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一步法RT-PCR检测大缸奶在BVDV清除计划中的应用
1
作者
黄凯
邵晓磊
李锡智
《中国奶牛》
2011年第18期4-7,共4页
本文利用一步法RT-PCR对28个牛场共计50份大缸奶样进行了BVDV核酸检测。在与全群抗原检测结果对比后发现,9个已知存有PI牛的泌乳牛群,其大缸奶核酸检测均为阳性,其余41个已知无PI牛的泌乳牛群,除1个因为存在急性感染牛造成阳性结果外,其...
本文利用一步法RT-PCR对28个牛场共计50份大缸奶样进行了BVDV核酸检测。在与全群抗原检测结果对比后发现,9个已知存有PI牛的泌乳牛群,其大缸奶核酸检测均为阳性,其余41个已知无PI牛的泌乳牛群,除1个因为存在急性感染牛造成阳性结果外,其余40个均为阴性。由此可见,本方法对与泌乳牛群内是否存在PI牛可以做出准确判断,其检测灵敏度和特异性均为100%,阳性预测结果可信度为0.9(9/10),阴性预测结果可信度为0.98(40/41)。此外,针对50个大缸奶样进行的抗体检测表明,对于已感染牛场,泌乳牛群是否存在PI牛,抗体水平没有明显差异(OD1.12±0.12vsOD1.34±0.23,P>0.05)。实验室条件下,本试验使用的RT-PCR方法对于阳性乳的最低检出限为50μL/头,因此理论上,最多可从1000份样品中检出阳性乳成分(总体积为50mL)。综上可知,本试验确立的RT-PCR方法灵敏度高、特异性强,可对泌乳牛群是否存在PI牛进行准确预测,相比大缸奶抗体检测更具实际指导意义,联合ELISA-Ag使用时还可大幅度降低泌乳牛群BVDV清除计划的检测成本,因而值得推广使用。
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关键词
RT—PCR
bvdv
—
pi
牛
大缸奶核酸检测
大缸奶抗体检测
bvdv
清除计划
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职称材料
牛病毒性腹泻病毒(BVDV)持续感染牛的筛查与胚胎移植
2
作者
唐燕
孟小林
+3 位作者
贾林军
刘晓娜
李桉
范洪先
《中国兽医杂志》
CAS
北大核心
2016年第11期29-31,共3页
为了保证胚胎移植的效果,达到良种繁育的目的,对胚胎移植的受体牛进行了牛病毒性腹泻病毒(BVDV)-持续感染(PI)牛的筛查。首先采取受体牛血清样本,然后提取样本RNA,反转录为c DNA,进行RT-巢式PCR,根据琼脂糖凝胶电泳结果,确定受体牛是否...
为了保证胚胎移植的效果,达到良种繁育的目的,对胚胎移植的受体牛进行了牛病毒性腹泻病毒(BVDV)-持续感染(PI)牛的筛查。首先采取受体牛血清样本,然后提取样本RNA,反转录为c DNA,进行RT-巢式PCR,根据琼脂糖凝胶电泳结果,确定受体牛是否是BVDV-PI牛。初次检测结果为阴性的牛,可作为胚胎移植的备选牛。初检阳性的牛,进行隔离,3周后进行复检,连续进行两次复检,如果3次检测结果都为阳性,认定该牛为BVDV-PI牛,予以淘汰。如果复检为阴性,则判为BVDV急性感染牛,可继续使用。结果 108头受体牛中,确认3头受体牛为BVDV-PI牛,予以淘汰,BVDV-PI牛阳性率2.8%。剩下的105头受体牛,通过直肠检查可用于胚胎移植的81头。45天后孕检,怀孕61头,受胎率75.3%。
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关键词
bvdv
-
pi
牛
筛查
RT-巢式PCR
胚胎移植
受胎率
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职称材料
题名
一步法RT-PCR检测大缸奶在BVDV清除计划中的应用
1
作者
黄凯
邵晓磊
李锡智
机构
北京三元绿荷奶牛养殖中心
出处
《中国奶牛》
2011年第18期4-7,共4页
文摘
本文利用一步法RT-PCR对28个牛场共计50份大缸奶样进行了BVDV核酸检测。在与全群抗原检测结果对比后发现,9个已知存有PI牛的泌乳牛群,其大缸奶核酸检测均为阳性,其余41个已知无PI牛的泌乳牛群,除1个因为存在急性感染牛造成阳性结果外,其余40个均为阴性。由此可见,本方法对与泌乳牛群内是否存在PI牛可以做出准确判断,其检测灵敏度和特异性均为100%,阳性预测结果可信度为0.9(9/10),阴性预测结果可信度为0.98(40/41)。此外,针对50个大缸奶样进行的抗体检测表明,对于已感染牛场,泌乳牛群是否存在PI牛,抗体水平没有明显差异(OD1.12±0.12vsOD1.34±0.23,P>0.05)。实验室条件下,本试验使用的RT-PCR方法对于阳性乳的最低检出限为50μL/头,因此理论上,最多可从1000份样品中检出阳性乳成分(总体积为50mL)。综上可知,本试验确立的RT-PCR方法灵敏度高、特异性强,可对泌乳牛群是否存在PI牛进行准确预测,相比大缸奶抗体检测更具实际指导意义,联合ELISA-Ag使用时还可大幅度降低泌乳牛群BVDV清除计划的检测成本,因而值得推广使用。
关键词
RT—PCR
bvdv
—
pi
牛
大缸奶核酸检测
大缸奶抗体检测
bvdv
清除计划
Keywords
RT-PCR
bvdv
-
pi
Bulk milk nucleic acid test
Bulk milk antibody test
bvdv
elimination programme
分类号
S858.23 [农业科学—临床兽医学]
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职称材料
题名
牛病毒性腹泻病毒(BVDV)持续感染牛的筛查与胚胎移植
2
作者
唐燕
孟小林
贾林军
刘晓娜
李桉
范洪先
机构
新疆农业职业技术学院
新疆豪子畜牧业有限公司
出处
《中国兽医杂志》
CAS
北大核心
2016年第11期29-31,共3页
基金
新疆农业职业技术学院科研基金项目(XJNZYKJ-2014002)
文摘
为了保证胚胎移植的效果,达到良种繁育的目的,对胚胎移植的受体牛进行了牛病毒性腹泻病毒(BVDV)-持续感染(PI)牛的筛查。首先采取受体牛血清样本,然后提取样本RNA,反转录为c DNA,进行RT-巢式PCR,根据琼脂糖凝胶电泳结果,确定受体牛是否是BVDV-PI牛。初次检测结果为阴性的牛,可作为胚胎移植的备选牛。初检阳性的牛,进行隔离,3周后进行复检,连续进行两次复检,如果3次检测结果都为阳性,认定该牛为BVDV-PI牛,予以淘汰。如果复检为阴性,则判为BVDV急性感染牛,可继续使用。结果 108头受体牛中,确认3头受体牛为BVDV-PI牛,予以淘汰,BVDV-PI牛阳性率2.8%。剩下的105头受体牛,通过直肠检查可用于胚胎移植的81头。45天后孕检,怀孕61头,受胎率75.3%。
关键词
bvdv
-
pi
牛
筛查
RT-巢式PCR
胚胎移植
受胎率
Keywords
bvdv
-
pi
cattle screening
RT-nested PCR
embryo transfer
pregnancy rate
分类号
S857.21 [农业科学—临床兽医学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
一步法RT-PCR检测大缸奶在BVDV清除计划中的应用
黄凯
邵晓磊
李锡智
《中国奶牛》
2011
0
下载PDF
职称材料
2
牛病毒性腹泻病毒(BVDV)持续感染牛的筛查与胚胎移植
唐燕
孟小林
贾林军
刘晓娜
李桉
范洪先
《中国兽医杂志》
CAS
北大核心
2016
0
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职称材料
已选择
0
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