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玉米BTB-TAZ蛋白与转录因子ZmBET10的互作分析
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作者 刘玲玉 李紫媛 +4 位作者 张思怡 曹宏哲 张康 时翠平 邢继红 《分子植物育种》 CAS 北大核心 2024年第1期8-17,共10页
为明确玉米BTB-TAZ蛋白与转录因子ZmBET10的互作关系,本研究构建了玉米BTB-TAZ蛋白ZmBT4、Zm BT2a、ZmBT2b和转录因子ZmBET10(ZmBET10a,ZmBET10b)的酵母双杂交载体,利用酵母双杂交技术研究玉米BTB-TAZ蛋白与转录因子ZmBET10的互作关系... 为明确玉米BTB-TAZ蛋白与转录因子ZmBET10的互作关系,本研究构建了玉米BTB-TAZ蛋白ZmBT4、Zm BT2a、ZmBT2b和转录因子ZmBET10(ZmBET10a,ZmBET10b)的酵母双杂交载体,利用酵母双杂交技术研究玉米BTB-TAZ蛋白与转录因子ZmBET10的互作关系。结果发现,共转化AD-ZmBT4、AD-ZmBT2a、AD-ZmBT2b分别与BD-ZmBET10a、BD-ZmBET10b组合的酵母在三缺培养基(SD/-Leu/-Trp/-His)和三缺添加3-AT的培养基(SD/-Leu/-Trp/-His/3-AT)上均能正常生长,而对照组均不能在三缺、三缺添加3-AT的培养基上正常生长,表明玉米BTB-TAZ蛋白ZmBT4、Zm BT2a、Zm BT2b均能与ZmBET10转录因子ZmBET10a、Zm BET10b在酵母细胞中直接互作。为明确BTB结构域在BTB-TAZ蛋白与转录因子ZmBET10互作中的功能,本研究构建了ZmBT4、ZmBT2b蛋白BTB结构域的酵母双杂交载体,进一步利用酵母双杂交技术研究BTB结构域与转录因子ZmBET10的互作,结果发现ZmBT4、Zm BT2b蛋白的BTB结构域ZmBT4-BTB、Zm BT2b-BTB均能与ZmBET10互作,表明BTB结构域在BTB-TAZ蛋白与转录因子ZmBET10互作过程中具有重要作用。研究结果为阐明BTB-TAZ蛋白在玉米抗病中的功能与调控机制奠定了基础。 展开更多
关键词 玉米 btb-TAZ蛋白 ZmBET10 btb结构域 酵母双杂交
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小鼠BTB/锌指结构新基因Bsg6的克隆及表达谱分析 被引量:2
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作者 慈宏亮 李昱华 +1 位作者 陈微 李亦平 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第2期117-123,共7页
Bsg6(brain specific gene 6)是用消减差异筛选的方法克隆的小鼠头部特异表达新基因.Bsg6基因cDNA长3 871 bp,编码一个670个氨基酸残基的蛋白,GenBank登录号AY635051,位于小鼠第4号染色体,由2个外显子构成.Bsg6蛋白含有一个N端BTB(Broad... Bsg6(brain specific gene 6)是用消减差异筛选的方法克隆的小鼠头部特异表达新基因.Bsg6基因cDNA长3 871 bp,编码一个670个氨基酸残基的蛋白,GenBank登录号AY635051,位于小鼠第4号染色体,由2个外显子构成.Bsg6蛋白含有一个N端BTB(Broad-complex,Tramtrack,andBric-a-brac)结构域和两个C端C2H2型锌指结构域.小鼠Bsg6蛋白与其在人类和鸡中同源蛋白的同源性分别为86.2%和79.1%.Bsg6在小鼠胚胎中的表达具有一定动态性,在E8.5的小鼠胚胎中,Bsg6主要在前脑和神经管表达.在E9.5的小鼠胚胎中,Bsg6的表达明显增强并主要集中在前脑的端脑部.Bsg6在E10.5小鼠胚胎端脑的表达出现了下降,但是在中脑和后脑的表达增加,此外,Bsg6 mRNA的表达还出现在肢芽和尾部.在HH10期的鸡胚中,Bsg6主要在头部和神经管前端表达.Northern杂交结果显示,Bsg6在很多小鼠成体组织中没有表达,但是在破骨细胞瘤中高表达.Bsg6的表达谱提示,Bsg6可能是在器官形成期对脑的发育起到重要作用的转录因子,而且其表达受到严格的调控,此外Bsg6还可能与肿瘤的发生有关. 展开更多
关键词 Bsg6基因 差异筛选 锌指蛋白 btb结构域
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包含BTB锌指结构的新基因Bsg2结构特性及其在发育阶段的组织表达特异性 被引量:1
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作者 姚艺桑 北京师范大学生命科学学院生物医学研究所 +3 位作者 邹星 慈宏亮 陈微 李亦平 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2004年第6期725-731,共7页
通过消减差异筛选法寻找小鼠胚胎发育过程中在脑中特异表达的基因 .克隆得到的脑特异表达新基因 2 (brainspecificgene 2 ,简称Bsg2 )长 36 91bp ,通过生物信息学方法预测其编码一个含713个氨基酸的锌指蛋白 .此蛋白N端有一个BTB(BR C ,... 通过消减差异筛选法寻找小鼠胚胎发育过程中在脑中特异表达的基因 .克隆得到的脑特异表达新基因 2 (brainspecificgene 2 ,简称Bsg2 )长 36 91bp ,通过生物信息学方法预测其编码一个含713个氨基酸的锌指蛋白 .此蛋白N端有一个BTB(BR C ,ttkandbab)结构域 ,C端有 9个连续的C2H2锌指结构 .该基因定位在小鼠 12号染色体上 ,包含 1个内含子和 2个外显子 .应用生物信息学和RT PCR方法分别检验该基因在小鼠各组织中的表达 .结果表明 ,Bsg2基因在小鼠胚胎及成体的各组织中普遍表达 ,在脾、肾、睾丸、肠、子宫和脑的表达水平较强 .利用整体 (wholemount)原位杂交研究其时空表达模式 .结果显示 ,Bsg2在早期的小鼠胚胎和不同时期鸡胚的头部均特异表达 ,在11d鼠胚的肢芽里也有较强的表达 .Bsg2基因的结构和表达特征预示它编码 1个具有DNA结合功能的转录调控因子 。 展开更多
关键词 生物信息学 btb结构域 C2H2锌指 原位杂交
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ZBTB5基因及其表达特征的初步研究 被引量:1
4
作者 王炎钦 姜玉新 《泰山医学院学报》 CAS 2008年第6期401-405,共5页
目的了解ZBTB5基因的序列和表达特征。方法运用生物信息学方法分析该基因的序列特征和染色体定位,分子生物学方法分析其表达特征和亚细胞定位。结果ZBTB5基因的N末端含一个BTB结构域,C末端含2个C2H2锌指结构域;根据人类基因组序列数据... 目的了解ZBTB5基因的序列和表达特征。方法运用生物信息学方法分析该基因的序列特征和染色体定位,分子生物学方法分析其表达特征和亚细胞定位。结果ZBTB5基因的N末端含一个BTB结构域,C末端含2个C2H2锌指结构域;根据人类基因组序列数据库搜索,将ZBTB5基因定位在人类基因组第9染色体上。Northern杂交结果表明,ZBTB5基因在不同组织中表达差异明显。免疫胶体金技术显示该蛋白定位于细胞核。结论该基因可能是一个转录因子。 展开更多
关键词 btb结构域 生物信息学 转录因子 定位
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野桑蚕br-c基因的克隆与序列分析
5
作者 凌君 楚渠 彭云武 《湖南农业科学》 2018年第10期1-5,12,共6页
昆虫BR-C(Broad complax)蛋白是一个含BTB结构域和锌指结构域的转录因子,介导蜕皮激素20E和保幼激素JH的信号转导,是昆虫变态发育调控的关键基因之一。研究克隆了野桑蚕br-c基因开放阅读框及其上下游的部分非翻译区序列,并对该基因编码... 昆虫BR-C(Broad complax)蛋白是一个含BTB结构域和锌指结构域的转录因子,介导蜕皮激素20E和保幼激素JH的信号转导,是昆虫变态发育调控的关键基因之一。研究克隆了野桑蚕br-c基因开放阅读框及其上下游的部分非翻译区序列,并对该基因编码序列进行了特征分析。结果表明:野桑蚕BR-C蛋白具有保守的BTB和ZnF-C2H2结构域,N端含有胞外区、跨膜区和胞内区等结构。聚类分析表明:家蚕与野桑蚕在亲缘关系上最为接近,其BR-C蛋白序列基本一致。 展开更多
关键词 野桑蚕 家蚕 br-c基因 btb结构域 变态发育
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放疗诱导ZBTB7A基因过表达在胶质母细胞瘤放疗抵抗中的作用 被引量:1
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作者 冯瑾 高德志 +2 位作者 王鹏 邱晓光 刘彦伟 《中华神经外科杂志》 CSCD 北大核心 2024年第2期182-189,共8页
目的 应用大样本临床测序数据联合体外细胞筛选放疗抵抗相关基因,探讨放疗诱导含锌指和BTB结构域蛋白质7A(ZBTB7A)过表达在胶质母细胞瘤(GBM)放疗抵抗中的作用.方法 纳入中国脑胶质瘤基因组图谱计划数据库中966例脑胶质瘤标本的测序和... 目的 应用大样本临床测序数据联合体外细胞筛选放疗抵抗相关基因,探讨放疗诱导含锌指和BTB结构域蛋白质7A(ZBTB7A)过表达在胶质母细胞瘤(GBM)放疗抵抗中的作用.方法 纳入中国脑胶质瘤基因组图谱计划数据库中966例脑胶质瘤标本的测序和临床数据筛选及验证GBM放疗抵抗候选基因:(1)纳入226例原发GBM(pGBM)与134例手术+放疗后复发的GBM(rGBM)非配对肿瘤标本,以及15例首次诊断为pGBM、手术+放疗后复发再次行手术切除的配对肿瘤标本的测序数据筛选GBM放疗抵抗候选基因,并验证ZBTB7A是否为放疗抵抗相关基因;(2)比较异柠檬酸脱氢酶(IDH)野生型与突变型胶质瘤标本ZBTB7A mRNA表达量的差异(数据集1样本量分别为286、356例,数据集2分别为149、175例);(3)比较ZBTB7A高表达组(148例)与低表达组(148例)GBM患者生存期的差异.纳入2019年4月至2022年12月于首都医科大学附属北京天坛医院手术并经病理学诊断的pGBM与rGBM肿瘤标本(各12例),采用免疫组织化学染色法检测两组肿瘤组织中ZBTB7A蛋白表达水平的差异.采用高能X线照射人脑GBM细胞株U87、LN229和U251(单次13 Gy,照射6.5 min),4、8 h后采用定量PCR方法检测细胞ZBTB7A mRNA的表达量;照射U87和LN229细胞(单次5 Gy,照射2.5 min),1、2、4、8、12 h后采用蛋白质免疫印迹法检测ZBTB7A蛋白 及DNA损伤标志物H2AX蛋白的表达量.采用小干扰RNA慢病毒(shRNA)感染法敲低U87细胞ZBTB7A的表达后,采用高能X线照射(单次照射剂量为5 Gy,照射2.5 min),1 h后行彗星实验检测细胞的DNA损伤情况;采用平板克隆实验检测细胞的增殖情况.结果 非配对和配对肿瘤标本测序数据交叉筛选显示,rGBM组ZBTB7A mRNA的表达量均高于pGBM组(均P<0.05).IDH野生型ZBTB7A mRNA表达量高于IDH突变型;ZBTB7A高表达GBM患者的生存期短于低表达者;免疫组织化学染色证实ZBTB7A蛋白在rGBM肿瘤标本中的表达量高于pGBM,上述数据� 展开更多
关键词 胶质母细胞瘤 放疗抵抗 过表达 含锌指和btb结构域蛋白质7A
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BTB蛋白泛素化介导植物发育和逆境应答的研究进展
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作者 吕彤彤 颜文慧 +3 位作者 梁艳 丁寅 颜庆霞 李金华 《生物工程学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第1期63-80,共18页
BTB(broad-complex,tramtrack,and bric-à-brac)结构域是在真核生物中发现的高度保守的蛋白质相互作用基序。含有BTB结构域的一类蛋白统称为BTB蛋白,它们广泛参与转录调控、蛋白质降解等过程。越来越多的研究表明,该基因在植物生... BTB(broad-complex,tramtrack,and bric-à-brac)结构域是在真核生物中发现的高度保守的蛋白质相互作用基序。含有BTB结构域的一类蛋白统称为BTB蛋白,它们广泛参与转录调控、蛋白质降解等过程。越来越多的研究表明,该基因在植物生长发育、生物与非生物胁迫等生理过程中具有重要的作用。本文以蛋白结构域为基础,系统总结了该基因家族蛋白在泛素化介导植物发育和逆境应答等过程中的研究进展,为植物中该类基因的研究提供了参考。 展开更多
关键词 btb结构域蛋白 蛋白泛素化 植物发育 逆境应答
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微小RNA-122靶向锌指和BTB结构域蛋白20调控Wnt通路影响胃癌的侵袭和迁移 被引量:4
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作者 袁远 宋玉成 +2 位作者 张广坛 张学东 薛焕洲 《中华实验外科杂志》 CSCD 北大核心 2017年第4期608-611,共4页
目的 探讨微小RNA(miRNA,miR)-122靶向锌指和BTB结构域蛋白20(ZBTB20)调控Wnt信号通路影响胃癌的侵袭和迁移的作用机制。方法 应用实时荧光定量聚合酶链反应(FQ-PCR)检测miR-122在胃癌组织中表达;运用Western blot在胃癌细胞株... 目的 探讨微小RNA(miRNA,miR)-122靶向锌指和BTB结构域蛋白20(ZBTB20)调控Wnt信号通路影响胃癌的侵袭和迁移的作用机制。方法 应用实时荧光定量聚合酶链反应(FQ-PCR)检测miR-122在胃癌组织中表达;运用Western blot在胃癌细胞株中挑出高表达ZBTB20的细胞株;双荧光素酶报告基因系统检测miR-122对ZBTB20转录活性的影响;Transwell侵袭实验检测miR-122的表达对胃癌细胞SGC-7901的侵袭能力的影响;划痕实验检测miR-122的表达对胃癌细胞SGC-7901的迁移能力的影响;Western blot检测沉默ZBTB20后Wnt信号通路的蛋白表达水平。裸鼠体外成瘤实验检测过表达miR-122后SGC-7901胃癌细胞体外成瘤能力变化。 结果 miR-122在胃癌组织中低表达,ZBTB20在SGC-7901胃癌细胞株中表达水平较高(2.51±0.31比0.58±0.17, P=0.009);过表达miR-122后,胃癌细胞株SGC-7901的侵袭和迁移能力明显降低[(18.62±2.32)%比(35.92±2.48)%,P=0.029;(34.25±5.75)%比(62.19±7.23)%,P=0.032;(49.73±3.91)%比(85.24±6.29)%,P=0.026];双荧光素酶报告基因系统检测结果显示,miR-122可以直接调控ZBTB20的转录活性;沉默ZBTB20后,Wnt、c-Myc和细胞周期素D1(Cyclin D1)蛋白表达下调[(12.32±0.81)%比(81.45±3.69)%; (15.64±1.11)%比(88.45±8.34)%, (13.52±0.71)%比(79.45±3.76)%,P=0.043];过表达miR-122后,胃癌SGC-7901细胞株体外成瘤能力下降[体积(3.09±0.23) cm3比(0.45±0.12) cm3,P=0.029;重量(2.85±0.35) g比(0.48±0.14) g,P=0.018]。 结论miR-122靶向ZBTB20的表达,从而调控胃癌细胞的侵袭和迁移能力。 展开更多
关键词 微小RNA-122 锌指和btb结构域蛋白20 WNT 胃癌
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微小RNA-520e对非小细胞肺癌细胞侵袭迁移和JAK1/STAT3信号通路的影响 被引量:4
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作者 言成一 杨继承 袁跃西 《临床肿瘤学杂志》 CAS 北大核心 2019年第11期978-983,共6页
目的探讨微小RNA-520e(miR-520e)对非小细胞肺癌(NSCLC)细胞侵袭迁移和Janus激酶1(JAK1)/信号转导和转录激活因子3(STAT3)信号通路的影响。方法采用实时定量PCR(QPCR)检测人肺上皮细胞BEAS-2B和NSCLC细胞株H1299、H1975、H1650、A549的m... 目的探讨微小RNA-520e(miR-520e)对非小细胞肺癌(NSCLC)细胞侵袭迁移和Janus激酶1(JAK1)/信号转导和转录激活因子3(STAT3)信号通路的影响。方法采用实时定量PCR(QPCR)检测人肺上皮细胞BEAS-2B和NSCLC细胞株H1299、H1975、H1650、A549的miR-520e水平;体外常规培养A549细胞并采用脂质体分别转染模拟物(过表达组)和阴性对照序列(NC组),以仅经脂质体处理的细胞为对照组。采用QPCR、活细胞计数CCK-8、划痕实验和Transwell实验检测miR-520e和含锌指和BTB结构域7A(ZBTB7A)水平、增殖活力、划痕愈合率和穿膜细胞数,Western blotting检测基质金属蛋白酶(MMP)-9、磷酸化JAK1(p-JAK1)和磷酸化STAT3(p-STAT3)水平;双荧光素酶报告基因系统联合荧光素酶报告质粒psiCHECK-2验证miR-520e与ZBTB7A的靶向关系。结果与正常细胞相比,NSCLC细胞的miR-520e水平降低,其中A549细胞最低,差异有统计学意义(P<0.05)。过表达组的miR-520e水平为19.562±1.448,高于对照组的1.002±0.057和NC组的1.053±0.082,ZBTB7A水平为0.173±0.026,低于对照组的1.109±0.091和NC组的1.076±0.136,差异均有统计学意义(P<0.05)。与对照组和NC组相比,过表达组转染36、48 h后的增殖活力及转染48 h后的MMP-9、p-JAK1和p-STAT3水平均降低(P<0.05)。过表达组的划痕愈合率和穿膜细胞数分别为(23.618±3.684)%和(51.644±7.069)个,低于对照组的(57.089±4.569)%和(152.269±12.833)个及NC组的(59.267±5.671)%和(149.075±11.239)个(P<0.05)。MiR-520e模拟物与携带野生型ZBTB7A 3’端非翻译区的psiCHECK-2载体共转染细胞的相对荧光强度降低(P<0.05)。结论 miR-520e在NSCLC细胞中表达下调且可能通过靶向ZBTB7A降低JAK1/STAT3信号通路活性来抑制NSCLC细胞的增殖、侵袭和迁移。 展开更多
关键词 非小细胞肺癌 微小RNA-520e 侵袭迁移 含锌指和btb结构域7A
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微小RNA-146a-5p对肝癌细胞侵袭迁移和ZBTB2表达的影响 被引量:3
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作者 吴涛 陈恩洪 +1 位作者 金成 刘敏丰 《临床肿瘤学杂志》 CAS 北大核心 2019年第11期984-988,共5页
目的探讨微小RNA-146a-5p(miR-146a-5p)对肝癌细胞侵袭、迁移和含锌指和BTB结构域2(ZBTB2)表达的影响。方法采用实时定量PCR(QPCR)检测人正常肝细胞LO2和肝癌细胞SMMC-7721的miR-146a-5p水平;体外常规培养SMMC-7721细胞进行转染,根据转... 目的探讨微小RNA-146a-5p(miR-146a-5p)对肝癌细胞侵袭、迁移和含锌指和BTB结构域2(ZBTB2)表达的影响。方法采用实时定量PCR(QPCR)检测人正常肝细胞LO2和肝癌细胞SMMC-7721的miR-146a-5p水平;体外常规培养SMMC-7721细胞进行转染,根据转染物不同分为增强转染组(转染miR-146a-5p mimics)、抑制转染组(转染miR-146a-5p inhibitor)和空白转染组(转染脂质体)。采用实时定量PCR(QPCR)、四甲基偶氮噻唑蓝(MTT)比色法、Transwell细胞迁移和侵袭实验以及Western blotting检测miR-146a-5p水平、增殖活力、穿膜细胞数和ZBTB2水平;将含ZBTB2基因3’端非翻译区(3’UTR)特定种子序列克隆至荧光素酶报告质粒psiCHECK-2并通过双荧光素酶报告基因系统验证miR-146a-5p与ZBTB2的靶向关系。结果 SMMC-7721细胞的miR-146a-5p水平为0.156±0.047,低于LO2细胞的1.157±0.413(P<0.05)。与空白转染组的1.241±0.375相比,增强转染组的miR-146a-5p水平升高至8.159±1.274,而抑制转染组则降低至0.219±0.036;与空白转染组相比,增强转染组转染48、72 h后的增殖活力降低,而抑制组则升高;细胞侵袭实验中,与空白转染组的(22.069±3.152)个相比,增强转染组的穿膜细胞数降低至(11.847±2.031)个,而抑制转染组则升高至(69.540±4.257)个;细胞迁移实验中,与空白转染组的(47.338±5.067)个相比,增强转染组的穿膜细胞数降低至(29.640±3.652)个,而抑制转染组则升高至(136.426±18.469)个;与对照组的0.564±0.089相比,增强转染组的ZBTB2水平降低至0.168±0.023,而抑制组则升高至0.826±0.157;以上组间差异均有统计学意义(P<0.05)。经miR-146a-5p mimics处理后,转染野生型ZBTB2 3’UTR质粒细胞的相对荧光强度低于转染突变型质粒(P<0.05)。结论 miR-146a-5p在肝癌细胞中低表达并发挥抑癌作用,该miRNA可能通过靶向ZBTB2来抑制迁移侵袭能力,在肝癌靶向治疗中有一定应用前景。 展开更多
关键词 肝癌 微小RNA-146a-5p 侵袭迁移 含锌指和btb结构域2
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脑胶质瘤病人血清LASP1、ZBTB20水平变化及其诊断价值 被引量:1
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作者 赵舰 张良龙 +2 位作者 金亮 兰伟途 张维 《中西医结合心脑血管病杂志》 2023年第17期3257-3261,共5页
目的:观察脑胶质瘤病人血清含LIM和SH3结构域蛋白1(LASP1)、锌指和BTB结构域蛋白20(ZBTB20)水平变化,并探讨血清LASP1、ZBTB20水平对脑胶质瘤的诊断价值。方法:选取2017年6月—2020年3月沧州市人民医院神经外科收治的67例脑胶质瘤病人... 目的:观察脑胶质瘤病人血清含LIM和SH3结构域蛋白1(LASP1)、锌指和BTB结构域蛋白20(ZBTB20)水平变化,并探讨血清LASP1、ZBTB20水平对脑胶质瘤的诊断价值。方法:选取2017年6月—2020年3月沧州市人民医院神经外科收治的67例脑胶质瘤病人作为研究组,采集病人入院后及术后7 d静脉血,收集病人的临床资料,另选取同期在我院体检的60名健康体检者作为对照组,采集静脉血,采用酶联免疫吸附试验(ELISA)法检测血清LASP1水平,实时荧光定量聚合酶链式反应(RT-PCR)法检测血清ZBTB20水平;采用Pearson相关性分析法分析LASP1与ZBTB20表达的相关性;绘制受试者工作特征(ROC)曲线分析血清LASP1、ZBTB20水平对脑胶质瘤的诊断价值。结果:研究组病人血清LASP1、ZBTB20水平明显高于对照组(P<0.001),术后7 d病人血清LASP1、ZBTB20水平明显低于术前(P<0.001)。Pearson相关性分析结果显示,脑胶质瘤病人血清LASP1与ZBTB20水平呈正相关(r=0.263,P=0.031)。血清LASP1、ZBTB20及二者联合诊断脑胶质瘤的ROC曲线下面积(AUC)分别为0.770,0.859,0.904,敏感度分别为76.12%、77.61%、74.63%,特异度分别为68.33%、83.33%、95.00%,二者联合诊断的效能优于各自单独诊断(Z=3.643,P<0.001;Z=2.129,P=0.003)。结论:脑胶质瘤病人血清LASP1、ZBTB20水平显著上调,二者联合检测对脑胶质瘤具有较高的诊断价值。 展开更多
关键词 脑胶质瘤 含LIM和SH3结构域蛋白1 LASP1 锌指和btb结构域蛋白20 Zbtb20 诊断价值
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ZBTB12对肝细胞癌细胞有氧糖酵解、增殖和迁移的影响 被引量:1
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作者 吴洁 吴群 +2 位作者 高春 吴鑫阳 李国春 《临床肿瘤学杂志》 CAS 2022年第12期1078-1084,共7页
目的 探讨锌指和BTB结构域蛋白12(ZBTB12)对肝细胞癌(HCC)细胞有氧糖酵解、增殖和迁移的影响。方法 利用实时荧光定量聚合酶链反应(qPCR)、Western blotting和免疫组化检测ZBTB12在HCC组织和配对癌旁组织中的表达差异。构建敲低ZBTB12的... 目的 探讨锌指和BTB结构域蛋白12(ZBTB12)对肝细胞癌(HCC)细胞有氧糖酵解、增殖和迁移的影响。方法 利用实时荧光定量聚合酶链反应(qPCR)、Western blotting和免疫组化检测ZBTB12在HCC组织和配对癌旁组织中的表达差异。构建敲低ZBTB12的HCC细胞Hep3B和SMMC-7721,体外通过平板克隆形成实验、CCK-8实验和Transwell小室实验检测ZBTB12对HCC细胞增殖和迁移的影响。体内通过裸鼠皮下瘤模型和肺转移模型评估ZBTB12对HCC细胞增殖和迁移的影响。通过检测葡萄糖摄取量、乳酸产生量、耗氧率(OCR)和细胞外酸化率(ECAR)明确ZBTB12对HCC细胞有氧糖酵解的影响,进一步采用qPCR和Western blotting检测ZBTB12对糖酵解关键酶的影响。结果 ZBTB12的mRNA和蛋白水平在HCC组织中较癌旁组织均呈现明显的高表达。敲低ZBTB12明显抑制了Hep3B和SMMC-7721细胞在体外和体内的增殖和迁移的能力。机制研究表明敲低ZBTB12明显抑制了HCC细胞的葡萄糖摄取量、乳酸产生量、OCR和细胞外酸ECAR,进一步分析发现敲低ZBTB12明显抑制了糖酵解关键酶HK2和LDHA的表达。结论 ZBTB12的表达在HCC组织中明显上调,敲低ZBTB12可以明显抑制HCC细胞的有氧糖酵解、增殖和迁移,有望成为HCC治疗的潜在靶点。 展开更多
关键词 肝细胞癌 锌指和btb结构域蛋白12 有氧糖酵解 增殖迁移
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MiR-125b-5p靶向BACH1增强β-地中海贫血单核细胞吞噬活性的机制研究
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作者 岑红霞 蔡思铭 +1 位作者 姜虹羽 廖赵妹 《河北医药》 CAS 2023年第15期2245-2250,共6页
目的探讨miR-125b-5p通过靶向BACH1增强β-地中海贫血(β-thal)单核细胞吞噬活性的机制。方法收集健康儿童与HbE型β-thal(HbE/β-thal)患儿外周血,流式细胞仪分析外周血单核细胞(PBMC)表型,qRT-PCR法测定miR-125b-5p的表达量,分析HbE/... 目的探讨miR-125b-5p通过靶向BACH1增强β-地中海贫血(β-thal)单核细胞吞噬活性的机制。方法收集健康儿童与HbE型β-thal(HbE/β-thal)患儿外周血,流式细胞仪分析外周血单核细胞(PBMC)表型,qRT-PCR法测定miR-125b-5p的表达量,分析HbE/β-thal患儿miR-125b-5p表达与病情及激活表型的关系,双荧光素酶报告基因系统检验miR-125b-5p与BACH1的靶向关系,western blot检测BACH1与HO-1的表达量,在正常PBMC中同时上调miR-125b-5p与BACH1,在HbE/β-thal来源PBMC中同时下调miR-125b-5p与BACH1,测定PBMC吞噬活性的变化。结果2组儿童PBMC数量没有明显差异(P>0.05),但HbE/β-tha患儿CD14hiCD16+表型PBMC比例增加(P<0.05),HbE/β-thal患儿PBMC内miR-125b-5p表达量显著高于健康儿童(P<0.05),miR-125b-5p的表达与RBC计数、Hb含量、Hct、MCH均呈负相关(P<0.05),而与CD14hiCD16+比例呈现正相关(P<0.05);双荧光素酶报告基因系统与western blot证实miR-125b-5p能靶向抑制BACH1表达(P<0.05),且与正常儿童比较,HbE/β-thal患儿PBMC中BACH1表达量降低(P<0.05),而HO-1表达量升高(P<0.05);miR-125b-5p上调可以显著增强健康儿童来源PBMC的吞噬能力(P<0.05),而过表达BACH1能逆转该情况(P<0.05),相反,抑制miR-125b-5p能降低具有高吞噬能力的HbE/β-thal患儿来源PBMC的吞噬活性(P<0.05),而抑制BACH1能逆转该现象(P<0.05)。结论miR-125b-5p通过抑制BACH1来增强HbE/β-thal患儿PBMC吞噬活性。 展开更多
关键词 miR-125b-5p HbE型β-地中海贫血 单核细胞 吞噬 btb结构域和CNC同系物1
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PAK4与RCBTB1相互作用促进胰腺癌细胞增殖 被引量:1
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作者 于昕博 黄昌伟 +2 位作者 路天琦 袁莹 李晓东 《中国医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2022年第2期115-120,共6页
目的研究p21激活激酶4(PAK4)与RCC1和BTB结构域包含蛋白1(RCBTB1)的相互作用及其在胰腺癌细胞增殖过程中的作用。方法采用免疫共沉淀实验确定PAK4与RCBTB1在胰腺癌细胞内的相互作用;采用免疫荧光实验确定PAK4与RCBTB1在胰腺癌细胞内的... 目的研究p21激活激酶4(PAK4)与RCC1和BTB结构域包含蛋白1(RCBTB1)的相互作用及其在胰腺癌细胞增殖过程中的作用。方法采用免疫共沉淀实验确定PAK4与RCBTB1在胰腺癌细胞内的相互作用;采用免疫荧光实验确定PAK4与RCBTB1在胰腺癌细胞内的定位和共定位位置;采用CCK-8实验探究过表达PAK4、RCBTB1对胰腺癌细胞增殖的影响;采用流式细胞术检测过表达PAK4、RCBTB1对胰腺癌细胞周期的影响;采用Western blotting检测过表达PAK4、RCBTB1对cyclin D1蛋白表达水平的影响。结果PAK4与RCBTB1在胰腺癌细胞内存在相互作用。PAK4与RCBTB1共定位于胰腺癌细胞核和核周细胞质内。过表达PAK4、RCBTB1促进胰腺癌细胞增殖,加速胰腺癌细胞的细胞周期进程,促进cyclin D1的表达。结论PAK4与RCBTB1相互作用促进胰腺癌细胞增殖。 展开更多
关键词 p21激活激酶4 RCC1和btb结构域包含蛋白1 相互作用 胰腺癌 增殖
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含锌指和BTB结构域7B(ZBTB7B/ThPOK)及其相关因子在T细胞分化及功能中的作用 被引量:1
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作者 黄丽芳 李启睿 李国华 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2017年第11期1572-1577,共6页
含锌指和BTB结构域7B(ZBTB7B/ThPOK)是CD4谱系分化中的关键转录因子,并抑制CD8谱系生成。ThPOK蛋白表达促进CD4谱系分化,维持CD4谱系稳定性,并抑制CD8谱系分化。首先在胸腺内,ThPOK基因表达受T细胞受体(TCR)信号、基因增强子、基因沉默... 含锌指和BTB结构域7B(ZBTB7B/ThPOK)是CD4谱系分化中的关键转录因子,并抑制CD8谱系生成。ThPOK蛋白表达促进CD4谱系分化,维持CD4谱系稳定性,并抑制CD8谱系分化。首先在胸腺内,ThPOK基因表达受T细胞受体(TCR)信号、基因增强子、基因沉默子等调节,且ThPOK表达受GATA结合蛋白3(GATA3)、Runt相关转录因子3(Runx3)、白血病/淋巴瘤相关因子(LRF)、胸腺细胞选择相关性高迁移率族盒基因(TOX)、Myc关联的锌指蛋白相关因子(MAZR)、E1A结合蛋白p300(P300)等转录因子影响,进而影响CD4、CD8谱系分化。而在外周T细胞中,ThPOK影响CD_4^+T细胞亚群、CD_8^+T细胞分化及功能。在此基础上,正逐步展开针对外周疾病中ThPOK作用的研究。 展开更多
关键词 含锌指和btb结构域7B(Zbtb7B/Th POK) CD4 CD8 T细胞受体(TCR) GATA结合蛋白3(GATA3) Runt相关转录因子3(Runx3) 综述
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受稻瘟病菌诱导的水稻OsBTB基因的分子特征和功能初探 被引量:3
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作者 姜玉新 董海涛 +2 位作者 庄杰云 郑康乐 李德葆 《中国水稻科学》 CAS CSCD 北大核心 2006年第6期577-582,共6页
报道了1个从稻瘟病菌诱导的水稻近等基因系H7R/H7S中克隆的类GMPOZ基因———OsBTB,通过测序获其全长cDNA并分析了该基因的序列特征。根据水稻基因组序列数据库搜索,将OsBTB基因定位在水稻基因组第2染色体上。Northern和Western杂交结... 报道了1个从稻瘟病菌诱导的水稻近等基因系H7R/H7S中克隆的类GMPOZ基因———OsBTB,通过测序获其全长cDNA并分析了该基因的序列特征。根据水稻基因组序列数据库搜索,将OsBTB基因定位在水稻基因组第2染色体上。Northern和Western杂交结果表明,OsBTB基因在水稻近等基因系H7R/H7S中均受稻瘟病菌诱导表达,且在非亲和与亲和互作中表达差异明显。定量PCR结果表明该基因的表达模式与所选取的抗性及抗性相关基因的表达模式一致。综合结果提示该基因可能参与了稻瘟病菌诱导的抗性反应。 展开更多
关键词 btb/POZ结构域 水稻 稻瘟病菌 近等基因系 Osbtb基因 分子特征 基因功能
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香蕉BTB/POZ域基因的克隆及表达分析 被引量:1
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作者 贾彩红 张丽丽 +4 位作者 金志强 周雪莉 刘菊华 张建斌 徐碧玉 《中国生物工程杂志》 CAS CSCD 北大核心 2010年第11期30-33,共4页
利用抑制缩减杂交文库从香蕉中分离获得一个cDNA片段,结合RACE技术获得该基因的全长序列,命名为MaBTB基因,该cDNA的ORF全长1080个碱基。通过Blastx同源性分析结果显示该基因的氨基酸序列与水稻OsBTB、苜蓿MtBTB/POZ、拟南芥AtBPM4、葡萄... 利用抑制缩减杂交文库从香蕉中分离获得一个cDNA片段,结合RACE技术获得该基因的全长序列,命名为MaBTB基因,该cDNA的ORF全长1080个碱基。通过Blastx同源性分析结果显示该基因的氨基酸序列与水稻OsBTB、苜蓿MtBTB/POZ、拟南芥AtBPM4、葡萄VvBTB、玉米ZmBTB、松树PsBTB基因的氨基酸序列同源性很高,分别为86%、85%、84%、84%、86%和87%。遗传进化树分析发现该基因与苜蓿MtBTB/POZ和拟南芥AtBPM4基因亲缘关系较近。用RT-PCR的方法研究该基因在不同胁迫处理下的表达特性,结果表明该基因在盐、乙烯和紫外线处理后其表达量逐渐增强;低温处理和香蕉尖孢镰刀菌4号生理小种处理后该基因表达量开始降低,随后逐渐升高;伤害处理后该基因的表达量没有明显变化。 展开更多
关键词 香蕉 btb/POZ结构域基因 克隆 表达分析
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Rho激酶抑制剂法舒地尔作用BTBD7-ROCK2信号通路抑制肝细胞癌侵袭运动 被引量:2
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作者 胡宽 王志明 陶一明 《中南大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2014年第12期1221-1227,共7页
目的:观察Rho激酶抑制剂法舒地尔(Fasudil)对人高侵袭潜能HCC细胞株3(human high metastatic liver cancer cells 3,HCCLM3)侵袭转移的影响,并且探讨其作用的机制。方法:应用100 mol/L Fasudil作用于HCCLM3细胞,采用肌动蛋白微丝荧光染... 目的:观察Rho激酶抑制剂法舒地尔(Fasudil)对人高侵袭潜能HCC细胞株3(human high metastatic liver cancer cells 3,HCCLM3)侵袭转移的影响,并且探讨其作用的机制。方法:应用100 mol/L Fasudil作用于HCCLM3细胞,采用肌动蛋白微丝荧光染色和侵袭小室实验观察HCCLM3细胞的运动侵袭能力。HCCLM3细胞经过处理后分为阴性对照组、Fasudil作用组、BTBD7干扰组,通过Western印迹检测BTB/POZ结构域蛋白7(BR-C,ttk and bab/pox virus domain containing 7,BTBD7)、Ras同系物家族成员C(ras homolog family member C,Rho C)、Rho关联卷曲螺旋蛋白激酶2(Rhoassociated,coiled-coil containing protein kinase 2,ROCK2)、MMP2和MMP9蛋白表达水平,酶谱分析法检测MMP2和MMP9活性水平。BTBD7干扰组作为阳性对照。结果:Fasudil处理后HCCLM3侵袭运动能力下降,BTBD7,Rho C,ROCK2蛋白表达下调,MMP2和MMP9活性降低,与阴性对照组比较差异有统计学意义(均P<0.01)。结论:Fasudil具有干预BTBD7-ROCK2信号通路、抑制HCC侵袭转移的重要作用。 展开更多
关键词 肝细胞癌 btb/POZ结构域蛋白7 Rho关联卷曲螺旋蛋白激酶2 法舒地尔 侵袭转移
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BTB/POZ结构域蛋白7假基因1在肝细胞癌中的表达及功能的初步研究 被引量:1
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作者 陶一明 胡宽 +2 位作者 汤参娥 冯铁诚 王志明 《中国普通外科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2017年第1期37-42,共6页
目的:探讨BTB/POZ结构域蛋白7(BTBD7)假基因1(BTBD7P1)在肝细胞癌(HCC)中的表达及功能。方法:检测106例配对的HCC组织与癌旁组织标本中BTBD7P1 m RNA的表达,分析BTBD7P1m RNA表达与HCC患者临床病理特征及预后的关系。用BTBD7P1过表达慢... 目的:探讨BTB/POZ结构域蛋白7(BTBD7)假基因1(BTBD7P1)在肝细胞癌(HCC)中的表达及功能。方法:检测106例配对的HCC组织与癌旁组织标本中BTBD7P1 m RNA的表达,分析BTBD7P1m RNA表达与HCC患者临床病理特征及预后的关系。用BTBD7P1过表达慢病毒载体转染HCC细胞系Bel7404后,检测细胞增殖率以及BTBD7 m RNA与蛋白的表达。结果:HCC组织中BTBD7P1相对表达量明显低于癌旁组织为(0.71 vs.2.14,P<0.05);BTBD7P1m RNA低表达与肿瘤大小、卫星灶、分化程度、静脉血管侵犯、出血坏死、HCC分期明显有关(均P<0.05);BTBD7P1 m RNA低表达患者的1、3、5年总体生存率及无瘤生存率均明显低于BTBD7P1m RNA高表达患者(均P<0.05)。与转染空载体质粒的对照组Bel7404细胞比较,转染BTBD7P1过表达慢病毒载体的Bel7404细胞,细胞增殖能力明显减低,BTBD7 m RNA表达明显下调(均P<0.05),但BTBD7蛋白表达无明显变化(P>0.05)。结论:BTBD7P1可能在m RNA水平对亲本基因BTBD7表达进行调控,从而参与了HCC发生与发展。 展开更多
关键词 肝细胞 btb/POZ结构域蛋白7 拟基因 RNA 长链非编码
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原发性干燥综合征患者唇腺组织中BTB/POZ结构域蛋白7及基质金属蛋白酶-9的表达与自身抗体的关系
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作者 王菲 时美红 《实用临床医药杂志》 CAS 2022年第21期98-102,共5页
目的 探讨原发性干燥综合征(pSS)患者唇腺组织中BTB/POZ结构域蛋白7(BTBD7)及基质金属蛋白酶-9(MMP-9)的表达与自身抗体的关系。方法 收集2016年9月—2020年10月本院46例pSS患者的唇腺组织为pSS组,收集同期46例口干燥症患者的唇腺组织... 目的 探讨原发性干燥综合征(pSS)患者唇腺组织中BTB/POZ结构域蛋白7(BTBD7)及基质金属蛋白酶-9(MMP-9)的表达与自身抗体的关系。方法 收集2016年9月—2020年10月本院46例pSS患者的唇腺组织为pSS组,收集同期46例口干燥症患者的唇腺组织为对照组。检测唇腺组织中BTBD7、MMP-9的mRNA表达及蛋白表达;分析pSS患者血清自身抗体[抗干燥综合征抗原A(SSA)抗体、抗干燥综合征抗原B(SSB)抗体、抗核抗体(ANA)]与BTBD7、MMP-9的关系;分析BTBD7蛋白表达水平与MMP-9蛋白表达水平的相关性。结果 与对照组比较,pSS组患者唇腺组织中BTBD7、MMP-9的mRNA及蛋白表达水平较高,差异有统计学意义(P<0.05)。在pSS患者的抗SSA抗体、抗SSB抗体以及ANA的检测结果中,各抗体阳性者唇腺组织中BTBD7、MMP-9的mRNA及蛋白表达水平均高于阴性者,差异均有统计学意义(P<0.05)。相关性分析显示,pSS患者唇腺组织中BTBD7蛋白表达水平与MMP-9蛋白表达水平呈显著正相关(r=0.493,P<0.05)。结论 pSS患者唇腺组织中BTBD7、MMP-9均呈高表达,且二者与自身抗体如抗SSA抗体、抗SSB抗体及ANA表达有密切联系。 展开更多
关键词 原发性干燥综合征 唇腺组织 btb/POZ结构域蛋白7 基质金属蛋白酶-9 自身抗体
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