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玉米BTB-TAZ蛋白与转录因子ZmBET10的互作分析
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作者 刘玲玉 李紫媛 +4 位作者 张思怡 曹宏哲 张康 时翠平 邢继红 《分子植物育种》 CAS 北大核心 2024年第1期8-17,共10页
为明确玉米BTB-TAZ蛋白与转录因子ZmBET10的互作关系,本研究构建了玉米BTB-TAZ蛋白ZmBT4、Zm BT2a、ZmBT2b和转录因子ZmBET10(ZmBET10a,ZmBET10b)的酵母双杂交载体,利用酵母双杂交技术研究玉米BTB-TAZ蛋白与转录因子ZmBET10的互作关系... 为明确玉米BTB-TAZ蛋白与转录因子ZmBET10的互作关系,本研究构建了玉米BTB-TAZ蛋白ZmBT4、Zm BT2a、ZmBT2b和转录因子ZmBET10(ZmBET10a,ZmBET10b)的酵母双杂交载体,利用酵母双杂交技术研究玉米BTB-TAZ蛋白与转录因子ZmBET10的互作关系。结果发现,共转化AD-ZmBT4、AD-ZmBT2a、AD-ZmBT2b分别与BD-ZmBET10a、BD-ZmBET10b组合的酵母在三缺培养基(SD/-Leu/-Trp/-His)和三缺添加3-AT的培养基(SD/-Leu/-Trp/-His/3-AT)上均能正常生长,而对照组均不能在三缺、三缺添加3-AT的培养基上正常生长,表明玉米BTB-TAZ蛋白ZmBT4、Zm BT2a、Zm BT2b均能与ZmBET10转录因子ZmBET10a、Zm BET10b在酵母细胞中直接互作。为明确BTB结构域在BTB-TAZ蛋白与转录因子ZmBET10互作中的功能,本研究构建了ZmBT4、ZmBT2b蛋白BTB结构域的酵母双杂交载体,进一步利用酵母双杂交技术研究BTB结构域与转录因子ZmBET10的互作,结果发现ZmBT4、Zm BT2b蛋白的BTB结构域ZmBT4-BTB、Zm BT2b-BTB均能与ZmBET10互作,表明BTB结构域在BTB-TAZ蛋白与转录因子ZmBET10互作过程中具有重要作用。研究结果为阐明BTB-TAZ蛋白在玉米抗病中的功能与调控机制奠定了基础。 展开更多
关键词 玉米 btb-TAZ蛋白 ZmBET10 btb结构域 酵母双杂交
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BTB蛋白结构与功能研究进展 被引量:2
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作者 刘坤 姬朝光 +2 位作者 闫晓寒 严汉池 刘培源 《现代生物医学进展》 CAS 2019年第7期1367-1373,1366,共8页
BTB(Broad-complex, Tramtrack, and Bric-a-brac)蛋白家族存在于痘病毒以及几乎所有真核生物中,该类蛋白为多结构域蛋白,最为显著的特征是含有高度保守且能介导蛋白与蛋白间相互作用的BTB结构域。BTB蛋白具有多种功能,其功能特异性取决... BTB(Broad-complex, Tramtrack, and Bric-a-brac)蛋白家族存在于痘病毒以及几乎所有真核生物中,该类蛋白为多结构域蛋白,最为显著的特征是含有高度保守且能介导蛋白与蛋白间相互作用的BTB结构域。BTB蛋白具有多种功能,其功能特异性取决于BTB蛋白中其他结构域以及它的互作蛋白。BTB蛋白广泛参与转录调节,染色质重组装,细胞骨架调控和泛素化降解等过程,与胚胎发育,器官形成,信号转导以及免疫调节等生理过程密切相关。除此之外,多种疾病如癌症,神经系统和骨骼肌系统疾病等的病理过程也与BTB蛋白相关。本文以蛋白结构为基础总结了该家族的共性规律并重点论述了BTB蛋白在转录调节以及泛素化降解过程中发挥的重要作用,以期为后续研究提供重要参考。 展开更多
关键词 btb蛋白 蛋白互作 转录调节 泛素化降解 胚胎发育
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包含BTB锌指结构的新基因Bsg2结构特性及其在发育阶段的组织表达特异性 被引量:1
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作者 姚艺桑 北京师范大学生命科学学院生物医学研究所 +3 位作者 邹星 慈宏亮 陈微 李亦平 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2004年第6期725-731,共7页
通过消减差异筛选法寻找小鼠胚胎发育过程中在脑中特异表达的基因 .克隆得到的脑特异表达新基因 2 (brainspecificgene 2 ,简称Bsg2 )长 36 91bp ,通过生物信息学方法预测其编码一个含713个氨基酸的锌指蛋白 .此蛋白N端有一个BTB(BR C ,... 通过消减差异筛选法寻找小鼠胚胎发育过程中在脑中特异表达的基因 .克隆得到的脑特异表达新基因 2 (brainspecificgene 2 ,简称Bsg2 )长 36 91bp ,通过生物信息学方法预测其编码一个含713个氨基酸的锌指蛋白 .此蛋白N端有一个BTB(BR C ,ttkandbab)结构域 ,C端有 9个连续的C2H2锌指结构 .该基因定位在小鼠 12号染色体上 ,包含 1个内含子和 2个外显子 .应用生物信息学和RT PCR方法分别检验该基因在小鼠各组织中的表达 .结果表明 ,Bsg2基因在小鼠胚胎及成体的各组织中普遍表达 ,在脾、肾、睾丸、肠、子宫和脑的表达水平较强 .利用整体 (wholemount)原位杂交研究其时空表达模式 .结果显示 ,Bsg2在早期的小鼠胚胎和不同时期鸡胚的头部均特异表达 ,在11d鼠胚的肢芽里也有较强的表达 .Bsg2基因的结构和表达特征预示它编码 1个具有DNA结合功能的转录调控因子 。 展开更多
关键词 生物信息学 btb结构域 C2H2锌指 原位杂交
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ZBTB5基因及其表达特征的初步研究 被引量:1
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作者 王炎钦 姜玉新 《泰山医学院学报》 CAS 2008年第6期401-405,共5页
目的了解ZBTB5基因的序列和表达特征。方法运用生物信息学方法分析该基因的序列特征和染色体定位,分子生物学方法分析其表达特征和亚细胞定位。结果ZBTB5基因的N末端含一个BTB结构域,C末端含2个C2H2锌指结构域;根据人类基因组序列数据... 目的了解ZBTB5基因的序列和表达特征。方法运用生物信息学方法分析该基因的序列特征和染色体定位,分子生物学方法分析其表达特征和亚细胞定位。结果ZBTB5基因的N末端含一个BTB结构域,C末端含2个C2H2锌指结构域;根据人类基因组序列数据库搜索,将ZBTB5基因定位在人类基因组第9染色体上。Northern杂交结果表明,ZBTB5基因在不同组织中表达差异明显。免疫胶体金技术显示该蛋白定位于细胞核。结论该基因可能是一个转录因子。 展开更多
关键词 btb结构域 生物信息学 转录因子 定位
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野桑蚕br-c基因的克隆与序列分析
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作者 凌君 楚渠 彭云武 《湖南农业科学》 2018年第10期1-5,12,共6页
昆虫BR-C(Broad complax)蛋白是一个含BTB结构域和锌指结构域的转录因子,介导蜕皮激素20E和保幼激素JH的信号转导,是昆虫变态发育调控的关键基因之一。研究克隆了野桑蚕br-c基因开放阅读框及其上下游的部分非翻译区序列,并对该基因编码... 昆虫BR-C(Broad complax)蛋白是一个含BTB结构域和锌指结构域的转录因子,介导蜕皮激素20E和保幼激素JH的信号转导,是昆虫变态发育调控的关键基因之一。研究克隆了野桑蚕br-c基因开放阅读框及其上下游的部分非翻译区序列,并对该基因编码序列进行了特征分析。结果表明:野桑蚕BR-C蛋白具有保守的BTB和ZnF-C2H2结构域,N端含有胞外区、跨膜区和胞内区等结构。聚类分析表明:家蚕与野桑蚕在亲缘关系上最为接近,其BR-C蛋白序列基本一致。 展开更多
关键词 野桑蚕 家蚕 br-c基因 btb结构域 变态发育
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BTB蛋白泛素化介导植物发育和逆境应答的研究进展
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作者 吕彤彤 颜文慧 +3 位作者 梁艳 丁寅 颜庆霞 李金华 《生物工程学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第1期63-80,共18页
BTB(broad-complex,tramtrack,and bric-à-brac)结构域是在真核生物中发现的高度保守的蛋白质相互作用基序。含有BTB结构域的一类蛋白统称为BTB蛋白,它们广泛参与转录调控、蛋白质降解等过程。越来越多的研究表明,该基因在植物生... BTB(broad-complex,tramtrack,and bric-à-brac)结构域是在真核生物中发现的高度保守的蛋白质相互作用基序。含有BTB结构域的一类蛋白统称为BTB蛋白,它们广泛参与转录调控、蛋白质降解等过程。越来越多的研究表明,该基因在植物生长发育、生物与非生物胁迫等生理过程中具有重要的作用。本文以蛋白结构域为基础,系统总结了该基因家族蛋白在泛素化介导植物发育和逆境应答等过程中的研究进展,为植物中该类基因的研究提供了参考。 展开更多
关键词 btb结构域蛋白 蛋白泛素化 植物发育 逆境应答
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放疗诱导ZBTB7A基因过表达在胶质母细胞瘤放疗抵抗中的作用
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作者 冯瑾 高德志 +2 位作者 王鹏 邱晓光 刘彦伟 《中华神经外科杂志》 CSCD 北大核心 2024年第2期182-189,共8页
目的 应用大样本临床测序数据联合体外细胞筛选放疗抵抗相关基因,探讨放疗诱导含锌指和BTB结构域蛋白质7A(ZBTB7A)过表达在胶质母细胞瘤(GBM)放疗抵抗中的作用.方法 纳入中国脑胶质瘤基因组图谱计划数据库中966例脑胶质瘤标本的测序和... 目的 应用大样本临床测序数据联合体外细胞筛选放疗抵抗相关基因,探讨放疗诱导含锌指和BTB结构域蛋白质7A(ZBTB7A)过表达在胶质母细胞瘤(GBM)放疗抵抗中的作用.方法 纳入中国脑胶质瘤基因组图谱计划数据库中966例脑胶质瘤标本的测序和临床数据筛选及验证GBM放疗抵抗候选基因:(1)纳入226例原发GBM(pGBM)与134例手术+放疗后复发的GBM(rGBM)非配对肿瘤标本,以及15例首次诊断为pGBM、手术+放疗后复发再次行手术切除的配对肿瘤标本的测序数据筛选GBM放疗抵抗候选基因,并验证ZBTB7A是否为放疗抵抗相关基因;(2)比较异柠檬酸脱氢酶(IDH)野生型与突变型胶质瘤标本ZBTB7A mRNA表达量的差异(数据集1样本量分别为286、356例,数据集2分别为149、175例);(3)比较ZBTB7A高表达组(148例)与低表达组(148例)GBM患者生存期的差异.纳入2019年4月至2022年12月于首都医科大学附属北京天坛医院手术并经病理学诊断的pGBM与rGBM肿瘤标本(各12例),采用免疫组织化学染色法检测两组肿瘤组织中ZBTB7A蛋白表达水平的差异.采用高能X线照射人脑GBM细胞株U87、LN229和U251(单次13 Gy,照射6.5 min),4、8 h后采用定量PCR方法检测细胞ZBTB7A mRNA的表达量;照射U87和LN229细胞(单次5 Gy,照射2.5 min),1、2、4、8、12 h后采用蛋白质免疫印迹法检测ZBTB7A蛋白 及DNA损伤标志物H2AX蛋白的表达量.采用小干扰RNA慢病毒(shRNA)感染法敲低U87细胞ZBTB7A的表达后,采用高能X线照射(单次照射剂量为5 Gy,照射2.5 min),1 h后行彗星实验检测细胞的DNA损伤情况;采用平板克隆实验检测细胞的增殖情况.结果 非配对和配对肿瘤标本测序数据交叉筛选显示,rGBM组ZBTB7A mRNA的表达量均高于pGBM组(均P<0.05).IDH野生型ZBTB7A mRNA表达量高于IDH突变型;ZBTB7A高表达GBM患者的生存期短于低表达者;免疫组织化学染色证实ZBTB7A蛋白在rGBM肿瘤标本中的表达量高于pGBM,上述数据� 展开更多
关键词 胶质母细胞瘤 放疗抵抗 过表达 含锌指和btb结构域蛋白质7A
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Ⅳ型胶原蛋白NC1片段在精子发生及血睾屏障中作用的研究进展
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作者 蒋术一 宿文辉 《基础医学与临床》 2023年第4期532-537,共6页
在哺乳动物睾丸中,位于生精上皮基底膜附近的血睾屏障(blood-testis barrier,BTB)对精子发生至关重要。BTB由相邻的支持细胞(Sertoli细胞)连接而成,将生精上皮分为靠近基底膜的“基底室”和靠近生精小管管腔的“近腔室”,为精子发生提... 在哺乳动物睾丸中,位于生精上皮基底膜附近的血睾屏障(blood-testis barrier,BTB)对精子发生至关重要。BTB由相邻的支持细胞(Sertoli细胞)连接而成,将生精上皮分为靠近基底膜的“基底室”和靠近生精小管管腔的“近腔室”,为精子发生提供了免疫屏障。Ⅳ型胶原蛋白是基底膜的重要组成成分,啮齿类动物的睾丸中Ⅳ型胶原蛋白主要是由3条α3链组成的三螺旋结构。大鼠睾丸的Ⅳ型胶原蛋白α3链C端可以水解成大小为28 ku的蛋白片段,称为C端非胶原结构域(noncollagenous domain-peptide,NC1片段)。NC1片段作为一种基底膜源性多肽在参与精子发生与维系BTB功能方面发挥了重要作用。本文通过分析、总结近期研究结果,概述Ⅳ型胶原蛋白NC1片段在睾丸中的作用及其机制,尤其是其在精子发生与BTB中作用的研究进展。 展开更多
关键词 精子发生 血睾屏障(btb) Ⅳ型胶原蛋白 NC1片段
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MiR-125b-5p靶向BACH1增强β-地中海贫血单核细胞吞噬活性的机制研究
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作者 岑红霞 蔡思铭 +1 位作者 姜虹羽 廖赵妹 《河北医药》 CAS 2023年第15期2245-2250,共6页
目的探讨miR-125b-5p通过靶向BACH1增强β-地中海贫血(β-thal)单核细胞吞噬活性的机制。方法收集健康儿童与HbE型β-thal(HbE/β-thal)患儿外周血,流式细胞仪分析外周血单核细胞(PBMC)表型,qRT-PCR法测定miR-125b-5p的表达量,分析HbE/... 目的探讨miR-125b-5p通过靶向BACH1增强β-地中海贫血(β-thal)单核细胞吞噬活性的机制。方法收集健康儿童与HbE型β-thal(HbE/β-thal)患儿外周血,流式细胞仪分析外周血单核细胞(PBMC)表型,qRT-PCR法测定miR-125b-5p的表达量,分析HbE/β-thal患儿miR-125b-5p表达与病情及激活表型的关系,双荧光素酶报告基因系统检验miR-125b-5p与BACH1的靶向关系,western blot检测BACH1与HO-1的表达量,在正常PBMC中同时上调miR-125b-5p与BACH1,在HbE/β-thal来源PBMC中同时下调miR-125b-5p与BACH1,测定PBMC吞噬活性的变化。结果2组儿童PBMC数量没有明显差异(P>0.05),但HbE/β-tha患儿CD14hiCD16+表型PBMC比例增加(P<0.05),HbE/β-thal患儿PBMC内miR-125b-5p表达量显著高于健康儿童(P<0.05),miR-125b-5p的表达与RBC计数、Hb含量、Hct、MCH均呈负相关(P<0.05),而与CD14hiCD16+比例呈现正相关(P<0.05);双荧光素酶报告基因系统与western blot证实miR-125b-5p能靶向抑制BACH1表达(P<0.05),且与正常儿童比较,HbE/β-thal患儿PBMC中BACH1表达量降低(P<0.05),而HO-1表达量升高(P<0.05);miR-125b-5p上调可以显著增强健康儿童来源PBMC的吞噬能力(P<0.05),而过表达BACH1能逆转该情况(P<0.05),相反,抑制miR-125b-5p能降低具有高吞噬能力的HbE/β-thal患儿来源PBMC的吞噬活性(P<0.05),而抑制BACH1能逆转该现象(P<0.05)。结论miR-125b-5p通过抑制BACH1来增强HbE/β-thal患儿PBMC吞噬活性。 展开更多
关键词 miR-125b-5p HbE型β-地中海贫血 单核细胞 吞噬 btb结构域和CNC同系物1
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微小RNA-520e对非小细胞肺癌细胞侵袭迁移和JAK1/STAT3信号通路的影响 被引量:4
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作者 言成一 杨继承 袁跃西 《临床肿瘤学杂志》 CAS 北大核心 2019年第11期978-983,共6页
目的探讨微小RNA-520e(miR-520e)对非小细胞肺癌(NSCLC)细胞侵袭迁移和Janus激酶1(JAK1)/信号转导和转录激活因子3(STAT3)信号通路的影响。方法采用实时定量PCR(QPCR)检测人肺上皮细胞BEAS-2B和NSCLC细胞株H1299、H1975、H1650、A549的m... 目的探讨微小RNA-520e(miR-520e)对非小细胞肺癌(NSCLC)细胞侵袭迁移和Janus激酶1(JAK1)/信号转导和转录激活因子3(STAT3)信号通路的影响。方法采用实时定量PCR(QPCR)检测人肺上皮细胞BEAS-2B和NSCLC细胞株H1299、H1975、H1650、A549的miR-520e水平;体外常规培养A549细胞并采用脂质体分别转染模拟物(过表达组)和阴性对照序列(NC组),以仅经脂质体处理的细胞为对照组。采用QPCR、活细胞计数CCK-8、划痕实验和Transwell实验检测miR-520e和含锌指和BTB结构域7A(ZBTB7A)水平、增殖活力、划痕愈合率和穿膜细胞数,Western blotting检测基质金属蛋白酶(MMP)-9、磷酸化JAK1(p-JAK1)和磷酸化STAT3(p-STAT3)水平;双荧光素酶报告基因系统联合荧光素酶报告质粒psiCHECK-2验证miR-520e与ZBTB7A的靶向关系。结果与正常细胞相比,NSCLC细胞的miR-520e水平降低,其中A549细胞最低,差异有统计学意义(P<0.05)。过表达组的miR-520e水平为19.562±1.448,高于对照组的1.002±0.057和NC组的1.053±0.082,ZBTB7A水平为0.173±0.026,低于对照组的1.109±0.091和NC组的1.076±0.136,差异均有统计学意义(P<0.05)。与对照组和NC组相比,过表达组转染36、48 h后的增殖活力及转染48 h后的MMP-9、p-JAK1和p-STAT3水平均降低(P<0.05)。过表达组的划痕愈合率和穿膜细胞数分别为(23.618±3.684)%和(51.644±7.069)个,低于对照组的(57.089±4.569)%和(152.269±12.833)个及NC组的(59.267±5.671)%和(149.075±11.239)个(P<0.05)。MiR-520e模拟物与携带野生型ZBTB7A 3’端非翻译区的psiCHECK-2载体共转染细胞的相对荧光强度降低(P<0.05)。结论 miR-520e在NSCLC细胞中表达下调且可能通过靶向ZBTB7A降低JAK1/STAT3信号通路活性来抑制NSCLC细胞的增殖、侵袭和迁移。 展开更多
关键词 非小细胞肺癌 微小RNA-520e 侵袭迁移 含锌指和btb结构域7A
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微小RNA-122靶向锌指和BTB结构域蛋白20调控Wnt通路影响胃癌的侵袭和迁移 被引量:4
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作者 袁远 宋玉成 +2 位作者 张广坛 张学东 薛焕洲 《中华实验外科杂志》 CSCD 北大核心 2017年第4期608-611,共4页
目的 探讨微小RNA(miRNA,miR)-122靶向锌指和BTB结构域蛋白20(ZBTB20)调控Wnt信号通路影响胃癌的侵袭和迁移的作用机制。方法 应用实时荧光定量聚合酶链反应(FQ-PCR)检测miR-122在胃癌组织中表达;运用Western blot在胃癌细胞株... 目的 探讨微小RNA(miRNA,miR)-122靶向锌指和BTB结构域蛋白20(ZBTB20)调控Wnt信号通路影响胃癌的侵袭和迁移的作用机制。方法 应用实时荧光定量聚合酶链反应(FQ-PCR)检测miR-122在胃癌组织中表达;运用Western blot在胃癌细胞株中挑出高表达ZBTB20的细胞株;双荧光素酶报告基因系统检测miR-122对ZBTB20转录活性的影响;Transwell侵袭实验检测miR-122的表达对胃癌细胞SGC-7901的侵袭能力的影响;划痕实验检测miR-122的表达对胃癌细胞SGC-7901的迁移能力的影响;Western blot检测沉默ZBTB20后Wnt信号通路的蛋白表达水平。裸鼠体外成瘤实验检测过表达miR-122后SGC-7901胃癌细胞体外成瘤能力变化。 结果 miR-122在胃癌组织中低表达,ZBTB20在SGC-7901胃癌细胞株中表达水平较高(2.51±0.31比0.58±0.17, P=0.009);过表达miR-122后,胃癌细胞株SGC-7901的侵袭和迁移能力明显降低[(18.62±2.32)%比(35.92±2.48)%,P=0.029;(34.25±5.75)%比(62.19±7.23)%,P=0.032;(49.73±3.91)%比(85.24±6.29)%,P=0.026];双荧光素酶报告基因系统检测结果显示,miR-122可以直接调控ZBTB20的转录活性;沉默ZBTB20后,Wnt、c-Myc和细胞周期素D1(Cyclin D1)蛋白表达下调[(12.32±0.81)%比(81.45±3.69)%; (15.64±1.11)%比(88.45±8.34)%, (13.52±0.71)%比(79.45±3.76)%,P=0.043];过表达miR-122后,胃癌SGC-7901细胞株体外成瘤能力下降[体积(3.09±0.23) cm3比(0.45±0.12) cm3,P=0.029;重量(2.85±0.35) g比(0.48±0.14) g,P=0.018]。 结论miR-122靶向ZBTB20的表达,从而调控胃癌细胞的侵袭和迁移能力。 展开更多
关键词 微小RNA-122 锌指和btb结构域蛋白20 WNT 胃癌
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转录因子BTB-CNC同源体1通过上调赖氨酰氧化酶促进胶质母细胞瘤中巨噬细胞的募集和极化
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作者 苑锋 丛子翔 +5 位作者 李振兴 杜超楠 朱俊豪 唐超 杨进 马驰原 《临床神经外科杂志》 2023年第4期407-414,共8页
目的研究转录因子BTB-CNC同源体1(BACH1)通过上调赖氨酰氧化酶(LOX)促进胶质母细胞瘤(GBM)中巨噬细胞的募集和极化。方法基于公共数据库分析BACH1在胶质瘤中的表达特点和预后情况;构建BACH1过表达的稳转GBM细胞系,并对其进行转录组和蛋... 目的研究转录因子BTB-CNC同源体1(BACH1)通过上调赖氨酰氧化酶(LOX)促进胶质母细胞瘤(GBM)中巨噬细胞的募集和极化。方法基于公共数据库分析BACH1在胶质瘤中的表达特点和预后情况;构建BACH1过表达的稳转GBM细胞系,并对其进行转录组和蛋白质组联合测序分析;利用Transwell共培养体系将GBM细胞与巨噬细胞共培养,观察对巨噬细胞的趋化和极化影响;构建GL261-C57BL/6小鼠脑胶质瘤原位模型,探索靶向调控BACH1对肿瘤生长以及免疫微环境中巨噬细胞的影响。结果首先,相对于正常脑组织,BACH1在胶质瘤中高表达,且在GBM患者中表达最高;同时还发现高表达BACH1的GBM患者预后较低表达BACH1的患者更差。然后,测序结果发现相对于BACH1空载组,BACH1过表达组中肿瘤相关巨噬细胞趋化因子LOX的转录和蛋白水平均显著升高(转录组,P<0.0001;蛋白组,P=0.0015)。其次,流式实验结果表明,相对于BACH1空载组,BACH1过表达组中M2型肿瘤相关巨噬细胞(CD11b^(+)CD206^(+))明显增加(P<0.0001),当加入LOX抑制剂后,两组中的M2型肿瘤相关巨噬细胞明显减少且BACH1过表达组减少的更明显(BACH1-Vec,P=0.0015;BACH1-OE,P=0.0013)。小鼠脑胶质瘤原位模型结果提示,相对于BACH1空载组,BACH1过表达组中肿瘤体积更大且侵袭能力更强。结论BACH1能够通过促进GBM细胞分泌肿瘤相关巨噬细胞趋化因子LOX进而影响巨噬细胞的募集和极化,最终促进肿瘤的恶性进展。 展开更多
关键词 转录因子btb-CNC同源体1 胶质母细胞瘤 赖氨酰氧化酶 肿瘤相关巨噬细胞
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受稻瘟病菌诱导的水稻OsBTB基因的分子特征和功能初探 被引量:3
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作者 姜玉新 董海涛 +2 位作者 庄杰云 郑康乐 李德葆 《中国水稻科学》 CAS CSCD 北大核心 2006年第6期577-582,共6页
报道了1个从稻瘟病菌诱导的水稻近等基因系H7R/H7S中克隆的类GMPOZ基因———OsBTB,通过测序获其全长cDNA并分析了该基因的序列特征。根据水稻基因组序列数据库搜索,将OsBTB基因定位在水稻基因组第2染色体上。Northern和Western杂交结... 报道了1个从稻瘟病菌诱导的水稻近等基因系H7R/H7S中克隆的类GMPOZ基因———OsBTB,通过测序获其全长cDNA并分析了该基因的序列特征。根据水稻基因组序列数据库搜索,将OsBTB基因定位在水稻基因组第2染色体上。Northern和Western杂交结果表明,OsBTB基因在水稻近等基因系H7R/H7S中均受稻瘟病菌诱导表达,且在非亲和与亲和互作中表达差异明显。定量PCR结果表明该基因的表达模式与所选取的抗性及抗性相关基因的表达模式一致。综合结果提示该基因可能参与了稻瘟病菌诱导的抗性反应。 展开更多
关键词 btb/POZ结构域 水稻 稻瘟病菌 近等基因系 Osbtb基因 分子特征 基因功能
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KBTBD7促进抗炎性巨噬细胞M2极化改善心肌梗死后的过度炎症和心脏功能障碍 被引量:3
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作者 刘帅 李原 +2 位作者 苏亚坤 孙艳荣 袁兰所 《免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2021年第12期1021-1028,共8页
目的研究BTB(POZ)结构域7蛋白(KBTBD7)对心肌梗死(MI)模型小鼠的过度炎症和心脏功能的影响并探讨机制。方法使用48只8~10周龄的雄性C57BL/6小鼠,每组12只,分为假手术组、MI组、MI+过表达KBTBD7慢病毒颗粒组(MI+K7-pGEX组)、MI+过表达腺... 目的研究BTB(POZ)结构域7蛋白(KBTBD7)对心肌梗死(MI)模型小鼠的过度炎症和心脏功能的影响并探讨机制。方法使用48只8~10周龄的雄性C57BL/6小鼠,每组12只,分为假手术组、MI组、MI+过表达KBTBD7慢病毒颗粒组(MI+K7-pGEX组)、MI+过表达腺病毒对照组(MI+Ctrl-pGEX组)。利用左前降支冠状动脉结扎法建立MI小鼠模型。MI+K7-pGEX组在MI造模后立即使用50μl的K7-pGEX(1μmol/L)治疗MI小鼠,其对照组则注射等量Ctrl-pGEX。经胸超声心动图、氯化三苯四唑(TTC)染色以及MASSON三色染色记录小鼠心脏功能和瘢痕面积;使用qPCR法检测MI后KBTBD7的表达变化;使用蛋白免疫印迹法检测KBTBD7、M1和M2型巨噬细胞表型标志物的表达以及NF-κB激活情况;ELISA法检测小鼠腹膜内IL-1β、IL-6、TNF-α的水平。结果与假手术组比,MI组的KBTBD7在1~7 d表达均上调(P<0.05),MI组的心脏功能障碍恶化,疤痕面积增加(P<0.05),心脏组织中的炎性细胞因子包括IL-1β,IL-6和TNF-α(P<0.05)、M1型巨噬细胞极化标志物IL-12、INF-γ、GM-CSF(P<0.05)以及IKKα/β和p65的磷酸化水平都上调(P<0.05),而M2型巨噬细胞极化标志物IL-10、Arg-1、CD206、DECTIN-1下调(P<0.05);而当K7-pGEX治疗后,与MI+Ctrl-pGEX组比,MI+K7-pGEX组的KBTBD7在3~7 d下调(P<0.05),心脏功能障碍恶化部分缓解,疤痕面积减少(P<0.05),心脏组织中IL-1β、IL-6和TNF-α下调(P<0.05),M1型巨噬细胞极化标志物IL-12、INF-γ、GM-CSF(P<0.05)下调,IKKα/β和p65的磷酸化水平下调(P<0.05),而M2型巨噬细胞极化标志物IL-10、Arg-1、CD206、DECTIN-1上调(P<0.05)。结论体内过表达KBTBD7促进MI小鼠心肌组织抗炎性M2型巨噬细胞极化,抑制NF-κB信号激活,并减轻MI后的炎症,从而改善心脏功能障碍。 展开更多
关键词 心肌梗死 btb(POZ)结构域7 巨噬细胞M2极化 炎症
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微小RNA-146a-5p对肝癌细胞侵袭迁移和ZBTB2表达的影响 被引量:3
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作者 吴涛 陈恩洪 +1 位作者 金成 刘敏丰 《临床肿瘤学杂志》 CAS 北大核心 2019年第11期984-988,共5页
目的探讨微小RNA-146a-5p(miR-146a-5p)对肝癌细胞侵袭、迁移和含锌指和BTB结构域2(ZBTB2)表达的影响。方法采用实时定量PCR(QPCR)检测人正常肝细胞LO2和肝癌细胞SMMC-7721的miR-146a-5p水平;体外常规培养SMMC-7721细胞进行转染,根据转... 目的探讨微小RNA-146a-5p(miR-146a-5p)对肝癌细胞侵袭、迁移和含锌指和BTB结构域2(ZBTB2)表达的影响。方法采用实时定量PCR(QPCR)检测人正常肝细胞LO2和肝癌细胞SMMC-7721的miR-146a-5p水平;体外常规培养SMMC-7721细胞进行转染,根据转染物不同分为增强转染组(转染miR-146a-5p mimics)、抑制转染组(转染miR-146a-5p inhibitor)和空白转染组(转染脂质体)。采用实时定量PCR(QPCR)、四甲基偶氮噻唑蓝(MTT)比色法、Transwell细胞迁移和侵袭实验以及Western blotting检测miR-146a-5p水平、增殖活力、穿膜细胞数和ZBTB2水平;将含ZBTB2基因3’端非翻译区(3’UTR)特定种子序列克隆至荧光素酶报告质粒psiCHECK-2并通过双荧光素酶报告基因系统验证miR-146a-5p与ZBTB2的靶向关系。结果 SMMC-7721细胞的miR-146a-5p水平为0.156±0.047,低于LO2细胞的1.157±0.413(P<0.05)。与空白转染组的1.241±0.375相比,增强转染组的miR-146a-5p水平升高至8.159±1.274,而抑制转染组则降低至0.219±0.036;与空白转染组相比,增强转染组转染48、72 h后的增殖活力降低,而抑制组则升高;细胞侵袭实验中,与空白转染组的(22.069±3.152)个相比,增强转染组的穿膜细胞数降低至(11.847±2.031)个,而抑制转染组则升高至(69.540±4.257)个;细胞迁移实验中,与空白转染组的(47.338±5.067)个相比,增强转染组的穿膜细胞数降低至(29.640±3.652)个,而抑制转染组则升高至(136.426±18.469)个;与对照组的0.564±0.089相比,增强转染组的ZBTB2水平降低至0.168±0.023,而抑制组则升高至0.826±0.157;以上组间差异均有统计学意义(P<0.05)。经miR-146a-5p mimics处理后,转染野生型ZBTB2 3’UTR质粒细胞的相对荧光强度低于转染突变型质粒(P<0.05)。结论 miR-146a-5p在肝癌细胞中低表达并发挥抑癌作用,该miRNA可能通过靶向ZBTB2来抑制迁移侵袭能力,在肝癌靶向治疗中有一定应用前景。 展开更多
关键词 肝癌 微小RNA-146a-5p 侵袭迁移 含锌指和btb结构域2
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Rho激酶抑制剂法舒地尔作用BTBD7-ROCK2信号通路抑制肝细胞癌侵袭运动 被引量:2
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作者 胡宽 王志明 陶一明 《中南大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2014年第12期1221-1227,共7页
目的:观察Rho激酶抑制剂法舒地尔(Fasudil)对人高侵袭潜能HCC细胞株3(human high metastatic liver cancer cells 3,HCCLM3)侵袭转移的影响,并且探讨其作用的机制。方法:应用100 mol/L Fasudil作用于HCCLM3细胞,采用肌动蛋白微丝荧光染... 目的:观察Rho激酶抑制剂法舒地尔(Fasudil)对人高侵袭潜能HCC细胞株3(human high metastatic liver cancer cells 3,HCCLM3)侵袭转移的影响,并且探讨其作用的机制。方法:应用100 mol/L Fasudil作用于HCCLM3细胞,采用肌动蛋白微丝荧光染色和侵袭小室实验观察HCCLM3细胞的运动侵袭能力。HCCLM3细胞经过处理后分为阴性对照组、Fasudil作用组、BTBD7干扰组,通过Western印迹检测BTB/POZ结构域蛋白7(BR-C,ttk and bab/pox virus domain containing 7,BTBD7)、Ras同系物家族成员C(ras homolog family member C,Rho C)、Rho关联卷曲螺旋蛋白激酶2(Rhoassociated,coiled-coil containing protein kinase 2,ROCK2)、MMP2和MMP9蛋白表达水平,酶谱分析法检测MMP2和MMP9活性水平。BTBD7干扰组作为阳性对照。结果:Fasudil处理后HCCLM3侵袭运动能力下降,BTBD7,Rho C,ROCK2蛋白表达下调,MMP2和MMP9活性降低,与阴性对照组比较差异有统计学意义(均P<0.01)。结论:Fasudil具有干预BTBD7-ROCK2信号通路、抑制HCC侵袭转移的重要作用。 展开更多
关键词 肝细胞癌 btb/POZ结构域蛋白7 Rho关联卷曲螺旋蛋白激酶2 法舒地尔 侵袭转移
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ZBTB12对肝细胞癌细胞有氧糖酵解、增殖和迁移的影响 被引量:1
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作者 吴洁 吴群 +2 位作者 高春 吴鑫阳 李国春 《临床肿瘤学杂志》 CAS 2022年第12期1078-1084,共7页
目的 探讨锌指和BTB结构域蛋白12(ZBTB12)对肝细胞癌(HCC)细胞有氧糖酵解、增殖和迁移的影响。方法 利用实时荧光定量聚合酶链反应(qPCR)、Western blotting和免疫组化检测ZBTB12在HCC组织和配对癌旁组织中的表达差异。构建敲低ZBTB12的... 目的 探讨锌指和BTB结构域蛋白12(ZBTB12)对肝细胞癌(HCC)细胞有氧糖酵解、增殖和迁移的影响。方法 利用实时荧光定量聚合酶链反应(qPCR)、Western blotting和免疫组化检测ZBTB12在HCC组织和配对癌旁组织中的表达差异。构建敲低ZBTB12的HCC细胞Hep3B和SMMC-7721,体外通过平板克隆形成实验、CCK-8实验和Transwell小室实验检测ZBTB12对HCC细胞增殖和迁移的影响。体内通过裸鼠皮下瘤模型和肺转移模型评估ZBTB12对HCC细胞增殖和迁移的影响。通过检测葡萄糖摄取量、乳酸产生量、耗氧率(OCR)和细胞外酸化率(ECAR)明确ZBTB12对HCC细胞有氧糖酵解的影响,进一步采用qPCR和Western blotting检测ZBTB12对糖酵解关键酶的影响。结果 ZBTB12的mRNA和蛋白水平在HCC组织中较癌旁组织均呈现明显的高表达。敲低ZBTB12明显抑制了Hep3B和SMMC-7721细胞在体外和体内的增殖和迁移的能力。机制研究表明敲低ZBTB12明显抑制了HCC细胞的葡萄糖摄取量、乳酸产生量、OCR和细胞外酸ECAR,进一步分析发现敲低ZBTB12明显抑制了糖酵解关键酶HK2和LDHA的表达。结论 ZBTB12的表达在HCC组织中明显上调,敲低ZBTB12可以明显抑制HCC细胞的有氧糖酵解、增殖和迁移,有望成为HCC治疗的潜在靶点。 展开更多
关键词 肝细胞癌 锌指和btb结构域蛋白12 有氧糖酵解 增殖迁移
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miR-142-3p靶向调控RHOBTB3基因对肺癌A549细胞增殖能力的影响 被引量:1
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作者 万启飞 朱晓明 +2 位作者 李基伟 姚文健 魏立 《中华实用诊断与治疗杂志》 2022年第3期237-241,共5页
目的观察肺癌组织miR-142-3p表达变化,探讨miR-142-3p靶向调控Rho相关结构域BTB蛋白质3(Rho-related BTB domain-containing protein 3,RHOBTB3)基因对肺癌A549细胞增殖能力的影响。方法肺癌患者35例,均行手术治疗,取手术切除癌组织及... 目的观察肺癌组织miR-142-3p表达变化,探讨miR-142-3p靶向调控Rho相关结构域BTB蛋白质3(Rho-related BTB domain-containing protein 3,RHOBTB3)基因对肺癌A549细胞增殖能力的影响。方法肺癌患者35例,均行手术治疗,取手术切除癌组织及癌旁组织,采用实时荧光定量PCR法检测miR-142-3p及RHOBTB3 mRNA相对表达量。将对数生长期A549细胞分为miR-142-3p组和对照组,分别转染表达miR-142-3p的慢病毒和阴性对照慢病毒,转染48 h时采用实时荧光定量PCR法检测miR-142-3p相对表达量。筛选出稳定转染的miR-142-3p组A549细胞分为稳转miR-142-3p组和miR-142-3p+RHOBTB3组,稳定转染的对照组A549细胞分为稳转对照组和RHOBTB3组,miR-142-3p+RHOBTB3组、RHOBTB3组采用脂质体转染法转染表达RHOBTB3的质粒,稳转miR-142-3p组、稳转对照组不做处理。转染48 h, 4组采用Western blot法检测RHOBTB3蛋白相对表达量,采用CCK-8法检测培养96 h时细胞增殖率,采用细胞克隆形成实验检测细胞克隆形成数目。采用荧光素酶报告基因实验验证miR-142-3p靶向结合RHOBTB3基因。结果肺癌组织miR-142-3p相对表达量(0.58±0.27)低于癌旁组织(1.06±0.34)(t=-6.508,P<0.001),RHOBTB3 mRNA相对表达量(1.24±0.32)高于癌旁组织(0.51±0.29)(t=10.020,P<0.001)。miR-142-3p组细胞miR-142-3p相对表达量(9.45±1.80)高于对照组(1.05±0.32)(t=11.240,P<0.001)。稳转miR-142-3p组RHOBTB3蛋白相对表达量(0.47±0.05)、细胞增殖率[(48.56±9.97)%]及细胞克隆形成数目[(47.00±8.39)个]均低于稳转对照组[0.79±0.07、(100.00±8.71)%、(165.67±13.92)个]和miR-142-3p+RHOBTB3组[0.77±0.06、(95.82±9.79)%、(141.33±12.88)个](P<0.05),RHOBTB3组RHOBTB3蛋白相对表达量(1.20±0.12)、细胞增殖率[(153.23±18.29)%]及细胞克隆形成数目[(267.83±23.25)个]均高于miR-142-3p+RHOBTB3组(P<0.05)。荧光素酶报告基因实验结果显示,miR-142-3p+pMIR WT组荧光素酶活性(0.41±0.05)低于NC+pMIR WT组(1.01±0.12)(t=11.220,P<0. 展开更多
关键词 肺癌 A549细胞 miR-142-3p Rho相关结构域btb蛋白质3 细胞增殖
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PAK4与RCBTB1相互作用促进胰腺癌细胞增殖 被引量:1
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作者 于昕博 黄昌伟 +2 位作者 路天琦 袁莹 李晓东 《中国医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2022年第2期115-120,共6页
目的研究p21激活激酶4(PAK4)与RCC1和BTB结构域包含蛋白1(RCBTB1)的相互作用及其在胰腺癌细胞增殖过程中的作用。方法采用免疫共沉淀实验确定PAK4与RCBTB1在胰腺癌细胞内的相互作用;采用免疫荧光实验确定PAK4与RCBTB1在胰腺癌细胞内的... 目的研究p21激活激酶4(PAK4)与RCC1和BTB结构域包含蛋白1(RCBTB1)的相互作用及其在胰腺癌细胞增殖过程中的作用。方法采用免疫共沉淀实验确定PAK4与RCBTB1在胰腺癌细胞内的相互作用;采用免疫荧光实验确定PAK4与RCBTB1在胰腺癌细胞内的定位和共定位位置;采用CCK-8实验探究过表达PAK4、RCBTB1对胰腺癌细胞增殖的影响;采用流式细胞术检测过表达PAK4、RCBTB1对胰腺癌细胞周期的影响;采用Western blotting检测过表达PAK4、RCBTB1对cyclin D1蛋白表达水平的影响。结果PAK4与RCBTB1在胰腺癌细胞内存在相互作用。PAK4与RCBTB1共定位于胰腺癌细胞核和核周细胞质内。过表达PAK4、RCBTB1促进胰腺癌细胞增殖,加速胰腺癌细胞的细胞周期进程,促进cyclin D1的表达。结论PAK4与RCBTB1相互作用促进胰腺癌细胞增殖。 展开更多
关键词 p21激活激酶4 RCC1和btb结构域包含蛋白1 相互作用 胰腺癌 增殖
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锌-α2糖蛋白和锌指蛋白32在大鼠睾丸及睾周脂肪中的表达 被引量:3
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作者 齐亚楠 崔彤 +4 位作者 马婧 韩瑞钰 安琪 谷翊群 王树松 《中国计划生育学杂志》 2020年第9期1338-1341,I0001,共5页
目的:探讨肥胖大鼠睾丸及睾周脂肪中锌α2糖蛋白(ZAG)和锌指蛋白32(ZBTB32)的表达及在睾丸中的定位。方法:清洁级雄性SD大鼠20只,随机分成研究组(高脂饲料喂养)和对照组(普通饲料喂养),12周后成功构建肥胖大鼠模型。采用免疫组织化学法... 目的:探讨肥胖大鼠睾丸及睾周脂肪中锌α2糖蛋白(ZAG)和锌指蛋白32(ZBTB32)的表达及在睾丸中的定位。方法:清洁级雄性SD大鼠20只,随机分成研究组(高脂饲料喂养)和对照组(普通饲料喂养),12周后成功构建肥胖大鼠模型。采用免疫组织化学法检测ZAG和ZBTB32在睾丸中的定位,采用实时荧光定量PCR和蛋白免疫印迹技术检测ZAG和ZBTB32在大鼠睾丸及睾周脂肪中mRNA和蛋白表达。结果:ZAG和ZBTB32在大鼠睾丸生精细胞胞质中表达;研究组大鼠睾周脂肪中ZAG蛋白的表达量和mRNA相对表达量(0.751±0.030,0.048±0.068)均低于对照组(1.116±0.021,1.000±0.000)(P<0.05);研究组与对照组大鼠睾丸组织中ZAG蛋白表达量(0.616±0.025,0.605±0.033)和mRNA相对表达量(0.820±0.760,1.000±0.000)均无差异(P>0.05);ZBTB32在研究组大鼠睾丸及睾周脂肪组织中蛋白表达量(1.514±0.057,0.376±0.007)与对照组(1.477±0.035,0.390±0.019)比较无差异(P>0.05);ZBTB32在研究组大鼠睾丸及睾周脂肪中mRNA相对表达量(0.994±0.770,0.744±0.650)与对照组大鼠(1.000±0,1.000±0.000)比较无差异(P>0.05)。结论:肥胖大鼠睾周脂肪中ZAG表达显著降低,提示肥胖可能导致ZAG表达异常,进而影响雄性生殖。 展开更多
关键词 大鼠 肥胖 睾丸 睾周脂肪 锌α2糖蛋白 锌指蛋白32
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