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绝经后骨质疏松患者胎球蛋白-基质gla蛋白-钙磷矿化复合物的作用机制研究 被引量：6
1
作者 周广文 沈霖 +4 位作者 周亚娜 代轶男 周慧敏 余欣然 向楠 《北京中医药》 2016年第6期552-556,共5页
目的探讨胎球蛋白-基质gla蛋白-钙磷矿化复合物（FMC）在绝经后骨质疏松症（PMOP）患者发病中的作用机制。方法分别选择PMOP患者（PMOP组）和骨量正常者（非骨质疏松组）各23名,采用双能X线吸收法（DEXA）测定腰椎骨密度（BMD）,采用酶... 目的探讨胎球蛋白-基质gla蛋白-钙磷矿化复合物（FMC）在绝经后骨质疏松症（PMOP）患者发病中的作用机制。方法分别选择PMOP患者（PMOP组）和骨量正常者（非骨质疏松组）各23名,采用双能X线吸收法（DEXA）测定腰椎骨密度（BMD）,采用酶联免疫吸附试验（ELISA）测定血清胎球蛋白A（fetuin-A）、基质gla蛋白（matrix gla protein,MGP）、骨形态发生蛋白2（bone morphogenetic protein,BMP2）、Runt相关转录因子2（Runt-related transcription factor-2,Run X2）水平,通过聚合酶链式反应（polymerase chain reaction,PCR）检测骨组织局部fetuin A、MGP、BMP2、Run X2mRNA表达。结果 PMOP组血清Fetuin-A、MGP、腰椎BMP2、Run X2 mRNA表达明显低于非骨质疏松组,而腰椎MGPmRNA表达高于非骨质疏松组（P〈0.05）;组间比较,血清BMP2、Run X2水平、腰椎Fetuin-A mRNA表达,均差异无统计学意义（P〉0.05）。多元逻辑回归分析显示,腰椎MGP、BMP2及Run X2 mRNA表达与BMD相关（OR 1.016,95%CI0.809~0.991,P=0.029;OR 1.230,95%CI 1.063~1.424,P=0.015;OR 1.107,95%CI 1.016~1.205,P=0.048）。结论血清FMC合成的减少及MGP在局部骨组织聚集,可能通过影响BMP2/Smad/Run X2信号通路,抑制正常的骨矿化,从而导致PMOP的发生。 展开更多
关键词 胎球蛋白-基质gla蛋白-钙磷矿化复合物 绝经后骨质疏松症 bmp2/smad/runx2信号通路
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基于BMP-Smad/RUNX2信号通路探讨固本增骨方含药血清对大鼠BMSCs增殖和成骨分化的影响 被引量：11
2
作者 宋敏 巩彦龙 +2 位作者 董平 董万涛 蒋林博 《世界科学技术-中医药现代化》 CSCD 北大核心 2020年第4期1159-1165,共7页
目的基于BMPs-Smad/RUNX2信号通路探讨固本增骨方含药血清对大鼠骨髓间充质干细胞增殖及成骨分化的作用机制。方法制备固本增骨方含药血清;台盼蓝染色观察细胞生长情况;取P3代大鼠BMSCs分为空白血清组、5%、10%、20%、30%浓度含药血清... 目的基于BMPs-Smad/RUNX2信号通路探讨固本增骨方含药血清对大鼠骨髓间充质干细胞增殖及成骨分化的作用机制。方法制备固本增骨方含药血清;台盼蓝染色观察细胞生长情况;取P3代大鼠BMSCs分为空白血清组、5%、10%、20%、30%浓度含药血清组及传统诱导组,分别对各组大鼠BMSCs进行培养及成骨诱导,向6组加入相应培养液24 h后开始测量细胞计数,连续测量4天;成骨诱导2周后,进行碱性磷酸酶染色试剂盒说明书进行染色,光镜下观察各组细胞蓝紫色区域的密集程度;ELISA法检测COL-I、ALP、BGP、OPN蛋白的含量;Real-time PCR检测BMPs信号通路相关基因BMP2、BMP4、Smad1、RUNX2表达。结果各组固本增骨方含药血清组在培养24h后比空白组及传统成骨诱导组OD值比较差异均具有统计学意义(P<0.05),并且20%含药血清组较5%、10%及30%含药血清组OD值比较差异具有统计学意义(P<0.05);碱性磷酸酶染色后镜下观察在浓度为20%时染色区域最密集;5%、10%、20%含药血清组与其他各组BGP、OPN、ALP、COL-I含量比较差异具有统计学意义(P<0.05),且20%含药血清组与5%、10%含药血清组比较差异具有统计学意义(P<0.05);20%含药血清组与其他各组BMP2、BMP4、Smad1、RUNX2mRNA表达比较差异均具有统计学意义(P<0.05)。结论固本增骨方能促进BMSCs的增殖,并且能促进成骨标志蛋白BGP、OPN、ALP、COL-I蛋白含量的增加,且在20%浓度为最佳,这个机制可能是激活了BMPSmad/RUNX2信号通路实现的。 展开更多
关键词 固本增骨方 bmp-smad/runx2信号通路 含药血清 骨髓间充质干细胞成骨分化
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基于BMP2/Smad1/Runx2/Osterix信号通路探讨健骨颗粒氯仿萃取部位对体外成骨细胞分化的影响 被引量：13
3
作者 周芬 孙雨晴 +3 位作者 孙攀 张楚天 杨娟 林燕萍 《康复学报》 CSCD 2022年第3期224-231,共8页
目的:通过观察健骨颗粒氯仿萃取部位对体外培养成骨细胞的影响,研究其调控BMP2/Smad1/Runx2/Osterix信号通路影响成骨细胞分化的可能机制。方法:选用年龄<3 d的BALB/c小鼠,从其颅盖骨提取原代成骨细胞,并采用碱性磷酸酶染色法对所提... 目的:通过观察健骨颗粒氯仿萃取部位对体外培养成骨细胞的影响,研究其调控BMP2/Smad1/Runx2/Osterix信号通路影响成骨细胞分化的可能机制。方法:选用年龄<3 d的BALB/c小鼠,从其颅盖骨提取原代成骨细胞,并采用碱性磷酸酶染色法对所提取的细胞进行鉴定;取生长状态良好的第3代成骨细胞作为实验对象,将健骨颗粒氯仿萃取部位稀释至不同的浓度梯度,即设置0、2、4、8、16、32、64 ng/mL 7个药物浓度组对细胞进行干预,采用MTT法筛选健骨颗粒氯仿萃取部位促进成骨细胞增殖的最佳浓度,作为最佳药物干预浓度进行后续实验。取第3代细胞,将其分为空白组、抑制剂组(BMP2抑制剂Noggin干预)、药物组(健骨颗粒氯仿萃取部位干预)和抑制剂加药物组(Noggin加健骨颗粒氯仿萃取部位干预),按组别干预后进行后续实验。采用RT-PCR检测各组BMP2、Smad1、Runx2、Osterix及成骨细胞分化相关基因ALP、CollagenⅠmRNA的表达水平;采用Western blot法检测各组BMP2、Smad1、Runx2、Osterix及ALP、CollagenⅠ的蛋白表达,观察健骨颗粒氯仿萃取部位对成骨细胞分化的影响。结果:经碱性磷酸酶染色法鉴定,所提取的原代细胞阳性率高达90%为成骨细胞;采用MTT法检测发现健骨颗粒氯仿萃取部位在药物浓度为32 ng/mL时,成骨细胞增殖速度最快,在干预2 d时达到增殖高峰,故选用32 ng/mL干预2 d作为健骨颗粒氯仿萃取部位最佳干预浓度进行后续实验;RT-PCR与Western blot检测结果显示,与空白组相比,抑制剂组BMP2、Smad1、Runx2、Osterix及ALP、CollagenⅠ各指标基因表达水平显著降低,蛋白相对表达量明显降低(P<0.01或P<0.05);与空白组相比较,药物组6个指标基因表达水平显著升高,蛋白相对表达量也明显升高(P<0.01或P<0.05);抑制剂加药物组与抑制剂组比较,各指标基因表达水平和蛋白相对表达量均显著升高(P<0.01或P<0.05)。结论:(1)使用Noggin抑� 展开更多
关键词 健骨颗粒 bmp2/smad1/runx2/Osterix信号通路 成骨细胞 细胞分化 氯仿萃取部位
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