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黄芩素通过BMP-2/Smad通路促进MC3T3-E1成骨作用的实验研究 被引量：7
1
作者 陈桂锋 尚奇 +9 位作者 李娟敏 陈弘林 招文华 余富勇 张鹏 余蝶 崔健超 沈耿杨 任辉 江晓兵 《中国骨质疏松杂志》 CAS CSCD 北大核心 2022年第10期1442-1447,共6页
目的探讨黄芩素(BAI)对小鼠胚胎成骨细胞前体细胞(MC3T3-E1)成骨分化的作用及其分子机制。方法将MC3T3-E1分为对照组(正常培养)和BAI组(以Baicalein处理),在成骨分化条件培养下采用CCK-8检测BAI对MC3T3-E1细胞增殖的影响;分别以碱性磷... 目的探讨黄芩素(BAI)对小鼠胚胎成骨细胞前体细胞(MC3T3-E1)成骨分化的作用及其分子机制。方法将MC3T3-E1分为对照组(正常培养)和BAI组(以Baicalein处理),在成骨分化条件培养下采用CCK-8检测BAI对MC3T3-E1细胞增殖的影响;分别以碱性磷酸酶染色(ALP)、茜素红染色(ARS)检测MC3T3-E1细胞成骨分化水平与矿化能力,实时荧光定量PCR检测成骨标志基因ALP、COL1A1、RUNX2、OSX的mRNA表达水平,通过免疫印迹法(Western-blot)检测MC3T3-E1细胞中BMP-2、Smad1、p-Smad1蛋白表达水平,通过免疫荧光技术(IF)检测RUNX2、COL1A1表达水平。结果与对照组比较,BAI干预1 d后发现,BAI组COL1A1(P<0.001)、RUNX2(P<0.05)、OSX(P<0.05)mRNA表达水平在成骨分化中表达上升;干预3 d后发现,与对照组比较,BAI组ALP(P<0.05)、RUNX2(P<0.001)mRNA表达上升;干预7 d后发现,与对照组比较,BAI组COL1A1(P<0.05)mRNA表达水平较对照组上升,BMP-2、p-Smad1/Smad1蛋白表达水平上升(P<0.05)。免疫荧光中成骨标志蛋白RUNX2、COL1A1表达增多(P<0.05)。结论BAI可通过激活BMP-2/Smad通路促进MC3T3-E1成骨分化。 展开更多
关键词 黄芩素 成骨分化 MC3T3-E1 bmp-2/smad通路 骨质疏松症
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IL-1β预刺激骨髓间充质干细胞通过NF-κB通路调节其成骨分化潜能 被引量：3
2
作者 叶炜 费小明 +2 位作者 汤郁 徐欣欣 朱彦 《中国实验血液学杂志》 CSCD 北大核心 2017年第3期890-895,共6页
目的:研究不同作用时间的IL-1β对骨髓间充质干细胞(BMMSC)成骨潜能的影响以及NF-κB等通路在其中的作用。方法:将正常人BMMSC在体外给予IL-1β处理1或7 d,再予成骨诱导分化后分别采用碱性磷酸酶(ALP)染色和茜素红染色(ARS)方法检测BMMS... 目的:研究不同作用时间的IL-1β对骨髓间充质干细胞(BMMSC)成骨潜能的影响以及NF-κB等通路在其中的作用。方法:将正常人BMMSC在体外给予IL-1β处理1或7 d,再予成骨诱导分化后分别采用碱性磷酸酶(ALP)染色和茜素红染色(ARS)方法检测BMMSC成骨分化;采用real-time PCR法检测BMMSC中IGF-1、EphB4和OPG基因mRNA表达水平;细免疫组织化学染色方法检测BMMSC的BMP-2和p-Smad1/5/8蛋白表达情况;Western blot方法检测BMMSC中iκBα和p-iκBα蛋白的表达水平,并将IL-1β处理组的结果与对照组比较。结果:与对照组相比较,IL-1β处理组BMMSC的成骨分化潜能明显增强,但这一差异可被NF-κB抑制剂减弱;另外,处理组的iκBα蛋白水平的表达降低(P<0.05),p-iκBα蛋白水平的表达增高(P<0.05);与此同时,处理组BMMSC的BMP-2表达水平增高,但p-Smad1/5/8的表达水平无明显变化;IL-1β处理组BMMSC的IGF-1、EphB4、OPG mRNA表达水平上调(P<0.05)。与成骨结果比较显示,IL-1β处理1 d组与对照组的差异,不如IL-1β处理7 d组明显。结论:骨髓微环境中高水平IL-1β长期作用于BMMSC,可以通过NF-κB通路而不是BMP-2/Smad通路对其成骨分化产生影响。 展开更多
关键词 骨髓间充质干细胞 多发性骨髓瘤 NF-ΚB通路 bmp-2/smad通路 IL-1Β 成骨分化
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鸢尾素缓解棕榈酸对骨髓间充质干细胞的成骨抑制 被引量：3
3
作者 张元澍 何旭 +4 位作者 薛源 金叶盛 汪凯 施勤 芮永军 《中国组织工程研究》 CAS 北大核心 2024年第1期26-31,共6页
背景:鸢尾素是肌肉细胞在运动时从跨膜蛋白FNDC5中分离出来的肌因子,具有诱导白色脂肪组织褐变的功能,但是其对脂毒性引起的成骨分化的影响及机制尚不清楚。目的:探究鸢尾素对棕榈酸诱导的骨髓间充质干细胞成骨能力的影响及作用机制。方... 背景:鸢尾素是肌肉细胞在运动时从跨膜蛋白FNDC5中分离出来的肌因子,具有诱导白色脂肪组织褐变的功能,但是其对脂毒性引起的成骨分化的影响及机制尚不清楚。目的:探究鸢尾素对棕榈酸诱导的骨髓间充质干细胞成骨能力的影响及作用机制。方法:CCK-8检测不同浓度棕榈酸对小鼠骨髓间充质干细胞增殖的影响,以及鸢尾素对棕榈酸存在条件下骨髓间充质干细胞增殖的影响;鸢尾素和棕榈酸预处理24 h后,对小鼠骨髓间充质干细胞成骨诱导分化,在成骨诱导培养第7天进行碱性磷酸酶染色,qRT-PCR检测成骨相关基因的表达,Western blot检测AMPK/BMP2/SMAD信号通路相关蛋白的表达,第21天进行茜素红染色,检测成骨差异。结果与结论:①CCK-8结果提示骨髓间充质干细胞的扩增与棕榈酸的浓度呈反比,但在0.02 mmol/L浓度时,棕榈酸对骨髓间充质干细胞扩增无显著影响,鸢尾素质量浓度在0.1-20μg/L范围内时,不影响骨髓间充质干细胞增殖;②碱性磷酸酶染色及茜素红染色结果显示,棕榈酸抑制骨髓间充质干细胞成骨分化能力,鸢尾素能改善棕榈酸诱导的骨髓间充质干细胞成骨抑制,qRT-PCR结果显示,棕榈酸可以引起成骨相关基因下调,而鸢尾素可以抑制这一趋势;③Western bolt结果显示,相较于单纯棕榈酸干预组,鸢尾素处理后增强了骨髓间充质干细胞中AMPK/BMP2/SMAD信号通路传导。该研究发现了鸢尾素能够改善棕榈酸预处理骨髓间充质干细胞的成骨分化能力并提出了具体的机制可能是由AMPK/BMP/SMAD信号通路介导的。 展开更多
关键词 骨髓间充质干细胞 鸢尾素 棕榈酸 成骨分化 AMPK/bmp2/smad通路
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miR-210-5p对小鼠脂肪干细胞成骨分化的影响及作用机制分析
4
作者 郑世雄 杨巍 刘合亮 《厦门大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2024年第1期127-133,共7页
[目的]观察miR-210-5p在小鼠脂肪干细胞增殖和成骨分化中的作用并探讨其作用机制.[方法]将小鼠脂肪干细胞分空白对照组、miR-210-5p模拟物阴性对照组、miR-210-5p模拟物组、miR-210-5p抑制物阴性对照组和miR-210-5p抑制物组,采用CCK-8... [目的]观察miR-210-5p在小鼠脂肪干细胞增殖和成骨分化中的作用并探讨其作用机制.[方法]将小鼠脂肪干细胞分空白对照组、miR-210-5p模拟物阴性对照组、miR-210-5p模拟物组、miR-210-5p抑制物阴性对照组和miR-210-5p抑制物组,采用CCK-8细胞计数法检测细胞增殖能力,茜素红染色观察钙盐矿化结节形成能力,用实时荧光定量PCR检测miR-210-5p水平及成骨分化标志物BMP2、Smad1、Smad5和Runx2 mRNA表达水平,进而用蛋白免疫印迹法检测BMP2、Smad1、Smad5和Runx2蛋白表达水平.[结果] miR-210-5p模拟物组细胞增殖活力显著升高(P<0.01),矿化结节显著增加,BMP2、Smad1、Smad5和Runx2 mRNA和蛋白表达水平显著上调(P<0.01);miR-210-5p抑制物组细胞增殖活力显著降低(P<0.01),矿化结节显著降低,BMP2、Smad1、Smad5和Runx2 mRNA和蛋白表达水平显著下调(P<0.01).[结论] miR-210-5p可能通过调控BMP2/Smad信号通路促进小鼠脂肪干细胞增殖和成骨分化. 展开更多
关键词 miR-210-5p bmp2/smad信号通路 小鼠脂肪干细胞 成骨分化
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藤黄健骨丸调控BMP-2/Smad信号通路治疗绝经后骨质疏松症 被引量：1
5
作者 张文静 王雨辰 +4 位作者 段瑶 顾晶业 律广富 皮子凤 林喆 《吉林中医药》 2023年第12期1459-1464,共6页
目的观察藤黄健骨丸对绝经后骨质疏松症模型大鼠的治疗作用。方法将72只雌性大鼠随机分为6组,分别为假手术组(SHAM)、模型组(OVX)、仙灵骨葆胶囊组(XLGB)、藤黄健骨丸低剂量组(THJGW-L)、藤黄健骨丸中剂量组(THJGW-M)及藤黄健骨丸高剂量... 目的观察藤黄健骨丸对绝经后骨质疏松症模型大鼠的治疗作用。方法将72只雌性大鼠随机分为6组,分别为假手术组(SHAM)、模型组(OVX)、仙灵骨葆胶囊组(XLGB)、藤黄健骨丸低剂量组(THJGW-L)、藤黄健骨丸中剂量组(THJGW-M)及藤黄健骨丸高剂量组(THJGW-H)。手术造模3 d后给药,除假手术组、模型组灌胃蒸馏水外,其余4组均按照相应剂量灌胃药物。连续灌胃8周后,分别检测大鼠术后各阶段体质量、子宫和肾脏重量、骨强度值,观察股骨病理变化。Western-blot法检测大鼠股骨中Runx2、BMP-2和Smad1蛋白表达水平。结果实验结果显示,藤黄健骨丸可以增加去卵巢大鼠的子宫和肾脏重量,能够提高去卵巢大鼠的股骨荷载力,改善骨微结构,增加钙离子沉积,增加骨细胞数量。Western-blot结果显示去势大鼠骨组织中Runx2、BMP-2和Smad1相对蛋白水平降低,经过藤黄健骨丸治疗后,Runx2、BMP-2和Smad1相对蛋白水平显著升高。结论藤黄健骨丸可以提高去势大鼠骨强度,改善骨组织形态,其作用机制可能与调控BMP-2/Smad信号通路来促进骨形成,对绝经后骨质疏松症有一定的治疗作用。 展开更多
关键词 藤黄健骨丸 绝经后骨质疏松症 药效 bmp-2/smad信号通路
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右归丸调控BMP-2/Smad信号通路促进绝经后骨质疏松症大鼠骨形成 被引量：2
6
作者 孟菲菲 高志礼 +2 位作者 王嘉昀 李娜 王花欣 《中国实验方剂学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2024年第4期100-106,共7页
目的:观察右归丸对去卵巢骨质疏松大鼠的骨代谢及骨形态发生蛋白-2(BMP-2)/Smad信号通路的影响,研究右归丸防治骨质疏松症的作用机制。方法:采用双侧卵巢摘除法,制备绝经后骨质疏松症大鼠模型,将40只SD雌性大鼠随机分为5组,分别为假手... 目的:观察右归丸对去卵巢骨质疏松大鼠的骨代谢及骨形态发生蛋白-2(BMP-2)/Smad信号通路的影响,研究右归丸防治骨质疏松症的作用机制。方法:采用双侧卵巢摘除法,制备绝经后骨质疏松症大鼠模型,将40只SD雌性大鼠随机分为5组,分别为假手术组、模型组、阿仑膦酸钠组(0.1 mg·kg^(-1))、右归丸高、低剂量组(5.36、2.68 g·kg^(-1))。造模7 d后给药,连续12周,每日1次。给药结束后,采用微计算机断层扫描技术(micro-CT)观察大鼠股骨组织结构变化,包括骨密度(BMD)、骨体积/总体积(BV/TV)、骨小梁数(Tb.N)、骨小梁厚度(Tb.Th)、骨表面/骨体积(BS/BV)和骨小梁分离度(Tb.Sp)。番红-固绿染色观察成骨情况。酶联免疫吸附测定法(ELISA)检测血清中骨代谢标志物水平,包括骨碱性磷酸酶(BALP)、骨钙素(BGP)、Ⅰ型前胶原氨基端原肽(PINP)和抗酒石酸酸性磷酸酶-5b(TRACP-5b)。实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)和蛋白免疫印迹法(Western blot)检测大鼠股骨中Runt相关转录因子2(Runx2)、BMP-2和Smad1 mRNA及蛋白表达水平。结果:与假手术组比较,模型组大鼠骨小梁变稀疏,BMD、BV/TV、Tb.N及Tb.Th下降(P<0.05,P<0.01),BS/BV(P<0.05)及Tb.Sp上升;血清中BGP、BALP、PINP和TRACP-5b含量显著升高(P<0.01);大鼠股骨中Runx2、BMP-2和Smad1的mRNA及蛋白表达明显降低(P<0.05,P<0.01);与模型组比较,右归丸高剂量组与右归丸低剂量组骨小梁数目增加,骨微结构得到改善,BMD、BV/TV、Tb.N及Tb.Th均明显增加(P<0.05,P<0.01),BS/BV及Tb.Sp有上升趋势;骨代谢标志物含量下降(P<0.05,P<0.01),骨组织中Runx2、BMP-2和Smad1 mRNA和蛋白水平明显升高(P<0.05,P<0.01)。结论:右归丸对绝经后骨质疏松症具有一定的防治作用,其作用机制可能与调控BMP-2/Smad信号通路促进骨形成有关。 展开更多
关键词 骨质疏松 右归丸 骨形态发生蛋白-2(bmp-2)/smad信号通路 卵巢摘除大鼠
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BMP⁃2/Smad信号通路探讨金匮肾气丸对BMSCs成骨分化的影响
7
作者 孟菲菲 高志礼 +2 位作者 李娜 王花欣 WANG Jiayun 《中国骨质疏松杂志》 CAS CSCD 北大核心 2024年第3期379-384,共6页
目的观察金匮肾气丸含药血清对大鼠骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymal stem cells,BMSCs)成骨分化的影响并探讨其发生的作用机制。方法制备金匮肾气丸含药血清,CCK⁃8法筛选出最佳浓度的金匮肾气丸含药血清对BMSCs向成骨分化的... 目的观察金匮肾气丸含药血清对大鼠骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymal stem cells,BMSCs)成骨分化的影响并探讨其发生的作用机制。方法制备金匮肾气丸含药血清,CCK⁃8法筛选出最佳浓度的金匮肾气丸含药血清对BMSCs向成骨分化的影响。将BMSCs分为空白组(control组)、成骨诱导组(OIS)、空白血清组(ROIS组)及含药血清组(JKSQ⁃OIS),分别对各组BMSCs进行成骨诱导。连续干预14 d及21 d后,分别进行碱性磷酸酶(ALP)染色和茜素红染色镜下观察各组碱性磷酸酶活性和成骨矿化水平;连续干预14 d后,实时荧光定量PCR(q⁃PCR)和蛋白免疫印迹法(Western blot)分别检测各组BMSCs中骨形态发生蛋白2(BMP⁃2)、Smad1、ALP、Runt相关转录因子2(runt⁃related transcription factor 2,Runx2)及成骨细胞特异性转录因子(Osterix,OSX)mRNA和蛋白的相对表达量。结果与control组相比,OIS组与ROIS组出现点状矿化结节,ALP染色轻微变深,ALP和Runx2 mRNA及蛋白的表达上升(P<0.05,P<0.01),OSX的表达上升但不明显(P>0.05);与OIS组相比,JKSQ⁃OIS组矿化结节成片分布,ALP染色明显加深,BMP⁃2、Smad1、ALP和Runx2 mRNA及蛋白的表达上升(P<0.05,P<0.01),OSX mRNA及蛋白表达有上升趋势(P>0.05)。结论金匮肾气丸含药血清可能通过调控BMP⁃2/Smad信号通路,上调ALP、Runx2和OSX的表达,促进BMSCs向成骨分化,改善OP。 展开更多
关键词 金匮肾气丸 骨髓间充质干细胞 成骨 bmp⁃2/smad信号通路
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补肾健脾活血方对去卵巢大鼠BMP2/Smad信号通路的影响 被引量：21
8
作者 柴爽 王吉利 +5 位作者 黄佳纯 黄宏兴 万雷 刘少津 汪悦东 胡仕畅 《中国实验方剂学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2018年第20期129-133,共5页
目的：研究补肾健脾活血方对去卵巢大鼠骨形态发生蛋白2（BMP2）/Smad信号通路的影响。方法：72只6月龄雌性SD大鼠,随机分为假手术组（24只）,手术组（48只）,双侧卵巢切除法造模,术后3个月两组各随机选取12只检测骨密度验证造模成功。... 目的：研究补肾健脾活血方对去卵巢大鼠骨形态发生蛋白2（BMP2）/Smad信号通路的影响。方法：72只6月龄雌性SD大鼠,随机分为假手术组（24只）,手术组（48只）,双侧卵巢切除法造模,术后3个月两组各随机选取12只检测骨密度验证造模成功。手术组剩余的36只大鼠随机分为双侧卵巢切除模型组（OVX）,补肾健脾活血方组（BSJPHX,给药剂量2.979 g·kg^（-1））,阿仑膦酸钠维D3片（Ⅱ）组（ALN,给药剂量1.02 mg·kg^（-1））,假手术组,OVX组给与等体积生理盐水灌胃。12周后处死各组大鼠,双能X射线法检测大鼠全身骨密度,生物力学试验进行胫骨三点弯曲试验,实时荧光定量聚合酶链式反应（Real-time PCR）检测BMP2,Smad1,Runt相关转录因子2（Runx2）,骨保护素（OPG）基因的表达,蛋白免疫印迹法（Western blot）检测BMP2,p-Smad1,Runx2,OPG蛋白的表达。结果：造模3个月后,与假手术组比较,OVX组大鼠骨密度明显降低,最大载荷及刚度均降低,BMP2,Smad1,Runx2,OPG基因和蛋白表达水平显著降低（P〈0.05）;给药3个月后,与OVX组比较,BSJPHX组,ALN组骨密度均明显增高,最大载荷及刚度均增加,能显著提高BMP2,Smad1,Runx2,OPG基因和蛋白表达水平（P〈0.05）。结论：补肾健脾活血方既能通过调控BMP2/Smad通路的信号转导,又能上调OPG的表达,这可能是补肾健脾活血方防治绝经后骨质疏松症的机制之一。 展开更多
关键词 补肾健脾活血方 去卵巢大鼠 骨形态发生蛋白2(bmp2)/smad信号通路 绝经后骨质疏松症 骨保护素
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吡非尼酮对慢性传输型便秘小鼠的治疗作用及机制 被引量：1
9
作者 王博 刘勇 +3 位作者 任冰冰 付思齐 姚志伟 孙大庆 《山东医药》 CAS 2021年第19期9-12,16,共5页
目的探讨吡非尼酮(PFD)对慢性传输型便秘(STC)小鼠的治疗作用及机制。方法将50只SPF级雄性BALB/c小鼠随机分为对照组、STC组及1、10、100 mg/kg治疗组,各10只。STC组、各治疗组给予10 mg/kg洛派丁胺溶液灌胃,对照组给予等量生理盐水灌胃... 目的探讨吡非尼酮(PFD)对慢性传输型便秘(STC)小鼠的治疗作用及机制。方法将50只SPF级雄性BALB/c小鼠随机分为对照组、STC组及1、10、100 mg/kg治疗组,各10只。STC组、各治疗组给予10 mg/kg洛派丁胺溶液灌胃,对照组给予等量生理盐水灌胃,均2次/日,持续2周。自造模第8天,各治疗组在洛哌丁胺灌胃3 h后分别给予1、10、100 mg/kg的PFD灌胃,1次/日,持续1周。期间监测小鼠一般情况(体质量、饮水量、食物摄入量)及粪便参数(第1颗黑色粪便排出时间、粪便含水量);将小鼠脱颈处死取结肠组织,用HE染色法观察结肠组织形态学变化,用免疫组化法检测组织中TNF-α的表达,用肠神经全层铺片观察肠神经肌层神经元形态;用定量PCR检测结肠组织中骨形态发生蛋白2(BMP2)、Smad同源物1(Smad1)mRNA表达。结果与对照组比较,STC组第1颗黑色粪便排出时间长、排便频率低(P均<0.05)。1、10 mg/kg治疗组第1颗黑色粪便排出时间、排便频率与STC组比较差异无统计学意义(P均>0.05);与STC组比较,100 mg/kg治疗组第1颗黑色粪便排出时间短、排便频率高(P均<0.05)。后续实验选择100 mg/kg治疗组进行观察。与对照组比较,STC组体质量低,摄食量、饮水量少(P均<0.05);与STC组比较,100 mg/kg治疗组体质量高,摄食量、饮水量多(P均<0.05)。与对照组比较,STC组TNF-α阳性面积百分比高(P<0.05);与STC组比较,100 mg/kg治疗组TNF-α阳性面积百分比低(P<0.05)。STC组结肠肌间神经分布稀疏,神经纤维变细,胞体减少;而100 mg/kg治疗组神经元的以上变化发生逆转。与对照组比较,STC组结肠组织中BMP2、Smad1 mRNA相对表达量高(P均<0.05);与STC组比较,100 mg/kg治疗组结肠组织中BMP2、Smad1 mRNA相对表达量低(P均<0.05)。结论PFD可改善STC小鼠的便秘症状,其作用机制与PFD能够调控BMP2-Smad1信号通路有关。 展开更多
关键词 慢性传输型便秘 吡非尼酮 肠神经 bmp2-smad1信号通路
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