溴结构域和超末端结构域(bromodomain and extra-terminal,BET)蛋白家族作为表观"阅读器",在哺乳动物发育过程中起着至关重要的作用。其家族内的各成员通过识别各种表观修饰并募集相应的功能复合物,对相关基因进行精密调控,...溴结构域和超末端结构域(bromodomain and extra-terminal,BET)蛋白家族作为表观"阅读器",在哺乳动物发育过程中起着至关重要的作用。其家族内的各成员通过识别各种表观修饰并募集相应的功能复合物,对相关基因进行精密调控,促使早期胚胎向特定方向分化和发育。另外,随着诱导性多潜能干细胞(induced pluripotent stem cell,iPSC)重编程技术发展,越来越多的研究发现BET蛋白家族在体细胞重编程中可能也占据着核心地位。本文总结了BET蛋白家族在哺乳动物发育和iPSC重编程中的作用,并对BET家族调控重编程的新机制进行了展望。展开更多
旨在探究抑制水牛BET(bromodomain and extra terminal,BET)蛋白对支持细胞自噬调控的影响。以水牛支持细胞(sertoli cells,SCs)为研究对象,首先从睾丸中分离纯化得到高纯度的SCs,通过免疫荧光法及RT-PCR法检测出水牛SCs的标记基因均正...旨在探究抑制水牛BET(bromodomain and extra terminal,BET)蛋白对支持细胞自噬调控的影响。以水牛支持细胞(sertoli cells,SCs)为研究对象,首先从睾丸中分离纯化得到高纯度的SCs,通过免疫荧光法及RT-PCR法检测出水牛SCs的标记基因均正常表达。结果显示,BET蛋白被抑制后,水牛SCs形态和数量发生显著变化,细胞的体积变大,数量减少,折光性减弱,免疫荧光分析和MDC分析也证实其生物学功能受到影响。超微结构分析发现,水牛SCs中产生大量自噬体、自噬溶酶体以及自噬空泡,且自噬相关标记基因的表达量显著提升。说明抑制BET蛋白可引起水牛SCs活性和自噬活性降低,并导致自噬体增多。结果表明,本试验为BET蛋白调控雄性生殖机制的研究提供了依据。展开更多
1文献来源PIHA-PAUL S A,HANN C L,FRENCH C A,et al.Phase 1 study of molibresib(GSK525762),a bromodomain and extra-terminal domain protein inhibitor,in NUT carcinoma and other solid tumors[J].JNCI Cancer Spectr,2019,4(2)...1文献来源PIHA-PAUL S A,HANN C L,FRENCH C A,et al.Phase 1 study of molibresib(GSK525762),a bromodomain and extra-terminal domain protein inhibitor,in NUT carcinoma and other solid tumors[J].JNCI Cancer Spectr,2019,4(2):pkz093.doi:10.1093/jncics/pkz093.2研究背景溴结构域和超末端结构域(bromodomain and extraterminal domain,BET)家族是表观基因组的调节因子,也是肿瘤细胞生存所依赖的肿瘤相关基因表达的关键驱动因子,一些重要的原癌基因如MYC、BCL2、CDK6均受到BET蛋白的调控,BET蛋白的异常激活与包括癌症在内的各种人类疾病密切相关,包括罕见且具有高度侵袭性的NUT癌。展开更多
为了明确鸡(Gallus gallus)溴结构域和超末端结构(bromodomain and extra terminal,BET)家族蛋白亚细胞定位及其基因在免疫器官中的表达特性,并为后续研究BET家族蛋白调控鸡相关病毒复制的作用机制提供基础,本研究将前期构建的鸡BRD2、B...为了明确鸡(Gallus gallus)溴结构域和超末端结构(bromodomain and extra terminal,BET)家族蛋白亚细胞定位及其基因在免疫器官中的表达特性,并为后续研究BET家族蛋白调控鸡相关病毒复制的作用机制提供基础,本研究将前期构建的鸡BRD2、BRD3、BRD4基因重组真核表达载体pEGFP-BRD2、pEGFP-BRD3和pEGFP-BRD4分别转染人(Homo sapiens)胚胎肾细胞(HEK-293T),利用Western blotting和荧光检测鸡BRD2、BRD3、BRD4基因的表达和蛋白的亚细胞定位情况,并利用实时定量PCR(real time quantitative PCR)技术检测1~6月龄鸡免疫器官中BRD2、BRD3和BRD4基因的表达。结果表明,鸡BET家族蛋白融合蛋白EGFP-BRD2、EGFP-BRD3和EGFP-BRD4在细胞中正确表达,且鸡BRD2、BRD3和BRD4蛋白主要定位在细胞核。实时定量PCR检测结果发现,鸡的脾脏和胸腺中BRD2基因的表达量在3月龄时最高,在法氏囊中则在4月龄时最高,表达变化均为“倒V”型;脾脏中BRD3基因的表达量在1月龄时为最高;而鸡的胸腺和法氏囊中,BRD3和BRD4基因的表达量均在6月龄时为最高,其中,BRD3基因在胸腺和法氏囊的表达变化,以及BRD4基因在法氏囊中的表达变化均为逐渐上升的“直线”型;BRD3基因在脾脏中的表达变化,以及BRD4基因在胸腺中的表达变化均为“倒N”型;脾脏中BRD4基因的表达量在3月龄时最高,其表达变化呈先上升后下降的趋势。鸡BET家族基因在不同月龄鸡的脾脏、胸腺和法氏囊中均有表达,但表达量呈现不同的变化趋势,BET家族蛋白主要定位在细胞核。展开更多
目的:探讨溴结构域(bromodomain and extra-terminal,BET)蛋白抑制剂JQ1对系统性红斑狼疮(systemic lupus erythematosus,SLE)外周血CD4^+T细胞中自身免疫相关基因表达的作用。方法:利用磁珠分选获得SLE患者CD4^+T细胞,采用流式细胞检测...目的:探讨溴结构域(bromodomain and extra-terminal,BET)蛋白抑制剂JQ1对系统性红斑狼疮(systemic lupus erythematosus,SLE)外周血CD4^+T细胞中自身免疫相关基因表达的作用。方法:利用磁珠分选获得SLE患者CD4^+T细胞,采用流式细胞检测CD4^+T细胞纯度。用JQ1(100 nm/L)处理CD4^+T细胞6,24,48 h后收集细胞。采用实时荧光定量PCR(quantitative real-time PCR,q PCR)检测不同辅助性T细胞亚类特异性基因的m RNA表达。采用ELISA法检测细胞培养上清中细胞因子的蛋白水平。结果:磁珠分选所得CD4^+T细胞百分比为97.2%。与对照组相比,JQ1处理组IFNG,IL-17F,IL-21,CXCR5和FOXP3 m RNA表达水平在6,24,48 h均显著降低(P<0.05),IL-17A m RNA表达在6,24 h显著下降(P<0.01),IL-4 m RNA表达在24,48 h显著升高(P<0.01),TGF-β1 m RNA表达在6,48 h显著升高(P<0.05)。JQ1处理48 h细胞培养上清中IFN-γ,IL-21和IL-17蛋白水平明显下降(P<0.05),IL-4和TGF-β蛋白水平明显升高(P<0.05)。结论:BET蛋白抑制剂JQ1可纠正SLE患者CD4^+T细胞中的免疫调节失衡,促进免疫稳态恢复。展开更多
文摘旨在探究抑制水牛BET(bromodomain and extra terminal,BET)蛋白对支持细胞自噬调控的影响。以水牛支持细胞(sertoli cells,SCs)为研究对象,首先从睾丸中分离纯化得到高纯度的SCs,通过免疫荧光法及RT-PCR法检测出水牛SCs的标记基因均正常表达。结果显示,BET蛋白被抑制后,水牛SCs形态和数量发生显著变化,细胞的体积变大,数量减少,折光性减弱,免疫荧光分析和MDC分析也证实其生物学功能受到影响。超微结构分析发现,水牛SCs中产生大量自噬体、自噬溶酶体以及自噬空泡,且自噬相关标记基因的表达量显著提升。说明抑制BET蛋白可引起水牛SCs活性和自噬活性降低,并导致自噬体增多。结果表明,本试验为BET蛋白调控雄性生殖机制的研究提供了依据。
文摘1文献来源PIHA-PAUL S A,HANN C L,FRENCH C A,et al.Phase 1 study of molibresib(GSK525762),a bromodomain and extra-terminal domain protein inhibitor,in NUT carcinoma and other solid tumors[J].JNCI Cancer Spectr,2019,4(2):pkz093.doi:10.1093/jncics/pkz093.2研究背景溴结构域和超末端结构域(bromodomain and extraterminal domain,BET)家族是表观基因组的调节因子,也是肿瘤细胞生存所依赖的肿瘤相关基因表达的关键驱动因子,一些重要的原癌基因如MYC、BCL2、CDK6均受到BET蛋白的调控,BET蛋白的异常激活与包括癌症在内的各种人类疾病密切相关,包括罕见且具有高度侵袭性的NUT癌。
文摘为了明确鸡(Gallus gallus)溴结构域和超末端结构(bromodomain and extra terminal,BET)家族蛋白亚细胞定位及其基因在免疫器官中的表达特性,并为后续研究BET家族蛋白调控鸡相关病毒复制的作用机制提供基础,本研究将前期构建的鸡BRD2、BRD3、BRD4基因重组真核表达载体pEGFP-BRD2、pEGFP-BRD3和pEGFP-BRD4分别转染人(Homo sapiens)胚胎肾细胞(HEK-293T),利用Western blotting和荧光检测鸡BRD2、BRD3、BRD4基因的表达和蛋白的亚细胞定位情况,并利用实时定量PCR(real time quantitative PCR)技术检测1~6月龄鸡免疫器官中BRD2、BRD3和BRD4基因的表达。结果表明,鸡BET家族蛋白融合蛋白EGFP-BRD2、EGFP-BRD3和EGFP-BRD4在细胞中正确表达,且鸡BRD2、BRD3和BRD4蛋白主要定位在细胞核。实时定量PCR检测结果发现,鸡的脾脏和胸腺中BRD2基因的表达量在3月龄时最高,在法氏囊中则在4月龄时最高,表达变化均为“倒V”型;脾脏中BRD3基因的表达量在1月龄时为最高;而鸡的胸腺和法氏囊中,BRD3和BRD4基因的表达量均在6月龄时为最高,其中,BRD3基因在胸腺和法氏囊的表达变化,以及BRD4基因在法氏囊中的表达变化均为逐渐上升的“直线”型;BRD3基因在脾脏中的表达变化,以及BRD4基因在胸腺中的表达变化均为“倒N”型;脾脏中BRD4基因的表达量在3月龄时最高,其表达变化呈先上升后下降的趋势。鸡BET家族基因在不同月龄鸡的脾脏、胸腺和法氏囊中均有表达,但表达量呈现不同的变化趋势,BET家族蛋白主要定位在细胞核。
文摘目的:探讨溴结构域(bromodomain and extra-terminal,BET)蛋白抑制剂JQ1对系统性红斑狼疮(systemic lupus erythematosus,SLE)外周血CD4^+T细胞中自身免疫相关基因表达的作用。方法:利用磁珠分选获得SLE患者CD4^+T细胞,采用流式细胞检测CD4^+T细胞纯度。用JQ1(100 nm/L)处理CD4^+T细胞6,24,48 h后收集细胞。采用实时荧光定量PCR(quantitative real-time PCR,q PCR)检测不同辅助性T细胞亚类特异性基因的m RNA表达。采用ELISA法检测细胞培养上清中细胞因子的蛋白水平。结果:磁珠分选所得CD4^+T细胞百分比为97.2%。与对照组相比,JQ1处理组IFNG,IL-17F,IL-21,CXCR5和FOXP3 m RNA表达水平在6,24,48 h均显著降低(P<0.05),IL-17A m RNA表达在6,24 h显著下降(P<0.01),IL-4 m RNA表达在24,48 h显著升高(P<0.01),TGF-β1 m RNA表达在6,48 h显著升高(P<0.05)。JQ1处理48 h细胞培养上清中IFN-γ,IL-21和IL-17蛋白水平明显下降(P<0.05),IL-4和TGF-β蛋白水平明显升高(P<0.05)。结论:BET蛋白抑制剂JQ1可纠正SLE患者CD4^+T细胞中的免疫调节失衡,促进免疫稳态恢复。
