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碘标记bcl-2反义寡核苷酸的研究及其稳定性与生物分布的评价 被引量：4
1
作者 刘生 刘长征 +2 位作者 梁碧玲 梁昌盛 蒋宁一 《核技术》 CAS CSCD 北大核心 2004年第5期365-369,共5页
为了建立Iodogen直接法碘标记反义寡核苷酸(ASON)方法,评价探针的稳定性及生物分布特征。用Iodogen对15merbcl-2mRNA的反义寡核苷酸进行直接标记,SephadexG-25凝胶柱纯化,测定标记率和纯度,评价标记ASON的稳定性。在BALB/c裸鼠及荷CNE2... 为了建立Iodogen直接法碘标记反义寡核苷酸(ASON)方法,评价探针的稳定性及生物分布特征。用Iodogen对15merbcl-2mRNA的反义寡核苷酸进行直接标记,SephadexG-25凝胶柱纯化,测定标记率和纯度,评价标记ASON的稳定性。在BALB/c裸鼠及荷CNE2瘤小鼠中研究其生物分布特征。结果显示:1)在适当条件下,本法标记率可达85%,放射性纯度为90%,放射性比度为4.77×105Bq/μg(ASON)。2)标记ASON室温下96h保持较稳定,但新鲜血浆下部分分解。3)标记ASON在大多数组织器官中的放射性活度随时间减少迅速,大多数曲线呈示踪剂为两相分布。30min时胃肠道和甲状腺放射性浓集明显,提示标记探针体内不稳定。肿瘤对探针的摄取较少,免疫组化证实肿瘤组织bcl-2表达极低。结果表明Iodogen直接法碘标记反义寡核苷酸(ASON)方法简单可靠,可获得标记率高、纯度较高且稳定性较好的标记探针,但碘标寡核苷酸在体内因核酶的分解而稳定性较差。 展开更多
关键词 bcl-2反义寡核苷酸 碘-125 稳定性 生物分布
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Bcl-2反义寡核苷酸抑制视网膜色素上皮细胞增生的实验研究 被引量：2
2
作者 华振宇 赵宏 +3 位作者 朱冬梅 高延庆 张蕾 李铮 《眼科研究》 CSCD 北大核心 2004年第4期347-350,共4页
目的　探讨不同浓度的Bcl 2反义寡核苷酸 (bcl 2AS ODN)对人视网膜色素上皮 (RPE)细胞增生活性的影响。方法　使用不同浓度 ( 0、15、3 0、45、60 μmol/L)的bcl 2AS ODN和bcl 2S ODN处理人RPE细胞 2 4h后 ,使用MTT、氚 -标记脱氧胸苷... 目的　探讨不同浓度的Bcl 2反义寡核苷酸 (bcl 2AS ODN)对人视网膜色素上皮 (RPE)细胞增生活性的影响。方法　使用不同浓度 ( 0、15、3 0、45、60 μmol/L)的bcl 2AS ODN和bcl 2S ODN处理人RPE细胞 2 4h后 ,使用MTT、氚 -标记脱氧胸苷掺入试验 ( 3 H TdR)测定RPE细胞增生的抑制率及DNA合成抑制率 ;使用流式细胞仪检测其对RPE细胞周期的影响 ;使用免疫组织化学染色法检测不同浓度bcl 2AS ODN作用下的RPE细胞bcl 2的表达。结果　不同浓度bcl 2AS ODN处理过的RPE细胞的抑制率和DNA合成抑制率随bcl 2AS ODN浓度的增高而升高 ,bcl 2AS ODN将RPE细胞阻滞在G0 /G1期 ,免疫组化结果显示 :bcl 2AS ODN可抑制RPE细胞bcl 2的表达。结论　bcl 2AS ODN对RPE细胞的增生有抑制作用且呈浓度依赖性 ,这一结果有可能成为增生性玻璃体视网膜病变 (PVR)基因治疗的一个新靶点。 展开更多
关键词 bcl-2反义寡核苷酸 视网膜色素上皮细胞 MTT 氚-标记脱氧胸苷掺人试验 流式细胞技术 免疫组 织化学染色方法
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Bcl-2反义寡核苷酸对人胆管癌细胞株QBC939中Bcl-2表达的影响
3
作者 彭创 汤恢焕 吴金术 《中华肝胆外科杂志》 CAS CSCD 2007年第11期784-786,共3页
胆管癌对放疗、化疗不敏感，手术效果差，如何提高其治疗效果，一直是困扰临床医师的难题。作者既往的实验显示胆管癌组织中Bcl-2高表达，胆管癌细胞株QBC939中Bcl-2阳性表达，Bcl-2反义寡核苷酸（ASODN）可抑制QBC939细胞增殖。本研究... 胆管癌对放疗、化疗不敏感，手术效果差，如何提高其治疗效果，一直是困扰临床医师的难题。作者既往的实验显示胆管癌组织中Bcl-2高表达，胆管癌细胞株QBC939中Bcl-2阳性表达，Bcl-2反义寡核苷酸（ASODN）可抑制QBC939细胞增殖。本研究将Bcl-2 ASODN作用于人胆管癌细胞株QBC939，旨在探索Bcl-2 ASODN作用的分子机制，为胆管癌反义基因治疗提供实验依据。 展开更多
关键词 bcl-2反义寡核苷酸 bcl-2表达 胆管癌细胞株 QBC939 ASODN 反义基因治疗 胆管癌组织 手术效果
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bcl-2反义寡核苷酸体外净化急性髓细胞白血病骨髓的研究
4
作者 杨婷 战榕 +3 位作者 胡建达 林艳娟 林祥华 陈志哲 《中华内科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2008年第10期838-839,共2页
有效地体外净化自体造血干细胞移植（AHSCT）的移植物是减少移植后复发及提高疗效的重要手段，当前研究的净化方法还存在一些局限性，或不能彻底清除恶性克隆细胞，或对正常细胞有毒性作用，影响造血功能恢复。由于Bcl-2蛋白在急性髓细... 有效地体外净化自体造血干细胞移植（AHSCT）的移植物是减少移植后复发及提高疗效的重要手段，当前研究的净化方法还存在一些局限性，或不能彻底清除恶性克隆细胞，或对正常细胞有毒性作用，影响造血功能恢复。由于Bcl-2蛋白在急性髓细胞白血病（AML）的高表达，而且与化疗后白血病细胞残留及耐药直接相关，我们选用bcl-2反义寡核苷酸（bcl-2 AS-ODN）从基因水平阻断bcl-2的转录和表达，研究其对缓解骨髓细胞中残留的白血病细胞的凋亡诱导作用，及其对正常骨髓细胞的生长和造血功能的影响。 展开更多
关键词 bcl-2反义寡核苷酸 急性髓细胞白血病 骨髓细胞 体外净化 自体造血干细胞移植 造血功能恢复 bcl-2蛋白 白血病细胞
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bcl-2-反义寡核苷酸对卵巢癌顺铂耐药细胞株的耐药逆转作用
5
作者 李敏 王泽华 +3 位作者 于利利 蔡俐琼 邱文红 王志华 《华中医学杂志》 CAS 2003年第3期115-117,共3页
目的 探讨bcl-2-反义寡核苷酸(bcl-2-AODN)对卵巢癌顺铂(DDP)耐药细胞耐药性的逆转作用。方法 以卵巢癌顺铂耐药细胞株A2780/DDP为模型,用脂质体转染的方法,将bcl-2-AODN转染A2780/DDP细胞,同时以转染bcl-2正义链(bcl-2-SODN)作对照。采... 目的 探讨bcl-2-反义寡核苷酸(bcl-2-AODN)对卵巢癌顺铂(DDP)耐药细胞耐药性的逆转作用。方法 以卵巢癌顺铂耐药细胞株A2780/DDP为模型,用脂质体转染的方法,将bcl-2-AODN转染A2780/DDP细胞,同时以转染bcl-2正义链(bcl-2-SODN)作对照。采用DNA凝胶电泳检测转染后是否诱导细胞出现凋亡,应用免疫组织化学技术检测Bcl-2蛋白表达变化,RT-PCR检测Bcl-2mRNA表达水平的变化。MTT法检测细胞抑制率与药物半数抑制浓度。结果 脂质体转染bcl-2反义寡核苷酸12 h后,倒置显微镜下即可见A2780/DDP有40％细胞出现变化,收集细胞检测,Bcl-2蛋白表达降低;实验组bcl-2mRNA表达水平与转染前相比,基因扩增条带亮度明显减弱,mRNA表达率下降(P<0.05);DNA凝胶电泳出现梯带状条带;细胞药物半数抑制浓度下降(P<0.05)。结论 bcl-2-AODN可通过增加细胞的凋亡而一定程度地逆转卵巢癌细胞的顺铂耐药性,提高卵巢癌细胞对化学治疗药物的敏感性。 展开更多
关键词 bcl-2—反义寡核苷酸 卵巢癌 顺铂 耐药细胞株 耐药逆转作用
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bcl—2反义寡核苷酸抑制胃癌SGC—7901细胞端粒酶活性的研究
6
作者 范钰 许祖德 等 《胃肠病学》 2001年第C00期71-71,共1页
关键词 胃癌 SGC-7901细胞 端粒酶活性 bcl-2反义寡核苷酸 PCR-ELISA法
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新型bcl-2反义寡核苷酸（F951）治疗急性髓性白血病药效学和毒理学实验
7
作者 李东良 吕联煌 《福建医科大学学报》 2003年第4期378-378,共1页
关键词 新型bcl-2反义寡核苷酸 F951 治疗 急性髓性白血病 药效学 毒理学实验
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bcl-2硫代反义寡核苷酸提高肺癌细胞对Fas介导细胞毒作用的敏感性 被引量：3
8
作者 郑俊猛 王得坤 +1 位作者 张柱林 欧阳能太 《中华肿瘤杂志》 CAS CSCD 北大核心 2002年第6期549-549,共1页
关键词 bcl-2硫代反义寡核苷酸 肺肿瘤 小细胞肺癌 反义寡核苷酸 bcl-2基因 基因表达 FAS抗体
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