βB2晶体蛋白晶体外功能研究进展

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作者 黄玮 李美慧 +2 位作者 刘胜楠 顾仲毅 张俊洁 《中国临床医学》 2022年第6期1030-1033,共4页

B2晶体蛋白是脊椎动物晶状体中的主要结构蛋白,除在晶状体内发挥作用外,近年研究发现其在晶状体外也表现突出。βB2晶体蛋白高表达于视网膜、大脑、睾丸及卵巢,既可促进视神经轴突再生、保护损伤的视神经,还可影响感觉运动门控和海马功... B2晶体蛋白是脊椎动物晶状体中的主要结构蛋白,除在晶状体内发挥作用外,近年研究发现其在晶状体外也表现突出。βB2晶体蛋白高表达于视网膜、大脑、睾丸及卵巢,既可促进视神经轴突再生、保护损伤的视神经,还可影响感觉运动门控和海马功能,同时影响生殖功能,可能与胎儿流产相关。此外,最新研究还表明,βB2晶体蛋白与多种肿瘤的发生、发展相关。本文就βB2晶体蛋白的晶状体外功能及研究进展作一综述。 展开更多

关键词 b2晶体蛋白 视网膜 卵巢 流产 海马 肿瘤

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βB2晶体蛋白与小鼠年龄相关性白内障的发生 及其晶状体功能的相关性研究 被引量：4

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作者 唐莉 蒋慧莉 +2 位作者 马波 杨文 龚珂 《临床和实验医学杂志》 2021年第10期1029-1032,共4页

目的研究βB2晶体蛋白与小鼠年龄相关性白内障的发生相关性,并探讨βB2晶体蛋白与小鼠晶状体功能的相关性。方法通过胚胎打靶技术建立βB2晶体基因敲除的小鼠(βB2 KO组,n=50),以野生型(WT组,n=50)小鼠作为对照。通过紫外线照射晶状体... 目的研究βB2晶体蛋白与小鼠年龄相关性白内障的发生相关性,并探讨βB2晶体蛋白与小鼠晶状体功能的相关性。方法通过胚胎打靶技术建立βB2晶体基因敲除的小鼠(βB2 KO组,n=50),以野生型(WT组,n=50)小鼠作为对照。通过紫外线照射晶状体诱导小鼠发生白内障,分别比较诱导白内障后4、8、12、16、20个月小鼠体重、晶状体重量和直径、白内障的发生率以及晶状体谷胱甘肽(GSH)含量。结果2组小鼠体重、晶状体的重量和直径、以及白内障的发生率均随年龄增长而增加,而晶状体GSH水平随年龄增加而降低。与WT组小鼠相比,同龄βB2 KO组小鼠体重差异无统计学意义(P>0.05)。与WT组小鼠相比,同龄βB2 KO组小鼠晶状体的重量均显著降低,差异均有统计学意义(P<0.05)。4~12月龄时2组小鼠晶状体的直径比较,差异无统计学意义(P>0.05);与WT组小鼠相比,16、20月龄时βB2 KO组小鼠晶状体直径均降低,差异均有统计学意义(P<0.05)。4、8月龄时2组小鼠晶状体GSH水平比较,差异无统计学意义(P>0.05);与WT组小鼠相比,12~20月龄时βB2 KO组小鼠晶状体GSH水平显著降低,差异均有统计学意义(P<0.05)。与WT组小鼠相比,4~12月龄时βB2 KO组小鼠白内障发生率显著升高,差异均有统计学意义(P<0.05);16、20月龄时2组小鼠白内障发生率比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论βB2晶体蛋白与小鼠年龄相关的白内障的发生有关,βB2基因敲除增加小鼠年龄相关的白内障的发生率,其机制可能与βB2基因敲除抑制晶状体发育有关。 展开更多

关键词 小鼠 βb2晶体蛋白 年龄相关白内障 基因敲除

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βB2晶体蛋白基因敲除与小鼠年龄相关性白内障 被引量：4

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作者 薛炼 姚雯颖 +3 位作者 张军 高莉 付清 李闻捷 《国际眼科杂志》 CAS 2009年第1期28-30,共3页

目的:研究βB2晶体蛋白基因敲除对于小鼠晶状体功能的影响。方法:采用胚胎干细胞打靶技术,培育出基因敲除小鼠。用裂隙灯显微镜观察小鼠晶状体的病变;透射和扫描电镜观察晶状体的超微结构;观察该基因敲除后晶状体形态和功能改变。结果:... 目的:研究βB2晶体蛋白基因敲除对于小鼠晶状体功能的影响。方法:采用胚胎干细胞打靶技术,培育出基因敲除小鼠。用裂隙灯显微镜观察小鼠晶状体的病变;透射和扫描电镜观察晶状体的超微结构;观察该基因敲除后晶状体形态和功能改变。结果:βB2晶体蛋白基因敲除后,新生的小鼠晶状体发育正常;随年龄增长,小鼠晶状体的质量、直径和正常小鼠比较明显减少;小鼠在生后数月内发生皮质性白内障,其程度随年龄增长而加重;电镜观察显示晶状体细胞纤维排列异常。结论:小鼠βB2晶体蛋白基因敲除导致年龄相关性白内障的发生。 展开更多

关键词 βb2晶体蛋白 基因敲除 白内障

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βB2晶体蛋白的功能及相关机制研究进展 被引量：2

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作者 刘鹏 孙建明 《国际检验医学杂志》 CAS 2017年第4期505-507,共3页

晶体蛋白是脊椎动物眼晶状体上皮细胞的主要成分,占晶状体中水溶性蛋白的90%。晶体蛋白根据相对分子质量大小顺序分为α、β和γ3种,各自均由许多亚单位构成。其中α晶体蛋白是结构和功能蛋白,α晶体蛋白属小热休克蛋白家族,发挥分子伴... 晶体蛋白是脊椎动物眼晶状体上皮细胞的主要成分,占晶状体中水溶性蛋白的90%。晶体蛋白根据相对分子质量大小顺序分为α、β和γ3种,各自均由许多亚单位构成。其中α晶体蛋白是结构和功能蛋白,α晶体蛋白属小热休克蛋白家族,发挥分子伴侣作用,可促进βγ-晶体蛋白的正确折叠,在应激时可阻止蛋白变性聚集、沉淀及程序性死亡。 展开更多

关键词 βb2晶体蛋白 生殖 表达 机制

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βB2基因敲除小鼠睾丸组织长链非编码RNA的差异性表达分析 被引量：1

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作者 任含笑 高谦 +3 位作者 贾音 张建荣 张俊洁 李闻捷 《第二军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第1期59-64,共6页

目的探讨长链非编码RNA(lncRNA)在βB2基因敲除小鼠睾丸中的表达及其影响睾丸发育的可能机制。方法采用lncRNA芯片技术,筛选野生型(WT)和βB2基因敲除(KO)小鼠睾丸组织(均n=3)中lncRNA及信使RNA(mRNA)表达谱的变化;对差异表达lncRNA和m... 目的探讨长链非编码RNA(lncRNA)在βB2基因敲除小鼠睾丸中的表达及其影响睾丸发育的可能机制。方法采用lncRNA芯片技术,筛选野生型(WT)和βB2基因敲除(KO)小鼠睾丸组织(均n=3)中lncRNA及信使RNA(mRNA)表达谱的变化;对差异表达lncRNA和mRNA进行GO数据库分析及KEGG数据库分析,建立调控网络图;采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)验证差异表达的lncRNA和mRNA,探讨调控通路。结果 (1)两组小鼠睾丸组织差异表达的lncRNA共140条,mRNA共477条;(2)通过GO数据库分析,筛选出差异表达lncRNA共12条,其中上调7条,下调5条;(3)经KEGG数据库进行路径分析,发现差异表达mRNA主要经由Ca2+信号、配体-受体相互作用等信号通路起作用;(4)用关联矩阵法建立了lncRNA和mRNA共表达网络图,共有17个节点,12条连接,包含9条lncRNA和8条mRNA;其中Rsl1由3条lncRNA调控,Lpo和Mpo各由2条lncRNA调控,Hdac1、Ephb4等各由1条lncRNA调控。(5)qRT-PCR分析结果表明,在βB2基因敲除小鼠睾丸组织中,lncRNA A-30-P01019163和P2rx7的表达均下调(P<0.05)。结论 lncRNA与βB2基因的晶状体外功能密切相关,其中lncRNA A-30-P01019163可能通过调控下游P2rx7mRNA的表达影响睾丸组织细胞周期及信号转导,进而调控睾丸发育。 展开更多

关键词 lncRNA βb2晶体蛋白 睾丸发育 P2rx7

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长链非编码RNA A-30-P01019163对卵巢颗粒细胞βB2晶体蛋白表达的调控及对颗粒细胞增殖和凋亡的影响 被引量：1

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作者 刘胜楠 李美慧 +2 位作者 李励 黄玮 张俊洁 《中国临床医学》 2021年第5期795-801,共7页

目的:探讨lncRNA A-30-P01019163对卵巢颗粒细胞βB2晶体蛋白(βB2 crystallin,CryBB2)表达的调控作用,以及其对卵巢颗粒细胞增殖、凋亡的影响。方法:构建小鼠卵巢颗粒细胞过表达lncRNA A-30-P01019163体内模型,同时基于人卵巢颗粒细胞... 目的:探讨lncRNA A-30-P01019163对卵巢颗粒细胞βB2晶体蛋白(βB2 crystallin,CryBB2)表达的调控作用,以及其对卵巢颗粒细胞增殖、凋亡的影响。方法:构建小鼠卵巢颗粒细胞过表达lncRNA A-30-P01019163体内模型,同时基于人卵巢颗粒细胞系KGN构建过表达或干扰lncRNA A-30-P01019163稳定细胞株。采用qRT-PCR和Western印迹法检测lncRNA A-30-P01019163过表达或干扰后颗粒细胞中CryBB2的表达水平,采用EdU法检测细胞增殖,采用TUNEL法和流式细胞术检测细胞凋亡。结果:随着小鼠周龄增长,卵巢颗粒细胞lncRNA A-30-P01019163表达逐渐增加(P<0.05)。过表达lncRNA A-30-P01019163后,小鼠卵巢颗粒细胞中CryBB2 mRNA和蛋白表达均增加(P<0.01)。对卵巢颗粒细胞系KGN过表达lncRNA A-30-P01019163后,其CryBB2 mRNA和蛋白表达均增加(P<0.05);颗粒细胞增殖加快,细胞周期相关蛋白D1及增殖细胞核抗原蛋白表达均增加(P<0.01);颗粒细胞凋亡增加,凋亡相关蛋白半胱氨酸蛋白酶3(caspase-3)切割体及多聚ADP-核糖聚合酶(poly ADP-ribose polymerase,PARP)切割体表达均增加(P<0.05)。而干扰卵巢颗粒细胞系KGN中lncRNA A-30-P01019163后,CryBB2 mRNA和蛋白表达均下调(P<0.01);颗粒细胞增殖减慢,细胞周期相关蛋白D1及增殖细胞核抗原蛋白表达均降低(P<0.01);颗粒细胞凋亡减少,caspase-3及PARP切割体表达均降低(P<0.05)。结论:小鼠卵巢颗粒细胞中lncRNA A-30-P01019163表达随卵巢发育逐渐增加,参与调控CryBB2表达,并与颗粒细胞增殖、凋亡密切相关。 展开更多

关键词 长链非编码RNA βb2晶体蛋白 卵巢颗粒细胞 增殖 凋亡

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βB2晶体蛋白在小鼠卵巢组织中的表达 被引量：1

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作者 张俊洁 张薇薇 +2 位作者 姚雯颖 张军 李闻捷 《现代检验医学杂志》 CAS 2009年第2期1-3,共3页

目的观察βB2晶体蛋白在卵巢组织中的表达.方法采用实时定量PCR，Westernblot和免疫组化方法对卵巢组织βB2基因及晶体蛋白表达进行检测.结果三种检测方法均发现小鼠卵巢组织中βB2晶体蛋白存在表达，且其表达量随小鼠鼠龄增长有明显上... 目的观察βB2晶体蛋白在卵巢组织中的表达.方法采用实时定量PCR，Westernblot和免疫组化方法对卵巢组织βB2基因及晶体蛋白表达进行检测.结果三种检测方法均发现小鼠卵巢组织中βB2晶体蛋白存在表达，且其表达量随小鼠鼠龄增长有明显上调.结论小鼠卵巢组织中存在βB2晶体蛋白表达，提示其在卵巢中存在一定的功能. 展开更多

关键词 βb2晶体蛋白 卵巢 表达

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βB2晶体蛋白在晶状体内外功能及相关机制研究

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作者 高谦 张俊洁 李闻捷 《医学综述》 2013年第5期769-771,共3页

βB2晶体蛋白是β族晶体蛋白中含量最多的一种,是脊椎动物眼晶状体中的主要蛋白成分之一,对维持晶状体的透明性和屈光度起主要作用。近年来,研究发现βB2基因不仅在晶状体内表达,而且在晶状体外也有高表达,并行使一定功能,尤其对生殖功... βB2晶体蛋白是β族晶体蛋白中含量最多的一种,是脊椎动物眼晶状体中的主要蛋白成分之一,对维持晶状体的透明性和屈光度起主要作用。近年来,研究发现βB2基因不仅在晶状体内表达,而且在晶状体外也有高表达,并行使一定功能,尤其对生殖功能有重要影响。βB2晶体蛋白在晶状体外的功能及相关作用机制成为研究的新热点。该文就βB2晶体蛋白在晶状体内外的功能及可能作用机制进行探讨,以期加深对特殊晶体蛋白新特性的了解。 展开更多

关键词 βb2晶体蛋白 机制 钙离子 生殖

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βB2-晶体蛋白的克隆和在大肠杆菌中的高效表达和纯化

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作者 赵惠仁 胡书群 +1 位作者 裴冬生 张光毅 《徐州医学院学报》 CAS 1998年第6期444-446,共3页

目的表达βＢ２－晶体蛋白，以研究其结构与功能的关系。方法用ＲＴ－ＰＣＲ的方法从大鼠晶状体中获得βＢ２－晶体蛋白的ｃＤＮＡ，将ｃＤＮＡ克隆到表达载体ｐＭＯＮ５７４３，转染Ｅ．ｃｏｌｉ菌株ＪＭ１０１，以萘啶酮酸诱导表达β... 目的表达βＢ２－晶体蛋白，以研究其结构与功能的关系。方法用ＲＴ－ＰＣＲ的方法从大鼠晶状体中获得βＢ２－晶体蛋白的ｃＤＮＡ，将ｃＤＮＡ克隆到表达载体ｐＭＯＮ５７４３，转染Ｅ．ｃｏｌｉ菌株ＪＭ１０１，以萘啶酮酸诱导表达βＢ２－晶体蛋白，用ＤＥＡＥ纤维素层析纯化。结果ＲＴ－ＰＣＲ扩增获得约７００ｂｐ的ｃＤＮＡ，在Ｅ．ｃｏｌｉ中获得高效表达，βＢ２－晶体蛋白占细菌总蛋白的３０％。ＤＥＡＥ纯化后获一２４ｋＤ蛋白，分子量与βＢ２－晶体蛋白一致。结论βＢ２－晶体蛋白ｃＤＮＡ可在大肠杆菌中获高效表达，表达产物的分子量约２４ｋＤ。 展开更多

关键词 βb2晶体蛋白 RT-PCR 克隆 纯化 大肠杆菌

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大鼠βB2-晶体蛋白的表达纯化及多克隆抗体的制备 被引量：2

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作者 胡书群 裴冬生 +1 位作者 陆梁 赵惠仁 《免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2011年第5期433-436,共4页

目的表达并纯化βB2-晶体蛋白,制备其多克隆抗体,用以研究βB2-晶体蛋白聚合的机制。方法用RT-PCR的方法扩增了βB2-晶体蛋白的cDNA并克隆到原核表达载体pMON5473中。用萘啶酮酸诱导recA启动子后,蛋白质在大肠杆菌中得到了高效表达。表... 目的表达并纯化βB2-晶体蛋白,制备其多克隆抗体,用以研究βB2-晶体蛋白聚合的机制。方法用RT-PCR的方法扩增了βB2-晶体蛋白的cDNA并克隆到原核表达载体pMON5473中。用萘啶酮酸诱导recA启动子后,蛋白质在大肠杆菌中得到了高效表达。表达的蛋白质用DEAE纤维素层析和凝胶过滤纯化,SDS-PAGE显示一条带。与佐剂混合后免疫新西兰大白兔。结果纯化了大鼠βB2-晶体蛋白,成功制备了其多克隆抗体。结论制备的多克隆抗体为下阶段的研究提供了重要的实验材料。 展开更多

关键词 βb2-晶体蛋白 表达 纯化 抗体

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SD大鼠βB_2-晶体蛋白的克隆、表达与纯化

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作者 刘梦蕾 李闻捷 +2 位作者 蔡刚 张燕 张军 《现代临床医学生物工程学杂志》 2005年第1期1-4,共4页

目的　得到大量纯的βB2 -晶体蛋白,为研究其生物学特性及潜在的生理功能打下基础.方法　从SD大鼠晶状体中抽提总RNA ,用RT -PCR法克隆βB2 -晶体蛋白的cDNA ,装入原核表达载体pGEX - 4T - 1后用萘啶酮酸(IPTG)诱导表达;用GST纯化系统... 目的　得到大量纯的βB2 -晶体蛋白,为研究其生物学特性及潜在的生理功能打下基础.方法　从SD大鼠晶状体中抽提总RNA ,用RT -PCR法克隆βB2 -晶体蛋白的cDNA ,装入原核表达载体pGEX - 4T - 1后用萘啶酮酸(IPTG)诱导表达;用GST纯化系统纯化并用蛋白水解酶对融合蛋白进行酶切.结果　βB2 -pGEX重组质粒经测序及限制性内切酶分析等鉴定,与预期结果一致;IPTG诱导后,蛋白质在大肠杆菌BL2 1中得到高效表达.纯化酶切后,经Westenblot方法验证,得到了高纯度的βB2 -晶体蛋白.结论　成功构建了βB2 -pGEX原核表达载体,高效表达了βB2-GST融合蛋白,经纯化和酶切得到了高纯度的βB2 -晶体蛋白,为进一步研究其生物学特性及潜在的生理功能打下基础. 展开更多

关键词 βb2-晶体蛋白 克隆 表达 纯化 大肠杆菌

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