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异补骨脂素纳米结构脂质载体的体外溶出及其抗白癜风活性研究 被引量:15
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作者 庞建云 沈成英 +5 位作者 周敏 申宝德 刘肖 刘娟 许润春 袁海龙 《中草药》 CAS CSCD 北大核心 2018年第8期1796-1801,共6页
目的评价异补骨脂素纳米结构脂质载体(IPRN-NLC)的体外溶出行为,并考察其对小鼠黑色素瘤B16F10细胞增殖、黑色素合成及酪氨酸酶活性的影响。方法采用透析袋法测定IPRN-NLC在72 h内的累积溶出量并绘制溶出曲线,MTT法测定B16F10细胞增殖情... 目的评价异补骨脂素纳米结构脂质载体(IPRN-NLC)的体外溶出行为,并考察其对小鼠黑色素瘤B16F10细胞增殖、黑色素合成及酪氨酸酶活性的影响。方法采用透析袋法测定IPRN-NLC在72 h内的累积溶出量并绘制溶出曲线,MTT法测定B16F10细胞增殖情况,多巴氧化法测定酪氨酸酶活性,GENMED细胞黑色素含量比色法测定黑色素合成。结果在72 h时体外累积溶出量IPRN-NLC为67.31%,IPRN-物理混合物为90.30%,IPRN-DMSO为98.67%,IPRN-混悬液为53.34%。IPRN在一定质量浓度范围内可以促进B16F10细胞增殖,提高酪氨酸酶活性,增加黑色素的合成,且同质量浓度的IPRN-NLC对B16F10的作用显著高于IPRN溶液(P<0.05)。结论 IPRN-NLC不仅具有缓释作用,还可以增加药物的溶解度;在一定质量浓度范围内与细胞具有较好的生物相容性,能显著提高细胞酪氨酸酶活性,促进黑色素合成。 展开更多
关键词 异补骨脂素 纳米结构脂质载体 体外释放 黑色素瘤b16f10细胞 白癜风 酪氨酸酶 细胞增殖 黑色素 MTT法 多巴氧化法
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光甘草定诱导小鼠黑色素瘤B16F10细胞凋亡的机制研究 被引量:9
2
作者 高彩霞 王艳明 +2 位作者 李德芳 唐晓峰 郑秋生 《天然产物研究与开发》 CAS CSCD 北大核心 2017年第5期836-842,共7页
通过体外和体内模型研究光甘草定对小鼠黑色素瘤B16F10细胞增殖的抑制作用及其分子机制。B16F10细胞经光甘草定处理后可抑制其增殖,且具有浓度依赖性;诱导B16F10细胞凋亡,观察到明显的细胞凋亡状态,细胞内凋亡相关基因及蛋白Bax表达显... 通过体外和体内模型研究光甘草定对小鼠黑色素瘤B16F10细胞增殖的抑制作用及其分子机制。B16F10细胞经光甘草定处理后可抑制其增殖,且具有浓度依赖性;诱导B16F10细胞凋亡,观察到明显的细胞凋亡状态,细胞内凋亡相关基因及蛋白Bax表达显著上升,Bcl-2则表达下调。进一步的研究发现,经光甘草定处理后的B16F10细胞中,培养基中葡萄糖含量升高,而ATP含量、乳酸生成均降低;细胞内糖酵解相关基因及蛋白HK2、Ldha表达下调。同时,经光甘草定处理后,移植瘤小鼠的肿瘤组织生长受到明显抑制,肿瘤组织内细胞凋亡率显著升高,Bax表达明显上升,而Bcl-2、HK2和Ldha则表达均下调。说明,光甘草定在一定浓度范围内抑制了小鼠黑色素瘤B16F10细胞的增殖,诱导细胞凋亡,而其诱导细胞凋亡的机制可能与调控糖酵解相关基因的表达相关。 展开更多
关键词 光甘草定 b16f10细胞 糖酵解 细胞凋亡
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基于TLR4/TRIF/STAT1通路探讨大蝉草多糖通过增强免疫抑制黑色素瘤细胞的机制
3
作者 杨碧萍 朱丽军 《菌物学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第8期126-136,共11页
探讨大蝉草多糖(CCPa)通过调节免疫细胞(RAW264.7)活性抑制黑色素瘤细胞(B16F10)的机制。构建RAW264.7和B16F10细胞共培养体系并给予CCPa干预,检测B16F10细胞的增殖能力、凋亡能力和转移能力,明确共培养条件下CCPa对B16F10的抑制作用;另... 探讨大蝉草多糖(CCPa)通过调节免疫细胞(RAW264.7)活性抑制黑色素瘤细胞(B16F10)的机制。构建RAW264.7和B16F10细胞共培养体系并给予CCPa干预,检测B16F10细胞的增殖能力、凋亡能力和转移能力,明确共培养条件下CCPa对B16F10的抑制作用;另外,采用不同浓度CCPa给药RAW264.7,通过检测RAW264.7的细胞活力、细胞吞噬能力、F-actin蛋白表达、免疫因子水平以及TLR4、TRIF、p-STAT1蛋白的表达,明确CCPa增强RAW264.7免疫活性的具体作用机制。研究结果表明,在共培养体系下,CCPa能协同顺铂抑制B16F10细胞的增殖和转移;RAW264.7细胞经CCPa处理后,细胞的吞噬能力,F-actin蛋白的表达以及免疫因子(IFN-β、IL-6)的水平均明显上升(P<0.05),同时,干预后的细胞内TLR4、TRIF、p-STAT1的表达显著上升(P<0.05)。以上结果表明CCPa可通过TLR4/TRIF/STAT1通路增强RAW264.7细胞免疫活性从而有效抑制B16F10细胞。 展开更多
关键词 大蝉草多糖 TLR4/TRIf/STAT1通路 免疫 RAW264.7细胞 b16f10细胞
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姜黄素对黑素的抑制作用及机制 被引量:3
4
作者 朱秀琪 展晓 周佳 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第8期1527-1533,共7页
目的姜黄素调节B16F10细胞微环境影响黑素合成的机制研究。方法(1)不同浓度姜黄素分别作用于B16F10及HaCaT细胞,MTT法检测该两种细胞活力;NaOH裂解法检测B16F10细胞黑素含量;L-DOPA氧化法检测B16F10细胞酪氨酸酶活性;Western blot法检测... 目的姜黄素调节B16F10细胞微环境影响黑素合成的机制研究。方法(1)不同浓度姜黄素分别作用于B16F10及HaCaT细胞,MTT法检测该两种细胞活力;NaOH裂解法检测B16F10细胞黑素含量;L-DOPA氧化法检测B16F10细胞酪氨酸酶活性;Western blot法检测B16F10细胞黑素生成(gp100、Mitf、GPNMB、Tyr、TRP2)及转运(Rab27a)关键蛋白表达水平;HaCaT细胞:ISG15蛋白表达水平。(2)不同浓度ISG15作用于B16F10细胞,NaOH裂解法检测黑素含量;L-DOPA氧化法检测酪氨酸酶活性;结果姜黄素在一定浓度范围内,直接抑制酪氨酸酶活性及黑素生成,且抑制黑素细胞迁移;ISG15蛋白作用于黑素细胞,明显促进gp100蛋白表达,酪氨酸酶活力,黑素含量。姜黄素抑制HaCaT细胞ISG15蛋白表达,改变黑素细胞微环境,通过ISG15间接发挥抑制黑素合成作用。结论姜黄素除直接抑制黑素合成外,还可以通过抑制ISG15蛋白的表达,改变黑素细胞微环境,间接发挥抑制黑素合成作用。 展开更多
关键词 姜黄素 b16f10细胞 微环境 HACAT细胞 黑素合成 ISG15蛋白
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B16F10/ESAT-6-GPI-IL-21瘤苗安全性及抗肿瘤效应研究 被引量:4
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作者 何向锋 王净 +6 位作者 余方流 赵枫姝 蔡凯 张洪义 陈峻崧 陈登宇 窦骏 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2011年第9期779-782,共4页
目的:评估B16F10/ESAT-6-GPI-IL-21瘤苗用于C57BL/6小鼠的安全性及其诱导的抗肿瘤免疫效应。方法:应用免疫荧光、FCM检测瘤苗细胞ESAT-6-GPI的表达情况;以Western blot方法检测瘤苗细胞IL-21的表达情况;动物实验检测瘤苗体内应用的安全... 目的:评估B16F10/ESAT-6-GPI-IL-21瘤苗用于C57BL/6小鼠的安全性及其诱导的抗肿瘤免疫效应。方法:应用免疫荧光、FCM检测瘤苗细胞ESAT-6-GPI的表达情况;以Western blot方法检测瘤苗细胞IL-21的表达情况;动物实验检测瘤苗体内应用的安全性;制备荷瘤鼠术后免疫模型,评价瘤苗免疫效果。结果:B16F10/ESAT-6-GPI-IL-21瘤苗细胞表面有靶抗原ESAT-6-GPI表达,并分泌IL-21。于C57BL/6小鼠皮下接种2×105个B16F10/ESAT-6-GPI-IL-21瘤苗细胞,60天内未见致瘤,但能够诱导小鼠产生有效的抗肿瘤免疫效应。结论:B16F10/ESAT-6-GPI-IL-21瘤苗致瘤性明显下降,低剂量应用具有安全性,能够诱导小鼠产生有效的抗肿瘤免疫效应。 展开更多
关键词 b16f10细胞 IL-21 ESAT-6 GPI 肿瘤疫苗
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赤芝提取物的抗氧化美白及细胞增殖作用研究
6
作者 木开代斯·买合木提 陈建 +1 位作者 焦春伟 谢意珍 《世界中医药》 CAS 北大核心 2024年第7期949-956,共8页
目的:研究赤芝提取物(GLE)抗氧化美白及细胞增殖作用。方法:以测定GLE中糖类含量,体外1,1-二苯基-2-三硝基苯肼(DPPH)和2,2-联氮-二(3-乙基-苯并噻唑-6-磺酸)二铵盐(ABTS)自由基清除力、蘑菇酪氨酸酶活性抑制力、抑制B16F10细胞黑色素... 目的:研究赤芝提取物(GLE)抗氧化美白及细胞增殖作用。方法:以测定GLE中糖类含量,体外1,1-二苯基-2-三硝基苯肼(DPPH)和2,2-联氮-二(3-乙基-苯并噻唑-6-磺酸)二铵盐(ABTS)自由基清除力、蘑菇酪氨酸酶活性抑制力、抑制B16F10细胞黑色素合成及酪氨酸酶活性抑制、结晶紫实验和划痕实验为评价指标,研究GLE抗氧化美白及对L929成纤维细胞增殖的作用。结果:GLE中富含总糖、多糖,GLE相较于β-熊果苷对DPPH自由基和ABTS自由基表现出较弱的清除作用,其自由基清除率半抑制浓度(IC 50)分别为1.6 mg/mL和1.2 mg/mL;对蘑菇酪氨酸酶活性有很强的抑制能力,基于α-MSH促黑激素细胞表型造模实验显示,0.4 mg/mL和0.8 mg/mL的GLE具有显著抑制B16F10细胞酪氨酸酶活性以及黑色素生成的作用;GLE具有促进L929成纤维细胞增殖作用。结论:GLE是美白及功能食品开发利用领域的候选者。 展开更多
关键词 赤芝提取物 酪氨酸酶活性 b16f10细胞 黑色素 自由基 抗氧化 增殖 L929成纤维细胞
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具有抑制酪氨酸酶活性乳酸菌的筛选及其成分分析 被引量:2
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作者 张雪 李雪峰 +2 位作者 胡瑞峰 郭万春 刘学军 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2023年第18期193-199,共7页
以抑制酪氨酸酶活性为筛选指标,对5株乳酸菌发酵上清液、菌体细胞和破碎提取物的酪氨酸酶抑制活性和1,1-二苯基-2-三硝基苯肼(1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl,DPPH)自由基清除率进行分析,结果表明,菌株发酵上清液抑制酪氨酸酶能力远高... 以抑制酪氨酸酶活性为筛选指标,对5株乳酸菌发酵上清液、菌体细胞和破碎提取物的酪氨酸酶抑制活性和1,1-二苯基-2-三硝基苯肼(1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl,DPPH)自由基清除率进行分析,结果表明,菌株发酵上清液抑制酪氨酸酶能力远高于菌体细胞和破碎提取物,其中MNJ-9菌株发酵上清液抑制酪氨酸酶能力可达68.9%。菌体细胞和破碎提取物仅为50.9%和34.8%。MNJ-9菌株发酵上清液对DPPH自由基清除能力可达93.1%。因此,对MNJ-9菌株进行16S rDNA菌种鉴定。基于液相色谱-质谱非靶向代谢组学对MNJ-9菌株发酵上清液进行主要成分分析。对其主要成分的10种化合物进行抑制率测定,结果表明,5-氨基戊酸抑制率最高。将5-氨基戊酸对小鼠黑色素瘤细胞(B16F10)进行细胞毒性实验、黑色素含量测定、细胞酪氨酸酶活性测定评价其美白能力。结果表明,5-氨基戊酸质量浓度为70μg/mL连续培养72 h时细胞存活率≥80%,细胞无明显毒性;质量浓度为10~70μg/mL时,细胞内黑色素含量和酪氨酸酶活性分别为85.4%~45.2%和76.53%~40.5%,说明5-氨基戊酸具有一定的美白能力。 展开更多
关键词 乳酸菌 酪氨酸酶抑制 1 1-二苯基-2-三硝基苯肼自由基 发酵上清液 5-氨基戊酸 b16f10细胞
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Beclin-1基因shRNA慢病毒载体的构建及其对B16F10细胞自噬及活力的影响 被引量:3
8
作者 贾艳艳 赵莹莹 +6 位作者 余祖华 何雷 廖成水 李静 郁川 张春杰 李银聚 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2021年第9期2609-2616,共8页
利用RNA干扰技术构建稳定沉默Beclin-l基因的B16F10小鼠黑色素瘤细胞系,分析稳转细胞系的自噬水平和活力,为探讨Beclin-1基因、自噬与肿瘤三者关系奠定基础。构建小鼠Beclin-l基因干扰载体,转染至293T细胞,获得慢病毒颗粒,将病毒颗粒感... 利用RNA干扰技术构建稳定沉默Beclin-l基因的B16F10小鼠黑色素瘤细胞系,分析稳转细胞系的自噬水平和活力,为探讨Beclin-1基因、自噬与肿瘤三者关系奠定基础。构建小鼠Beclin-l基因干扰载体,转染至293T细胞,获得慢病毒颗粒,将病毒颗粒感染B16F10细胞,通过加压筛选、有限稀释、细胞驯化得到稳定转染m-Beclin-1-shRNA1的B16F10细胞系。采用RT-PCR和免疫荧光技术检测对Beclin-l的干扰效果,Western blot和透射电镜分析稳转细胞系中自噬标志物LC3蛋白表达及自噬小体形成情况,CCK-8法检测稳转细胞系的活力。结果表明,成功构建了靶向抑制Beclin-l基因表达的shRNA,纯化的慢病毒滴度为1×10^(8) TU·mL^(-1),建立的细胞系中Beclin-1 mRNA和蛋白表达都受到不同程度的抑制,mRNA的沉默效率约为75%(P<0.01),发现干预Beclin-1表达能够抑制LC3-Ⅱ蛋白的表达及自噬小体的形成数量,降低B16F10细胞活力。以上结果表明,干扰Beclin-1表达能够有效降低B16F10细胞自噬活性,促进B16F10细胞死亡,这为探讨Beclin-1基因功能及自噬在抗肿瘤中的作用奠定重要基础。 展开更多
关键词 RNA干扰 b16f10细胞 beclin-1基因 慢病毒载体 细胞自噬
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白芨水提物对小鼠黑色素瘤B16F10细胞增殖与迁移的影响 被引量:3
9
作者 令狐浪 李成龙 姚晓东 《遵义医学院学报》 2018年第4期408-412,417,共6页
目的探讨白芨水提物对小鼠黑色素瘤B16F10细胞增殖与迁移的影响。方法使用水提醇沉法提取白芨粗多糖,同时保留有机小分子物质部分;采用CCK8试剂检测不同浓度的两部分提取物对B16F10细胞存活率及增殖的影响;细胞划痕检测提取物对B16F10... 目的探讨白芨水提物对小鼠黑色素瘤B16F10细胞增殖与迁移的影响。方法使用水提醇沉法提取白芨粗多糖,同时保留有机小分子物质部分;采用CCK8试剂检测不同浓度的两部分提取物对B16F10细胞存活率及增殖的影响;细胞划痕检测提取物对B16F10细胞迁移的影响,以及ELISA法检测迁移相关蛋白的表达情况。结果与对照组相比,白芨水提物均能降低B16F10细胞的存活率和增殖能力,并与浓度呈正相关,其中多糖和有机小分子物质的半数抑制浓度(IC_(50))分别为51.14μg/mL和40.61μg/mL;此外,白芨水提物对细胞迁移也具有抑制作用,并能下调MMP-2和MMP-9的表达,与对照组相比,中、高浓度的下调作用具有显著性差异。结论白芨水提物能够抑制B16F10细胞的增殖与迁移能力,其作用可能通过下调迁移相关蛋白MMP-2和MMP-9的表达有关。 展开更多
关键词 白芨 水提物 b16f10细胞 细胞增殖 细胞迁移
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Mushroom Tyrosinase Inhibition and Antimelanogenesis Activities of <i>Bacopa monnieri</i>(L.) Methanol Extract in B16F10 Melanoma Cells 被引量:2
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作者 T. N. Shamu Junna Lalitha Manohar Shinde 《Journal of Biosciences and Medicines》 2020年第5期189-202,共14页
Melanocytes that form stratum basale of skin epidermis express tyrosinase enzyme, which catalyzes initial two rate-limiting steps in the biotransformation of tyrosine into dark pigment called melanin. Even today, Tyro... Melanocytes that form stratum basale of skin epidermis express tyrosinase enzyme, which catalyzes initial two rate-limiting steps in the biotransformation of tyrosine into dark pigment called melanin. Even today, Tyrosinase inhibitors are among the promising candidates in cosmetic industry for skin-lightening formulations. Overexpression of tyrosinase causes excess melanin biosynthesis and deposition resulting in dark skin color. Moreover, localized overexpression of tyrosinase cause variety of hyperpigmentation disorders like melanoma, melasma, chloasma, dark patches, liver patches, etc. There has been a renewed interest in the natural products as main ingredients in the formulation of safe products for skin-whitening and treatment options for hyperpigmentation disorders. In the present communication, the results of our investigations on tyrosinase inhibition, modulation of intracellular tyrosinase and melanin levels in cultured B16F10 melanoma cells by Bacopa monnieri (L.) methanol extract (BME) are presented and discussed as safe option for skin lightening and to treat hyperpigmentation disorders. BME showed 11%, 29%, 54% and 80% inhibition of mushroom tyrosinase activity at an initial 100, 200, 400 and 600 μg of extract. Treatment of α-melanocyte stimulating hormone (α-MSH) stimulated cultured murine melanoma B16F10 cells with 100 μg/ml of the extract showed a decrease in the levels of cellular melanin and cellular tyrosinase content by 22% and 46% respectively. The cytotoxicity studies by MTT assay revealed that the LC50 of the BME is ≥1000 μg/ml in cultured mouse melanoma B16F10 and HEK293 cells. 展开更多
关键词 TYROSINASE bacopa monieri b16f10 cells MELANIN Α-MSH
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人参皂苷Rb1对过氧化氢诱导的B16F10鼠黑素瘤细胞凋亡的保护作用 被引量:1
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作者 刘海平 高华 付洪军 《中国麻风皮肤病杂志》 2014年第6期327-330,共4页
目的:确定人参皂苷Rb1对过氧化氢诱导的B16F10黑素瘤细胞凋亡的保护作用。方法:将B16F10细胞随机分为对照组,H_2O_2组和Rb1+H_2O_2组(细胞培养液中分别加入10 mg/L、20 mg/L、50 mg/L的人参皂苷Rb1和H_2O_2)。分别测定B16F10细胞活力、... 目的:确定人参皂苷Rb1对过氧化氢诱导的B16F10黑素瘤细胞凋亡的保护作用。方法:将B16F10细胞随机分为对照组,H_2O_2组和Rb1+H_2O_2组(细胞培养液中分别加入10 mg/L、20 mg/L、50 mg/L的人参皂苷Rb1和H_2O_2)。分别测定B16F10细胞活力、LDH漏出量、线粒体膜电位及细胞凋亡水平。结果:H_2O_2作用24 h后,B16F10细胞活力降低至对照组的53.77%,而Annexin V和PI阳性细胞比例为25.6%,显著高于对照组(P<0.01)。50 mg/L人参皂苷Rb1预处理后,B16F10细胞活力为对照组的77.75%,较H_2O_2组增加44.6%(P<0.01)。Annexin V和PI阳性细胞比例为14.4%,明显低于H_2O_2组(P<0.01),并且LDH漏出率明显降低,线粒体膜电位显著升高。结论:人参皂苷Rb1对H_2O_2所致的B16F10黑素瘤细胞凋亡具有保护作用,有效提高其抗氧化应激能力。 展开更多
关键词 人参皂苷Rb1 b16f10细胞 凋亡
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全反式维甲酸对小鼠黑色素瘤B16F10细胞生物学行为的影响
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作者 郑先珍 姚秋娥 +3 位作者 石三军 李欣 卢来春 赵语 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2017年第22期2169-2175,共7页
目的探讨全反式维甲酸(all-trans retinoic acid,ATRA)对小鼠黑色素瘤B16F10细胞体外增殖、迁移、凋亡、致瘤性的影响及其初步作用机制。方法采用MTT法检测ATRA对小鼠黑色素瘤细胞B16F10和小鼠成纤维细胞L929增殖能力的影响。显微镜下... 目的探讨全反式维甲酸(all-trans retinoic acid,ATRA)对小鼠黑色素瘤B16F10细胞体外增殖、迁移、凋亡、致瘤性的影响及其初步作用机制。方法采用MTT法检测ATRA对小鼠黑色素瘤细胞B16F10和小鼠成纤维细胞L929增殖能力的影响。显微镜下观察给药后两种细胞的形态变化,应用划痕实验和Transwell实验检测ATRA对B16F10细胞迁移能力的影响,分别采用DAPI染色和Annexin V-FITC/PI染色观察B16F10细胞凋亡情况,JC-1染色实验检测B16F10细胞线粒体膜电位,荧光分光光度计检测B16F10细胞中Caspase-9、Caspase-3的活化情况,利用体内成瘤实验观察ATRA对B16F10细胞致瘤性的影响。结果 MTT结果显示ATRA呈浓度依赖性地抑制B16F10细胞和L929细胞增殖,但B16F10细胞的存活率明显低于L929细胞的存活率(P<0.05);分别以低、中、高3个浓度(6.25、16、40μmol/L)的ATRA处理细胞24 h后,显微镜下可见B16F10细胞在中浓度时呈凋亡样改变,高浓度时细胞基本死亡,丧失正常形态;而L929细胞形态仅在高浓度时发生显著变化;划痕实验和Transwell实验提示B16F10细胞的体外迁移能力在中浓度即受到明显抑制(P<0.05);继续以中浓度(16μmol/L)的ATRA作用B16F10细胞24 h,DAPI染色可见细胞核裂解,甚至可见凋亡小体;Annexin V-FITC/PI染色结合流式细胞仪测得细胞凋亡率为(37.27±4.42)%;JC-1染色实验提示线粒体膜电位明显降低;荧光分光光度计测得给药后Caspase-9、Caspase-3显著被活化,活性分别增加了(1.54±0.00)、(3.09±0.01)倍(P<0.05);成瘤实验结果显示ATRA处理后的B16F10细胞致瘤性显著降低(P<0.01),甚至消失。结论 ATRA能显著抑制B16F10细胞体外增殖、迁移能力,并能通过降低线粒体膜电位,活化Caspase-9、Caspase-3蛋白诱导细胞凋亡,进而抑制B16F10致瘤性。 展开更多
关键词 全反式维甲酸 恶性黑色素瘤 b16f10细胞 增殖 迁移 凋亡 致瘤性
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甘草查尔酮A对小鼠黑色素瘤B16F10细胞体外迁移能力的影响 被引量:2
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作者 马晓懿 杨新惠 郑秋生 《中国实验方剂学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2015年第18期111-114,共4页
目的:探讨甘草中黄酮类化合物甘草查尔酮A(licochalcone A,LCA)对小鼠黑色素瘤B16F10细胞株体外迁移能力的影响。方法:取对数生长期B16F10细胞按8 000个/孔接种于96孔板中,磺酰罗丹明B(SRB)法测定LCA(0,5,10,15,20μmol·L-^... 目的:探讨甘草中黄酮类化合物甘草查尔酮A(licochalcone A,LCA)对小鼠黑色素瘤B16F10细胞株体外迁移能力的影响。方法:取对数生长期B16F10细胞按8 000个/孔接种于96孔板中,磺酰罗丹明B(SRB)法测定LCA(0,5,10,15,20μmol·L-^1)作用24 h对细胞活力影响;取对数生长期B16F10细胞按1×10^5个/孔接种于24孔板中,划痕实验检测LCA(0,5,10,15μmol·L^-1)作用24 h细胞体外迁移能力;取对数生长期B16F10细胞按5×10^5个/瓶接种于细胞培养瓶中,LCA(0,5,10,15μmol·L^-1)作用24 h后,明胶酶谱法检测细胞培养上清基质金属蛋白酶-2(MMP-2)和基质金属蛋白酶-9(MMP-9)活性;ELISA检测MMP-2和MMP-9蛋白含量;实时荧光定量PCR(Q-PCR)和半定量PCR(RT-PCR)法检测MMP-2和MMP-9基因表达水平。结果:5-15μmol·L-1的LCA对小鼠黑色素瘤B16F10细胞作用24 h,对细胞活力没有显著的影响;划痕试验结果说明,LCA可剂量依赖性地降低B16F10细胞的体外迁移能力;明胶酶谱结果显示,LCA可明显抑制B16F10细胞分泌MMP-2和MMP-9的活性;ELISA试验表明,LCA可明显降低MMP-2和MMP-9蛋白表达;Q-PCR和RT-PCR结果显示,LCA可明显降低MMP-2和MMP-9的mRNA基因表达量。结论:甘草查尔酮A能抑制B16F10小鼠黑色素瘤细胞体外转移侵袭作用,其机制可能与抑制MMP-2和MMP-9表达有关。 展开更多
关键词 甘草查尔酮A 抗转移 基质金属蛋白酶 小鼠黑色素瘤b16f10细胞
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茶多酚对小鼠黑色素瘤细胞B16F10体外增殖和迁移的影响 被引量:1
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作者 刘芳君 蓝吴涛 +3 位作者 李鹏飞 许冬梅 张磊 朱芷葳 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2022年第4期1280-1286,共7页
【目的】研究茶多酚对小鼠黑色素瘤细胞B16F10增殖和迁移的影响,以期为将茶多酚用于肿瘤的治疗提供依据。【方法】用不同浓度茶多酚(0.05、0.10和0.15 g/L)处理B16F10细胞,不处理(0 g/L)的作为对照组,采用CCK-8法检测各组细胞生长情况,... 【目的】研究茶多酚对小鼠黑色素瘤细胞B16F10增殖和迁移的影响,以期为将茶多酚用于肿瘤的治疗提供依据。【方法】用不同浓度茶多酚(0.05、0.10和0.15 g/L)处理B16F10细胞,不处理(0 g/L)的作为对照组,采用CCK-8法检测各组细胞生长情况,计算生长抑制率;不同浓度茶多酚处理细胞24 h后,采用划痕试验评价细胞的迁移能力;通过实时荧光定量PCR和Western blotting检测B16F10细胞中小眼畸形相关转录因子(microphthalmia-associated transcription factor,MITF)和黑色素形成限速酶(tyrosinase,TYR)mRNA和蛋白的表达水平。【结果】与对照组相比,0.05 g/L茶多酚对B16F10细胞增殖无明显抑制作用(P>0.05),0.10和0.15 g/L茶多酚对B16F10细胞的增殖能力有极显著的抑制作用(P<0.01),且浓度越高,抑制作用越强;0.05、0.10和0.15 g/L茶多酚对B16F10细胞的迁移均有极显著的抑制作用(P<0.01);实时荧光定量PCR和Western blotting结果显示,随着茶多酚浓度的升高,MITF和TYR mRNA和蛋白的表达量均呈浓度依赖性降低,与对照组相比,0.05 g/L茶多酚显著降低MITF mRNA和蛋白的表达(P<0.05),0.10和0.15 g/L茶多酚均极显著降低MITF mRNA和蛋白的表达(P<0.01),0.10和0.15 g/L茶多酚均极显著降低TYR mRNA和蛋白的表达(P<0.01)。【结论】0.10和0.15 g/L茶多酚对B16F10细胞的增殖和迁移均有明显的抑制作用,并且能降低黑色素生成基因MITF和TYR的表达,表明茶多酚能抑制黑色素瘤的进展。 展开更多
关键词 黑色素瘤b16f10细胞 茶多酚 增殖 迁移
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声动力疗法刺激肿瘤微环境中CD80与CD86表达的研究
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作者 谷传文 王姗 +1 位作者 郑金华 刘明 《肿瘤学杂志》 CAS 2015年第3期201-205,共5页
[目的]检测声动力治疗(sonodynamic therapy,SDT)对B16F10荷瘤鼠模型中肿瘤微环境T细胞共刺激分子CD80、CD86表达情况的影响。[方法]以2.0W/cm2超声强度结合250mg/kg 5-氨基酮戊酸(5-ALA)治疗B16F10荷瘤鼠,测量不同实验组小鼠体重及肿... [目的]检测声动力治疗(sonodynamic therapy,SDT)对B16F10荷瘤鼠模型中肿瘤微环境T细胞共刺激分子CD80、CD86表达情况的影响。[方法]以2.0W/cm2超声强度结合250mg/kg 5-氨基酮戊酸(5-ALA)治疗B16F10荷瘤鼠,测量不同实验组小鼠体重及肿瘤大小;免疫组织化学方法检测移植瘤微环境中CD80、CD86、IFN-γ和TNF-α表达情况。[结果]与其他组相比,SDT组肿瘤体积缩小更加显著,体重变化无差异;SDT组CD80、CD86、IFN-γ和TNF-α均出现表达增高,且具有统计学意义。[结论]SDT能够加强T细胞共刺激分子的CD80、CD86的表达,促进抗肿瘤免疫的发生。 展开更多
关键词 声动力治疗 b16f10细胞 肿瘤微环境
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双脱甲氧基姜黄素对黑色素瘤B16-F10细胞增殖、凋亡的影响 被引量:7
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作者 曾小飞 马瑞东 +3 位作者 尚观胜 付强 李书平 何小平 《实用医学杂志》 CAS 北大核心 2016年第1期50-53,共4页
目的:探讨双脱甲氧基姜黄素(bisdemethoxycurcumin)对黑色素瘤B16-F10细胞增殖与凋亡的影响。方法:双脱甲氧基姜黄素作用于B16-F10细胞24 h,MTT法检测双脱甲氧基姜黄素对B16-F10细胞的增殖抑制作用。流式细胞术检测双脱甲氧基姜黄素对... 目的:探讨双脱甲氧基姜黄素(bisdemethoxycurcumin)对黑色素瘤B16-F10细胞增殖与凋亡的影响。方法:双脱甲氧基姜黄素作用于B16-F10细胞24 h,MTT法检测双脱甲氧基姜黄素对B16-F10细胞的增殖抑制作用。流式细胞术检测双脱甲氧基姜黄素对细胞周期、细胞凋亡的影响。在C57BL/6小鼠上面建立黑色素瘤模型,采用静脉给药,观察其对黑色素瘤模型的增殖影响。用蛋白免疫印迹法检测双脱甲氧基姜黄素在细胞和组织层面对抗细胞凋亡蛋白BCL-1的表达影响。结果:双脱甲氧基姜黄素可以明显抑制B16-F10细胞的增殖。双脱甲氧基姜黄素诱导B16-F10细胞凋亡,抑制细胞周期于S期。采用静脉注射给药,双脱甲氧基姜黄素可以抑制黑色素瘤的生长。在细胞和组织层面,可以抑制抗凋亡蛋白BCL-1的表达。结论:双脱甲氧基姜黄素可以抑制黑色素瘤B16-F10细胞的增殖,可能与其促进细胞凋亡有关;双脱甲氧基姜黄素诱导黑色素瘤B16-F10细胞凋亡可能与抑制抗凋亡单位BCL-1有关。 展开更多
关键词 双脱甲氧基姜黄素 黑色素瘤b16-f10细胞 增殖 凋亡
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搭载咪唑−沸石骨架的减毒沙门氏菌的制备及抗肿瘤作用研究
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作者 钟小芳 邓小瑜 刘帅 《药学学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第6期1841-1846,共6页
本研究利用仿生矿化将咪唑−沸石骨架(ZIF-8)巧妙地搭载在减毒沙门氏菌VNP20009表面,同时包载化疗药物盐酸多柔比星(doxorubicin,DOX)得到ZD@VNP;采用透射电镜、激光共聚焦显微镜对ZD@VNP的形貌及ZIF-8与VNP20009的结合情况进行表征。采... 本研究利用仿生矿化将咪唑−沸石骨架(ZIF-8)巧妙地搭载在减毒沙门氏菌VNP20009表面,同时包载化疗药物盐酸多柔比星(doxorubicin,DOX)得到ZD@VNP;采用透射电镜、激光共聚焦显微镜对ZD@VNP的形貌及ZIF-8与VNP20009的结合情况进行表征。采用荧光分光光度法考察DOX的包封率及体外释放率;通过CCK-8和细胞活/死染色FDA/PI评估ZD@VNP抑制黑色素瘤细胞(B16F10)增殖的能力,并建立黑色素瘤小鼠模型考察ZD@VNP抑瘤效果。实验结果表明ZIF-8均匀地结合在VNP20009表面,共聚焦结果也证实了ZD@VNP中ZIF-8与VNP的结合;ZD@VNP对DOX的包封率为85.7%±3.7%,在pH 6.0的缓冲液中DOX的释放显著高于pH 7.4;细胞实验结果表明ZD@VNP能增强DOX对B16F10细胞增殖的抑制作用;药效实验结果表明与VNP+DOX相比,ZD@VNP治疗在C57BL/6小鼠(实验得到广东医科大学动物保护和伦理委员会批准,编号:GDMU-2023-002518)上可显著抑制B16F10肿瘤生长,并延长小鼠生存期。综上,本研究借助仿生矿化通过一步法制备的ZD@VNP可显著增强DOX和VNP抑制肿瘤细胞生长的作用,在药物递送领域具有较大的应用前景。 展开更多
关键词 咪唑−沸石骨架 沙门氏菌VNP20009 仿生矿化 细胞增殖 b16f10细胞
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花青素单一成分矢车菊-3-O-葡萄糖苷抑制B16-F10细胞增殖和迁移的机理 被引量:4
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作者 王丽 程鹏 +1 位作者 曲晨菲 李秀艳 《生理学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第6期855-862,共8页
本研究旨在探讨花青素单一成分矢车菊-3-O-葡萄糖苷(cyanidin-3-O-glucoside, Cy-3-glu)对小鼠黑色素瘤细胞B16-F10增殖和迁移的影响,并阐明相关机理。用不同浓度Cy-3-glu处理B16-F10细胞,采用CCK-8法检测细胞存活率,划痕法检测细胞迁... 本研究旨在探讨花青素单一成分矢车菊-3-O-葡萄糖苷(cyanidin-3-O-glucoside, Cy-3-glu)对小鼠黑色素瘤细胞B16-F10增殖和迁移的影响,并阐明相关机理。用不同浓度Cy-3-glu处理B16-F10细胞,采用CCK-8法检测细胞存活率,划痕法检测细胞迁移情况,流式细胞仪检测细胞周期,real-time PCR检测细胞周期相关基因的m RNA表达水平,Western blot检测p-AKT、E-钙黏蛋白(E-cadherin)、N-钙黏蛋白(N-cadherin)和波形蛋白(vimentin)的相对表达水平,并用小动物活体成像仪检测B16-F10细胞在C57BL/6J小鼠体内的生长和迁移情况。结果显示,Cy-3-glu能明显抑制体外B16-F10细胞的生长(P <0.001)和迁移(P <0.01),使细胞周期阻滞在S期。Cy-3-glu作用后p-AKT (P <0.05)、N-cadherin和vimentin (P <0.001)表达水平显著下降,E-cadherin表达水平升高(P <0.05)。饲喂Cy-3-glu饲料的肿瘤模型C57BL/6J小鼠肿瘤大小和重量显著减小(P <0.05),肿瘤的转移水平也明显降低。以上结果提示,Cy-3-glu通过抑制PI3K/AKT信号、调节细胞黏附和迁移信号使B16-F10细胞周期停滞在S期,最终抑制其在体内和体外的增殖和迁移。 展开更多
关键词 矢车菊-3-O-葡萄糖苷 小鼠黑色素瘤b16-f10细胞 增殖 迁移
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MC1R基因在山羊皮肤组织及B16-F10细胞中的表达分析 被引量:3
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作者 蒋婧 李杰 +6 位作者 周鹏 王高富 陈灿灿 付琳 张丽 刘良佳 任航行 《黑龙江畜牧兽医》 CAS 北大核心 2020年第15期13-17,共5页
为了探讨黑素皮质素受体1 (melanocortin 1 receptor, MC1R)基因在不同肤色成年山羊皮肤组织中的表达及其对黑色素细胞增殖和分化的影响,试验以成年酉州乌羊、板角山羊及小鼠皮肤黑色素瘤细胞(B16-F10细胞)为研究材料,采用实时荧光定量... 为了探讨黑素皮质素受体1 (melanocortin 1 receptor, MC1R)基因在不同肤色成年山羊皮肤组织中的表达及其对黑色素细胞增殖和分化的影响,试验以成年酉州乌羊、板角山羊及小鼠皮肤黑色素瘤细胞(B16-F10细胞)为研究材料,采用实时荧光定量PCR方法检测MC1R基因在山羊皮肤组织及B16-F10细胞增殖、分化过程中的表达情况。结果表明:MC1R基因在成年酉州乌羊皮肤组织中的相对表达量极显著高于板角山羊(P<0.01);在B16-F10细胞增殖阶段,MC1R基因相对表达量先上升后下降,在24, 72, 120小时时的相对表达量显著高于6, 168小时时(P<0.05);在B16-F10细胞分化阶段,MC1R基因在分化后期(72, 120, 168小时)的相对表达量显著高于前期(6, 24小时)(P<0.05)。说明MC1R基因对动物皮肤黑色素生成和沉积起重要作用,且对黑色素细胞的增殖和分化有一定促进作用。 展开更多
关键词 酉州乌羊 板角山羊 小鼠皮肤黑色素瘤细胞 黑素皮质素受体1基因 基因表达 皮肤组织
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不同细胞外泌体的分离与特性研究 被引量:2
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作者 李昕 刘瑜 尹宗宁 《华西药学杂志》 CAS CSCD 2018年第6期590-593,共4页
目的探究人肺癌细胞A549与小鼠黑色素瘤细胞B16-F10不同细胞外泌体的性质及促细胞增殖能力的差异。方法采用超速离心法及Exo Qμick试剂盒法提取A549细胞及B16-F10细胞培养上清液中的外泌体;利用透射电镜观察外泌体的形态,采用动态光散... 目的探究人肺癌细胞A549与小鼠黑色素瘤细胞B16-F10不同细胞外泌体的性质及促细胞增殖能力的差异。方法采用超速离心法及Exo Qμick试剂盒法提取A549细胞及B16-F10细胞培养上清液中的外泌体;利用透射电镜观察外泌体的形态,采用动态光散射法测定粒径,用SDS-PAGE电泳技术分析外泌体的蛋白分布,采用Western blot技术分析其特异蛋白TSG 101的表达,用MTT法测定外泌体促细胞的增殖能力。结果超速离心法和Exo Qμick试剂盒法均可用于提取外泌体,A549及B16-F10细胞外泌体均呈圆形膜性囊泡结构;提取的外泌体样本均有外泌体特异性标记蛋白TSG 101的表达,B16-F10细胞外泌体促细胞增殖能力更佳。结论超速离心法分离的外泌体纯度高,促细胞增殖能力好。 展开更多
关键词 外泌体 A549细胞 b16f10细胞 表征 分离 鉴定 促增殖
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