鸡MHC-B-F基因外显子2、3的SNPs分析 被引量：6

1

作者 罗庆斌 沈栩 任广彩 《养禽与禽病防治》 北大核心 2005年第10期6-9,共4页

本研究分别选择10个个体通过直接测序并与Ncbi下载的13条鸡MHC-B-F基因序列合并分析了外显子2、外显子3中的单核苷酸多态性位点。结果在外显子2264个碱基的序列中发现了44个核苷酸变异位点,其中有24个引起了氨基酸的改变,在外显子3273... 本研究分别选择10个个体通过直接测序并与Ncbi下载的13条鸡MHC-B-F基因序列合并分析了外显子2、外显子3中的单核苷酸多态性位点。结果在外显子2264个碱基的序列中发现了44个核苷酸变异位点,其中有24个引起了氨基酸的改变,在外显子3273个碱基的序列中发现了42个核苷酸变异位点,其中有26个引起了氨基酸的改变。而且核苷酸序列的同源性均高于氨基酸序列的同源性。 展开更多

关键词 鸡 MHC b—f基因 单核苷酸多态性 f基因序列 外显子2 SNPS 多态性位点 氨基酸序列 单核苷酸

原文传递

鸡MHC-B-F基因外显子3 PCR-RFLP-TasⅠ的多态分布 被引量：1

2

作者 罗庆斌 任广彩 沈栩 《中国家禽》 北大核心 2005年第20期16-18,共3页

研究利用PCR-RFLP方法检测了MHC-B-F基因外显子3TasⅠ位点不同基因型在9个鸡品种计235个个体中的分布情况。结果表明MHC-B-F基因外显子3TasⅠ位点中存在3种基因型,命名为AA、AB、BB。它们在不同品种中的分布各异,AA基因型在杏花鸡、灵... 研究利用PCR-RFLP方法检测了MHC-B-F基因外显子3TasⅠ位点不同基因型在9个鸡品种计235个个体中的分布情况。结果表明MHC-B-F基因外显子3TasⅠ位点中存在3种基因型,命名为AA、AB、BB。它们在不同品种中的分布各异,AA基因型在杏花鸡、灵山香鸡、丝羽乌骨鸡中的频率显著甚至极显著地高于其它品种(P<0.05orP<0.01),AB基因型在来航鸡与隐性白洛克中的频率相当低(P<0.05orP<0.01),BB基因型在隐性白洛克中的分布频率则极显著地高于其它8个品种(P<0.01)。 展开更多

关键词 鸡 MHC抗原 细胞表面转膜蛋白 b—f基因 多态分布 组织相容性复合体 PCR—RfLP方法

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基因转移载体脂质体和重组腺病毒介导碱性磷酸酶基因在B16F1细胞中的表达比较 被引量：8

3

作者 刘金辉 Glenn Larsen 《江西医学院学报》 2002年第2期15-18,共4页

目的 :探讨两种基因转移载体脂质体转染的和重组腺病毒收集并转导的SEAP基因在B16F1细胞中的表达动态。方法 :脂质体和质粒DNA复合后 ,转染 10 6 B16F1细胞 ,连续 5d收集并换细胞培养液 ,并检测其中的SEAP酶活性。将重组腺病毒以 10 0 0... 目的 :探讨两种基因转移载体脂质体转染的和重组腺病毒收集并转导的SEAP基因在B16F1细胞中的表达动态。方法 :脂质体和质粒DNA复合后 ,转染 10 6 B16F1细胞 ,连续 5d收集并换细胞培养液 ,并检测其中的SEAP酶活性。将重组腺病毒以 10 0 0m .o .i、2 0 0 0m .o .i、3 0 0 0m .o .i、4 0 0 0m .o .i接种B16F1细胞 ,连续 5d收集并换细胞培养液 ,并检测其中SEAP的含量。结果 :随着时间的推移 ,脂质体转染的SEAP的表达逐渐下降 ,由第 1天的 82 1.6μUnit/ml下降到第 5天的 2 75 .2 μUnit/ml。腺病毒转导的SEAP的表达却是逐渐上升。并随接种毒量的增加而上升。且第三、四天表达达最高后 ,能保持较稳定的水平。接种 4 0 0 0m .o .i组 ,SEAP的表达由第 1天的93 .9μUnit/ml上升到第 3天 12 81.1μUnit/ml。到第 5天仍为 12 4 0 .4 μUnit/ml。结论 :脂质体和重组腺病毒作为不同的基因转移载体都能有效地介导外源基因的转移入靶细胞 ,并使外源基因在靶细胞内获得有效地表达。 展开更多

关键词 脂质体 重组腺病毒 碱性磷酸酶 基因转移 基因表达 b16f1细胞 载体

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鼠粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子基因转染小鼠黑色素瘤B16F1细胞 被引量：2

4

作者 刘金辉 Glenn Larsen 《江西医学院学报》 CAS 2002年第5期10-12,共3页

目的 :探讨基因转移载体脂质体介导转染的鼠粒细胞 巨噬细胞集落刺激因子 (mGM CSF)基因在B16F1细胞的表达动态及表达产物的生物活性。方法 :脂质体和质粒DNA复合后 ,转染 10 6B16F1细胞 ,连续 5d换细胞培养液 ,并检测其中的mGM CSF含... 目的 :探讨基因转移载体脂质体介导转染的鼠粒细胞 巨噬细胞集落刺激因子 (mGM CSF)基因在B16F1细胞的表达动态及表达产物的生物活性。方法 :脂质体和质粒DNA复合后 ,转染 10 6B16F1细胞 ,连续 5d换细胞培养液 ,并检测其中的mGM CSF含量。采用 [3 HTdR]渗入法 ,测定DA1G细胞和转染后第一天收获的以 1:10对倍稀释到 1:6 40的上清液及 [3 HTdR]混合培养后 ,渗入到DA1G细胞的 [3 HTdR]量 (cpm) ,以分析表达产物的生物活性。结果 :转染B16F1细胞的mGM CSF基因得到有效表达。但随着时间的推移 ,表达由第 1天的 135ng/ml下降到第 5天的 42 .2ng/ml。渗入到DA1G细胞的 [3 HTdR]量 (cpm)随上清液的稀释而逐步下降 ,由 1:10稀释度的9371下降到 1:6 40时的 32 5 1。和DMEM混合培养的DA1G细胞的 [3 HTdR]渗入量 (cpm)仅为 472。结论 :脂质体作为基因转移载体可有效地介导mGM CSF基因转染B16F1细胞 。 展开更多

关键词 黑色素瘤b16f1细胞 脂质体 粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子 基因转移 基因表达

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Beclin-1基因shRNA慢病毒载体的构建及其对B16F10细胞自噬及活力的影响 被引量：2

5

作者 贾艳艳 赵莹莹 +6 位作者 余祖华 何雷 廖成水 李静 郁川 张春杰 李银聚 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2021年第9期2609-2616,共8页

利用RNA干扰技术构建稳定沉默Beclin-l基因的B16F10小鼠黑色素瘤细胞系,分析稳转细胞系的自噬水平和活力,为探讨Beclin-1基因、自噬与肿瘤三者关系奠定基础。构建小鼠Beclin-l基因干扰载体,转染至293T细胞,获得慢病毒颗粒,将病毒颗粒感... 利用RNA干扰技术构建稳定沉默Beclin-l基因的B16F10小鼠黑色素瘤细胞系,分析稳转细胞系的自噬水平和活力,为探讨Beclin-1基因、自噬与肿瘤三者关系奠定基础。构建小鼠Beclin-l基因干扰载体,转染至293T细胞,获得慢病毒颗粒,将病毒颗粒感染B16F10细胞,通过加压筛选、有限稀释、细胞驯化得到稳定转染m-Beclin-1-shRNA1的B16F10细胞系。采用RT-PCR和免疫荧光技术检测对Beclin-l的干扰效果,Western blot和透射电镜分析稳转细胞系中自噬标志物LC3蛋白表达及自噬小体形成情况,CCK-8法检测稳转细胞系的活力。结果表明,成功构建了靶向抑制Beclin-l基因表达的shRNA,纯化的慢病毒滴度为1×10^(8) TU·mL^(-1),建立的细胞系中Beclin-1 mRNA和蛋白表达都受到不同程度的抑制,mRNA的沉默效率约为75%(P<0.01),发现干预Beclin-1表达能够抑制LC3-Ⅱ蛋白的表达及自噬小体的形成数量,降低B16F10细胞活力。以上结果表明,干扰Beclin-1表达能够有效降低B16F10细胞自噬活性,促进B16F10细胞死亡,这为探讨Beclin-1基因功能及自噬在抗肿瘤中的作用奠定重要基础。 展开更多

关键词 RNA干扰 b16f10细胞 beclin-1基因 慢病毒载体 细胞自噬

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The SNPs C.513A>T in the MHC B-F gene and rs15001532 in the SPOCK1 gene are associated with Salmonella pullorum disease resistance in chickens

6

作者 ZHANG Ze-tang GAN Jian-kang +3 位作者 ZHANG Wen-wu ZHANG De-xiang ZHANG Xi-quan LUO Qing-bin 《Journal of Integrative Agriculture》 SCIE CAS CSCD 2016年第8期1856-1862,共7页

supported by the Earmarked Fund for the Modern Agroindustry Technology Research System, China （CARS-41）;the National High Technology Research and Development Program of China （2011AA100301）

关键词 MHC b-f gene SPOCK1 gene SNPs Salmonella pullorum partridge chicken

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脑心肌炎病毒内部核蛋白体进入位点介导白介素-12基因在B16F1细胞中的表达 被引量：1

7

作者 刘金辉 Glenn Larsen 《江西医学院学报》 2003年第4期9-11,共3页

目的　研究脑心肌炎病毒的内部核蛋白体进入位点连接的鼠白介素 12 (mIL 12 )的 p4 0和p35双亚基基因在同一启动子的调控下能否得以有效地表达并形成异二聚体 p70。 方法　采用脂质体法将表达经脑心肌炎病毒的内部核蛋白体进入位点连接... 目的　研究脑心肌炎病毒的内部核蛋白体进入位点连接的鼠白介素 12 (mIL 12 )的 p4 0和p35双亚基基因在同一启动子的调控下能否得以有效地表达并形成异二聚体 p70。 方法　采用脂质体法将表达经脑心肌炎病毒的内部核蛋白体进入位点连接的p4 0和 p35的质粒mIL - 12 /AD1 1转染B16F1细胞 ,连续 3d收集并换细胞培养液 ,并检测其中的mIL 12 (p70 )量。结果　ELISA结果显示 ,mIL12 (p70 )的表达量随着时间推移逐步下降 ,由第 1天的 15 .5ng/ml逐步下降到第 3天的 9.3ng/ml。表明mIL 12 p4 0和p35双亚基基因得到有效的表达并加工形成了异二聚体p70。结论　脑心肌炎病毒的内部核蛋白体进入位点连接的双基因p4 0和 p35在同一启动子的调控下得以同时表达。 展开更多

关键词 脑心肌炎病毒 白介素12 基因表达 内部核蛋白体 b16f1细胞

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阳离子脂质体介导粒细胞/巨噬细胞集落刺激因子基因转染的黑色素瘤细胞作瘤苗的研究

8

作者 刘金辉 Glenn Larsen 《江西医学院学报》 CAS 2007年第5期22-25,51,共5页

目的本研究拟探讨采用阳离子脂质体介导的鼠粒细胞/巨噬细胞集落刺激因子基因转染的B16F1细胞作为瘤苗的抗肿瘤效果。方法阳离子脂质体复合mGMCSF DNA转染B16F1细胞,ELISA法检测mGMCSF在B16F1中的表达。[3HTdR]掺入法分析B16F1分泌的mGM... 目的本研究拟探讨采用阳离子脂质体介导的鼠粒细胞/巨噬细胞集落刺激因子基因转染的B16F1细胞作为瘤苗的抗肿瘤效果。方法阳离子脂质体复合mGMCSF DNA转染B16F1细胞,ELISA法检测mGMCSF在B16F1中的表达。[3HTdR]掺入法分析B16F1分泌的mGMCSF生物活性。γ射线照射灭活基因修饰的B16F1细胞皮下免疫小鼠,ELISA分析小鼠血清中的mGMCSF水平。7 d后免疫鼠皮下攻击未修饰的B16F1细胞以检测瘤苗在小鼠体内的抗肿瘤效果5。1Cr释放实验检测免疫鼠抗B16F1的特异CTL反应。结果阳离子脂质体介导mGMCSF基因转染B16F1细胞后,未经阳性克隆筛选,mGMCSF得到特异且具有生物学活性的表达。但表达逐步下降由第1天的(135.5±21.1)μg/L下降到第5d的(47.8±5.3)μg/L。随γ射线照射剂量的增加,mGMCSF的表达逐步降低,但仍具有生物学活性。γ射线照射的5×105基因修饰B16F1接种小鼠后,鼠血清中的mGMCSF水平在4 h时为(198.4±23.1)ng/L,攻击的B16F1细胞在接种瘤苗的小鼠体内的生长完全被抑制,51Cr释放实验结果显示该瘤苗在小鼠体内诱导了特异的CTL反应。结论本研究表明阳离子脂质体作为基因载体介导鼠粒细胞/巨噬细胞集落刺激因子基因转染的黑色素瘤B16F1细胞,作为瘤苗在小鼠体内可有效地激发抗肿瘤免疫。 展开更多

关键词 粒细胞/巨噬细胞集落刺激因子 阳离子脂质体 肿瘤疫苗 b16f1细胞 基因转移

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热休克蛋白gp96表达对B16F10细胞生长的影响

9

作者 岳培彬 赵玫 +3 位作者 林梁 余权 王晓霞 黄常志 《实用癌症杂志》 2004年第3期237-240,共4页

目的　探讨热休克蛋白gp96表达对B16F10细胞株生物学行为的影响。 方法　构建gp96正义和反义真核重组表达质粒 pcDNA hgp96和 pcDNA anti96P ,并转染B16F10细胞 ,G 418筛选稳定转染的阳性细胞克隆 ,然后Western印迹分析细胞gp96的表达情... 目的　探讨热休克蛋白gp96表达对B16F10细胞株生物学行为的影响。 方法　构建gp96正义和反义真核重组表达质粒 pcDNA hgp96和 pcDNA anti96P ,并转染B16F10细胞 ,G 418筛选稳定转染的阳性细胞克隆 ,然后Western印迹分析细胞gp96的表达情况 ,绘制细胞生长曲线 ,观察 gp96表达对细胞生长特性的影响。 结果　转染了 gp96正义表达质粒的B16F10细胞gp96表达水平升高 ,细胞生长缓慢 ,倍增时间延迟 ;反义gp96表达质粒明显抑制了B16F10细胞 gp96表达 ,使细胞倍增时间提前。结论　热休克蛋白 gp96表达水平升高可抑制肿瘤细胞的生长 ,而 gp96表达水平下降则肿瘤细胞生长速度加快 。 展开更多

关键词 热休克蛋白 gp96表达 b16f10细胞 细胞生长 生物学行为

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阳离子脂质体介导IL-15基因治疗小鼠肺转移模型的实验研究 被引量：3

10

作者 滕秀 周西坤 +4 位作者 张印兵 邱吉 毛咏秋 邓洪新 李炯 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2012年第2期148-152,共5页

目的:用阳离子脂质体(CL)包裹pcDNA3.1-IL15制备阳离子脂质体质粒DNA复合物CL-IL15,观察其抗小鼠B16-F10肺转移瘤的治疗作用,并初步探讨其作用机制。方法:构建hIL-15真核表达载体,测定脂质体-质粒DNA复合物的最佳包封率;将该复合物转染C... 目的:用阳离子脂质体(CL)包裹pcDNA3.1-IL15制备阳离子脂质体质粒DNA复合物CL-IL15,观察其抗小鼠B16-F10肺转移瘤的治疗作用,并初步探讨其作用机制。方法:构建hIL-15真核表达载体,测定脂质体-质粒DNA复合物的最佳包封率;将该复合物转染CHO-K1细胞株,West-ern blott检测体外转染条件下IL-15蛋白的表达情况,MTT法检测细胞转染上清对CTLL-2细胞株的增殖刺激作用;建立B16-F10小鼠黑色素瘤肺转移模型,尾静脉给药,每隔1 d给药1次,共6次,治疗结束24 h后观察各组肿瘤肺转移情况;LDH释放法(乳酸脱氢酶释放法)检测脾淋巴细胞的杀伤作用,冰冻切片免疫荧光法观察NK细胞对肿瘤组织的浸润。结果:成功构建hIL-15表达载体,并验证其与阳离子脂质体的质量比为1∶5时,包裹后形成的复合物具有较好的包封率;可以在体外有效转染并表达具生物活性的分泌型IL-15蛋白;CL-IL15复合物治疗小鼠肿瘤肺转移模型,可以显著减少肿瘤肺转移结节数目,提高脾细胞对肿瘤细胞杀伤活性(P<0.05),增加NK细胞在肿瘤组织中的浸润比例。结论:阳离子脂质体质粒DNA复合物CL-IL15可有效地抑制小鼠B16-F10肺转移瘤,其作用机制可能与IL-15诱导脾细胞对肿瘤细胞的杀伤、激活NK(natural killer)细胞对肿瘤组织的浸润等机制有关。 展开更多

关键词 阳离子脂质体 IL-15 b16-f10 肺转移 基因治疗

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腺病毒CD-80基因转导B16-F10细胞的体外生物学特征(英文)

11

作者 田长富 李殿俊 +5 位作者 刘旭 任丽君 TIAN Chang-fu LI Dian-jun LIU Xu REN Li-jun 《哈尔滨医科大学学报》 CAS 2002年第4期263-266,F003,共5页

目的　探讨含hB7 1基因的重组腺病毒hCD80rAd对B16 F10肿瘤细胞体外生物学特性的影响。方法　以腺病毒为载体 ,将CD80基因导入B16 F10肿瘤细胞后 ,以PCR方法检测基因导入 ,以电镜、FACS等方法观察对其体外生物学特性的影响。结果　重... 目的　探讨含hB7 1基因的重组腺病毒hCD80rAd对B16 F10肿瘤细胞体外生物学特性的影响。方法　以腺病毒为载体 ,将CD80基因导入B16 F10肿瘤细胞后 ,以PCR方法检测基因导入 ,以电镜、FACS等方法观察对其体外生物学特性的影响。结果　重组腺病毒的滴度可达 10 1 0 PFU mL ,2 0MOIsrAd可使 95 %以上的B16 F10细胞被感染。转染CD80基因后 ,B16 F10细胞的生长能力、克隆形成能力等均无变化 ,电镜下 ,细胞表面结构及胞内超微结构有轻微变化。结论　重组腺病毒hCD80rAd可以有效地将hCD80基因导入肿瘤细胞而不会引起明显的生物学特性改变 。 展开更多

关键词 体外生物学特征 重组腺病毒 b16-f10 CD80 基因治疗 肿瘤疫苗

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vWF-△Pro改善基于蛋白质剪接的双载体BDD-FⅧ基因转移 被引量：6

12

作者 朱甫祥 杨树德 +2 位作者 刘泽隆 屈慧鸽 迟晓艳 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第8期720-726,共7页

多聚体von Willebrand因子(vWF)的功能之一是保护凝血Ⅷ因子(FⅧ)免受蛋白水解引起的快速清除.前肽缺失突变体vWF(vWF-ΔPro)不能形成多聚体,但可以结合FⅧ蛋白.为探讨vWF-ΔPro对基于蛋白质反式剪接作用介导的双载体转FⅧ基因后连接的... 多聚体von Willebrand因子(vWF)的功能之一是保护凝血Ⅷ因子(FⅧ)免受蛋白水解引起的快速清除.前肽缺失突变体vWF(vWF-ΔPro)不能形成多聚体,但可以结合FⅧ蛋白.为探讨vWF-ΔPro对基于蛋白质反式剪接作用介导的双载体转FⅧ基因后连接的FⅧ蛋白的分泌和活性的影响,将vWF-ΔPro基因和融合SspDnaB内含肽的B结构域缺失型FⅧ(BDD-FⅧ)断裂基因共转染293细胞进行转基因的瞬时表达,用Western印迹检测了单独转染vWF-ΔPro基因细胞的vWF-ΔPro表达量和蛋白形式,并检测了其对FⅧ的结合力;用ELISA法观察分泌至培养上清中的剪接的BDD-FⅧ,并用Coatest法检测由其产生的生物活性.结果显示,vWF-ΔPro转基因细胞呈现二聚体蛋白表达形式,其结合FⅧ的能力与转野生型vWF基因细胞相近;vWF-ΔPro共转染细胞上清中剪接BDD-FⅧ蛋白浓度为198±21ng/mL,活性为1.78±0.18IU/mL,明显高于未转染vWF-ΔPro基因的细胞对照(91±12ng/mL和1.05±0.13IU/mL),与共转染野生型vWF基因细胞对照相近(221±19ng/mL和1.95±0.22IU/mL),表明vWF-ΔPro可显著改善内含肽剪接的BDD-FⅧ蛋白的分泌和生物活性.为vWF-ΔPro转基因的基于蛋白质剪接技术双AAV载体转BDD-FⅧ基因动物体内实验提供了依据. 展开更多

关键词 von WILLEbRAND因子 bDD-fⅧ 转基因 内含肽 蛋白质反式剪接

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慢病毒载体介导CDK2基因沉默对黑素瘤B16-F1细胞生物学行为的影响 被引量：3

13

作者 晋佳路 朱仁书 +1 位作者 谢育媛 刘红春 《中国肿瘤生物治疗杂志》 CAS CSCD 北大核心 2016年第2期243-249,共7页

目的:探讨由慢病毒载体p UL介导的p UL-CDK2-shRNA3(CDK2-shRNA)沉默CDK2基因后对小鼠黑素瘤B16-F1细胞恶性生物学行为的影响,初步探索其作用机制。方法:利用重组慢病毒载体CDK2-shRNA转染B16-F1细胞,MTT法检测其对细胞增殖的影响,DAPI... 目的:探讨由慢病毒载体p UL介导的p UL-CDK2-shRNA3(CDK2-shRNA)沉默CDK2基因后对小鼠黑素瘤B16-F1细胞恶性生物学行为的影响,初步探索其作用机制。方法:利用重组慢病毒载体CDK2-shRNA转染B16-F1细胞,MTT法检测其对细胞增殖的影响,DAPI染色、Annexin V-FITC/PI双染流式术检测细胞凋亡情况,流式术检测细胞周期变化,细胞黏附实验、transwell小室实验分别检测细胞黏附、侵袭和迁移能力变化,Western blotting检测细胞周期信号通路上RB蛋白(成视网膜细胞瘤蛋白)、pRB蛋白、细胞周期相关转录因子E2F1及侵袭迁移相关蛋白基质金属酶-2(MMP-2)、基质金属酶-9(MMP-9)的表达水平。结果:与空白对照组和阴性对照组相比,CDK2-shRNA组细胞相对增殖率、细胞黏附率、细胞侵袭和迁移能力均显著下降(均P<0.05)。细胞凋亡率显著增加(均P<0.05);G1期细胞显著增加而S期和G2期显著降低(P<0.05)。细胞周期相关蛋白pRB、E2F1明显降低而RB显著升高(P<0.05),细胞侵袭和迁移相关蛋白MMP-2、MMP-9明显降低(P<0.05)。结论:慢病毒载体p UL介导的shRNA沉默CDK2基因对B16-F1细胞恶性生物学行为有显著的抑制作用,其机制主要与细胞周期和细胞侵袭迁移相关蛋白表达变化有关。 展开更多

关键词 黑素瘤 b16-f1细胞 CDK2基因 sh-RNA 恶性生物学行为 机制

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MC1R基因在山羊皮肤组织及B16-F10细胞中的表达分析 被引量：2

14

作者 蒋婧 李杰 +6 位作者 周鹏 王高富 陈灿灿 付琳 张丽 刘良佳 任航行 《黑龙江畜牧兽医》 CAS 北大核心 2020年第15期13-17,共5页

为了探讨黑素皮质素受体1 (melanocortin 1 receptor, MC1R)基因在不同肤色成年山羊皮肤组织中的表达及其对黑色素细胞增殖和分化的影响,试验以成年酉州乌羊、板角山羊及小鼠皮肤黑色素瘤细胞(B16-F10细胞)为研究材料,采用实时荧光定量... 为了探讨黑素皮质素受体1 (melanocortin 1 receptor, MC1R)基因在不同肤色成年山羊皮肤组织中的表达及其对黑色素细胞增殖和分化的影响,试验以成年酉州乌羊、板角山羊及小鼠皮肤黑色素瘤细胞(B16-F10细胞)为研究材料,采用实时荧光定量PCR方法检测MC1R基因在山羊皮肤组织及B16-F10细胞增殖、分化过程中的表达情况。结果表明:MC1R基因在成年酉州乌羊皮肤组织中的相对表达量极显著高于板角山羊(P<0.01);在B16-F10细胞增殖阶段,MC1R基因相对表达量先上升后下降,在24, 72, 120小时时的相对表达量显著高于6, 168小时时(P<0.05);在B16-F10细胞分化阶段,MC1R基因在分化后期(72, 120, 168小时)的相对表达量显著高于前期(6, 24小时)(P<0.05)。说明MC1R基因对动物皮肤黑色素生成和沉积起重要作用,且对黑色素细胞的增殖和分化有一定促进作用。 展开更多

关键词 酉州乌羊 板角山羊 小鼠皮肤黑色素瘤细胞 黑素皮质素受体1基因 基因表达 皮肤组织

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单基因和双基因联合治疗对小鼠B16-F10黑色素瘤生长抑制作用研究

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作者 韦世元 唐放 +2 位作者 彭旭 何学令 尹海林 《四川动物》 北大核心 2020年第1期34-40,共7页

目的研究阳离子脂质体介导mGM-csf和mFlt-kdr3基因治疗以及2个基因联合治疗对小鼠B16-F10黑色素瘤肺转移以及实体瘤的生长抑制作用。方法通过尾静脉注射法和皮下注射法分别将10~5个以及10~6个对数生长期黑色素瘤细胞注入BALB/c小鼠体内... 目的研究阳离子脂质体介导mGM-csf和mFlt-kdr3基因治疗以及2个基因联合治疗对小鼠B16-F10黑色素瘤肺转移以及实体瘤的生长抑制作用。方法通过尾静脉注射法和皮下注射法分别将10~5个以及10~6个对数生长期黑色素瘤细胞注入BALB/c小鼠体内,构建小鼠肺转移模型和腋下实体瘤模型。将2组模型小鼠分别分成5组:mFlt-kdr3治疗组、mGM-csf治疗组、联合治疗组(1次mFlt-kdr3,2次mGM-csf)、H1299脂质体质粒对照组和生理盐水对照组。肺转移模型小鼠建模3周后,尾静脉给药治疗,每次给药80μL,每次间隔1 d,共3次。完成后3 d,解剖取出小鼠肺组织并对肿瘤灶进行计数、苏木精-伊红染色。实体瘤模型小鼠在建模1周后开始瘤体穿刺给药,每次给药25μL,每次间隔1 d,共9次,每次给药前用游标卡尺测量瘤体的长、短径。结果肺转移治疗实验中,治疗组平均肿瘤个数显著少于对照组(P<0.05),且联合治疗组肿瘤个数最少,并且肺部结构完整,基本未见明显的肿瘤灶,可以看到明显的肺泡结构。实体瘤模型实验中,治疗组瘤体平均体积显著小于对照组(P<0.05),且在观察的时间内联合治疗组瘤体平均体积呈现明显的下降趋势,治疗组的疗效价值为联合治疗组>mFlt-kdr3治疗组>mGM-csf治疗组。结论GM-csf和Flt-kdr3基因药物对黑色素瘤具有协同治疗效用,可以明显抑制肺部肿瘤灶的形成和实体瘤的生长。 展开更多

关键词 b16-f10黑色素瘤 粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子 血管内皮生长因子 基因治疗

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