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题名一种新的B链C端去四肽胰岛素的研制方法
被引量：1
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作者
王一成
石嘉豪
张元兴
费俭
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机构
华东理工大学生物反应器工程国家重点实验室
同济大学生命科学与技术学院
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出处
《细胞生物学杂志》
CSCD
2007年第5期771-776,共6页
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基金
上海市科学技术委员会基金项目资助(No.04DZ19204)~~
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文摘
报道了将单体胰岛素前体(MIP)经胰蛋白酶和羧肽酶B两步连续酶切获得B链C端去四肽胰岛素(DTI)的方法。MIP由甲醇酵母表达,最高发酵表达量达到150mg/L。发酵液中MIP通过疏水层析,分子筛初步纯化后直接进行酶切,在胰蛋白酶酶切3h后加入抑制剂paminobenzamidine处理15min,然后直接加入羧肽酶B酶切6h,再通过反相柱纯化即可得到纯品DTI,从分子筛到最后DTI,总纯化得率达到77%。按中国药典小白鼠惊厥法测定得DTI的生物活力为22IU/mg,是胰岛素的80%,在Superdex G-75分子筛上测定DTI的解离聚合曲线,证明其是单体。
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关键词
单体胰岛素前体
b链c端去四肽胰岛素
胰蛋白酶
羧肽酶b
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Keywords
monomeric insulin precursor
monomeric destetrapeptide human insulin
trypsin
carboxypeptidase b
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分类号
R943
[医药卫生—药剂学]
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