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重组腺相关病毒介导B细胞表面分化成熟抗原269基因转染树突状细胞治疗多发性骨髓瘤的体外实验研究 被引量：1
1
作者 陈海梅 徐运孝 +2 位作者 李清照 沈婵娟 胡国瑜 《临床内科杂志》 CAS 2019年第1期51-54,共4页
目的探讨重组腺相关病毒(rAAV)介导B细胞表面分化成熟抗原269(CD269)基因转染树突状细胞(DCs)对多发性骨髓瘤(MM)的治疗作用。方法取中南大学湘雅二医院健康人外周血单个核细胞,采用含粒细胞.巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)和白细胞介素(... 目的探讨重组腺相关病毒(rAAV)介导B细胞表面分化成熟抗原269(CD269)基因转染树突状细胞(DCs)对多发性骨髓瘤(MM)的治疗作用。方法取中南大学湘雅二医院健康人外周血单个核细胞,采用含粒细胞.巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)和白细胞介素(IL)-4的培养液进行体外诱导,并设置转染组、空载组和对照组,转染组培养第1d加入rAAV/CD269病毒液,空载组培养第1d加入rAAV病毒液,对照组培养第1d加入等量磷酸缓冲盐溶液,3组均于培养第5 d加入肿瘤坏死因子(TNF)-α仪诱导树突状细胞(DCs)成熟。观察分化细胞的形态学变化,检测3组DCs的CD269表达。将3组DCs分别加入自体T淋巴细胞,获得细胞毒性T淋巴细胞(CTLs),检测CTLs中干扰素(IFN)-γ的表达,并检测3组中CTLs分别对人U266细胞、人MM原代细胞和阴性对照细胞的杀伤率和转染组不同效靶比下的杀伤率。结果细胞逐渐发生形态学改变且符合DCs形态特征。转染组DCs中CD269表达明显高于空载组和对照组(P<0.05)。转染组IFN-γ的表达率高于空载组和对照组(P<0.05)。转染组CTLs对人MM细胞株U226和人MM原代细胞的杀伤率均高于空载组和对照组(P<0.05)。当效靶比为1:1、5:1、10:1、20:1、50:1时,CTLs对人MM原代细胞的杀伤率分别为(13.24±1.29)%、(17.68±1.96)%、(25.66±2.17)%、(33.14±2.33)%、(39.74±2.56)%,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论rAAV介导CD269基因转染DCs能够获得CTLs,上调IFN-γ表达,增强对人MM细胞株U226的杀伤作用,且效靶比越高,杀伤率也越高。 展开更多
关键词 重组腺相关病毒 b细胞表面分化成熟抗原269 基因转染 树突状细胞 多发性骨髓瘤
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