姜黄素对宫颈癌大鼠肿瘤细胞凋亡、免疫功能的影响及作用机制 被引量：2

1

作者 陈红梅 冯强 +1 位作者 黎娟 陈铁民 《中国老年学杂志》 CAS 北大核心 2023年第13期3271-3274,共4页

目的探讨姜黄素对宫颈癌大鼠肿瘤细胞凋亡、免疫功能的影响及作用机制。方法将36只雌性大鼠建立宫颈癌模型并分为姜黄素组、环磷酰胺组及对照组,连续14 d分别给予120 mg/(kg•d)姜黄素、25 mg/(kg•d)环磷酰胺及等量生理盐水。处死大鼠并... 目的探讨姜黄素对宫颈癌大鼠肿瘤细胞凋亡、免疫功能的影响及作用机制。方法将36只雌性大鼠建立宫颈癌模型并分为姜黄素组、环磷酰胺组及对照组,连续14 d分别给予120 mg/(kg•d)姜黄素、25 mg/(kg•d)环磷酰胺及等量生理盐水。处死大鼠并对其脾脏、胸腺及肿瘤组织称重,计算抑瘤率及胸腺指数、脾脏指数,采用DNA断裂的原位末端标记(TUNEL)法、四甲基偶氮唑盐微量酶反应比色(MTT)法、Western印迹检测肿瘤细胞凋亡指数、淋巴细胞增殖能力及肿瘤组织B细胞淋巴瘤(Bcl)-2蛋白和Bcl-2相关X蛋白(Bax)的表达情况。结果3组抑瘤率、胸腺指数、脾脏指数、凋亡指数、淋巴细胞增殖能力比较差异均有统计学意义(均P<0.05)。3组CD4^(+)、CD8^(+)及CD4^(+)/CD8^(+)的比较差异有统计学意义(均P<0.05)。与对照组比较,环磷酰胺组CD4^(+)、CD8^(+)及CD4^(+)/CD8^(+)均显著降低(P<0.05),姜黄素组CD4^(+)、CD8^(+)及CD4^(+)/CD8^(+)均明显升高(P<0.05)。3组Bcl-2、Bax蛋白表达比较差异均有统计学意义(均P<0.05)。结论姜黄素能够促进宫颈癌大鼠肿瘤细胞凋亡并增强其免疫功能,其作用机制可能与姜黄素调节Bcl-2、Bax的表达有关。 展开更多

关键词 姜黄素 宫颈癌 凋亡 免疫功能 b细胞淋巴瘤(bcl)-2 bcl-2相关X蛋白(bax)

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miR-21通过Bcl-2和P53对早期胃癌病理形态学的影响 被引量：3

2

作者 危柳柳 赖月亮 +2 位作者 朱方擎 林晔 谢俊峰 《中国老年学杂志》 CAS 北大核心 2022年第14期3545-3548,共4页

目的探讨miR-21通过Bcl-2和P53对早期胃癌病理形态学的影响。方法选取60例早期胃癌患者切除的癌组织,将癌组织分为过表达miR-21组和敲低miR-21组各30例。分别采用免疫组化和苏木素-伊红(HE)染色病理切片检测癌组织中B细胞淋巴瘤(Bcl)-2... 目的探讨miR-21通过Bcl-2和P53对早期胃癌病理形态学的影响。方法选取60例早期胃癌患者切除的癌组织,将癌组织分为过表达miR-21组和敲低miR-21组各30例。分别采用免疫组化和苏木素-伊红(HE)染色病理切片检测癌组织中B细胞淋巴瘤(Bcl)-2和P53的表达,采用Western印迹检测癌组织中miR-21对Bcl-2和P53蛋白表达的影响。结果免疫组化法结果显示,过表达miR-21组Bcl-2表达显著低于敲低miR-21组,P53表达显著高于敲低miR-21组(P<0.05);HE病理切片结果显示,过表达miR-21组的病理组织学情况显著优于敲低miR-21组(P<0.05);过表达miR-21组中Bcl-2蛋白表达显著低于敲低miR-21组,P53蛋白表达显著高于敲低miR-21组(P<0.05)。结论miR-21通过调节Bcl-2和P53的表达,改善早期胃癌患者胃内理化环境,减少理化损伤,也可以作为早期胃癌检查的指标,对患者的临床治疗有一定意义。 展开更多

关键词 MIR-21 b细胞淋巴瘤(bcl)-2 P53 早期胃癌

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当归多糖通过抑制星形胶质细胞凋亡缓解帕金森病小鼠的运动障碍

3

作者 张晨宇 刘波 +2 位作者 袁志军 马小芬 曾芳 《中国老年学杂志》 CAS 北大核心 2024年第13期3188-3192,共5页

目的观察当归多糖(ASP)对1-甲基-4-苯基-1,2,3,6-四氢吡啶(MPTP)诱导的帕金森病(PD)小鼠运动障碍的作用,并探讨其分子机制。方法将C57BL/6J小鼠分为空白组(腹腔注射生理盐水)、ASP组(200 mg/kg)、MPTP组(25 mg/kg)、ASP+MPTP组(20 mg/kg... 目的观察当归多糖(ASP)对1-甲基-4-苯基-1,2,3,6-四氢吡啶(MPTP)诱导的帕金森病(PD)小鼠运动障碍的作用,并探讨其分子机制。方法将C57BL/6J小鼠分为空白组(腹腔注射生理盐水)、ASP组(200 mg/kg)、MPTP组(25 mg/kg)、ASP+MPTP组(20 mg/kg ASP和25 mg/kg MPTP)。完成药物处理后,采用抓力计和转棒仪检测四肢抓力和运动能力。用ASP处理正常原代星形胶质细胞及1-甲基-4-苯基吡啶离子(MPP^(+))染毒的星形胶质细胞,设置对照组(生理盐水)、观察组(100 mg/L ASP)、MPP^(+)组、ASP+MPP^(+)组(100 mg/L ASP和MPP^(+));采用CCK-8法检测ASP对星形胶质细胞活性的影响;采用TUNEL荧光染色法分析ASP对MPP^(+)染毒星形胶质细胞凋亡的影响;采用流式细胞术检测ASP对MPP^(+)染毒星形胶质细胞活性氧(ROS)产生的影响;采用Western印迹法分析ASP对MPP^(+)染毒星形胶质细胞B细胞淋巴瘤(Bcl)2相关X蛋白(Bax)/Bcl2/胱天蛋白酶(Caspase)-3凋亡信号通路的影响。结果ASP具有缓解由MPTP诱导的PD小鼠运动障碍的作用;与对照组相比,200和400 mg/L ASP处理可显著提高原代星形胶质细胞的活性(P<0.05,P<0.01);ASP处理可显著提高MPP^(+)染毒星形胶质细胞的细胞活力,显著减少MPP^(+)染毒星形胶质细胞的凋亡(P<0.05,P<0.01);流式细胞分析表明ASP处理可显著减少MPP^(+)染毒星形胶质细胞的ROS产生(P<0.01);Western印迹结果表明ASP处理可明显抑制MPP^(+)染毒星形胶质细胞Bax/Bcl2/Caspase-3凋亡信号通路的活化(P<0.05)。结论ASP处理可缓解PD小鼠运动障碍,其分子机制可能是ASP通过抑制Bax/Bcl2/Caspase-3凋亡信号通路减少PD小鼠中脑星形胶质细胞凋亡,从而发挥缓解PD小鼠运动障碍的作用。 展开更多

关键词 当归多糖 原代星形胶质细胞 凋亡 b细胞淋巴瘤(bcl)-2相关X蛋白(bax)/bcl2/胱天蛋白酶(Caspase)-3

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基于PI3K/AKT/Bcl-2信号通路探讨加味柴胡当归汤抑制肝星状细胞纤维化的机制 被引量：1

4

作者 孙素红 周晓玲 +2 位作者 李泽鹏 吴腾 孙东琪 《中国老年学杂志》 CAS 北大核心 2023年第20期5019-5023,共5页

目的探究加味柴胡当归汤对肝星状细胞纤维化的抑制作用及其通过调控磷脂酰肌醇3激酶(PI3K)/蛋白激酶B(AKT)/B细胞淋巴瘤(Bcl)-2信号通路抗肝纤维化的机制。方法培养永生化的大鼠肝星状细胞(HSC-T6),设置正常对照组(不作干预)、模型组[... 目的探究加味柴胡当归汤对肝星状细胞纤维化的抑制作用及其通过调控磷脂酰肌醇3激酶(PI3K)/蛋白激酶B(AKT)/B细胞淋巴瘤(Bcl)-2信号通路抗肝纤维化的机制。方法培养永生化的大鼠肝星状细胞(HSC-T6),设置正常对照组(不作干预)、模型组[血小板衍生生长因子(PDGF)-BB干预],中药组(PDGF-BB+含药血清干预),激动剂+中药组(PDGF-BB+HY-101625+含药血清干预),抑制剂+中药组(PDGF-BB+LY294002+含药血清干预),采取不同干预方式进行实验。使用CCK-8试剂盒和细胞凋亡试剂盒检测细胞增殖活性和凋亡水平;采用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测细胞α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、Ⅰ型胶原(COL-Ⅰ)、基质金属蛋白酶(MMP)-2、MMP-9、MMP组织抑制剂(TIMP)-1表达水平;进行Western印迹实验分析细胞中Bcl-2、Bcl-2相关X蛋白(Bax)、半胱氨酸蛋白酶(Caspase)-3、Caspase-9、哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)表达;利用qRT-聚合酶链反应(PCR)法测定细胞中PI3K、p-PI3K、AKT、p-AKT mRNA表达。结果与正常对照组相比,模型组细胞增殖活性、α-SMA、COL-Ⅰ、TIMP-1、Bcl-2表达及PI3K、AKT、mTOR磷酸化水平显著升高,凋亡率、MMP-2、MMP-9、Bax、Caspase-3和Caspase-9表达显著降低(P<0.05)。与模型组相比,中药组、激动剂+中药组、抑制剂+中药组细胞增殖活性、Bcl-2、α-SMA、COL-Ⅰ、TIMP-1表达及PI3K、AKT、mTOR磷酸化水平明显降低,凋亡率、MMP-2、MMP-9、Bax、Caspase-3和Caspase-9表达水平明显升高(P<0.05)。结论加味柴胡当归汤可通过调控PI3K/AKT/Bcl-2信号通路,抑制肝星状细胞活化,逆转肝纤维化进程。 展开更多

关键词 加味柴胡当归汤 肝星状细胞 肝纤维化 磷脂酰肌醇3激酶(PI3K)/蛋白激酶b(AKT)/b细胞淋巴瘤(bcl)-2信号通路 细胞外基质

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miR-133b、Bcl-w在老年食管鳞癌中表达及相关机制

5

作者 张帅 葛晓晴 +2 位作者 张进 侯露 杨鲲鹏 《中国老年学杂志》 CAS 北大核心 2023年第20期5064-5067,共4页

目的探讨microRNA(miR)-133b、B细胞淋巴瘤(Bcl)-w在老年食管鳞状细胞癌中的表达及对食管鳞状细胞癌细胞的影响。方法使用实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)检测30例老年患者食管鳞状细胞癌组织及其对应癌旁组织中miR-133b及Bcl-w mRN... 目的探讨microRNA(miR)-133b、B细胞淋巴瘤(Bcl)-w在老年食管鳞状细胞癌中的表达及对食管鳞状细胞癌细胞的影响。方法使用实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)检测30例老年患者食管鳞状细胞癌组织及其对应癌旁组织中miR-133b及Bcl-w mRNA表达。将miR-133b mimics及阴性对照转染至食管鳞状细胞癌ECA109细胞株,检测转染效率。检测转染后ECA109细胞的增殖和凋亡情况,使用TargetScan和miRDB软件预测miR-133b的靶基因,并通过双荧光素酶报告实验方法验证,Western印迹检测靶基因Bcl-w蛋白表达。结果食管鳞状细胞癌中miR-133b mRNA表达量明显低于癌旁组织(P<0.001),而食管鳞状细胞癌中Bcl-w蛋白表达量明显高于癌旁组织(P<0.001),miR-133b与Bcl-w表达呈负相关(r=-0.792,P<0.01)。miR-133b mimics转染能明显上调ECA109细胞中的miR-133b水平,并明显降低其增殖能力,明显促进其凋亡(P<0.001)。miR-133b与Bcl-w存在靶向调控关系,过表达miR-133b可明显下调Bcl-w蛋白表达水平(P<0.05)。结论miR-133b可能通过靶向下调Bcl-w基因的表达抑制食管鳞状细胞癌细胞的增殖并促进其凋亡。 展开更多

关键词 miR-133b b细胞淋巴瘤(bcl)-w 食管鳞状细胞癌

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养阴化瘀解毒方促进结肠癌HCT116细胞凋亡的实验研究 被引量：2

6

作者 朱静 严小军 +2 位作者 刘红宁 叶依殷 尚广彬 《生命科学研究》 CAS CSCD 2020年第5期376-381,共6页

为了探讨养阴化瘀解毒方(Yangyin Huayu Jiedu Decoction,YYHYJDD)含药血清对结肠癌细胞凋亡的影响,取对数生长期的HCT116细胞并将其分为正常组、空白血清对照组以及YYHYJDD含药血清低、中、高剂量组(体积分数为5%、10%、20%),细胞分别... 为了探讨养阴化瘀解毒方(Yangyin Huayu Jiedu Decoction,YYHYJDD)含药血清对结肠癌细胞凋亡的影响,取对数生长期的HCT116细胞并将其分为正常组、空白血清对照组以及YYHYJDD含药血清低、中、高剂量组(体积分数为5%、10%、20%),细胞分别经24 h、48 h、72 h和96 h处理后用MTS试剂盒检测其增殖情况;以处理48 h的含药血清干预细胞为研究对象,采用AOEB染色法观察细胞的凋亡情况,采用Annexin V-FITC/PI双染检测细胞的凋亡率,同时通过Western-blot检测B细胞淋巴瘤2(B cell lymphoma 2,Bcl-2)、B细胞淋巴瘤2相关X蛋白(Bcl-2-associated X protein,Bax)的表达。结果显示:与空白血清对照组相比,YYHYJDD含药血清低、中、高剂量组从48 h开始抑制细胞活性,细胞出现凋亡现象,细胞凋亡率明显升高;高剂量组下调Bcl-2蛋白的表达,中、高剂量组上调Bax蛋白的表达,中、高剂量组Bcl-2/Bax的比值明显下调。实验结果初步表明YYHYJDD含药血清可促进结肠癌HCT116细胞凋亡,其机制可能与其影响Bcl-2和Bax的表达相关。 展开更多

关键词 养阴化瘀解毒方(YYHYJDD) 结肠癌 细胞凋亡 b细胞淋巴瘤2(bcl-2) b细胞淋巴瘤2相关X蛋白(bax)

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对叶百部总生物碱对人肝癌SMMC-7721细胞凋亡及Bcl-2,Bax和cleaved Caspase-3蛋白表达的影响 被引量：24

7

作者 林思 朱华 +3 位作者 秦慧真 王孝勋 许立拔 邓玲玉 《中国实验方剂学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2021年第19期73-79,共7页

目的:研究对叶百部总生物碱对人肝癌SMMC-7721细胞凋亡及B细胞淋巴瘤-2(Bcl-2),Bcl-2相关X蛋白(Bax和切割型半胱氨酸天冬氨酸蛋白水解酶-3(cleaved Caspase-3)蛋白表达的影响。方法:选择人肝癌SMMC-7721细胞,常规培养及传代,对叶百部总... 目的:研究对叶百部总生物碱对人肝癌SMMC-7721细胞凋亡及B细胞淋巴瘤-2(Bcl-2),Bcl-2相关X蛋白(Bax和切割型半胱氨酸天冬氨酸蛋白水解酶-3(cleaved Caspase-3)蛋白表达的影响。方法:选择人肝癌SMMC-7721细胞,常规培养及传代,对叶百部总生物碱设置添加干预的质量浓度为50,75,112,167,250 mg·L^(-1),另设置仅添加10%胎牛血清作为空白组。采用噻唑蓝(MTT)比色法和细胞克隆实验观察细胞增殖的作用,Hoechst 33258染色法观察细胞凋亡,蛋白免疫印迹法(Western blot)检测3种凋亡相关蛋白Bcl-2,Bax和cleaved Caspase-3的表达。结果:对叶百部总生物碱可抑制SMMC-7721细胞增殖,与空白组比较,细胞增殖抑制率显著升高(P<0.01),作用24,48,72 h的50%细胞抑制浓度(IC_(50))分别为(173.36±8.75),(112.14±16.50),(96.41±2.60)mg·L^(-1),细胞集落形成抑制率显著升高(P<0.01),存在浓度依赖性。与空白组比较,对叶百部总生物碱可促进细胞凋亡,SMMC-7721细胞凋亡数目和凋亡率显著增加(P<0.01),在荧光正置显微镜下可观察到典型细胞凋亡形态,如亮蓝色细胞核染色,细胞质浓缩和细胞核固缩等。与空白组比较,抑凋亡蛋白Bcl-2表达显著下调(P<0.01);与空白组比较,对叶百部总生物碱75,112,167,250 mg·L^(-1)促凋亡蛋白Bax,cleaved Caspase-3蛋白表达显著上调(P<0.01)。结论:对叶百部总生物碱有很好的抑制SMMC-7721细胞增殖和促进凋亡的作用,其机制可能与抑制Bcl-2蛋白表达和促进Bax,cleaved Caspase-3蛋白表达有关。 展开更多

关键词 对叶百部总生物碱 人肝癌 SMMC-7721细胞 凋亡 b细胞淋巴瘤-2(bcl-2) bcl-2相关X蛋白(bax) 切割型半胱氨酸天冬氨酸蛋白水解酶-3(cleaved Caspase-3)

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加味四君子汤含药血清对胃癌细胞SGC-7901凋亡相关因子表达的影响 被引量：20

8

作者 聂闪闪 李洵 +1 位作者 赵玉航 王东生 《中国实验方剂学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第9期25-30,共6页

目的:研究加味四君子汤含药血清对胃癌细胞SGC-7901凋亡相关因子表达的影响,进一步探讨其具体抗肿瘤作用机制。方法:40只SD大鼠随机分为加味四君子汤低、中、高剂量组(0.213,0.426,0.853 g·kg^(-1)),空白组,每组10只,空白组给予等... 目的:研究加味四君子汤含药血清对胃癌细胞SGC-7901凋亡相关因子表达的影响,进一步探讨其具体抗肿瘤作用机制。方法:40只SD大鼠随机分为加味四君子汤低、中、高剂量组(0.213,0.426,0.853 g·kg^(-1)),空白组,每组10只,空白组给予等体积的生理盐水灌胃,各组连续灌胃10 d,末次给药1.5 h后,水合氯醛腹腔麻醉,心脏采血,分离血清,56℃灭菌,0.22μm过滤,制备加味四君子汤高、中、低剂量组含药血清,各剂量组含药血清孵育胃癌细胞SGC-7901,运用流式细胞仪检测细胞早期和晚期凋亡情况,运用实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)技术检测肿瘤抑制基因p53,c-核蛋白类基因(c-Myc),半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3(Caspase-3),凋亡相关基因B细胞淋巴瘤-2(Bcl-2)mRNA的表达,运用细胞免疫荧光技术检测p53,c-Myc,Caspase-3,Bcl-2蛋白的相对表达量情况。结果:与空白组比较,加味四君子汤含药血清高剂量组细胞凋亡比率显著升高(P<0.01),且可使胃癌细胞SGC-7901早期+晚期凋亡率达到22.58%(P<0.01)。Real-time PCR结果显示加味四君子汤中剂量组能显著促进Caspase-3 mRNA表达(P<0.01),加味四君子汤高剂量组能显著上调p53及c-Myc mRNA表达量(P<0.01),加味四君子汤高剂量组显著抑制Bcl-2 mRNA表达(P<0.01)。免疫荧光结果显示加味加味四君子汤高剂量组能使c-Myc,Caspase-3,p53蛋白表达水平显著升高(P<0.01),而Bcl-2蛋白表达水平显著降低(P<0.05)。结论:加味四君子汤含药血清能抑制抗凋亡蛋白Bcl-2的表达,促进凋亡相关分子p53,c-Myc,Caspase-3的表达,发挥抗肿瘤作用。 展开更多

关键词 加味四君子汤含药血清 胃癌细胞SGC-7901 细胞凋亡 肿瘤抑制基因P53 c-核蛋白类基因(c-Myc) 半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3(Caspase-3) 凋亡相关基因b细胞淋巴瘤-2(bcl-2)

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基于PI3K/Akt/mTOR信号通路探讨左归丸对^(60)Co-γ射线损伤大鼠卵泡凋亡调控作用 被引量：14

9

作者 赵粉琴 安明霞 +4 位作者 丁晓南 刘洁颖 赵艳 谢知慧 李淑萍 《中国实验方剂学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2022年第18期12-19,共8页

目的以磷脂酰肌醇3-激酶/蛋白激酶B/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(PI3K/Akt/mTOR)信号通路为靶点,探讨左归丸对^(60)Co-γ射线早衰大鼠的保护作用。方法采用^(60)Co-γ射线一次性照射(6.0 Gy,LD_(40))性成熟雌性SD大鼠60只,随机分成模型组、... 目的以磷脂酰肌醇3-激酶/蛋白激酶B/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(PI3K/Akt/mTOR)信号通路为靶点,探讨左归丸对^(60)Co-γ射线早衰大鼠的保护作用。方法采用^(60)Co-γ射线一次性照射(6.0 Gy,LD_(40))性成熟雌性SD大鼠60只,随机分成模型组、补佳乐组(0.18 g·kg^(-1)·d^(-1))、补佳乐(0.09 g·kg^(-1)·d^(-1))+左归丸高剂量(23.625 g·kg^(-1)·d^(-1))组、左归丸高剂量(23.625 g·kg^(-1)·d^(-1))组、左归丸中剂量(9.45 g·kg^(-1)·d^(-1))组和左归丸低剂量(4.725 g·kg^(-1)·d^(-1))组,每日1次,治疗21 d,酶联免疫吸附测定法(ELISA)检测大鼠血清[卵泡刺激素(FSH)、黄体生成素(LH)和雌二醇(E_(2))],苏木素-伊红(HE)染色观察卵巢的组织形态变化,原位末端标记法(TUNEL)检测颗粒细胞凋亡率,蛋白免疫印迹法(Western blot)检测卵巢组织磷酸化(p)-PI3K、p-Akt、p-mTOR和B细胞淋巴瘤-2(Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)的蛋白表达结果。结果与正常组比较,模型组大鼠血清FSH显著上升(P<0.01),E2明显下降(P<0.05),卵巢早期卵泡和黄体数量减少(P<0.01);颗粒细胞凋亡率显著增加(P<0.01);卵巢组织p-PI3K、p-Akt、p-mTOR和Bcl-2蛋白表达明显下降,Bax蛋白表达显著增加(P<0.01);与模型组比较,各给药组干预后卵巢内早期卵泡数量增加,颗粒细胞凋亡率降低,p-PI3K、p-Akt、p-mTOR和Bcl-2蛋白表达有增加趋势,Bax蛋白表达有下降趋势,尤以补佳乐+左归丸高剂量组差异均具有统计学意义(P<0.05,P<0.01)。结论左归丸对辐射损伤卵巢的保护作用机制可能是通过活化卵巢组织PI3K/Akt/mTOR蛋白表达,增加Bcl-2蛋白量和抑制Bax蛋白表达。 展开更多

关键词 辐射损伤 卵巢早衰(POF) 左归丸 原位末端标记法(TUNEL) 磷脂酰肌醇3-激酶/蛋白激酶b/雷帕霉素的哺乳动物靶标(PI3K/Akt/mTOR)信号通路 b细胞淋巴瘤-2(bcl-2) bcl-2相关X蛋白(bax)

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基于JAK/STAT通路研究没食子酸抗结肠癌作用机制 被引量：9

10

作者 阿丽亚·依拉木 阿布都艾则孜·艾尔肯 +2 位作者 古丽娜·卡里曼江 艾尔菲丁·阿尼娃尔 木巴拉克·伊明江 《中国实验方剂学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2022年第4期91-99,共9页

目的:探讨没食子酸(GA)对人结肠癌细胞HCT-116和Caco-2活性和细胞内Janus激酶(JAK)/信号转导与转录激活因子(STAT)信号通路,抗凋亡蛋白B细胞淋巴瘤-2(Bcl-2)和促凋亡蛋白B细胞淋巴瘤-2相关X蛋白(Bax)表达的影响讨论其作用机制。方法:设... 目的:探讨没食子酸(GA)对人结肠癌细胞HCT-116和Caco-2活性和细胞内Janus激酶(JAK)/信号转导与转录激活因子(STAT)信号通路,抗凋亡蛋白B细胞淋巴瘤-2(Bcl-2)和促凋亡蛋白B细胞淋巴瘤-2相关X蛋白(Bax)表达的影响讨论其作用机制。方法:设立GA组、空白组及5-氟尿嘧啶(5-FU,0.05 g·L^(-1))组,通过细胞增殖与活性检测-8(CCK-8)法检测GA(0.02,0.05,0.1,0.15,0.2 g·L^(-1))处理HCT-116和Caco-2细胞12,24,48,72 h增殖抑制率,选取有效抑制增殖的GA浓度;结晶紫染色法检测细胞集落形成能力;划痕实验检测细胞迁移;荧光探针法(DCFH-DA)检测细胞活性氧(ROS)水平;酶联免疫吸附测定(ELISA)试剂盒检测细胞上清液中白细胞介素-6(IL-6)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)表达;蛋白免疫印迹法(Western blot)检测JAK2,磷酸化(p)-JAK2,STAT3,p-STAT3,Bcl-2和Bax的表达变化。结果:CCK-8结果显示,与空白组比较,GA(0.02,0.05,0.1,0.15,0.2 g·L^(-1))组2种细胞在12,24,48,72 h后细胞增殖抑制率升高(P<0.05,P<0.01),并呈现浓度与时间依赖效应;与5-FU组比较,GA(0.2 g·L^(-1))组2种细胞在12,24,48,72 h后细胞增殖抑制率显著升高(P<0.01),呈现时间依赖效应。与空白组比较,两种细胞GA(0.1,0.15,0.2 g·L^(-1))组细胞集落形成数显著降低(P<0.01),细胞集落形成抑制率显著升高(P<0.01),划痕愈合率显著降低(P<0.01),细胞内ROS荧光强度显著升高(P<0.01),上清液中IL-6,TNF-α表达降低(P<0.05,P<0.01),以上均呈现浓度依赖效应;与5-FU组比较,GA(0.2 g·L^(-1))组细胞划痕愈合率显著降低(P<0.01),细胞内ROS荧光强度显著升高(P<0.01),细胞上清液中IL-6,TNF-α表达降低(P<0.05,P<0.01)。Western blot显示,与空白组比较,GA(0.1,0.15,0.2 g·L^(-1))组2种细胞内p-JAK2,p-STAT3,Bcl-2表达明显降低(P<0.01),而Bax蛋白表达增加(P<0.05,P<0.01),p-JAK2/JAK2,p-STAT3/STAT3,Bcl-2/Bax显著降低(P<0.01),以上均呈现浓度依赖效应;与5-FU组比较,GA(0.2 g·L^(-1))组2种细胞内p-JAK2, 展开更多

关键词 没食子酸 结肠癌 Janus激酶(JAK) 信号转导与转录激活因子(STAT) b细胞淋巴瘤-2(bcl-2) b细胞淋巴瘤-2相关X蛋白(bax)

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补肾活血汤对乳腺癌骨转移模型裸鼠Bax/Bcl-2及cleaved Caspase-3蛋白表达的影响 被引量：6

11

作者 朱蓉 郭雪斌 +5 位作者 杨满英 陈雪珍 胡玉蝶 杨争 袁博 胡金辉 《中国实验方剂学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2023年第8期133-141,共9页

目的:观察补肾活血汤对乳腺癌骨转移模型裸鼠细胞凋亡及B细胞淋巴瘤-2(Bcl-2)相关X蛋白(Bax)/Bcl-2及切割型胱天蛋白酶-3(cleaved Caspase-3)蛋白表达的影响,探讨其抑制骨质破坏的作用机制。方法:将30只BALB/c雌性裸鼠随机分成空白组6... 目的:观察补肾活血汤对乳腺癌骨转移模型裸鼠细胞凋亡及B细胞淋巴瘤-2(Bcl-2)相关X蛋白(Bax)/Bcl-2及切割型胱天蛋白酶-3(cleaved Caspase-3)蛋白表达的影响,探讨其抑制骨质破坏的作用机制。方法:将30只BALB/c雌性裸鼠随机分成空白组6只、造模组24只。将乳腺癌细胞株4T1经裸鼠右下肢胫骨注射构建乳腺癌骨转移模型,将成膜裸鼠随机分为模型组、补肾活血汤组、唑来膦酸组、联合用药组,每组6只。补肾活血汤组予以补肾活血汤中药灌胃36.67 g·kg^(-1),每日1次,唑来膦酸组予以皮下注射100μg·kg^(-1),每周2次,联合用药组给予相同剂量补肾活血汤组灌胃联合唑来膦酸皮下注射,正常组和模型组予以等体积蒸馏水灌胃,连续14 d,次日脊柱脱臼法处死,观察裸鼠一般情况及体质量变化,截取每组裸鼠右下肢,称重,X射线扫描及苏木素-伊红(HE)染色观察裸鼠骨组织形态学变化、原位末端标记法(TUNEL)检测裸鼠骨组织凋亡情况,蛋白免疫印迹法(Western blot)检测裸鼠骨组织中Bax/Bcl-2及cleaved Caspase-3蛋白表达情况。结果:与空白组比较,模型组第5~15天裸鼠体质量显著减轻(P<0.01),右下肢组织质量显著增加(P<0.01),与模型组比较,补肾活血汤组、唑来膦酸组、联合用药组第10~15天裸鼠体质量显著增加(P<0.01),右下肢组织质量显著降低(P<0.01)。HE染色显示与空白组比较,模型组、补肾活血汤组、唑来膦酸组、联合用药组裸鼠肿瘤细胞异型性明显,核染色深,骨转移明确。X射线扫描示与空白组比较,模型组裸鼠右下肢出现明显溶骨性破坏,胫骨近段、膝关节完整结构基本丧失,与模型组比较,补肾活血汤组、唑来膦酸组、联合用药组右下肢溶骨性病变明显减少,部分结构完整,对骨质破坏具有抑制作用。TUNEL染色显示与空白组比较,模型组骨转移瘤细胞凋亡率降低,与模型组比较,补肾活血汤组、唑来膦酸组、� 展开更多

关键词 补肾活血汤 乳腺癌骨转移 凋亡 b细胞淋巴瘤-2(bcl-2) bcl-2相关X蛋白(bax) 切割型胱天蛋白酶-3(cleaved Caspase-3)

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网络药理学预测四逆汤抗心肌缺血再灌注损伤机制及实验验证 被引量：8

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作者 赵博 屈新亮 +6 位作者 王祁 高璐 董泰玮 陈琳 卫培峰 王斌 李敏 《中国实验方剂学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2022年第9期168-175,共8页

目的:基于网络药理学预测四逆汤抗心肌缺血/再灌注损伤(MI/RI)的作用机制及验证研究。方法:通过中药系统药理学数据库与分析平台(TCMSP)数据库筛选检索四逆汤的主要成分,并通过TCMSP平台筛选潜在的成分靶点,结合人类孟德尔遗传数据库(OM... 目的:基于网络药理学预测四逆汤抗心肌缺血/再灌注损伤(MI/RI)的作用机制及验证研究。方法:通过中药系统药理学数据库与分析平台(TCMSP)数据库筛选检索四逆汤的主要成分,并通过TCMSP平台筛选潜在的成分靶点,结合人类孟德尔遗传数据库(OMIM)和GeneCards数据库获取经人工确认的四逆汤抗MI/RI的作用靶点。应用蛋白互作网络分析数据库(STRING)构建蛋白-蛋白相互作用(PPI)网络模型,应用DAVID数据库分别进行基因本体(GO)功能富集分析和京都基因和基因组百科全书(KEGG)通路富集分析,利用细胞实验进行验证,以揭示四逆汤抗MI/RI的机制。结果:从四逆汤中共筛选得到105个活性成分,234个靶点,治疗MI/RI靶点116个。GO功能富集分析得到GO条目587个,其中生物过程条目417个、细胞组成条目101个和分子功能条目69个;KEGG通路富集分析筛选出125条信号通路,主要涉及细胞内皮生长因子(VEGF)、磷脂酰肌醇3-激酶/蛋白激酶B(PI3K/Akt)、叉头框转录因子O(FoxO)、缺氧诱导因子-1(HIF-1)、细胞凋亡等信号通路。细胞存活率检测结果表明四逆汤可增加缺氧/复氧(H/R)损伤的H9C2细胞存活率;试剂盒检测结果表明四逆汤可降低H/R损伤的H9C2细胞中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-6(IL-6)、肌酸磷化酶-同工酶(CK-MB)的水平;流式细胞仪检测结果表明四逆汤可降低H/R损伤的H9C2细胞凋亡率;蛋白免疫印迹法(Western blot)结果显示四逆汤可降低H/R损伤的H9C2细胞中B细胞淋巴瘤-2(Bcl-2)相关X蛋白(Bax)的表达,增加Bcl-2的表达。结论:四逆汤抗MI/RI呈现多靶点、多通路协同作用,治疗机制可能与细胞凋亡相关信号通路有关。 展开更多

关键词 网络药理学 四逆汤 心肌缺血再灌注损伤 b细胞淋巴瘤-2(bcl-2) bcl-2相关X蛋白(bax)

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基于Bcl-2/Bax/Caspase-3信号通路探究参红通络方对心肌缺血再灌注损伤大鼠细胞凋亡的影响 被引量：2

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作者 赖颖蓉 赵倩琳 姜丽红 《中国实验方剂学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2024年第11期104-110,共7页

目的:探讨参红通络方加减对心肌缺血再灌注损伤(MI/RI)大鼠细胞凋亡的作用机制。方法:60只SD大鼠随机分为空白组、模型组、参红通络方剂低、中、高剂量组和辛伐他汀组。除空白组外,采用线栓结扎冠状动脉左前降支方式制备心肌缺血再灌注... 目的:探讨参红通络方加减对心肌缺血再灌注损伤(MI/RI)大鼠细胞凋亡的作用机制。方法:60只SD大鼠随机分为空白组、模型组、参红通络方剂低、中、高剂量组和辛伐他汀组。除空白组外,采用线栓结扎冠状动脉左前降支方式制备心肌缺血再灌注损伤大鼠模型(MI/RI模型),造模成功后第1天起,空白组(生理盐水1.0 mL·kg^(-1))、模型组(生理盐水1.0 mL·kg^(-1))、参红通络方剂低、中、高剂量组(1.031、2.063、4.126 g·kg^(-1)参红通络方标准浓缩液)和辛伐他汀组(辛伐他汀0.71 mg·kg^(-1)),定时灌胃给药,每日1次,连续2周。苏木素-伊红(HE)染色法观察心肌细胞病理形态学变化;酶联免疫吸附测定法(ELISA)检测血清肌酸激酶同工酶(CK-MB)、白细胞介素-6(IL-6)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)水平变化;原位末端转移酶标记技术(TUNEL)染色法检测大鼠心肌细胞凋亡率;蛋白免疫印迹法(Western blot)检测细胞凋亡相关蛋白B细胞淋巴瘤-2(Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)和胱天蛋白酶-3(Caspase-3)表达水平。结果:与空白组比较,模型组HE染色可见心肌细胞排列紊乱,纤维不完整,心肌细胞小灶性坏死,并伴有炎性细胞浸润;血清CK-MB、IL-6和TNF-α水平明显上升(P<0.05);心肌细胞凋亡率明显升高(P<0.05),Bax、Caspase-3蛋白表达水平则明显升高,Bcl-2明显下降(P<0.05);与模型组比较,参红通络方剂加减低、中、高剂量组可明显降低CK-MB、IL-6和TNF-α水平(P<0.05);明显下调心肌细胞凋亡率(P<0.05);Bax、Caspase-3蛋白显著降低,Bcl-2表达水平明显增加(P<0.05)。参红通络方剂加减组中Bax、Caspase-3蛋白随参红通络方给药剂量的增加而明显降低,Bcl-2表达水平随参红通络方给药剂量的增加而明显升高(P<0.05)。结论:参红通络方加减可通过减轻心肌组织病理损伤并降低心肌细胞凋亡,可能与抑制Caspase-3、Bax表达、促进Bcl-2水平表达有关。 展开更多

关键词 参红通络方 心肌缺血再灌注损伤 细胞凋亡 b细胞淋巴瘤-2(bcl-2) bcl-2相关X蛋白(bax) 胱天蛋白酶-3(Caspase-3)

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宫颈癌凋亡抑制因子表达与HPV_(16/18)感染相关性 被引量：9

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作者 穆雅琴 赵富玺 +1 位作者 郭俊成 刘润花 《中国公共卫生》 CAS CSCD 北大核心 2006年第12期1416-1418,共3页

目的研究凋亡抑制因子B细胞淋巴瘤-2(Bcl-2)和生存蛋白(Survivin)在宫颈癌组织中的表达及其与人乳头瘤病毒(HPV)感染的相关性。方法采用免疫组织化学方法,对宫颈癌、宫颈上皮内瘤样病变(CIN)和正常宫颈组织的石蜡标本进行Bcl-2和生存蛋... 目的研究凋亡抑制因子B细胞淋巴瘤-2(Bcl-2)和生存蛋白(Survivin)在宫颈癌组织中的表达及其与人乳头瘤病毒(HPV)感染的相关性。方法采用免疫组织化学方法,对宫颈癌、宫颈上皮内瘤样病变(CIN)和正常宫颈组织的石蜡标本进行Bcl-2和生存蛋白的检测,同时采用DNA缺口末端标记技术(TUNEL法)和PCR技术检测细胞凋亡指数(AI)和HPV16/18感染情况。结果宫颈癌组织、CIN和正常宫颈3种组织中,Bcl-2、生存蛋白表达阳性率和AI的差异均有统计学意义(均P<0.01),且随着临床分期病理分级的升高阳性率差异有统计学意义,其表达率与淋巴结转移有关(P<0.05)。在正常宫颈、CIN和宫颈癌中的HPV16/18阳性率逐渐升高,差异有统计学意义,但与临床分期、病理分级、淋巴转移无关。Bcl-2、生存蛋白和AI均与HPV16/18感染有相关性。结论宫颈癌组织中的Bcl-2、生存蛋白的异常表达与HPV16/18感染有关,与宫颈癌的恶变程度有关,可作为宫颈癌筛查预后判断的有利指标。 展开更多

关键词 b细胞淋巴瘤-2(bcl-2) 生存蛋白(Survivin) 细胞凋亡 人乳头瘤病毒(HPV) 宫颈癌

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葛菊护肝片调节NF-κB和Bcl-2/Bax信号通路改善酒精所致的小鼠肝脏损伤 被引量：3

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作者 王晨 宋立孝 +3 位作者 程金来 谭余庆 杨米一 赵保胜 《中国实验方剂学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2023年第18期17-25,共9页

目的:探究葛菊护肝片对酒精性肝损伤小鼠肝脏的保护作用,并基于核转录因子-κB p65(NF-κB p65)和B细胞淋巴瘤-2(Bcl-2)蛋白/Bcl-2相关X蛋白(Bax)信号通路探讨其作用机制。方法:SPF级雄性ICR小鼠60只,按体质量随机分为正常组、模型组、... 目的:探究葛菊护肝片对酒精性肝损伤小鼠肝脏的保护作用,并基于核转录因子-κB p65(NF-κB p65)和B细胞淋巴瘤-2(Bcl-2)蛋白/Bcl-2相关X蛋白(Bax)信号通路探讨其作用机制。方法:SPF级雄性ICR小鼠60只,按体质量随机分为正常组、模型组、复方益肝灵片组、葛菊护肝片低、中、高剂量组。葛菊护肝片低、中、高剂量组分别灌胃0.2、0.4、0.8 g·kg^(-1)葛菊护肝片;复方益肝灵片组灌胃剂量0.16 g·kg^(-1)的复方益肝灵片,连续28 d,每天给药1次;正常组及模型组灌胃等体积纯水。第29天除正常组外,其余各组小鼠灌胃53°白酒,灌胃2次,灌胃间隔6 h;第30天取材。苏木素-伊红(HE)染色观察肝组织病理改变;透射电镜观察肝细胞超微结构改变;酶联免疫吸附测定法(ELISA)检测肝组织丙二醛(MDA)、还原型谷胱甘肽(GSH)、甘油三酯(TG)、血清丙氨酸氨基转移酶(ALT)和天门冬氨酸氨基转移酶(AST)含量;蛋白免疫印迹法(Western blot)检测肝组织NF-κB p65、磷酸化核因子抑制蛋白α(p-IκBα)、Bcl-2、Bax蛋白表达。结果:与正常组比较,模型组血清ALT、AST含量显著升高(P<0.01),肝组织MDA、TG含量显著升高(P<0.01),GSH含量显著下降(P<0.01),肝脏HE染色、油红O和电镜肝损伤评分显著升高(P<0.01);肝组织NF-κB、p-IκBα、Bax蛋白表达量均明显升高(P<0.05,P<0.01),Bcl-2蛋白表达量明显降低(P<0.05)。与模型组比较,葛菊护肝片低、中、高剂量组血清ALT、AST含量显著下降,肝组织MDA、TG含量显著下降,GSH含量显著增加(P<0.01);葛菊护肝片中、高剂量组HE和电镜评分显著降低(P<0.01);葛菊护肝片中、高剂量组小鼠肝组织NF-κB、p-IκBα、Bax蛋白表达量显著降低(P<0.01),葛菊护肝片低、中、高剂量组Bcl-2蛋白表达量显著升高(P<0.01)。结论:葛菊护肝片对ALD小鼠肝脏有一定的保护作用,其机制可能是通过下调NF-κB信号通路减轻肝组织炎症,下调Bax蛋白表达,� 展开更多

关键词 葛根 菊花 酒精性肝损伤 核转录因子-κb信号通路 b细胞淋巴瘤-2(bcl-2) bcl-2相关X蛋白(bax)

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跑台训练联合中药松弛膏外敷对废用性肌萎缩大鼠骨骼肌细胞凋亡及IGF-1/PI3K/Akt信号通路的影响

16

作者 阿斯古丽·图尔荪 束娇娇 +4 位作者 努尔比亚·克其克 夏热帕·阿不都拉 杨芮琦 哈丽米热·阿卜杜吉力力 帕丽达·买买提 《中华物理医学与康复杂志》 CAS CSCD 北大核心 2024年第8期692-698,共7页

目的观察跑台训练联合中药松弛膏外敷对废用性肌萎缩(DMA)大鼠骨骼肌细胞凋亡及胰岛素样生长因子-1(IGF-1)/磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)/蛋白激酶B(Akt)信号通路的影响。方法选取8周龄雄性Wistar大鼠46只, 取8只大鼠纳入健康对照组(健康组),... 目的观察跑台训练联合中药松弛膏外敷对废用性肌萎缩(DMA)大鼠骨骼肌细胞凋亡及胰岛素样生长因子-1(IGF-1)/磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)/蛋白激酶B(Akt)信号通路的影响。方法选取8周龄雄性Wistar大鼠46只, 取8只大鼠纳入健康对照组(健康组), 余38只大鼠则制成左后肢废用性肌萎缩模型。于造模3周后采用随机数字表法将制模成功的32只大鼠分为模型对照组(模型组)、跑台训练组(跑台组)、中药松弛膏组(中药组)及跑台训练联合中药松弛膏组(联合组), 每组8只大鼠。跑台组大鼠给予跑台训练, 中药组大鼠则于患肢局部涂抹中药松弛膏, 联合组大鼠给予跑台训练及中药松弛膏患肢局部涂抹。于6周干预结束后采用原位末端标记法(TUNEL)检测各组大鼠骨骼肌细胞凋亡情况;采用蛋白免疫印迹法(Western blot)检测各组大鼠骨骼肌中IGF-1、磷酸化PI3K(p-PI3K)、磷酸化Akt(p-Akt)、B细胞淋巴瘤-2(Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)等因子表达水平。结果通过TUNEL染色发现, 跑台组、中药组、联合组骨骼肌凋亡细胞数量均较模型组明显减少(P<0.05);联合组凋亡细胞数量亦显著低于跑台组及中药组水平(P<0.05)。通过Western blot检测发现, 模型组Bcl-2蛋白表达较健康组显著降低, Bax蛋白表达则显著增高(P<0.01);与模型组比较, 中药组及联合组Bcl-2蛋白表达均显著增高(P<0.01), Bax蛋白表达则显著降低(P<0.01);另外联合组Bcl-2蛋白表达均明显高于中药组及跑台组水平, Bax蛋白表达则显著低于中药组及跑台组水平(P<0.05)。与模型组比较, 中药组、联合组IGF-1、p-PI3K及p-Akt蛋白表达均显著升高(P<0.01);联合组IGF-1、p-PI3K、p-Akt蛋白表达亦较跑台组及中药组显著增高(P<0.01)。结论跑台训练联合中药松弛膏外敷能抑制DMA大鼠骨骼肌细胞凋亡, 其作用机制可能与激活IGF-1/PI3K/Akt信号通路, 继而上调抑凋亡蛋白Bcl-2含量, 下调促凋亡 展开更多

关键词 废用性肌萎缩 IGF-1/PI3K/Akt信号通路 细胞凋亡 b细胞淋巴瘤-2(bcl-2) bcl-2相关X蛋白(bax)

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五子衍宗丸中所含药物盐制后组方对大鼠生精细胞凋亡的影响 被引量：5

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作者 廖宇娇 张希 +3 位作者 敖明月 胡昌江 陈志敏 许润春 《中国实验方剂学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2021年第10期1-7,共7页

目的:观察由不同炮制品组方的五子衍宗丸对肾精亏虚大鼠生精细胞凋亡的影响,探讨其对生精细胞的保护作用。方法:将SD大鼠随机分成空白组、模型组、全生品组、药典组、盐制组,每组8只。通过给予雷公藤多苷片复制肾精亏虚模型(剂量20 mg&#... 目的:观察由不同炮制品组方的五子衍宗丸对肾精亏虚大鼠生精细胞凋亡的影响,探讨其对生精细胞的保护作用。方法:将SD大鼠随机分成空白组、模型组、全生品组、药典组、盐制组,每组8只。通过给予雷公藤多苷片复制肾精亏虚模型(剂量20 mg·kg^(-1)),利用流式细胞术(FCM)分析睾丸中生精细胞凋亡情况,运用免疫组化(IHC)和蛋白免疫印迹法(Western blot)检测睾丸中B细胞淋巴瘤-2(Bcl-2)和Bcl-2相关X蛋白(Bax)的表达水平。采用高效液相色谱法(HPLC)比较由不同炮制品组方的五子衍宗丸中8个成分(绿原酸、鞣花酸、金丝桃苷、异槲皮苷、毛蕊花糖苷、紫云英苷、山柰酚、五味子醇甲)的含量,流动相乙腈(A)-0.4%磷酸水溶液(B)梯度洗脱(0~5 min,5%~15%A;5~10 min,15%~17%A;10~25 min,17%A;25~35 min,17%~26%A,35~60 min,26%~56%A),检测波长254 nm。结果:与模型组比较,各给药组对生精细胞总凋亡率,Bcl-2和Bax表达均有改善作用,且药典组与盐制组有显著作用(P<0.01);同时,药典组与盐制组的改善作用明显优于全生品组(P<0.05)。药物炮制后组方的五子衍宗丸中绿原酸、金丝桃苷、异槲皮苷、毛蕊花糖苷含量增加;盐制组鞣花酸含量增加,但药典组鞣花酸含量减少;盐制组样品中毛蕊花糖苷、紫云英苷、山柰酚、五味子醇甲的含量高于药典组样品。结论:五子衍宗丸可能通过抑制Bax和促进Bcl-2的蛋白表达来减少大鼠睾丸中生精细胞的凋亡,发挥其补肾益精作用;组方药物炮制后抗生精细胞凋亡作用增强可能与炮制后化学成分含量的变化有关。 展开更多

关键词 五子衍宗丸 盐制 肾精亏虚 生精细胞凋亡 b细胞淋巴瘤-2(bcl-2) bcl-2相关X蛋白(bax) 化学成分

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丹酚酸F调控Bax/Caspase-3/GSDME信号通路改善肾小管上皮细胞焦亡作用机制

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作者 石贤聪 谢治深 +6 位作者 赵靓 王佳俊 段亚飞 王潘 张振强 张效威 徐江雁 《中国实验方剂学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2024年第9期56-64,共9页

目的:基于B细胞淋巴瘤-2(Bcl-2)相关X蛋白(Bax)/胱天蛋白酶-3(Caspase-3)/消皮素E(GSDME)通路探讨丹酚酸F改善高糖诱导的肾小管上皮细胞(HK-2)损伤的机制。方法:细胞增殖与活性检测(CCK-8)法检测不同浓度(2.5、5、10、20μmol·L^(-... 目的:基于B细胞淋巴瘤-2(Bcl-2)相关X蛋白(Bax)/胱天蛋白酶-3(Caspase-3)/消皮素E(GSDME)通路探讨丹酚酸F改善高糖诱导的肾小管上皮细胞(HK-2)损伤的机制。方法:细胞增殖与活性检测(CCK-8)法检测不同浓度(2.5、5、10、20μmol·L^(-1))丹酚酸F对高糖诱导的HK-2细胞相对活力的影响及给予丹酚酸F不同干预时间条件下HK-2细胞的相对活力;乳酸脱氢酶(LDH)试剂盒和酶联免疫吸附测定法(ELISA)试剂盒分别检测细胞培养基上清中LDH和白细胞介素-1β(IL-1β)的含量;流式细胞术结合异硫氰酸荧光素(Annexin V-FITC)/碘化丙啶(PI)和Hoechst 33342/PI染色检测丹酚酸F对高糖诱导的HK-2细胞PI阳性率的影响;蛋白免疫印迹法(Western blot)评价丹酚酸F对高糖诱导的HK-2细胞中Bax、Bcl-2、细胞色素C(Cyt C)、胱天蛋白酶-9(Caspase-9)、Caspase-3、GSDME蛋白表达及激活情况的影响。2,7-二氯二氢荧光素二乙酸酯荧光探针法(DCFH-DA)及线粒体膜电位(JC-1)考察丹酚酸F对高糖诱导的HK-2细胞中活性氧(ROS)产生及线粒体膜电位的影响。结果:与空白组比较,模型组细胞活力显著降低(P<0.01),乳酸脱氢酶、炎症因子IL-1β、PI阳性细胞比例均显著升高(P<0.01);Bax、Cyt C、Caspase-9、Caspase-3、GSDME蛋白表达显著升高(P<0.01),Bcl-2蛋白表达显著降低(P<0.01),HK-2细胞线粒体膜电位的降低,ROS产生过量蓄积。与模型组比较,丹酚酸F组有效改善高糖诱导所致HK-2细胞的损伤(P<0.05),明显降低细胞培养基上清中LDH及IL-1β含量(P<0.05,P<0.01),显著减少PI阳性细胞的比例(P<0.01);丹酚酸F组降低Bax、Cyt C、Caspase-9、Caspase-3、GSDME蛋白表达,明显升高Bcl-2蛋白表达(P<0.05,P<0.01),HK-2细胞线粒体膜电位的升高,ROS的过量蓄积减少。结论:丹酚酸F通过减少ROS的产生,改善线粒体膜电位失衡,抑制Bax/Caspase-3/GSDME信号通路介导的细胞焦亡发挥改善高糖诱导所致HK-2细胞损伤的作用。 展开更多

关键词 丹酚酸F b细胞淋巴瘤-2(bcl-2)相关X蛋白(bax)/胱天蛋白酶-3(Caspase-3)/消皮素E(GSDME)信号通路 肾小管上皮细胞 细胞焦亡

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B细胞淋巴瘤-2家族蛋白与细胞凋亡 被引量：5

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作者 卢玉婷 李月红 +1 位作者 吉尚雷 陈崇洲 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2014年第1期123-126,共4页

细胞凋亡是由多基因控制的细胞自主有序的死亡,以维持内环境稳定。其在多细胞生物的组织分化、器官发育、机体稳态的维持中有重要意义。细胞凋亡可促进因感染、损伤所致的细胞死亡并被机体清除,临床上细胞凋亡与许多疾病有直接关系。B... 细胞凋亡是由多基因控制的细胞自主有序的死亡,以维持内环境稳定。其在多细胞生物的组织分化、器官发育、机体稳态的维持中有重要意义。细胞凋亡可促进因感染、损伤所致的细胞死亡并被机体清除,临床上细胞凋亡与许多疾病有直接关系。B细胞淋巴瘤-2(Bcl-2)家族蛋白是参与细胞凋亡的重要调节分子,既可抑制也可促进细胞凋亡。作者概述了Bcl-2蛋白家族成员、结构特点、Bcl-2蛋白家族与细胞凋亡的关系及生物学意义。 展开更多

关键词 b细胞淋巴瘤-2(bcl-2) 细胞凋亡 调控

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基于Bcl-2/Bax信号通路探讨湿生扁蕾乙酸乙酯提取物治疗溃疡性结肠炎作用机制

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作者 柳娜 王嘉鸣 +1 位作者 徐婕 景明 《中国实验方剂学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2023年第19期116-125,共10页

目目的的:探讨藏族医药湿生扁蕾乙酸乙酯提取物通过B细胞淋巴瘤-2(Bcl-2)与Bcl-2相关X蛋白(Bax)介导的凋亡通路防治复发型大鼠大肠湿热型溃疡性结肠炎(UC)的作用机制。方法:采用“病证结合”法构建复发型大鼠大肠湿热UC模型,将70只SPF... 目目的的:探讨藏族医药湿生扁蕾乙酸乙酯提取物通过B细胞淋巴瘤-2(Bcl-2)与Bcl-2相关X蛋白(Bax)介导的凋亡通路防治复发型大鼠大肠湿热型溃疡性结肠炎(UC)的作用机制。方法:采用“病证结合”法构建复发型大鼠大肠湿热UC模型,将70只SPF级SD雄性大鼠随机分为空白组、模型组、湿生扁蕾乙酸乙酯提取物高、中、低剂量组(150、75、37.5 mg·kg^(-1))及美沙拉嗪组(135 mg·kg^(-1)),连续灌胃给药14 d,记录大鼠一般状态,观察大鼠结肠长度及肠黏膜损伤情况,测定结肠湿质量指数,计算肝脏、脾脏、胸腺脏器系数。酶联免疫吸附测定法(ELISA)检测各组大鼠血清中白细胞介素-6(IL-6)和白细胞介素-1β(IL-1β)的水平,苏木素-伊红(HE)染色观察结肠病理变化,原位末端标记法(TUNEL)检测结肠上皮细胞的凋亡情况,蛋白免疫印迹法(Western blot)检测结肠组织中Bcl-2、Bax、胱天蛋白酶-3(Caspase-3)、胱天蛋白酶-9(Caspase-9)、闭锁连接蛋白-1(ZO-1)、紧密连接蛋白3(Claudin3)、闭合蛋白(Occludin)的表达,免疫组化法(IHC)观察结肠上皮细胞中Bax、Caspase-3的表达。结果:与空白组比较,模型组大鼠疾病活动指数(DAI)评分、结肠黏膜损伤指数(CMDI)、肠上皮凋亡、肝脏、脾脏指数及血清中炎症因子IL-1β和IL-6水平均显著升高(P<0.01),肠黏膜保护蛋白ZO-1、Claudin3、Occludin表达显著降低(P<0.01),促凋亡蛋白Bax、Caspase-3、Caspase-9表达显著升高(P<0.01),抑制凋亡蛋白Bcl-2表达显著降低(P<0.01);与模型组比较,湿生扁蕾乙酸乙酯提取物高、中、低剂量均能够显著改善大鼠的一般状态,减轻结肠病变,降低肠上皮细胞凋亡、肝脏、脾脏指数,上调ZO-1、Claudin3、Occludin及Bcl-2蛋白表达,下调Bax、Caspase-3、Caspase-9蛋白表达,以湿生扁蕾高、中剂量效果明显(P<0.05,P<0.01)。结论:湿生扁蕾乙酸乙酯提取物能够通过调节Bcl-2/Bax信号通路,减轻肠黏膜损伤,发 展开更多

关键词 b细胞淋巴瘤-2(bcl-2)/bcl-2相关X蛋白(bax)信号通路 湿生扁蕾 溃疡性结肠炎 大鼠 大肠湿热型

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