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新型结核病疫苗菌株在小鼠体内的毒性及安全性研究 被引量:6
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作者 梁粟 吴芳 +7 位作者 程青虹 李建华 吴江东 章乐 柳小玲 张培培 王君 张万江 《中国病原生物学杂志》 CSCD 北大核心 2016年第3期193-199,214,共8页
目的观察由卡介苗(简称BCG)和结核分枝杆菌国际标准无毒株H37Ra(简称H37Ra菌株)为亲本菌株构建的融合菌株(简称B/R菌株)接种C57BL/6小鼠后在小鼠体内的毒性及其安全性。方法将204只C57BL/6小鼠随机分为生理盐水组(36只)、BCG组(56只)、... 目的观察由卡介苗(简称BCG)和结核分枝杆菌国际标准无毒株H37Ra(简称H37Ra菌株)为亲本菌株构建的融合菌株(简称B/R菌株)接种C57BL/6小鼠后在小鼠体内的毒性及其安全性。方法将204只C57BL/6小鼠随机分为生理盐水组(36只)、BCG组(56只)、B/R组(56只)和H37Ra组(56只);分别皮内接种无菌生理盐水、BCG菌悬液、B/R菌株菌悬液、H37Ra菌株菌悬液0.1ml(含活菌数为1.0×106个),观察各组小鼠生存基本情况并记录接种后第3、6、9、12、15、18周小鼠体重;分别于接种后第2、3、6、9、12周取BCG组、B/R组、H37Ra组小鼠各4只,处死后摘取小鼠完整肺脏和脾脏称重后分别制成脏器组织匀浆,接种于罗氏培养基培养20d,计数各脏器菌落数(CFU);分别于接种后第3、6、9、12、15、18周,四组分别随机各取6只小鼠,脱颈处死后称取体重,摘取小鼠肺脏及脾脏在组织固定液中固定(固定前脾脏称重),48h后制作病理切片,HE染色后观察小鼠肺脏、脾脏的病理变化,并计算各组小鼠各时间点的脾脏系数。结果 (1)4组小鼠接种后一般生存状态良好,接种部位未出现明显溃疡、脓疱等。从接种后第1d^18周各组小鼠均无死亡,生存率为100%。接种后第3周、6周,四组之间小鼠体重相比差异无统计学意义(P>0.05),接种后第9周、15周,H37Ra组小鼠体重低于生理盐水组(P<0.05),接种后第12周,BCG组小鼠体重低于生理盐水组(P<0.05),接种后第18周,H37Ra组小鼠体重分别与生理盐水组、BCG组、B/R组相比均降低(P<0.05);(2)接种后第2周、3周、6周时小鼠脾脏定植细菌数(Log10cfu),H37Ra组、B/R组均较BCG组升高(P<0.05);B/R组与H37Ra组比较差异无统计学意义(P>0.05)。接种后第9周小鼠脾脏定植菌数(Log10cfu),H37Ra组较BCG组升高(P<0.05),B/R组分别与H37Ra组、BCG组相比差异无统计学意义(P>0.05)。接种后第12周小鼠脾脏定植细菌数(Log10cfu),H37Ra组、B/R组均较BCG组升高(P<0.05),B/R组� 展开更多
关键词 b/r菌株 bCG H37rA 毒性 结核分枝杆菌
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新型结核病疫苗融合菌株制备及其免疫学特性的研究 被引量:6
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作者 柳小玲 吴芳 +5 位作者 吴江东 章乐 王君 梁粟 张培培 张万江 《中国病原生物学杂志》 CSCD 北大核心 2016年第1期21-24,共4页
目的观察由卡介苗(BCG)与结核分枝杆菌国际标准弱毒株H37Ra(H37Ra菌株)构建的融合菌株(B/R菌株)生长特性及其在免疫小鼠体内的生长情况。方法分别测定用7H9培养基培养3、6、9、12、15、18、21、24、27和30d的B/R菌株、BCG和H37Ra菌液在... 目的观察由卡介苗(BCG)与结核分枝杆菌国际标准弱毒株H37Ra(H37Ra菌株)构建的融合菌株(B/R菌株)生长特性及其在免疫小鼠体内的生长情况。方法分别测定用7H9培养基培养3、6、9、12、15、18、21、24、27和30d的B/R菌株、BCG和H37Ra菌液在波长600nm处的A值,以时间为横坐标,A600值为纵坐标,绘制细菌生长曲线。将C57BL/6小鼠随机分为B/R菌株、BCG和H37Ra菌株3组,每组30只,分别皮下接种B/R、BCG和H37Ra菌液0.1ml(含活菌数为1.0×106个),免疫15、30、45、60和75d后无菌条件下取小鼠肝脏、脾脏和肺脏,制成脏器组织匀浆,接种罗氏固体培养基斜面,培养20d后计数各脏器菌落数(Log10cfu)。结果细菌生长曲线显示,B/R菌株的适应调整期较长,6d后进入生长对数期,27d后进入稳定期,生长周期约30d左右。免疫15、30、45、60和75d小鼠肝脏、脾脏、肺脏定植细菌数(Log10cfu)B/R菌株组高于BCG和H37Ra菌株组。小鼠肝脏定植细菌数(Log10cfu)B/R菌株组与BCG和H37Ra菌株组比较差异无统计学意义(P>0.05);免疫15、60及75d小鼠脾脏定植细菌数(Log 10cfu)B/R菌株组与BCG和H37Ra菌株组比较差异有统计学意义(P<0.05),免疫30和45d小鼠脾脏定植细菌数(Log10cfu)B/R菌株组与BCG组比较差异有统计学意义(P<0.05),与H37Ra菌株组比较差异无统计学意义(P>0.05);免疫15和45d小鼠肺脏定植的细菌数(Log10cfu)B/R菌株组与BCG和H37Ra菌株组比较差异有统计学意义(P<0.05),免疫30、60和75d小鼠肺脏定植细菌数(Log10cfu)B/R菌株组与BCG组比较差异有统计学意义(P<0.05),与H37Ra菌株组比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论 B/R菌株的生长周期为30d,在小鼠体内至少存活2个月,定植能力较强。 展开更多
关键词 b/r菌株 bCG H37rA 定植性 生长特性
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