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禽流感病毒重组核蛋白ELISA诊断技术的研究 被引量:56
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作者 李海燕 于康震 +1 位作者 辛晓光 邓国华 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 2000年第3期182-185,共4页
用表达禽流感病毒 (AIV)核蛋白基因的杆状病毒感染Sf9昆虫细胞 ,以其表达产物制备抗原 ,建立了以杆状病毒系统表达的AIV核蛋白为抗原的禽流感间接酶联免疫吸附试验诊断技术 (rNP_ELISA)。其抗原最适包被量为 0 .6 μg/孔 ,待检血清最适... 用表达禽流感病毒 (AIV)核蛋白基因的杆状病毒感染Sf9昆虫细胞 ,以其表达产物制备抗原 ,建立了以杆状病毒系统表达的AIV核蛋白为抗原的禽流感间接酶联免疫吸附试验诊断技术 (rNP_ELISA)。其抗原最适包被量为 0 .6 μg/孔 ,待检血清最适稀释度为 1:2 0 0 ,酶标抗体使用浓度为 1:10 0 0。根据对 140份SPF鸡血清检测结果的统计分析 ,确定其判定标准为OD值大于 0 .15的血清样品为阳性。用rNP_ELISA检测 15 0份SPF鸡血清、194份非免疫鸡血清及 30份其它 15种鸡疫病阳性血清均为阴性 ;检测A型AIV15个不同亚型 (H1~H15 )毒株的特异性血清均为阳性 ;对人工接种AIV的SPF鸡第 3天即能检出抗体 ,到第 16 2天试验结束时检测仍为阳性。其批内和批间重复试验的变异系数分别在 2 .9%~ 7.2 %和 3 .4%~ 9.8%之间。对3138份鸡血清进行监测 ,rNP_ELISA与全病毒间接ELISA(AIV_ELISA)、琼脂扩散试验 (AGP)及血凝抑制试验 (HI)的符合率分别为 99.9%、97.1%、98.8% ;并能 10 0 %检出AGP阳性及疑似、HI阳性的血清样品。试验证明 ,rNP_ELISA是检测A型禽流感病毒血清特异性抗体的一种特异、敏感、微量、快速。 展开更多
关键词 禽流感 重组核蛋白 ELISA 抗体检测 诊断 AIV
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禽流感油乳剂灭活疫苗的研究 被引量:46
2
作者 唐秀英 田国斌 +1 位作者 于康震 冯菊艳 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 1999年第6期401-405,共5页
将6种不同亚型的禽流感病毒(AIVH2N9、H3N8、H5N1、H5N2、H7N1、H9N2)分别接种鸡胚,收获尿囊液,经甲醛灭活,以矿物油为佐剂制成油乳剂灭活疫苗。疫苗接种4和8周龄SPF鸡,注苗后均无不良反应。每种亚型疫苗免疫后14天和21天攻毒保... 将6种不同亚型的禽流感病毒(AIVH2N9、H3N8、H5N1、H5N2、H7N1、H9N2)分别接种鸡胚,收获尿囊液,经甲醛灭活,以矿物油为佐剂制成油乳剂灭活疫苗。疫苗接种4和8周龄SPF鸡,注苗后均无不良反应。每种亚型疫苗免疫后14天和21天攻毒保护率均达90%-100%。分别用H5N1和H9N2亚型灭活疫苗免疫8周龄SPF鸡、25和28周龄健康商品蛋鸡,免疫后7天产生免疫力,14天保护率达100%,21天后抗体达高峰,仔鸡接苗后最高血凝抑制(HI)几何平均滴度(GMT)为7.3-8.0log2,蛋鸡为8.0-10.5log2。免疫后180天,抗体效价不低于6.5log2。免疫后180天分别以AIV攻击,H5亚型疫苗组,用强毒攻击无一发病和死亡,对照鸡全部发病死亡;H9亚型疫苗组,对照鸡在攻毒后72小时停产,免疫鸡无一发病且产蛋正常,对同源攻毒的保护率达100%。 展开更多
关键词 禽流感 灭活疫苗 免疫 油乳剂
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我国禽流感研究进展及成就 被引量:63
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作者 张毅 王幼明 +4 位作者 王芳 王静静 毕玉海 尹燕博 丁家波 《微生物学通报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第3期497-503,共7页
禽流感不仅严重危害养禽业,而且给公共卫生造成巨大威胁。为了科学认识和积极防控禽流感,我国科学家进行了大量且富有成效的研究,取得了举世瞩目的成果。通过长期的监测,基本掌握了禽流感在我国的流行情况和进化规律;利用反向遗传操作... 禽流感不仅严重危害养禽业,而且给公共卫生造成巨大威胁。为了科学认识和积极防控禽流感,我国科学家进行了大量且富有成效的研究,取得了举世瞩目的成果。通过长期的监测,基本掌握了禽流感在我国的流行情况和进化规律;利用反向遗传操作技术和蛋白质组学技术,发现了影响流感病毒致病力、传播力和受体结合能力的部分关键位点,阐释了其作用机制;通过对传统技术的改进和先进方法的应用,不断成功建立禽流感诊断、检测技术;新型禽流感疫苗不断涌现并逐步被推广和应用,取得了良好的免疫效果。上述成果为我国禽流感的防控奠定了良好的基础,也为后续研究提供了依据。但是禽流感的防控形势依然严峻,2013年新型H7N9病毒的出现,使禽流感的防控面临新的挑战。 展开更多
关键词 禽流感 研究进展 致病机制
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禽流感A/鸡/北京/1/96(H9N2)株核蛋白基因克隆和序列分析 被引量:29
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作者 陈福勇 夏春 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 1999年第2期130-133,共4页
本研究采用PT-PCR法从禽流感A/鸡/北京/1/96(H9N2)株克隆了核蛋白(NP)基因。NP基因全长1497bp,编码498个氨基酸。将其序列与数株A型流感病毒NP序列进行比较,相互间同源性在96.6%~95.... 本研究采用PT-PCR法从禽流感A/鸡/北京/1/96(H9N2)株克隆了核蛋白(NP)基因。NP基因全长1497bp,编码498个氨基酸。将其序列与数株A型流感病毒NP序列进行比较,相互间同源性在96.6%~95.4%。 展开更多
关键词 流感 核蛋白 基因克隆
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中国大陆首例人感染禽流感病毒(H5N1)的调查与确认 被引量:59
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作者 余宏杰 陈裕旭 +19 位作者 舒跃龙 李俊华 高占成 胡世雄 董捷 张红 向妮娟 张烨 胡英惠 徐翠玲 高立冬 王敏 李中杰 周蕾 刘志涛 李德新 王茂武 王子军 王宇 杨维中 《中华流行病学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2006年第4期281-287,共7页
目的确认2005年10月湖南省湘潭县发生的一起家庭聚集性(姐弟二人)不明原因肺炎病例的病因。方法访谈病例发病前后的相关知情人,重现病家暴露环境及发病时间序列,查阅临床病志,对病例和病死禽的密切接触者进行医学观察。采集病例咽拭子,... 目的确认2005年10月湖南省湘潭县发生的一起家庭聚集性(姐弟二人)不明原因肺炎病例的病因。方法访谈病例发病前后的相关知情人,重现病家暴露环境及发病时间序列,查阅临床病志,对病例和病死禽的密切接触者进行医学观察。采集病例咽拭子,应用逆转录-聚合酶链反应 (RT-PCR)和实时荧光定量PCR法,检测A/H5N1亚型特异的核酸片段,接种SPF鸡胚进行病毒分离。应用马血球血凝抑制试验和微量中和试验检测患者急性期和恢复期血清抗A/H5特异性抗体滴度。结果姐(病例1)弟(病例2)二人分别在其家鸡开始死亡2天和4天后出现发热和肺炎症状,病例1死于急性呼吸窘迫综合征和多器官功能衰竭,病例2痊愈。病例1病后第8天的血清A/H5抗体阴性,病例2急性期和恢复期血清抗体滴度呈4倍以上升高。192名密切接触者中,仅1名(接诊过病例1的医生)出现上呼吸道症状,但血清标本经微量中和试验阴性。结论病例2为中国大陆第一例感染禽流感病毒(H5N1)的确诊病例,病例1为临床诊断病例。二者发病最可能是感染了相同家庭环境中病死禽传播的H5N1病毒,调查中未发现两病例之间有互相传播的证据。 展开更多
关键词 禽流感 H5N1 家庭聚集性
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禽流感抗体斑点-ELISA诊断技术的研究 被引量:34
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作者 李海燕 辛晓光 +2 位作者 田国斌 张晶 于康震 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 1999年第5期321-324,共4页
以混合纤维素酯微孔滤膜为固相载体,用自制的禽流感全病毒抗原和酶标抗体,建立了禽流感抗体斑点 E L I S A 检测法,其抗原最适包被量为 0.06μg/点;血清抗体最佳稀释度为 1100;酶标抗体作 1200 稀释;出... 以混合纤维素酯微孔滤膜为固相载体,用自制的禽流感全病毒抗原和酶标抗体,建立了禽流感抗体斑点 E L I S A 检测法,其抗原最适包被量为 0.06μg/点;血清抗体最佳稀释度为 1100;酶标抗体作 1200 稀释;出现明显清晰的斑点者判为禽流感抗体阳性。该方法对 S P F鸡血清及新城疫、传染性法氏囊病等其它 11 种鸡疫病阳性血清均为阴性,对不同亚型特异性的禽流感病毒( A I V)分型血清、琼扩( A G P)阳性血清及血凝抑制( H I)阳性而 A G P疑似的血清样品均呈阳性;对人工接种 A I V 的 S P F鸡第 3 天即能检出抗体阳性,第 5~117 天可全部检出。与间接 E L I S A 法比较,不仅其特异性、敏感性、重复性相一致,而且结果可用肉眼判定,更适合现地禽流感抗体监测及流行病学调查。 展开更多
关键词 禽流感 斑点ELISA 抗体检测
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禽流感间接ELISA诊断试剂盒的研制及应用 被引量:25
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作者 李海燕 于康震 +3 位作者 辛晓光 秦运安 李雁冰 张晶 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2001年第5期372-376,共5页
将成熟的禽流感间接ELISA快速诊断技术试剂盒化 ,确定其外包装、规格、盒内组成 ,对盒内各组分的性状、保存、质量控制以及诊断试剂盒的特异性、敏感性、可重复性、符合率、与国外同类产品比较、保存期等进行了全面、详细的研究。试剂盒... 将成熟的禽流感间接ELISA快速诊断技术试剂盒化 ,确定其外包装、规格、盒内组成 ,对盒内各组分的性状、保存、质量控制以及诊断试剂盒的特异性、敏感性、可重复性、符合率、与国外同类产品比较、保存期等进行了全面、详细的研究。试剂盒由 9种成套试剂组成 ,在 - 15℃至 - 2 0℃保存 5 40天各项性能仍然很好。该试剂盒与进口禽流感间接ELISA诊断试剂盒对同样血清样品检测 ,符合率为 10 0 %。拥有该试剂盒 ,只需准备生理盐水 ,即可对大量血清样品同时进行检测 ,操作简单方便、结果特异性强、敏感性高、稳定、快速 ,更适合于禽流感免疫抗体的监测及现地疫病诊断等需要。先后制备诊断试剂盒 16个批次 ,已成功应用于我国省、市兽医站、兽医研究所、农业院校、农科院、农业公司、口岸检疫部门及鸡场等各领域对禽流感的定性诊断、流行病学调查、免疫抗体监测等。 展开更多
关键词 禽流感 酶联免疫吸附试验 诊断试剂盒 应用
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广州地区活禽市场休市措施对控制禽流感病毒污染效果的评价 被引量:47
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作者 刘慧 陈宗遒 +6 位作者 肖新才 陆剑云 狄飚 李魁彪 汪慧 罗雷 杨智聪 《中华流行病学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2014年第7期832-836,共5页
目的 分析广州地区5个活禽市场休市前后9轮外环境监测结果,评估休市措施对活禽市场禽流感病毒污染控制的成效及影响.方法 2014年1月对5个第1轮环境监测检出H7N9禽流感病毒核酸的活禽市场所有存栏活禽采取扑杀和无害化处理、全面清洗消毒... 目的 分析广州地区5个活禽市场休市前后9轮外环境监测结果,评估休市措施对活禽市场禽流感病毒污染控制的成效及影响.方法 2014年1月对5个第1轮环境监测检出H7N9禽流感病毒核酸的活禽市场所有存栏活禽采取扑杀和无害化处理、全面清洗消毒和3d休市的应急措施,其后开展第2轮监测,复市1周内再进行第3~9轮监测.采用RT-PCR检测环境标本中A型流感病毒核酸,阳性标本进一步检测H5、H7、H9病毒亚型.结果 共采集外环境标本654份.第1轮监测中A型流感病毒活禽销售摊点阳性率为94.44%,H5/H7/H9病毒亚型阳性率为61.11%,处置消毒后阳性率下降至0,复市后阳性率回升,A型流感病毒阳性率由第3轮的50.00%升至第9轮的72.22%,但差异无统计学意义(P>0.05),H5/H7/H9病毒亚型阳性率由第3轮的0升至第9轮的44.44%,差异有统计学意义(P<0.01).首轮监测中A型流感病毒标本阳性率为28.89%,H5/H7/H9病毒亚型标本阳性率为17.78%,处置消毒后标本阳性率降为0,复市后阳性率回升,标本A型流感病毒阳性率由第3轮的19.67%升至第9轮的27.54%,但差异无统计学意义(P>0.05),H5/H7/H9病毒亚型标本阳性率由第3轮的0升至第9轮的8.70%,差异有统计学意义(P<0.01).活禽宰杀工具标本A型流感病毒阳性率最高(22.4%,35/156).复市后1周内,后期污水和饮水A型流感病毒阳性率(25.9%,12.4%)均高于初期(8.3%,8.6%),但差异无统计学意义(P>0.05).活禽过夜存栏的销售摊点A型流感病毒阳性率(91.7%)高于不存栏过夜者(33.3%),同时售卖多种禽类的摊点A型流感病毒阳性率(85.7%)高于非售卖多种禽类摊点(25.0%),差异均有统计学意义(P<0.05).结论 市场内活禽宰杀对禽流感病毒污染扩散的风险大,污水、饮水存在禽流感病毒污染蓄积效应,活禽存栏过夜和多种类禽鸟混养是销售摊点存留禽流 展开更多
关键词 禽流感 活禽市场 休市 监测
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2009—2011年湖南省禽流感外环境监测结果分析 被引量:42
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作者 胡世雄 孙倩莱 +2 位作者 刘富强 杨浩 黄一伟 《疾病监测》 CAS 2014年第3期207-209,共3页
目的分析2009—2011年湖南省禽流感外环境监测结果,了解湖南省外环境中禽流感病毒流行特点和趋势,探讨禽流感防控工作方向。方法利用传染病监测平台信息管理系统数据,分析2009—2011年湖南省外环境中禽流感病毒三间分布情况。结果 2009... 目的分析2009—2011年湖南省禽流感外环境监测结果,了解湖南省外环境中禽流感病毒流行特点和趋势,探讨禽流感防控工作方向。方法利用传染病监测平台信息管理系统数据,分析2009—2011年湖南省外环境中禽流感病毒三间分布情况。结果 2009—2011年,湖南省共采集并检测各类环境标本3370份,流感病毒总阳性率为7.0%,H5、H9型高致病性禽流感病毒阳性率为2.3%。流感病毒检测阳性率冬春季节存在高峰;且在城乡活禽市场(17.8%)和家禽屠宰厂(14.1%)中、宰杀或摆放禽肉案板表面拭子(17.4%)和清洗禽类的污水(15.7%)中较高;鸭类来源的标本检测率(24.1%)高于鸡类来源的标本(9.5%)。结论冬春季节湖南省外环境中禽流感病毒流行较为活跃,湖南省应在禽流感流行季节来临前,针对暴露于城乡活禽市场和家禽屠宰厂、从事活禽宰杀工作的高危人群,以及鸭类养殖区域进行重点监测和宣传教育。 展开更多
关键词 禽流感 环境监测 流行病学
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禽流感重组禽痘病毒rFPV-HA-NA活载体疫苗的研究 被引量:25
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作者 乔传玲 姜永萍 +6 位作者 李呈军 田国斌 孟庆文 邓国华 王秀荣 于康震 唐秀英 《免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2003年第1期46-49,共4页
目的 确定重组禽痘病毒rFPV HA NA疫苗株的最佳免疫剂量、免疫日龄、免疫产生时间及免疫持续期。方法 用重组禽痘病毒rFPV HA NA疫苗免疫SPF鸡 ,免疫后用HPAIVH5N1和H7N1AIV进行致死性攻击 ,观察疫苗免疫后的保护效果。结果 大约含 1... 目的 确定重组禽痘病毒rFPV HA NA疫苗株的最佳免疫剂量、免疫日龄、免疫产生时间及免疫持续期。方法 用重组禽痘病毒rFPV HA NA疫苗免疫SPF鸡 ,免疫后用HPAIVH5N1和H7N1AIV进行致死性攻击 ,观察疫苗免疫后的保护效果。结果 大约含 10 0个PFU的重组病毒即能使机体获得对强毒攻击的 10 0 %保护 ;对 1日龄SPF鸡进行免疫接种 ,4周后能 10 0 %抵抗HPAIV的致死性攻击 ;2周和 3周龄的免疫鸡对免疫周 1后的强毒攻击具有 10 0 %的保护力 ;重组病毒在免疫后10个月时 ,其诱导产生的血凝抑制 (Haemagglutinininhibition ,HI)抗体仍保持在 2~ 3log2水平 ,并可以提供 10 0 %抵抗病毒的致死性感染。结论 重组禽痘病毒rFPV HA NA疫苗是一种安全、高效的基因工程疫苗 。 展开更多
关键词 禽流感 重组禽痘病毒 疫苗 免疫学
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H7N9病毒的来源和重组模式 被引量:40
11
作者 张宝 黄克勇 +5 位作者 郭劲松 吴娴波 李凌 朱利 万成松 赵卫 《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第7期1017-1021,共5页
目的通过序列分析揭示H7N9病毒的来源和重组产生模式。方法收集H7N9序列,运用BLAST、MEGA5.0等生物信息学软件分析序列相似性、多序列比对、构建进化树,确定H7N9病毒各节段序列的亲缘序列,模拟H7N9重组产生方式。结果系统进化树显示HA... 目的通过序列分析揭示H7N9病毒的来源和重组产生模式。方法收集H7N9序列,运用BLAST、MEGA5.0等生物信息学软件分析序列相似性、多序列比对、构建进化树,确定H7N9病毒各节段序列的亲缘序列,模拟H7N9重组产生方式。结果系统进化树显示HA、NA、PB2和NS节段最近缘关系序列只有一个;而PB1、PA、NP和MP节段序列,分布于不同的两个分枝。通过组合分析亲缘序列,可以将目前流行的H7N9病毒分为5型:A、B、A/Shanghai/1/2013-H7N9、A/Pigeon/Shanghai/S1069-H7N9和A/Zhejiang/HZ1/2013-H7N9。A型又可以分为A1和A2亚型。结论通过对序列的组合分析,推测此次H7N9病毒流行至少由5个病毒经过4次重组产生,产生两个主要流行株A和B型。A1和A2亚型的出现是同一次重组过程中产生两株不同产物;A/Pigeon/Shanghai/S1069-H7N9是A型H7N9病毒在流行期间与当地H9N2病毒的再一次重组产生。A/Zhejiang/HZ1/2013-H7N9是A2亚型和B型重组后产生的混合型。 展开更多
关键词 H7N9 禽流感 重组 生物信息学
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H5N1 avian influenza in China 被引量:37
12
作者 CHEN HuaLan Animal Influenza Laboratory of the Ministry of Agriculture and National Key Laboratory of Veterinary Biotechnology, Harbin Veterinary Research Institute, Chinese Academy of Agricultural Sciences, Harbin 150001, China 《Science China(Life Sciences)》 SCIE CAS 2009年第5期419-427,共9页
H5N1 highly pathogenic avian influenza virus was first detected in a goose in Guangdong Province of China in 1996. Multiple genotypes of H5N1 viruses have been identified from apparently healthy waterfowl since 1999. ... H5N1 highly pathogenic avian influenza virus was first detected in a goose in Guangdong Province of China in 1996. Multiple genotypes of H5N1 viruses have been identified from apparently healthy waterfowl since 1999. In the years 2004-2008, over 100 outbreaks in domestic poultry occurred in 23 provinces and caused severe economic damage to the poultry industry in China. Beginning from 2004, a culling plus vaccination strategy has been implemented for the control of epidemics. Since then, over 35420000 poultry have been depopulated, and over 55 billion doses of the different vaccines have been used to control the outbreaks. Although it is logistically impossible to vaccinate every single bird in China due to the large poultry population and the complicated rearing styles, there is no doubt that the increased vaccination coverage has resulted in decreased disease epidemic and environmental virus loading. The experience in China suggests that vaccination has played an important role in the protection of poultry from H5N1 virus infection, the reduction of virus load in the environment, and the prevention of H5N1 virus transmission from poultry to humans. 展开更多
关键词 avian influenza H5N1 CONTROL China
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人感染H7N9禽流感流行特征与防控策略 被引量:36
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作者 陈健 毛盛华 +1 位作者 胡家瑜 吴凡 《第二军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第6期585-590,共6页
2013年3月31日中国大陆出现新型禽流感疫情,此次的H7N9禽流感病毒为全球首次发现的新亚型流感病毒,可能由3种流感病毒重组后产生。截至5月31日,我国内地共报告确诊病例131例,死亡39例。而在上海市报告的33例确诊病例中,29例发病于4月6... 2013年3月31日中国大陆出现新型禽流感疫情,此次的H7N9禽流感病毒为全球首次发现的新亚型流感病毒,可能由3种流感病毒重组后产生。截至5月31日,我国内地共报告确诊病例131例,死亡39例。而在上海市报告的33例确诊病例中,29例发病于4月6日上海市关闭活禽交易市场前,其余4例发病于关闭后的第一个潜伏期内。33例病例中60岁以上患者占66.7%(22/33);15例死亡病例中,60岁以上患者占80%(12/15);90.91%(30/33)的病例具有可疑的动物或环境暴露史。此次疫情呈散发,虽然出现了2起家庭聚集性病例,但目前还没有明确的人传人的证据。疫情发生后,上海市人民政府适时启动了流感流行应急预案Ⅲ级响应,通过突发公共卫生事件应急响应、关闭全市活禽交易、健康教育、风险沟通等手段,及时有效地控制了疾病的传播。本文分析这次疫情防控工作的得失并提出建议,供今后的防疫工作借鉴参考。 展开更多
关键词 禽流感 H7N9亚型流感病毒A型 流行病学 传染病控制
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表达载体pCAGGS显著增强禽流感DNA疫苗的免疫保护效果 被引量:29
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作者 姜永萍 张洪波 +5 位作者 步志高 李呈军 赵有淑 王秀荣 于康震 陈化兰 《中国农业科学》 CAS CSCD 北大核心 2006年第4期825-830,共6页
目的将A/Goose/GuangDong/1/96(H5N1)[GD/1/96(H5N1)]的HA基因插入鸡β-actin启动子高效真核表达载体pCAGGS,构建了DNA疫苗质粒pCAGGHA5,以提高H5亚型禽流感DNA疫苗的表达水平和免疫保护效果。方法将pCAGGHA5和表达GD/1/96(H5N1)HA基因... 目的将A/Goose/GuangDong/1/96(H5N1)[GD/1/96(H5N1)]的HA基因插入鸡β-actin启动子高效真核表达载体pCAGGS,构建了DNA疫苗质粒pCAGGHA5,以提高H5亚型禽流感DNA疫苗的表达水平和免疫保护效果。方法将pCAGGHA5和表达GD/1/96(H5N1)HA基因的质粒pCIHA5通过间接免疫荧光法和Western-blot分析检测转染293T细胞后瞬时表达的HA抗原蛋白,随之将pCAGGHA5及pCIHA5分别以100μg和10μg剂量一次免疫3周龄SPF鸡,4周后用100LD50的HPAIVGD/1/96(H5N1)鼻腔途径进行攻击。结果间接免疫荧光法和Western-blot分析表明2种表达质粒均可正确表达H5亚型HA抗原蛋白,载体pCAGGS表达水平显著高于载体pCI;免疫SPF鸡后,100μgpCAGGHA5可形成5/5的免疫保护,100μgpCIHA5可形成2/4的免疫保护,10μgpCAGGHA5可形成对免疫鸡5/5的免疫保护,而10μgpCIHA5则基本不能形成免疫保护,pCAGGHA5诱导的HI抗体水平远远高于pCIHA5。结论鸡β-actin启动子表达载体pCAGGS可显著提高HA基因体外表达水平和H5亚型禽流感DNA疫苗诱导的保护性抗体免疫反应水平,增强免疫保护效果。 展开更多
关键词 禽流感 H5亚型 鸡β-actin启动子 DNA疫苗 免疫保护
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禽类外环境H7N9禽流感病毒检出率及其影响因素 被引量:31
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作者 颜玉炳 刘红莲 +1 位作者 蒋丽娜 沈惠燕 《中国热带医学》 CAS 2016年第1期49-51,59,共4页
目的探索禽类外环境标本H7N9禽流感病毒阳性检出率的影响因素。方法 2014年1月—2015年4月间,通过监测网络收集厦门市禽类外环境标本886份,填写标本相关信息,采用荧光定量RT-PCR方法对标本进行核酸检测,分析H7N9禽流感病毒阳性检出率的... 目的探索禽类外环境标本H7N9禽流感病毒阳性检出率的影响因素。方法 2014年1月—2015年4月间,通过监测网络收集厦门市禽类外环境标本886份,填写标本相关信息,采用荧光定量RT-PCR方法对标本进行核酸检测,分析H7N9禽流感病毒阳性检出率的相关因素。结果 886份标本来源于69个监测点,检出H7N9阳性标本113份,阳性率为12.8%,39个监测点有H7N9阳性标本检出,阳性率为56.52%;来源于活禽市场的标本高于家禽规模养殖场和家禽散养户的标本,禽类饮水和清洗禽类污水检出率最高;标本送检越及时,阳性率越高;活禽市场采取休市后,若清洗和消毒不到位,短期内外环境仍有H7N9禽流感病毒检出,但人群发病数仍可迅速减少。结论人感染H7N9疫情流行前期,各地应通过合理布点提早开展禽类外环境监测,根据监测结果尽早采取各项干预措施;疫情流行期间,重点关注活禽市场,外环境中一旦检出H7N9禽流感病毒,要及时采取休市或关闭活禽市场等措施。 展开更多
关键词 禽类外环境 禽流感 H7N9 阳性率
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禽流感油乳剂灭活疫苗的研制 被引量:19
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作者 罗开健 辛朝安 《中国兽医杂志》 CAS 北大核心 2001年第4期6-9,共4页
以禽流感病毒 ( AIV) H5 N4株、H7N3 株为抗原 ,分别研制了 H5 N4、H7N3 油乳剂灭活疫苗 ,并对其物理性状、安全性、免疫效力、保存期及抗体消长规律进行了检测。结果表明 ,3种抗原含量不同的 H5 N4疫苗在免疫后 3周~ 9个月对 AIV- H5... 以禽流感病毒 ( AIV) H5 N4株、H7N3 株为抗原 ,分别研制了 H5 N4、H7N3 油乳剂灭活疫苗 ,并对其物理性状、安全性、免疫效力、保存期及抗体消长规律进行了检测。结果表明 ,3种抗原含量不同的 H5 N4疫苗在免疫后 3周~ 9个月对 AIV- H5 N4攻击均获 8/ 8保护 ,H7N3 疫苗在免疫后 3周与 3个月时对 AIV- H5 N4攻击则分别保护 6 / 8与 3/ 7。疫苗 4℃保存 15个月 ,其免疫效力没有下降。 展开更多
关键词 禽流感病毒 AIV-H5N4 AIV-H7N3 油乳剂灭活疫苗
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H9N2亚型禽流感病毒抗原性变异的研究 被引量:28
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作者 王泽霖 刘岩 +3 位作者 李建丽 陈少渠 杨大光 柴丽娜 《中国兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第3期351-354,共4页
对1998—2002年间在河南省豫北地区分离到的5株H9N2亚型禽流感病毒的抗原性变异进行了研究。经HI试验、鸡胚中和试验、细胞中和试验及攻毒保护试验证明,5株H9N2亚型间已经发生了抗原性漂移。98A5和99S毒株间的保护力接近100%,HI试验... 对1998—2002年间在河南省豫北地区分离到的5株H9N2亚型禽流感病毒的抗原性变异进行了研究。经HI试验、鸡胚中和试验、细胞中和试验及攻毒保护试验证明,5株H9N2亚型间已经发生了抗原性漂移。98A5和99S毒株间的保护力接近100%,HI试验、鸡胚中和试验、细胞中和试验的相关性均在0.74以上。表明2毒株间的抗原性相近;用00Y毒株攻击其他4株免疫的鸡,其保护率仅为60%~80%;而02Y株对除00Y株外的4株的免疫保护率分别为60%、75%、80%、100%,与分离年代呈负相关性,HI、鸡胚中和试验、细胞中和试验也取得类似结果,说明2000年后的毒株间已发生抗原性变异。 展开更多
关键词 H9N2亚型 禽流感 抗原性变异
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广州地区2006-2012年人感染H5/H7/H9亚型禽流感病毒风险监测 被引量:29
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作者 陈宗遒 陆剑云 +6 位作者 肖新才 刘慧 狄飚 李魁彪 鲁恩洁 罗雷 杨智聪 《中华流行病学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第9期900-905,共6页
目的分析2006—2012年广州市人禽流感监测结果,综合评估人群感染H5、H7、H9(H5/H7/H9)亚型人禽流感病毒的风险。方法广州市人禽流感监测系统包括职业暴露人群血清流行病学监测、环境标本病原学监测、禽流感疫情应急监测、流感样病... 目的分析2006—2012年广州市人禽流感监测结果,综合评估人群感染H5、H7、H9(H5/H7/H9)亚型人禽流感病毒的风险。方法广州市人禽流感监测系统包括职业暴露人群血清流行病学监测、环境标本病原学监测、禽流感疫情应急监测、流感样病例病原学监测、不明原因肺炎监测和重症肺炎排查5个部分。采用RT-PCR检测环境和呼吸道标本中H5/H7/H9禽流感病毒核酸,血凝抑制试验检测职业人群血清H5/H7/H9抗体。结果2006--2012年共采集禽鸟职业暴露人群和一般人群血清标本4103份,H5/H7/H9抗体总阳性率为3.82%。其中H5抗体阳性为0.22%,H9抗体阳性率为3.70%,H7抗体阳性率为0。有4份血清标本同时检出H5和H9抗体阳性。职业暴露人群H9阳性率(4.21%)高于对照人群(2.16%)。共采集外环境标本2028份,其中H5核酸阳性标本55份,阳性率为2.71%;H9核酸阳性标本14份,阳性率为0.69%。有5份标本同时检出H5和H9禽流感病毒核酸阳性,其中菜市场禽类摊点H5禽流感病毒核酸阳性率最高(3.03%,46/1518),未检出H7禽流感病毒核酸。历年应急监测所排查的高危人群和医学观察密切接触者、流感样病例病原学监测、不明原因肺炎和重症肺炎排查对象均未检出H5/H7/H9禽流感病毒核酸。结论广州地区涉禽环境中存在H5/H9禽流感病毒污染,以菜市场禽类摊点污染为主,禽类职业暴露人群存在一定的H5/H9禽流感病毒无症状感染者,提示广州地区禽类职业人群存在感染禽流感病毒的风险。 展开更多
关键词 禽流感 H5 H7 H9亚型 监测 风险评估
原文传递
H5亚型禽流感重组鸡痘病毒活载体疫苗的构建及其遗传稳定性与免疫效力 被引量:20
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作者 贾立军 彭大新 +7 位作者 张艳梅 刘红旗 刘秀梵 程坚 陈素娟 韦栋平 黄勇 张如宽 《微生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2003年第6期722-727,共6页
以鹅源H5亚型禽流感病毒 (AIV)基因组为模板 ,用RT PCR扩增血凝素 (Hemaggluti nin ,HA)基因 ,克隆入鸡痘病毒表达载体pFG1 1 75 ,转染鸡痘病毒感染的鸡胚成纤维细胞 ,通过蓝斑筛选和间接免疫荧光检测 ,获得表达HA基因的重组鸡痘病毒 (R... 以鹅源H5亚型禽流感病毒 (AIV)基因组为模板 ,用RT PCR扩增血凝素 (Hemaggluti nin ,HA)基因 ,克隆入鸡痘病毒表达载体pFG1 1 75 ,转染鸡痘病毒感染的鸡胚成纤维细胞 ,通过蓝斑筛选和间接免疫荧光检测 ,获得表达HA基因的重组鸡痘病毒 (Recombinantfowlpoxvir us,rFPV HA)。rFPV HA经鸡胚成纤维细胞连续传 1 5代后 ,报告基因LacZ和HA基因可稳定表达。用 1 0 3PFU和 1 0 5PFU的rFPV HA免疫无特定病原体的 (Specificpathogenfree,SPF)鸡 ,免疫后 2 2d血凝抑制 (Hemagglutinininhibition ,HI)抗体监测阳性率分别为 0 %和 2 0 % ,但均抵御了H5亚型毒株的致死性攻击 ,保护率为 1 0 0 %。结果表明 ,构建了表达HA基因的重组鸡痘病毒 ,该重组病毒具有良好遗传稳定性 ,免疫鸡可提供完全保护 ,显示出了一定的应用前景。 展开更多
关键词 H5亚型 禽流感 血凝素基因 重组鸡痘病毒 遗传稳定性 免疫效力
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氟苯尼考和中草药黄芪淫羊藿合剂对鸡体液免疫反应的影响 被引量:23
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作者 操继跃 周洪波 +3 位作者 卢笑丛 窦树龙 柳阳伟 李小宝 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2003年第4期412-416,共5页
试验分别对免疫期间的各组鸡连续两周给予不同剂量的氟苯尼考、黄芪淫羊藿合剂后,在不同日龄采取血样,用血凝抑制(HI)试验分别对鸡新城疫(ND)抗体水平和禽流感(AI)抗体水平进行监测。结果表明,混饮给药,小剂量(50mg/L)氟苯尼考对ND抗体... 试验分别对免疫期间的各组鸡连续两周给予不同剂量的氟苯尼考、黄芪淫羊藿合剂后,在不同日龄采取血样,用血凝抑制(HI)试验分别对鸡新城疫(ND)抗体水平和禽流感(AI)抗体水平进行监测。结果表明,混饮给药,小剂量(50mg/L)氟苯尼考对ND抗体水平影响不显著(P>0 05),而中(150mg/L)、高(250mg/L)剂量氟苯尼考对ND抗体产生有显著的抑制作用(P<0 01);氟苯尼考追加给药1周后,中、高剂量组ND抗体水平又有显著降低(P<0 05),而小剂量组ND抗体水平差异不显著;中(15ml/L)、高(22 5ml/L)剂量黄芪淫羊藿合剂对ND、AI抗体产生有显著增强作用(P<0 01);对因氟苯尼考造成的免疫抑制,黄芪淫羊藿合剂可使抗体水平恢复至对照组水平(P>0 05)。 展开更多
关键词 氟苯尼考 中草药 黄芪淫羊藿合剂 体液 免疫反应 新城疫 禽流感
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