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携带NDV HN基因疫苗的重组减毒鸡白痢沙门菌口服免疫原性研究
1
作者 丁轲 余祖华 +8 位作者 李蒙 郁川 尚珂 程相朝 陈桂华 廖成水 贾艳艳 汪洋 张春杰 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第10期2081-2088,共8页
为研究携带新城疫病毒（NDV）血凝素-神经氨酸酶（HN）基因疫苗的重组减毒鸡白痢沙门菌的口服免疫原性,将携带NDV HN基因的重组质粒pcDNA3-HN电转化减毒鸡白痢沙门菌ΔcrpC79-13,构建重组疫苗菌株ΔcrpC79-13（pcDNA3-HN）。将重组菌株... 为研究携带新城疫病毒（NDV）血凝素-神经氨酸酶（HN）基因疫苗的重组减毒鸡白痢沙门菌的口服免疫原性,将携带NDV HN基因的重组质粒pcDNA3-HN电转化减毒鸡白痢沙门菌ΔcrpC79-13,构建重组疫苗菌株ΔcrpC79-13（pcDNA3-HN）。将重组菌株ΔcrpC79-13（pcDNA3-HN）以1×10^9 CFU·只-1口服免疫7日龄雏鸡,同时设PBS、ΔcrpC79-13（pcDNA3）和NDVⅣ系疫苗免疫对照,于免疫后7、14、21、28、35d测定免疫雏鸡诱导的抗NDV的HI抗体、鸡白痢沙门菌IgG抗体和肠道黏膜IgA抗体动态水平,同时测定免疫雏鸡的外周血淋巴细胞增殖水平并进行攻毒试验。结果表明,成功获得携带NDV HN基因疫苗的重组菌株Δcrp C79-13（pcDNA3-HN）;在免疫后14～35d,可诱导产生抗NDV的HI抗体,且在免疫后21d时达到最高值;可诱导产生抗鸡白痢沙门菌的IgG抗体,且在免疫后28d达到最高值;Δcrp（C79-13pcDNA3-HN）组肠道黏膜IgA抗体含量最高值略高于Δcrp C79-13（pcDNA3）组,但差异不显著（P〉0.05）。在免疫28d以后,Δcrp（C79-13pcDNA3-HN）组外周血淋巴细胞刺激指数极显著高于PBS对照组（P〈0.01）,显著高于ΔcrpC79-13（pCDNA3）组（P〈0.05）。用103EID50 NDV F48E9株攻毒,保护率达67%（10/15）,用108 CFU鸡白痢沙门菌C79-13攻毒,保护率为100%。本研究结果表明重组减毒鸡白痢沙门菌ΔcrpC79-13（pcDNA3-HN）具有良好的口服免疫原性。 展开更多
关键词 新城疫病毒 HN基因 减毒沙门菌 口服免疫 免疫原性
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携带肝细胞生长因子基因的减毒沙门氏菌在大鼠胃溃疡治疗中的组织分布
2
作者 蒋泽斌 哈小琴 高鹏 《世界华人消化杂志》 CAS 北大核心 2008年第16期1722-1727,共6页
目的:阐明携带肝细胞生长因子(HGF)基因的减毒沙门氏菌在大鼠胃溃疡治疗中的组织分布规律,为HGF在胃溃疡基因治疗中的实际应用提供依据.方法:乙酸诱发80只大鼠胃溃疡模型,随机分成2组:HGF灌胃组(40只)和绿色荧光蛋白(GFP)灌胃组(40只).... 目的:阐明携带肝细胞生长因子(HGF)基因的减毒沙门氏菌在大鼠胃溃疡治疗中的组织分布规律,为HGF在胃溃疡基因治疗中的实际应用提供依据.方法:乙酸诱发80只大鼠胃溃疡模型,随机分成2组:HGF灌胃组(40只)和绿色荧光蛋白(GFP)灌胃组(40只).将携带HGF和GFP基因真核表达质粒的减毒沙门氏菌分别给予大鼠灌胃,每只0.2mL,隔日1次,共3次.GFP灌胃组第1、3、5、7、9天分别处死大鼠3只,取胃、肠、肝、脾及肾组织制备成冰冻切片,荧光显微镜下观察目的基因组织分布;HGF灌胃组第1、3、5、7、9、11、13、15、17、19、21天分别处死大鼠3只,ELISA方法检测HGF在各组织中的表达;PCR方法检测真核表达载体在组织中的分布.结果:GFP组大鼠在荧光显微镜下观察到胃、肠组织有较强的荧光,在肝、脾、肾组织有微弱的荧光,荧光强度在第5、7天达到峰值;HGF组大鼠胃、肝、脾、肾、大肠、小肠组织,均检测到有HGF表达,但胃、肠组织中表达较高;大鼠胃、肝、脾、肾、大肠、小肠均可检测到真核表达载体的启动子CMV片段.结论:在大鼠胃溃疡治疗中,减毒沙门氏菌作为细胞载体以po方式可将携带目的基因的真核表达载体相对靶向性转入胃、肠组织中. 展开更多
关键词 肝细胞生长因子 减毒沙门氏菌 胃溃疡 绿色荧光蛋白 真核表达载体
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