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自噬核心蛋白ATG101对米色脂肪细胞分化和产热的影响 被引量：3
1
作者 马静远 李少博 +4 位作者 杨迪 白宁宁 米日阿依·阿里木江 杨颖 韩峻峰 《江苏大学学报（医学版）》 CAS 2020年第4期320-325,共6页
目的:探究自噬相关蛋白101(autophagyrelated 101,ATG101)对米色脂肪细胞增殖、分化和产热过程的影响。方法:将小鼠血管基质细胞(stromal vascular fraction,SVF)向米色脂肪细胞诱导分化,运用实时定量PCR及蛋白质印迹法检测诱导分化过程... 目的:探究自噬相关蛋白101(autophagyrelated 101,ATG101)对米色脂肪细胞增殖、分化和产热过程的影响。方法:将小鼠血管基质细胞(stromal vascular fraction,SVF)向米色脂肪细胞诱导分化,运用实时定量PCR及蛋白质印迹法检测诱导分化过程中(0、2、4、6和8 d)Atg101 mRNA和蛋白表达。使用慢病毒介导的shRNA在分化前敲减Atg101并诱导分化成米色脂肪细胞后,运用实时定量PCR检测成熟脂肪细胞(6 d)标志基因表达,油红O染色观察脂滴形态;同时检测分化过程中(0、2、4和6 d)产热相关基因的表达。结果:ATG101在米色脂肪细胞自然分化过程中表达量逐渐增加;Atg101敲减后,成熟米色脂肪细胞标志基因脂肪酸结合蛋白4(fatty acid binding protein 4,Fabp4),诱导细胞死亡DNA片断化因子α样效应因子(cell death-inducing DNA fragmentation factor-α-like effector A,Cidea)和葡萄糖转运体4(glucose transporter 4,Glut4)的表达较对照组明显降低(均P<0.05),脂滴生成受损。同时,Atg101的敲减使米色脂肪细胞中产热相关基因PR结构域蛋白16(PR domain-containing 16,Prdm16),Cidea和解偶联蛋白1(uncoupling protein 1,Ucp1)的表达也明显减少(均P<0.05)。结论:ATG101参与米色脂肪细胞分化过程;下调ATG101表达影响产热功能发挥。 展开更多
关键词 atg101 自噬 米色脂肪细胞 成脂分化 产热
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自噬核心蛋白Atg101对脂肪细胞衰老的影响
2
作者 叶雅芬 徐蓉蓉 +2 位作者 马静远 杨颖 韩峻峰 《中华内分泌代谢杂志》 CAS CSCD 北大核心 2023年第1期48-54,共7页
目的初步探究自噬核心蛋白Atg101对白色脂肪细胞衰老的影响。方法构建Atg101敲减的3T3-L1成熟脂肪细胞模型,验证Atg101对自噬相关蛋白LC3和p62蛋白的影响。构建并分析人类皮下脂肪组织的RNA-seq数据库,基于Atg101与其他基因FPKM值的Pear... 目的初步探究自噬核心蛋白Atg101对白色脂肪细胞衰老的影响。方法构建Atg101敲减的3T3-L1成熟脂肪细胞模型,验证Atg101对自噬相关蛋白LC3和p62蛋白的影响。构建并分析人类皮下脂肪组织的RNA-seq数据库,基于Atg101与其他基因FPKM值的Pearson相关系数(R^(2)>0.4,P<0.050)预测共表达基因集并进行KEGG和Reactome富集分析。构建年轻小鼠(8周龄)和老龄小鼠(18个月龄)模型,实时定量PCR(RT-qPCR)和Western印迹法检测Atg101在腹股沟皮下脂肪和内脏脂肪中的表达水平。进一步通过RNA-seq、Western印迹和RT-qPCR检测白色脂肪细胞衰老相关分泌表型(senescence-associated secretory phenotype,SASP)、细胞周期及线粒体稳态相关基因的表达差异,分析Atg101敲减对脂肪细胞衰老的影响。结果在3T3-L1脂肪细胞敲减Atg101后自噬相关蛋白LC3-Ⅱ显著降低,p62蛋白明显上调,提示细胞自噬受损。KEGG富集分析发现Atg101共表达基因集主要富集于自噬和衰老相关通路;Reactome富集分析发现该基因集与多个细胞周期信号通路相关。RT-qPCR和Western印迹证实Atg101在老龄小鼠皮下脂肪组织中mRNA和蛋白表达水平均下调,内脏脂肪组织蛋白水平也显著降低。最后,白色脂肪细胞模型中Atg101敲减后SASP相关基因表达上调,细胞周期特异性基因表达受限并且细胞周期素依赖性蛋白激酶抑制因子p16、p21表达显著增高,线粒体稳态调节基因表达也受到抑制。结论Atg101可能通过影响自噬活动调控白色脂肪细胞衰老,从而破坏线粒体稳态。 展开更多
关键词 atg101 自噬 白色脂肪细胞 衰老 线粒体稳态
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自噬新蛋白Atg101的相关研究进展
3
作者 马静远 杨颖 韩峻峰 《中国细胞生物学学报》 CAS CSCD 2020年第3期507-511,共5页
自噬是真核细胞特有的生命现象,它控制着细胞内蛋白质和细胞器的降解,并在机体的生长发育和维持能量平衡中起重要的作用。目前在酵母中已被鉴定的自噬相关基因有40余种。Atg101是一种全新的自噬相关蛋白,近年来,其分子结构及功能逐步被... 自噬是真核细胞特有的生命现象,它控制着细胞内蛋白质和细胞器的降解,并在机体的生长发育和维持能量平衡中起重要的作用。目前在酵母中已被鉴定的自噬相关基因有40余种。Atg101是一种全新的自噬相关蛋白,近年来,其分子结构及功能逐步被阐明,其在疾病发展中的作用也引起了广泛关注。该综述总结了近年来Atg101在分子生物学和病理生理领域的相关研究进展。 展开更多
关键词 自噬 atg101 ULK1自噬起始复合体
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