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植物Na^+/H^+逆向转运蛋白功能及调控的研究进展 被引量:8
1
作者 石乐义 李美茹 +1 位作者 李洪清 陈贻竹 《广西植物》 CAS CSCD 北大核心 2006年第6期602-607,共6页
Na+/H+逆向转运蛋白是一种调控Na+、H+跨膜转运的膜蛋白,对细胞内Na+的平衡和pH值的调控等活动具有重要作用。该文主要对近年来Na+/H+逆向转运蛋白功能及其调控的研究进展进行概述,着重讨论其在调控离子稳态平衡,液泡pH值大小与花色显现... Na+/H+逆向转运蛋白是一种调控Na+、H+跨膜转运的膜蛋白,对细胞内Na+的平衡和pH值的调控等活动具有重要作用。该文主要对近年来Na+/H+逆向转运蛋白功能及其调控的研究进展进行概述,着重讨论其在调控离子稳态平衡,液泡pH值大小与花色显现,以及在影响细胞,器官(叶片)发育,盐胁迫信号转导等方面的可能作用。 展开更多
关键词 NA^+/H^+逆向转运蛋白 atnhx SOS1
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根癌农杆菌介导AtNHX1基因转化小麦 被引量:16
2
作者 薛哲勇 支大英 +3 位作者 夏光敏 马秀玲 张慧 赵彦修 《山东大学学报(理学版)》 CAS CSCD 北大核心 2003年第1期106-109,共4页
利用根癌农杆菌对 3种基因型小麦进行了转化研究 .发现基因型对转化有明显影响 .将小麦品种烟优 36 1、烟 10 3、核生 3号的胚性愈伤组织用含报告基因NPTⅡ和抗盐基因Na+ H+反向转运AtNHX1的农杆菌菌株pROK2AT GV310 1感染和共培养后 ,... 利用根癌农杆菌对 3种基因型小麦进行了转化研究 .发现基因型对转化有明显影响 .将小麦品种烟优 36 1、烟 10 3、核生 3号的胚性愈伤组织用含报告基因NPTⅡ和抗盐基因Na+ H+反向转运AtNHX1的农杆菌菌株pROK2AT GV310 1感染和共培养后 ,用巴龙霉素 5 0 - 15 0mg L筛选抗性愈伤组织及转化植株 .对抗性植株的总DNA用AtNHX1基因的特异引物进行PCR检测 ,目的基因的PCR阳性频率为 1.3(烟 10 3)和 2 .9% (核生 3号 ) . 展开更多
关键词 小麦 根癌农杆菌 转基因植株 atnhx1基因
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农杆菌介导的双价抗盐基因转化番茄的研究 被引量:19
3
作者 刘晶 周树峰 +2 位作者 陈华 韩和平 李银心 《中国农业科学》 CAS CSCD 北大核心 2005年第8期1636-1644,共9页
植物的耐盐性是一个多基因控制的复杂性状,将多个耐盐相关基因导入同一植物更有助于提高植物的耐盐能力。运用农杆菌介导法向转AtNHX1(拟南芥Na+/H+逆向运输蛋白编码基因)的番茄(Lycopersicumesculentum L.Moneymaker’)株系X1OEA1自交... 植物的耐盐性是一个多基因控制的复杂性状,将多个耐盐相关基因导入同一植物更有助于提高植物的耐盐能力。运用农杆菌介导法向转AtNHX1(拟南芥Na+/H+逆向运输蛋白编码基因)的番茄(Lycopersicumesculentum L.Moneymaker’)株系X1OEA1自交二代植株(T2)中转入山菠菜甜菜碱醛脱氢酶基因(BADH)。PCR、Southern、RT-PCR和甜菜碱含量分析结果表明,BADH已经整合到番茄基因组中,并在转基因植株中转录和翻译表达。叶绿素荧光(Fv/Fm)、相对电导率(Rc/Rc’)、叶绿素含量(Chla+b)、叶绿素a/b比(Chla/b)、光合速率(Pn)测定结果表明,200mmol·L-1NaCl胁迫下,双转化的番茄植株各项生理指标均优于单转化AtNHX1的番茄。转双基因植株TT0-2随着NaCl浓度的增加,Fv/Fm值下降幅度最小;相对电导率与非胁迫条件下相比增加了3.6倍,而单转化AtNHX1的T2增加了4.2倍;与转单基因植株T2相比,茎部干重、鲜重分别增加12.5%、19.8%;叶部干重、鲜重分别增加22.5%、14.0%,差异达显著水平。初步证明双基因转化有助于增强番茄的耐盐性。同时对番茄的转化系统进行优化的结果表明,使用抗生素特美汀的转化效率明显高于头孢霉素的。 展开更多
关键词 农杆菌 BADN atnhxI 双基因转化 耐盐性 番茄 基因转化 农杆菌介导 Na^+/H^+逆向运输 甜菜碱醛脱氢酶基因 转基因植株
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根癌农杆菌介导的高羊茅遗传转化研究 被引量:16
4
作者 赵军胜 支大英 +1 位作者 薛哲勇 夏光敏 《Acta Genetica Sinica》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2005年第6期579-585,共7页
采用携带卡那霉素抗性基因nptⅡ和Na+/H+反向运输AtNHX1基因的表达载体pROK2/AtNHX1(带有35S启动子)和pROK2U/AtNHX1(带有ubi1启动子)的根癌农杆菌AGL1和GV3101,对4个品种高羊茅下胚轴来源的胚性愈伤组织进行了遗传转化。胚性愈伤组织... 采用携带卡那霉素抗性基因nptⅡ和Na+/H+反向运输AtNHX1基因的表达载体pROK2/AtNHX1(带有35S启动子)和pROK2U/AtNHX1(带有ubi1启动子)的根癌农杆菌AGL1和GV3101,对4个品种高羊茅下胚轴来源的胚性愈伤组织进行了遗传转化。胚性愈伤组织经根癌农杆菌感染和共培养后,用50~150mg/L巴龙霉素筛选抗性愈伤组织,获得1126棵再生植株,用10~20mg/L卡那霉素进一步筛选再生植株,总共得到525棵绿色抗性植株。抗性植株的总DNA用AtNHX1基因的特异引物进行PCR检测,其中21棵为PCR阳性,最高转化频率为1.77%。Southern杂交结果证实,外源基因以低拷贝整合到高羊茅的基因组中,实验发现,在不同品种之间转化效率有所差异。 展开更多
关键词 高羊茅 atnhx1基因 根癌农杆菌 转基因植株
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AtNHX1基因对菊苣的转化和耐盐性研究 被引量:16
5
作者 赵宇玮 王英娟 +2 位作者 步怀宇 郝建国 贾敬芬 《草业学报》 CSCD 北大核心 2009年第3期103-109,共7页
用农杆菌介导法将AtNHX1基因导入菊苣中,共获得42株卡那霉素(Kan)抗性再生植株。经过PCR检测、Southern杂交和RT-PCR检测表明,AtNHX1基因已成功整合到菊苣基因组中,并且能够正常转录。野生型和转基因植株诱发的愈伤组织进行耐盐生长试验... 用农杆菌介导法将AtNHX1基因导入菊苣中,共获得42株卡那霉素(Kan)抗性再生植株。经过PCR检测、Southern杂交和RT-PCR检测表明,AtNHX1基因已成功整合到菊苣基因组中,并且能够正常转录。野生型和转基因植株诱发的愈伤组织进行耐盐生长试验,结果显示,相同盐胁迫条件下,转基因愈伤组织的相对生长率显著高于野生型愈伤组织。施加梯度NaCl胁迫后,植株叶片K+和Na+含量测定结果显示,转基因植株叶片比野生型积累更多的Na+和K+,维持较高的K+/Na+;叶片相对电导率测定结果表明,转基因株系叶片相对电导率显著低于野生型。上述结果表明,AtNHX1基因的导入和表达在提高菊苣耐盐性的同时减轻了盐胁迫对植物细胞膜的伤害。 展开更多
关键词 atnhx1 菊苣 农杆菌 遗传转化 耐盐性
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根癌农杆菌介导马铃薯试管薯转化体系的优化及AtNHX1基因的导入 被引量:15
6
作者 王丽 杨宏羽 +1 位作者 张俊莲 王蒂 《西北植物学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第6期1088-1094,共7页
以马铃薯栽培品种甘农薯2号的试管薯薄片为转化受体材料,通过根癌农杆菌LBA4404介导拟南芥液泡膜Na+/H+逆向转运蛋白基因(AtNHX1)进行转化,获得了抗卡那霉素的再生植株,并对转化植株进行了PCR-Southern检测.结果表明,薯片分化和根再生... 以马铃薯栽培品种甘农薯2号的试管薯薄片为转化受体材料,通过根癌农杆菌LBA4404介导拟南芥液泡膜Na+/H+逆向转运蛋白基因(AtNHX1)进行转化,获得了抗卡那霉素的再生植株,并对转化植株进行了PCR-Southern检测.结果表明,薯片分化和根再生的卡那霉素选择压为50mg/L;乙酰丁香酮对薯片转化率无影响;优化的试管薯片转化方法是:不经预培养的薯片用OD600值为0.5的菌液侵染8~10min,然后经过2d共培养,在抗性芽分化培养基上生长40d,可获得30%卡那抗性绿苗.对抗性植株的PCR和PCR-Southern检测证明,外源At-NHX1基因已整合到马铃薯基因组中. 展开更多
关键词 马铃薯 根癌农杆菌 转化 atnhx1基因 转基因植株
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转拟南芥AtNHX1基因促进烟草对钾吸收的研究 被引量:12
7
作者 郭兆奎 杨谦 +2 位作者 姚泉洪 万秀清 颜培强 《高技术通讯》 CAS CSCD 北大核心 2007年第11期1174-1179,共6页
提取拟南芥总RNA,反转录合成Na+/H+逆向转运蛋白基因AtNHX1,构建了植物高效表达载体,用叶盘法将其导入烟草,经筛选获得了抗卡那霉素和GUS染色阳性的转化子38株。应用荧光定量PCR方法对转化材料部分含AtNHX1基因的烟草内源钾通道基因... 提取拟南芥总RNA,反转录合成Na+/H+逆向转运蛋白基因AtNHX1,构建了植物高效表达载体,用叶盘法将其导入烟草,经筛选获得了抗卡那霉素和GUS染色阳性的转化子38株。应用荧光定量PCR方法对转化材料部分含AtNHX1基因的烟草内源钾通道基因、烟草K+转运蛋白基因和烟草焦磷酸酶基因的转录水平进行了分析。结果表明:在转化烟草中可以检测到AtNHX1基因mRNA,与未转化材料相比,烟草钾离子转运蛋白基因NtHAK1的转录降低,H+-ATPase基因NHA1转录增加,钾通道基因NKT转录无显著变化,T1代转化烟叶中K+含量显著增加,Na^+、Ca^2+无显著变化,烟叶中总糖含量降低,证明了编码拟南芥AtNHX1基因与植物的K+吸收有关。 展开更多
关键词 atnhx1基因 转基因烟草 K+吸收
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转AtNHX1基因杨树Tr品系的耐盐性研究 被引量:11
8
作者 姜超强 郑青松 +3 位作者 刘兆普 徐文君 李洪燕 李青 《植物生态学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第5期563-570,共8页
以不同盐分强度处理欧美107杨(Populus×euramericana‘Neva’)(Wt)和转拟南芥液泡膜Na+/H+逆向转运蛋白基因AtNHX1欧美107杨新品系(Tr)幼苗,揭示Tr和Wt两品系幼苗耐盐性的差异,探索拟南芥液泡膜Na+/H+逆向转运蛋白基因AtNHX1对提... 以不同盐分强度处理欧美107杨(Populus×euramericana‘Neva’)(Wt)和转拟南芥液泡膜Na+/H+逆向转运蛋白基因AtNHX1欧美107杨新品系(Tr)幼苗,揭示Tr和Wt两品系幼苗耐盐性的差异,探索拟南芥液泡膜Na+/H+逆向转运蛋白基因AtNHX1对提高杨树耐盐能力的效应。结果表明:低盐处理下,Wt植株生长明显受到抑制,其干重显著低于对照,盐分强度加大后,抑制作用更大,其干重只有对照的50%;而Tr植株在低盐处理下干重与对照差异不显著,高盐处理时其干重为对照的74%。同时,不同盐度处理下,Tr的干重均显著高于Wt,且随着盐度升高,两品系间植株干重差异增大。盐处理后,Tr植株叶片叶绿素和类胡萝卜素的含量均显著高于Wt,并能维持较高的净光合速率(Pn)和PSII最大光化学效率(Fv/Fm);在盐处理下虽然Tr叶片和根系均较Wt积累了更多的Na+,但同时也维持了更高的K+和K+/Na+比率,而且叶片对K+选择性的运输明显高于Wt;同时,Tr叶片MDA含量和电解质渗漏率显著低于Wt。可见,在盐处理下转AtNHX1植株较未转基因植株维持了更高的生长量、光合色素、光合能力和叶片质膜稳定性,说明AtNHX1的转入能够显著提高欧美107杨的耐盐性。 展开更多
关键词 atnhx1 离子区域化 欧美杨 耐盐性 转基因植物
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农杆菌介导转AtNHX1基因杨树的获得 被引量:9
9
作者 徐文君 刘兆普 +1 位作者 隆小华 周玮 《植物生理学通讯》 CSCD 北大核心 2007年第3期413-416,共4页
采用根癌农杆菌介导法,将拟南芥Na^+/H^+逆向转运蛋白(Na^+/H^+antiporter)基因(AtNHX1)转入杨树。建立了杨树的继代及高频再生系统。经抗生素筛选,对再生植株进行PCR检测、PCR产物基因测序和杨树基因组DNA的Southern检测,证实已获得12... 采用根癌农杆菌介导法,将拟南芥Na^+/H^+逆向转运蛋白(Na^+/H^+antiporter)基因(AtNHX1)转入杨树。建立了杨树的继代及高频再生系统。经抗生素筛选,对再生植株进行PCR检测、PCR产物基因测序和杨树基因组DNA的Southern检测,证实已获得126株转AtNHX1基因的杨树植株。 展开更多
关键词 转基因杨树 杨树'尼娃107’ 根癌农杆菌 atnhx1
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AtNHX1基因对草木樨状黄芪的转化和耐盐性表达研究 被引量:8
10
作者 赵宇玮 步怀宇 +2 位作者 郝建国 王英娟 贾敬芬 《分子细胞生物学报》 CSCD 北大核心 2008年第3期213-221,共9页
应用RT-PCR技术从100mmol/LNaCl胁迫处理的拟南芥幼苗中克隆得到编码液泡膜Na+/H+逆向转运蛋白的AtNHX1基因cDNA编码ORF,并在该ORF上游分别插入CaMV 35启动子和TMV RNA5′UTR的Ω片段,而在下游插入NOS polyA构建真核表达盒,进而将该表... 应用RT-PCR技术从100mmol/LNaCl胁迫处理的拟南芥幼苗中克隆得到编码液泡膜Na+/H+逆向转运蛋白的AtNHX1基因cDNA编码ORF,并在该ORF上游分别插入CaMV 35启动子和TMV RNA5′UTR的Ω片段,而在下游插入NOS polyA构建真核表达盒,进而将该表达盒插入双元植物表达载体pNT质粒的T-DNA区构建了携带AtNHX1基因的植物表达载体质粒pNT-AtNHX1。将pNT-AtNHX1导入农杆菌LBA4404,用农杆菌介导法将AtNHX1基因导入豆科牧草草木樨状黄芪中,共获得103株Kan抗性再生植株。通过对农杆菌菌液浓度、侵染时间和乙酰丁香酮浓度等影响转化效率的因素进行优化,初步建立了稳定的草木樨状黄芪农杆菌转化体系。经过PCR检测、Southern杂交和RT-PCR检测表明,AtNHX1基因已被成功整合到草木樨状黄芪基因组中,并且能够正常转录。野生型和转基因株系诱发的愈伤组织进行耐盐生长实验,结果显示相同盐胁迫条件下,转基因愈伤组织的相对生长率显著高于野生型愈伤组织。施加梯度NaCl胁迫后,植株叶片K+,Na+含量和叶片相对电导率测定结果显示,转基因植物叶片比野生型积累更多的Na+和K+,维持较高的K+/Na+;而转基因株系叶片相对电导率显著低于野生型。上述结果表明,AtNHX1基因的导入和表达在提高草木樨状黄芪耐盐性的同时减轻了盐胁迫对植物细胞膜的伤害。 展开更多
关键词 atnhx1 草木樨状黄芪 农杆菌 遗传转化 耐盐性
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根癌农杆菌介导AtNHX1基因转化紫花苜蓿的研究 被引量:8
11
作者 王强龙 王锁民 +4 位作者 张金林 包爱科 陈托兄 楼洁琼 陆妮 《草业科学》 CAS CSCD 2006年第12期55-59,共5页
在已建立的紫花苜蓿Medicogo sativa体细胞胚高频再生体系的基础上,研究了OD600、侵染时间、负压处理、预培养及共培养时间、脱菌及选择方法等因子对转化效率的影响,并初步获得了抗性体胚。
关键词 紫花苜蓿 体细胞胚 根癌农杆菌 atnhx1 遗传转化
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拟南芥NHX5和NHX6:离子平衡与蛋白质运输 被引量:7
12
作者 邱全胜 《中国科学:生命科学》 CSCD 北大核心 2017年第8期839-846,共8页
拟南芥(Arabidopsis thaliana)AtNHX5和AtNHX6离子转运特性和生物功能的研究取得了重要进展.AtNHX5和AtNHX6属于内膜Na^+,K^+/H^+反向交换体(NHX),定位于高尔基(Golgi),反面高尔基网(TGN)和多胞体/液胞前体(MVB/PVC).研究表明,AtNHX5和A... 拟南芥(Arabidopsis thaliana)AtNHX5和AtNHX6离子转运特性和生物功能的研究取得了重要进展.AtNHX5和AtNHX6属于内膜Na^+,K^+/H^+反向交换体(NHX),定位于高尔基(Golgi),反面高尔基网(TGN)和多胞体/液胞前体(MVB/PVC).研究表明,AtNHX5和AtNHX6在调控细胞Na^+,K^+和pH平衡以及耐盐胁迫和钾营养等方面起着重要的作用.AtNHX5和AtNHX6跨膜结构域存在保守的酸性氨基酸残基;这些保守的酸性氨基酸残基调控着AtNHX5和AtNHX6的离子转运活性,从而调节植物的生长发育.最近研究发现,AtNHX5和AtNHX6调控着蛋白质向液胞的运输过程.并且发现,AtNHX5和AtNHX6在许多环节上调控着蛋白质的运输过程:AtNHX5和AtNHX6可能调控着液胞分选受体(VSR)与运输物的结合、VSR的循环运输过程以及SNARE复合物的亚细胞定位3个不同的细胞过程.本文将结合本研究组近年的研究工作,综述目前关于AtNHX5和AtNHX6的离子转运特性和生物功能方面的研究进展. 展开更多
关键词 atnhx5 atnhx6 Na+ K+/H+反向交换体 离子平衡 蛋白质运输 保守酸性氨基酸残基
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拟南芥AtNHX1基因克隆和cre(lox)植物表达载体构建 被引量:7
13
作者 杨平 蔡小宁 +4 位作者 钟小仙 贲爱玲 续晨 王敏 Wu Yajun 《江苏农业科学》 CSCD 北大核心 2007年第6期348-350,共3页
从拟南芥叶片提取总RNA,经反转录得到cDNA。根据Genbank数据库中已登记的拟南芥Na+/H+逆向转运蛋白基因AtNHX1的核苷酸序列设计并合成了1对克隆引物,通过PCR方法从cDNA中扩增出AtNHX1基因片段,将该目的片段克隆至pGEM-TEazy载体。通过酶... 从拟南芥叶片提取总RNA,经反转录得到cDNA。根据Genbank数据库中已登记的拟南芥Na+/H+逆向转运蛋白基因AtNHX1的核苷酸序列设计并合成了1对克隆引物,通过PCR方法从cDNA中扩增出AtNHX1基因片段,将该目的片段克隆至pGEM-TEazy载体。通过酶切,从pGEM-TEazy载体上切下目的基因片段,替换pX6-GFP载体中的GFP基因,构建了AtNHX1基因cre/lox植物表达载体。 展开更多
关键词 拟南芥 atnhx1基因 载体构建
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AtNHX5基因过量表达对拟南芥耐盐性的影响 被引量:6
14
作者 安静 侯蕾 +2 位作者 孔祥强 赵彦修 张慧 《西北植物学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第6期1106-1111,共6页
为了研究AtNHX5基因在植物耐盐中的作用,构建了植物过量表达载体pROKⅡ-AtNHX5,并转化拟南芥。结果显示:(1)RT-PCR检测表明,转基因拟南芥中AtNHX5基因的表达大幅提高。(2)对转基因纯合株系进行耐盐性分析显示,AtNHX5过量表达提高了植株... 为了研究AtNHX5基因在植物耐盐中的作用,构建了植物过量表达载体pROKⅡ-AtNHX5,并转化拟南芥。结果显示:(1)RT-PCR检测表明,转基因拟南芥中AtNHX5基因的表达大幅提高。(2)对转基因纯合株系进行耐盐性分析显示,AtNHX5过量表达提高了植株在种子萌发和苗期的耐盐性。(3)转基因植株在盐处理下的干重、鲜重以及地上部分Na+、K+含量均高于野生型对照。在200mmol/L NaCl处理下,以转基因株系a1-4为例,其地上部分单株鲜重、单株干重、K+含量分别是野生型的1.27、1.54、1.16倍,较野生型显著升高。研究表明,过量表达AtNHX5基因促进了盐胁迫下转基因植株对K+的吸收,转基因拟南芥的耐盐性明显提高。 展开更多
关键词 atnhx5 液泡膜Na+/H+逆向转运蛋白 过量表达 耐盐性 拟南芥
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转AtNHX1基因玉米的产生及其耐盐性分析 被引量:6
15
作者 尹小燕 杨爱芳 +1 位作者 张可炜 张举仁 《Acta Botanica Sinica》 CSCD 2004年第7期854-861,共8页
以玉米(Zea mays L.)骨干自交系DH4866、齐319和鲁原16106的胚性愈伤组织为材料,采用农杆菌介导法将AtNHX1和hpt基因转入玉米培养细胞,经筛选获得了抗潮霉素的愈伤组织并再生植株。经PCR检测和Southern blot验证,确定了22.8%的再... 以玉米(Zea mays L.)骨干自交系DH4866、齐319和鲁原16106的胚性愈伤组织为材料,采用农杆菌介导法将AtNHX1和hpt基因转入玉米培养细胞,经筛选获得了抗潮霉素的愈伤组织并再生植株。经PCR检测和Southern blot验证,确定了22.8%的再生植株为转基因植株。农杆菌液浓度、愈伤组织基因型及共培养时间对转化率均有明显影响。外源基因在转基因植株后代中的分离呈多样性,在部分株系中表现出孟德尔遗传规律。耐盐筛选表明,一些转基因植株及其后代具有很好的耐盐性,部分株系可在0.8%~1.0%NaCI溶液浇灌下萌发和生长。Northern杂交表明,植株耐盐性提高与AtNHX1基因的转录水平相一致。 展开更多
关键词 玉米 atnhx1基因 农杆菌 转基因植株 耐盐
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拟南芥AtNHX6基因启动子的克隆及表达分析 被引量:6
16
作者 王立光 陈军 李静雯 《西北植物学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第2期191-198,共8页
为了探明拟南芥内膜反向转运体AtNHX6基因的组织表达模式,从基因组中克隆了AtNHX6基因开放阅读框(ORF)上游侧翼调控区1 922bp序列,并成功构建AtNHX6基因启动子与GUS融合表达载体pCAM-BIA1381-proNHX6-GUS,通过农杆菌花序浸染法转化野生... 为了探明拟南芥内膜反向转运体AtNHX6基因的组织表达模式,从基因组中克隆了AtNHX6基因开放阅读框(ORF)上游侧翼调控区1 922bp序列,并成功构建AtNHX6基因启动子与GUS融合表达载体pCAM-BIA1381-proNHX6-GUS,通过农杆菌花序浸染法转化野生型拟南芥获得T3代纯合转基因拟南芥株系,经PCR检测扩增得到2 187bp目的条带。利用组织染色法鉴定转基因拟南芥的GUS表达模式发现,在子叶、下胚轴和花中GUS活性显著。在这些广泛表达的部位中,微管系统中的表达最为显著,真叶中只有局部检测到GUS表达;在根中GUS在根毛和侧根生长部位表达;在未成熟果荚中只有在果荚顶端和基部存在GUS活性,成熟果荚中只在果柄检测到GUS表达;在花中,雄蕊的花丝和花粉粒及雌蕊的柱头中检测到GUS表达。GUS染色分析结果表明,AtNHX6基因启动子与GUS的融合表达载体成功构建并正常启动GUS基因表达,且AtNHX6基因主要在拟南芥的子叶、下胚轴、根、花、果荚中的微管系统、根毛和侧根生长部位以及花丝、花粉、柱头中表达。 展开更多
关键词 atnhx6基因 启动子 GUS 表达分析
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转根癌农杆菌介导的AtNHX1基因马铃薯的获得 被引量:5
17
作者 张俊莲 王丽 +2 位作者 王蒂 张金文 陈正华 《作物学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第7期1067-1072,共6页
构建重组表达质粒pBI12135-GZ+AtNHX1(带有CaMV35S启动子),通过农杆菌将其携带的液泡膜Na+/H+逆向转运蛋白基因(AtNHX)转化马铃薯栽培品种“甘农薯2号”试管薯薄片和“克新2号”茎段。经根癌农杆菌侵染和共培养后,用50mgL-1卡那霉素+300... 构建重组表达质粒pBI12135-GZ+AtNHX1(带有CaMV35S启动子),通过农杆菌将其携带的液泡膜Na+/H+逆向转运蛋白基因(AtNHX)转化马铃薯栽培品种“甘农薯2号”试管薯薄片和“克新2号”茎段。经根癌农杆菌侵染和共培养后,用50mgL-1卡那霉素+300mgL-1头孢霉素筛选抗性芽,试管薯薄片获得30株抗性植株,抗性植株再生率为37%;茎段未获得抗性植株。抗性植株的总DNA用AtNHX1基因的特异性引物进行PCR检测,结果27株为阳性,占90%。Southern杂交结果证实,外源基因多以双拷贝整合到马铃薯的基因组中。Northern杂交结果表明,转基因植株可以进行AtNHX1基因mRNA的正常转录,但植株间存在着转录量的差异。该研究为耐盐马铃薯的培育奠定了良好的基础。 展开更多
关键词 马铃薯 根癌农杆菌 转基因植株 atnhx1基因
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Stable expression of Arabidopsis vacuolar Na^+/H^+ antiporter gene AtNHX1,and salt tolerance in transgenic soybean for over six generations 被引量:8
18
作者 LI TianXing ZHANG Yue +3 位作者 LIU Hua WU YuTing LI WenBin ZHANG HongXia 《Chinese Science Bulletin》 SCIE EI CAS 2010年第12期1127-1134,共8页
The Arabidopsis vacuolar Na+/H+ antiporter gene,AtNHX1,was introduced into soybean by Agrobacterium-mediated transformation.Four independent kanamycin resistant lines were obtained.The result of PCR,Southern blotting ... The Arabidopsis vacuolar Na+/H+ antiporter gene,AtNHX1,was introduced into soybean by Agrobacterium-mediated transformation.Four independent kanamycin resistant lines were obtained.The result of PCR,Southern blotting and Northern blotting analyses demonstrated that the AtNHX1 gene was successfully inserted into the soybean genome and stably expressed in these kanamycin resistant lines.The stability of AtNHX1 expression and salt resistance were evaluated in the soybean transformants for over 6 generations.Two independently derived transgenic lines with high expression level of AtNHX1 were selected,and propagated to generation T5 in the absence of selection pressure.PCR and RT-PCR examinations revealed that AtNHX1 was highly expressed in all investigated transgenic T5 progenies.Furthermore,all transgenic T5 plants showed resistant to salt stress,same as those of homozygous T2 plants.Taken together,our results indicated that constitutive expression of AtNHX1 enhanced salt tolerance in soybean for over 6 generations,suggesting a great potential use of AtNHX1 for improving salt tolerance in plants by genetic engineering. 展开更多
关键词 转基因大豆 稳定表达 蛋白基因 逆向转运 耐盐性 液泡膜 拟南芥 NORTHERN杂交
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大豆子叶节遗传转化体系优化及抗逆基因AtNHX5的转化研究 被引量:7
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作者 杨权 王月月 +5 位作者 刘炎光 蒋春志 张孟臣 张洪霞 张洁 王冬梅 《大豆科学》 CAS CSCD 北大核心 2015年第2期205-211,共7页
以河北省优良大豆品种冀豆15、五星2号和NF-58的子叶节为受体材料,利用农杆菌介导法进行遗传转化,探讨了影响农杆菌侵染后子叶节不定芽诱导的因素。结果表明:以萌发6 d、4℃处理24 h的子叶节为外植体,农杆菌侵染后经超声波处理30 s、共... 以河北省优良大豆品种冀豆15、五星2号和NF-58的子叶节为受体材料,利用农杆菌介导法进行遗传转化,探讨了影响农杆菌侵染后子叶节不定芽诱导的因素。结果表明:以萌发6 d、4℃处理24 h的子叶节为外植体,农杆菌侵染后经超声波处理30 s、共培养基中添加20 mg·L-1硝酸银,能够提高子叶节丛生芽诱导率,转化植株经草铵膦筛选以及PCR检测,T0代转化率达0.97%。利用该体系对大豆品种五星2号进行At NHX5基因的遗传转化,获得3株T0代RT-PCR检测阳性植株,且2-1号T1代阳性植株检测具有一定耐盐性,初步证明获得了转At NHX5基因的大豆新材料。 展开更多
关键词 大豆 子叶节 At NHX5基因 遗传转化 除草剂
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AtNHX1基因转化番茄及其耐盐碱性分析 被引量:3
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作者 王东明 崔继哲 杨淳淋 《中国农学通报》 CSCD 北大核心 2009年第22期52-56,共5页
高盐是限制作物生长发育和产量最严重的非生物胁迫之一,提高作物的耐盐性已成为一个日益紧迫的研究课题。将含有AtNHX1基因的表达载体pFYC-AtNHX1和含有bar基因的质粒pCAMBIA3300等量混合,采用花粉管通道法共转化番茄。经PPT抗性筛选后,... 高盐是限制作物生长发育和产量最严重的非生物胁迫之一,提高作物的耐盐性已成为一个日益紧迫的研究课题。将含有AtNHX1基因的表达载体pFYC-AtNHX1和含有bar基因的质粒pCAMBIA3300等量混合,采用花粉管通道法共转化番茄。经PPT抗性筛选后,PCR扩增获得12株导入了AtNHX1基因的番茄植株,Southern杂交分析表明该基因已经整合到番茄基因组中,通过RT-PCR检测到了AtNHX1基因的表达。在150 mmol/L NaCl处理下,转基因植株T1代对NaCl耐性显著增强。对转AtNHX1基因番茄T2代进行80 mmol/L碱性盐NaHCO(3pH 8.25)胁迫,以此评价转AtNHX1基因番茄对碳酸盐的耐受性。叶片相对电导率检测结果表明,AtNHX1基因的导入确实提高了番茄对碱性盐NaHCO3的耐受性。培育并栽种转AtNHX1基因的耐盐碱番茄将会降低盐渍化环境对番茄生长发育的影响。 展开更多
关键词 atnhx1基因 转基因番茄 耐盐性 NAHCO3胁迫 相对电导率
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