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题名α-葡萄糖苷酶基因序列分析及真核表达载体构建
被引量：2
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作者
王继瑞
张云开
覃晓娟
李玮
梁智群
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机构
广西大学生命科学与技术学院
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出处
《生物技术》
CAS
CSCD
北大核心
2009年第5期1-4,共4页
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基金
国家863项目资助("基因工程酶法生产高纯度低聚异麦芽糖"
2006AA10Z339)
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文摘
目的:Aspergillus niger(CU-1)菌株α-葡萄糖苷酶基因(agdA)克隆并对其序列进行分析,构建该基因的真核表达载体。方法:设计合成的一对特异性引物,采用PCR以总DNA为模板,扩增得到DNA片段(D1);采用RT-PCR方法扩增得到DNA片段(D2)。将DNA片段D1和D2转入大肠杆菌中并进行了序列测定,序列进行BLAST比对分析。将α-葡萄糖苷酶基因的cDNA片段与表达载体pGAPZαA连接,构建重组表达载体。结果:基因agdA大小为3 127bp,含有3个外显子和4个内含子。该基因的cDNA序列大小为2 958bp,包含完整的编码框,编码985个氨基酸。agdA基因序列与已发表的α-葡萄糖苷基因序列同源性达99%,其中有6个位置的碱基发生了变化。已成功构建重组表达载体pGAPZαA-agdA。结论:Aspergillus niger(CU-1)菌株α-葡萄糖苷酶基因序列分析及重组表达载体pGAPZαA-agdA的构建为在毕赤酵母中表达Aspergillus niger(CU-1)菌株的α-葡萄糖苷酶奠定基础。
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关键词
aspergillusniger(cu-1)
α-葡萄糖苷酶基因
基因序列分析
真核表达
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Keywords
Aspergillus niger（cu-1）
α-glucosidase
gene sequence analysis
eukaryotic expression
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分类号
Q786
[生物学—分子生物学]
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