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survivin反义寡核苷酸提高人肺腺癌A549耐药细胞系对顺铂敏感性的研究 被引量：18
1
作者 张梅春 胡成平 陈琼 《中华肿瘤杂志》 CAS CSCD 北大核心 2006年第6期408-412,共5页
目的探讨存活素反义寡核苷酸(ASODN)体外转染对耐顺铂人肺腺癌细胞A549/ CDDP凋亡及其对顺铂(CDDP)敏感性的影响。方法常规体外培养A549/CDDP细胞,以脂质体包裹的survivin ASODN转染细胞,采用RT-PCR法和免疫细胞化学法检测survivin mRN... 目的探讨存活素反义寡核苷酸(ASODN)体外转染对耐顺铂人肺腺癌细胞A549/ CDDP凋亡及其对顺铂(CDDP)敏感性的影响。方法常规体外培养A549/CDDP细胞,以脂质体包裹的survivin ASODN转染细胞,采用RT-PCR法和免疫细胞化学法检测survivin mRNA及蛋白表达。通过形态学观察、DNA琼脂糖凝胶电泳、caspase-3酶活性及细胞凋亡率(AI)的测定,评价细胞凋亡程度。采用MTT法测定细胞存活率和生长抑制率,计算半效抑制浓度(IC_(50))及耐药倍数(RI)。结果转染组survivin mRNA及蛋白表达下调明显,分别达41．56%和0．864±0．045,与其他各组比较,差异均有统计学意义(P＜0．05)。细胞形态学显示有细胞凋亡改变,表现为细胞核固缩、核边集和核碎裂等；DNA凝胶电泳可见DNA梯形条带；ASODN转染组细胞凋亡率和caspase-3相对活性分别增高至34．03%和1．1298±0．2502,而ASODN+CDDP组增高更为明显,分别达65．85%和1．6805±0．2758,与其他各组比较,差异均有统计学意义(P＜0．05)。ASODN转染组和ASODN+CDDP组生长抑制率分别增高至59．3%和83．7%(P＜0．05)；而ASODN转染组细胞对CDDP的IC_(50)由对照组的(225．03±10．59)μmol/L减低至(158．84±4．26)μmol/L,RI由11．9减至8．4。结论survivin ASODN通过下调survivin的表达,自身诱导了细胞凋亡,并逆转细胞对CDDP诱导的细胞凋亡的耐受,降低凋亡阈值,从而增强了人肺腺癌细胞对CDDP的敏感性。 展开更多
关键词 SURVIVIN asodn 顺铂 凋亡 人肺腺癌细胞系A549/CDDP 耐药性
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hTERT基因反义核酸对K562细胞端粒酶活性的影响 被引量：16
2
作者 何冬梅 张洹 jnu.edu.cn 《癌症》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2000年第7期653-655,共3页
目的：探讨人类端粒酶逆转录酶（humantelomerasereversetranscriptase,hTERT）基因的反义寡核苷酸（antisenseoligodeoxynucleotide，ASODN）对K562细胞端粒酶活性的影响。方法：采用多聚酶链反应-酶联免疫测定（PCR－ELISA）方法检测... 目的：探讨人类端粒酶逆转录酶（humantelomerasereversetranscriptase,hTERT）基因的反义寡核苷酸（antisenseoligodeoxynucleotide，ASODN）对K562细胞端粒酶活性的影响。方法：采用多聚酶链反应-酶联免疫测定（PCR－ELISA）方法检测人工合成的反义脱氧寡核苷酸处理K562细胞前后端粒酶活性的改变，以逆转录PCR（RT－PCR）分析hTERT基因mRNA表达水平。结果：hTERT基因的ASODN作用于K562细胞后，hTERTmRNA表达水平显著下调，其端粒酶活性明显受到抑制。结论：hTERT基因的ASODN可以在翻译水平显著抑制K562细胞的端粒酶活性，hTERT基因与端粒酶的活性密切相关。 展开更多
关键词 HTERT基因 K562细胞 端粒酶 asodn 肿瘤
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Survivin mRNA反义寡核苷酸诱导胰腺癌细胞凋亡 被引量：11
3
作者 王亚利 宋天保 +3 位作者 王西京 王中卫 宋潍 郝小静 《世界华人消化杂志》 CAS 2004年第8期1872-1874,共3页
目的:用反义寡核苷酸(ASODN)封闭胰腺癌细胞中Survivin 基因的表达,研究其诱导细胞凋亡的作用及其机制. 方法:用脂质体介导SurvivinASODN转染人胰腺癌细胞株SW1990细胞,用Annexin Ⅴ-FITC/PI复染、流式细胞术检测及电镜术观察凋亡,激酶... 目的:用反义寡核苷酸(ASODN)封闭胰腺癌细胞中Survivin 基因的表达,研究其诱导细胞凋亡的作用及其机制. 方法:用脂质体介导SurvivinASODN转染人胰腺癌细胞株SW1990细胞,用Annexin Ⅴ-FITC/PI复染、流式细胞术检测及电镜术观察凋亡,激酶活性检测法测定细胞内caspase-3活性变化,免疫沉淀法测定细胞内丝裂原活化蛋白激酶p38(p38MAPK)活性的变化早期细胞变化情况. 结果:脂质体介导SurvivinASODN转染胰腺癌细胞后细胞内p38MAPK及caspase-3活性较对照组明显升高(55.3% vs 2.9%,3.2%,4.5%,4.8%respectively,P<0.05).细胞出现典型的凋亡形态学特征,细胞凋亡率较对照组明显增加(8.81±1.33 vs 47.87±2.91,and 14.73±1.36 vs 23.47±3.61.P<0.05). 结论:脂质体介导转染Survivin ASODN可以诱导细胞激活,诱导活化进而诱导细胞发生凋亡. 展开更多
关键词 凋亡 asodn 胰腺癌细胞 诱导 脂质体介导 反义寡核苷酸 转染 RNA 形态学特征 免疫沉淀法
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脂质体生存素反义寡核苷酸抑制胃癌裸鼠皮下移植瘤生长的作用 被引量：11
4
作者 付广 王国斌 +1 位作者 卢晓明 杨春 《中华外科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2004年第22期1367-1371,共5页
目的　探讨脂质体生存素反义寡核苷酸 (ASODN)对人胃癌裸鼠皮下移植瘤生长的抑制作用及机理。方法　将 2 4只裸鼠建立人胃癌细胞系HS 74 6T皮下移植瘤模型 ,用不同的转染液处理后随机分成 6组 :空白对照组 ,脂质体组 ,正义链组 ,10 0、2... 目的　探讨脂质体生存素反义寡核苷酸 (ASODN)对人胃癌裸鼠皮下移植瘤生长的抑制作用及机理。方法　将 2 4只裸鼠建立人胃癌细胞系HS 74 6T皮下移植瘤模型 ,用不同的转染液处理后随机分成 6组 :空白对照组 ,脂质体组 ,正义链组 ,10 0、2 0 0和 4 0 0nmol/L反义链组 (ASODN组 )。于注射相应试剂后 2 ,4 ,8,12 ,16 ,2 0d观测裸鼠移植瘤体积 ,计算抑瘤率和肿瘤缩小率 ,观察移植瘤细胞形态变化 ,免疫组化SP法检测生存素的表达 ,并用逆转录聚合酶链反应技术 (RT PCR)和Westernblot蛋白免疫印迹法比较治疗后不同时间各组肿瘤组织中生存素mRNA和蛋白表达的变化。结果注射后 2 0d空白组、脂质体组和正义链组裸鼠的抑瘤率无明显差异 ,而ASODN组移植瘤的体积随着时间和浓度的增加而减小 ,肿瘤缩小率则增大 ,抑瘤率均大于对照组 ,4 0 0nmol/LASODN组抑瘤率最大为 93%。光镜下见ASODN组移植瘤凋亡细胞数增多 ,生存素表达减弱 ,6例 ( 6 /12 )肿瘤组织有坏死液化灶。各ASODN组均能够下调移植瘤细胞生存素mRNA含量 ,抑制生存素蛋白表达 ,注射 2 0d后4 0 0nmol/LASODN组蛋白表达为空白对照组的 36 8%。结论　生存素基因反义寡核苷酸能够通过诱导人胃癌裸鼠皮下移植瘤细胞凋亡 ,下调生存素mRNA和蛋白的表达 ,抑制裸鼠皮? 展开更多
关键词 生存素 asodn 裸鼠皮下移植瘤 抑瘤率 脂质体 反义寡核苷酸 瘤细胞 RNA 组蛋白 逆转录聚合酶链反应技术
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c-myc反义寡核苷酸对肾癌细胞的生长抑制作用及对细胞周期的影响 被引量：9
5
作者 王子明 种铁 张鹏 《西安交通大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2003年第6期611-612,623,共3页
目的　观察修饰的c myc反义寡核苷酸 (ASODN)对肾癌细胞的生长和细胞周期的影响。 方法　用人工合成的c mycASODN转染于培养的人肾癌细胞 ,观察其对瘤细胞的作用。结果　①MTT法测定发现 ,与正义和错配链相比较 ,c mycASODN有明显抑制... 目的　观察修饰的c myc反义寡核苷酸 (ASODN)对肾癌细胞的生长和细胞周期的影响。 方法　用人工合成的c mycASODN转染于培养的人肾癌细胞 ,观察其对瘤细胞的作用。结果　①MTT法测定发现 ,与正义和错配链相比较 ,c mycASODN有明显抑制肾癌细胞生长的作用 ,12 μmol·L-1c mycASODN组作用 4 8h ,对瘤细胞的生长抑制率为 4 7% ;该生长抑制作用随反义药物剂量的增加而增强 ,同时随作用时间的变化而变化。②流式细胞仪检测证明 ,c mycASODN对肾癌细胞周期的抑制作用在G1期到S期。结论　c 展开更多
关键词 C-MYC 反义寡核苷酸 肾癌 生长抑制 细胞周期 asodn 细胞培养
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端锚聚合酶1反义寡核苷酸对人肺癌细胞增殖的影响 被引量：8
6
作者 战忠利 李翀 孙慧 《中华结核和呼吸杂志》 CAS CSCD 北大核心 2004年第9期604-607,共4页
目的　探讨端锚聚合酶 1(tankyrase 1,TANK1)反义寡核苷酸对人肺癌细胞的影响 ,为肺癌治疗的靶向研究探索新途径。方法　合成TANK1正义寡核苷酸 (TANK1 SODN)、反义寡核苷酸(TANK1 ASODN) ,待人肺癌细胞株CALU在裸鼠蹊部皮下接种成瘤后 ... 目的　探讨端锚聚合酶 1(tankyrase 1,TANK1)反义寡核苷酸对人肺癌细胞的影响 ,为肺癌治疗的靶向研究探索新途径。方法　合成TANK1正义寡核苷酸 (TANK1 SODN)、反义寡核苷酸(TANK1 ASODN) ,待人肺癌细胞株CALU在裸鼠蹊部皮下接种成瘤后 ,将成瘤裸鼠随机分成 3组 :对照组 4只 (每天上午于瘤体内多位点注射生理盐水 2 0 0 μl/只 ) ,正义组 (每天同法注射含TANK SODN10 0 μg的生理盐水 2 0 0 μl/只 )和反义组 (每天同法注射含TANK ASODN 10 0 μg的生理盐水 2 0 0 μl/只 )各 5只 ,观察肿瘤的生长情况及组织学改变。用链霉亲和素 生物素 酶复合物 (SABC)法检测肿瘤细胞Ki6 7及端粒酶反转录酶 (hTERT)的阳性表达率。结果　在裸鼠成瘤部位连续注射相应液体 16d后 ,反义组移植瘤体积为 (1 4 6± 0 70 )cm3 ,明显小于对照组的 (3 2 9± 0 4 7)cm3 及正义组的 (3 14±0 70 )cm3 ,差异有显著性 (P均 <0 0 1) ;肿瘤细胞Ki6 7标记指数及hTERT细胞阳性率均明显低于对照组及正义组 (P均 <0 0 1)。结论　人肺癌细胞株端粒酶呈高度表达 ,TANK1 ASODN可降低瘤细胞端粒酶活性 。 展开更多
关键词 人肺癌细胞 反义寡核苷酸 注射 asodn 对照组 生理盐水 裸鼠 结论 研究探索 新途径
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PDGF-α受体反义寡核苷酸对体外视网膜色素上皮细胞增殖和凋亡的影响 被引量：10
7
作者 邱梅园 彭燕一 +2 位作者 黄岚珍 张玉明 向秋 《国际眼科杂志》 CAS 2011年第2期229-231,共3页
目的:探讨血小板源性生长因子-α受体反义寡核苷酸(PDGFR-αASODN)对体外人视网膜色素上皮(humanretinal pigment epithelium,HRPE)细胞增殖和凋亡的作用。方法:使用阳离子脂质体lipofectamineTM2000将靶向PDGFR-α基因的ASODN转染至细... 目的:探讨血小板源性生长因子-α受体反义寡核苷酸(PDGFR-αASODN)对体外人视网膜色素上皮(humanretinal pigment epithelium,HRPE)细胞增殖和凋亡的作用。方法:使用阳离子脂质体lipofectamineTM2000将靶向PDGFR-α基因的ASODN转染至细胞株HRPE细胞,MTT法检测对HRPE细胞增殖的影响;Hoechst33258荧光染色观察凋亡细胞;流式细胞仪检测HRPE细胞的周期和凋亡率。结果:PDGFR-αASODN转染组细胞增殖抑制率和凋亡率均明显高于对照组(P<0.05)。结论:沉默PDGFR-α基因表达可显著抑制HRPE细胞的增殖,并能诱导其凋亡。 展开更多
关键词 PDGF-α受体 反义寡核苷酸 视网膜色素上皮细胞 增殖 凋亡
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Survivin反义寡核苷酸对乳腺癌荷瘤裸鼠的抑瘤作用研究 被引量：8
8
作者 段体德 刘德权 杨策尧 《中国普通外科杂志》 CAS CSCD 2005年第9期691-695,共5页
目的探讨survivin反义寡核苷酸(ASODN)对乳腺癌荷瘤裸鼠的抑瘤作用。方法3 0只裸鼠建立人乳腺癌MCF-7细胞移植瘤动物模型。成瘤后动物随机分3组,每组1 0只。分别于瘤周及瘤体注射阳离子脂质体(lipofectin,Lip),ASODN/Lip及NODN/Lip,每5... 目的探讨survivin反义寡核苷酸(ASODN)对乳腺癌荷瘤裸鼠的抑瘤作用。方法3 0只裸鼠建立人乳腺癌MCF-7细胞移植瘤动物模型。成瘤后动物随机分3组,每组1 0只。分别于瘤周及瘤体注射阳离子脂质体(lipofectin,Lip),ASODN/Lip及NODN/Lip,每5天1次,共3次。观察肿瘤抑制率、肿瘤体积和裸鼠体重的变化。用TUNEL法,透射电镜观察体内瘤体的细胞调亡情况;用W estern-blot检测各组肿瘤的survivin蛋白表达情况。结果成功建立了裸鼠皮下移植瘤模型。ASODN/Lip治疗组的肿瘤体积在治疗期内减少,抑瘤率达7 0.1 0%;而NODN/Lip治疗组和Lip对照组肿瘤体积增加。各组裸鼠体重无明显变化。ASODN/Lip组细胞凋亡率为3 8.6%明显高于其他两组,差异有显著性(P<0.0 5)。ASODN/Lip组肿瘤的survivin蛋白表达明显降低。结论survivin反义寡核苷酸可有效地抑制人乳腺癌裸鼠皮下肿瘤的生长速度,并促进诱导肿瘤细胞的凋亡。 展开更多
关键词 乳腺癌/治疗 SURVIVIN反义寡核苷酸 荷瘤裸鼠 人乳腺癌 抑瘤作用 SURVIVIN反义寡核苷酸 SURVIVIN蛋白 asodn 肿瘤抑制率 Western
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血管内皮生长因子反义寡核苷酸抑制甲状腺癌血管生成的效应 被引量：6
9
作者 张海燕 高大新 +3 位作者 李萍 任路平 曹翠萍 刘国良 《中华内科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2005年第4期280-284,共5页
目的探讨反义寡核苷酸(ASODN)抑制甲状腺癌细胞血管内皮生长因子(VEGF)表达及内皮细胞生长的效应。方法设计合成靶向VEGF的ASODN转染人髓状甲状腺癌细胞系(TT)细胞,并制备相应条件培养基作用内皮细胞ECV304,设正义寡核苷酸(SODN)和空白... 目的探讨反义寡核苷酸(ASODN)抑制甲状腺癌细胞血管内皮生长因子(VEGF)表达及内皮细胞生长的效应。方法设计合成靶向VEGF的ASODN转染人髓状甲状腺癌细胞系(TT)细胞,并制备相应条件培养基作用内皮细胞ECV304,设正义寡核苷酸(SODN)和空白对照组进行比较。观察细胞生长状态,RT PCR、免疫细胞化学法检测TT细胞VEGFmRNA和蛋白表达,四氮唑蓝法检测TT和ECV304细胞生长抑制率(IR),流式细胞仪、吖啶橙/溴化乙锭染色法检测ECV304细胞凋亡状态。结果ASODN组TT细胞VEGFmRNA和蛋白表达显著低于SODN和对照组(P<0.01),但IR差异无统计学意义(P>0.05);各转染组ECV304细胞IR差异亦无统计学意义(P>0.05);而经各ASODN组TT细胞条件培养基作用的ECV304细胞生长明显受抑,IR(分别为0.21±0.03、0.31±0.01、0.42±0.22)显著高于SODN组(0.05±0.03,P<0.01),并伴明显细胞凋亡,上述效应呈浓度依赖性。结论ASODN可通过特异性封闭甲状腺癌细胞VEGF表达,抑制内皮细胞生长,干扰肿瘤血管生成。 展开更多
关键词 血管内皮生长因子(VEGF) 效应 甲状腺癌 酸抑制 asodn ECV304细胞 内皮细胞生长 免疫细胞化学法 细胞生长抑制率 条件培养基 反义寡核苷酸 正义寡核苷酸 细胞生长状态 VEGF表达 肿瘤血管生成 腺癌细胞 蛋白表达 mRNA 细胞凋亡
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蛋白激酶C-α反义核酸对人肝癌细胞HepG2体外增殖及凋亡的影响 被引量：5
10
作者 祝葆华 姚榛祥 +3 位作者 江黎明 吴平 何惠娟 杨展 《中华实验外科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2004年第6期678-680,共3页
目的　探讨蛋白激酶 (PK )C α反义寡核苷酸 (asODN)对人肝癌细胞HepG2体外增殖及凋亡的影响。方法　用RPMI 164 0体外培养和传代HepG2细胞 ,以脂质体 (LP)介导不同浓度PKC αasODN转染人肝癌细胞HepG2 ,四甲基偶氮唑蓝 (MTT)比色法检... 目的　探讨蛋白激酶 (PK )C α反义寡核苷酸 (asODN)对人肝癌细胞HepG2体外增殖及凋亡的影响。方法　用RPMI 164 0体外培养和传代HepG2细胞 ,以脂质体 (LP)介导不同浓度PKC αasODN转染人肝癌细胞HepG2 ,四甲基偶氮唑蓝 (MTT)比色法检测其生长指数 (GI) ,软琼脂克隆形成法检测其克隆形成率 ,流式细胞术 (FCM )检测其凋亡率。结果　 0 .10～ 1.0 0 μmol/L的PKC αasODN能显著降低HepG2细胞GI(P <0 .0 5 ) ;0 .0 5～ 1.0 0 μmol/L的PKC αasODN能显著降低其软琼脂克隆形成率 (P <0 .0 1) ,两者均具有量效依赖关系。 0 .5 0～ 1.0 0 μmol/L的PKC αa sODN可使HepG2细胞发生显著凋亡 (P <0 .0 1)。结论　通过PKC αasODN阻断人肝癌细胞HepG2信号转导分子PKC α ,可有效抑制HepG2体外生长增殖 。 展开更多
关键词 蛋白激酶C-Α 反义核酸 人肝癌细胞 HEPG2 体外增殖 细胞凋亡
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生存素反义寡核苷酸对胃癌细胞株SGC-7901生长的影响 被引量：3
11
作者 王晓梅 王一平 董芸 《实用癌症杂志》 2005年第1期24-27,共4页
目的　观察生存素蛋白在胃癌细胞株SGC 790 1中的表达及转染不同浓度的生存素反义寡核苷酸(ASODN )对胃癌细胞SGC- 790 1生长的影响。方法　采用细胞免疫组织化学染色观察生存素蛋白在胃癌细胞株SGC- 790 1中的表达。将胃癌细胞株SGC 79... 目的　观察生存素蛋白在胃癌细胞株SGC 790 1中的表达及转染不同浓度的生存素反义寡核苷酸(ASODN )对胃癌细胞SGC- 790 1生长的影响。方法　采用细胞免疫组织化学染色观察生存素蛋白在胃癌细胞株SGC- 790 1中的表达。将胃癌细胞株SGC 790 1分为8个组:空白对照组,脂质体转染组,2 0 0nmol/L、40 0nmol/L、60 0nmol/L无义链转染组,2 0 0nmol/L、40 0nmol/L、60 0nmol/L反义链转染组,转染48h后,采用四氮唑盐(MTT )比色法,测定各组的细胞生长抑制率,并采用流式细胞仪检测60 0nmol/L无义链转染组、60 0nmol/L反义链转染组细胞的凋亡率以及生存素蛋白表达。结果　显示生存素蛋白在胃癌细胞株SGC- 790 1的胞核和胞质中均有表达,但以胞核为主;各组生存素ASODN对胃癌细胞株SGC- 790 1有明显的抑制作用(P <0 .0 1) ,抑制作用呈浓度依赖性,60 0nmol/L反义链转染组抑制率为最高,达40 .0 % ,流式细胞仪检测表明生存素ASODN有明显的诱导细胞凋亡的作用,定量检测结果显示生存素ASODN可以下调生存素蛋白至8.8% (P <0 .0 1)。结论　不同浓度的生存素ASODN均能通过下调生存素蛋白表达来抑制胃癌细胞株SGC- 790 1的生长。 展开更多
关键词 SGC-7901 生存素反义寡核苷酸 胃癌细胞株 流式细胞仪检测 mol/L asodn 细胞免疫组织化学 细胞生长抑制率 诱导细胞凋亡 不同浓度 蛋白表达 抑制作用 脂质体转染 浓度依赖性 染色观察 四氮唑盐 检测结果 表达及 对照组
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Survivin反义寡核苷酸对人卵巢癌细胞株中survivin和SMAC/DIABLO基因表达的影响 被引量：4
12
作者 孙艳 李勇 +3 位作者 范立侨 吴小华 程建新 赵群 《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第10期1571-1574,共4页
目的观察survivin反义寡核苷酸(ASODN)对人卵巢癌细胞株SKOV3中survivin、Smac/DIABLO表达的影响,探讨survivin、Smac/DIABLO在ASODN诱导卵巢癌细胞凋亡和细胞周期改变中的作用和分子机制。方法用脂质体(LipofectamineTM2000)介导surviv... 目的观察survivin反义寡核苷酸(ASODN)对人卵巢癌细胞株SKOV3中survivin、Smac/DIABLO表达的影响,探讨survivin、Smac/DIABLO在ASODN诱导卵巢癌细胞凋亡和细胞周期改变中的作用和分子机制。方法用脂质体(LipofectamineTM2000)介导survivin ASODN转染人卵巢癌细胞株SKOV3,用MTT比色法检测细胞生长活性,流式细胞学技术检测细胞凋亡指数、细胞周期分布及survivin、Smac蛋白表达改变,逆转录酶链反应检测survivin、Smac/DIABLO基因表达改变。结果同对照组比较,不同浓度ASODN作用后细胞生长明显减慢,转染后48hIC50在600nmol/l左右。用600nmol/L ASODN转染48h后,细胞凋亡指数(AI)明显增加,(t=6.3671,P<0.05);更多的细胞停留在G0/G1期(t=10.3832,P<0.01)。Survivin mRNA和蛋白表达明显下调(t=3.5031,P<0.05,t=7.8146,P<0.01),SmacmRNA和蛋白表达上调(t=2.8011,P<0.05,t=11.3917,P<0.01)。结论ASODN诱导细胞凋亡,使更多的细胞停留在G0/G1期,减少进入有丝分裂细胞数的作用,是通过下调survivin基因,上调Smac基因表达来共同完成的,survivin、Smac/DIABLO基因在调节SKOV3细胞周期、凋亡的功能上密切相关,二者的相互作用是卵巢癌发生、发展的重要分子机制之一。 展开更多
关键词 卵巢癌 SURVIVIN基因 Smac/DIABLO基因 asodn
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Ki67反义核酸对裸鼠人肾癌细胞移植瘤生长及凋亡的影响 被引量：4
13
作者 郑骏年 陈家存 +6 位作者 孙晓青 孙亚峰 顾骧 温儒民 李望 吴松 刘俊杰 《中华实验外科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2004年第9期1132-1133,共2页
目的 观察Ki67基因反义寡核苷酸(ASODNs)对裸鼠人肾癌细胞移植瘤生长及凋亡的影响。方法 BALB／C-nu裸鼠接种入肾癌786-0细胞,治疗组瘤体注射ASODNs(10 mmol／g),连续4 d。对照组注射RPMI 1640培养基。药物处理后第3、6、12天每次处死小... 目的 观察Ki67基因反义寡核苷酸(ASODNs)对裸鼠人肾癌细胞移植瘤生长及凋亡的影响。方法 BALB／C-nu裸鼠接种入肾癌786-0细胞,治疗组瘤体注射ASODNs(10 mmol／g),连续4 d。对照组注射RPMI 1640培养基。药物处理后第3、6、12天每次处死小鼠4只,取瘤组织检测肿瘤体积;免疫组织化学、Western blot检测Ki67表达;脱氧核苷酸末端转移酶介导的缺口末端标记(TUNEL)法检测凋亡。结果ASODNs处理组小鼠肿瘤体积缩小,与对照组比较差异有显著性(P<0.01);肿瘤Ki-67抗原表达率、Ki-67蛋白定量均降低,与对照组比较差异均有显著性(P<0.01);肿瘤细胞凋亡率增加,与对照组比较差异均有显著性(P<0.01)。结论Ki67 ASODNs能有效抑制裸鼠入肾癌细胞移植瘤生长并促进其凋亡。 展开更多
关键词 凋亡 asodn 移植瘤 KI67 对照组 肾癌细胞 裸鼠 生长 BALB/C 表达率
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血管内皮生长因子反义寡核苷酸在人甲状腺髓样癌裸鼠模型中的抑瘤作用 被引量：4
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作者 都镇先 张海燕 +2 位作者 尹福在 杨向红 刘国良 《中华肿瘤防治杂志》 CAS 2006年第19期1452-1456,共5页
目的探讨血管内皮生长因子(VEGF)反义寡核苷酸(antisenseoligode-oxyribonucleotide,ASODN)在人甲状腺髓样癌(MTC)裸鼠模型中的抑瘤作用。方法构建12只MTC裸鼠模型,随机分为三组。治疗结束后1周,杀死全部瘤鼠,切取瘤体,测算瘤质量和IR... 目的探讨血管内皮生长因子(VEGF)反义寡核苷酸(antisenseoligode-oxyribonucleotide,ASODN)在人甲状腺髓样癌(MTC)裸鼠模型中的抑瘤作用。方法构建12只MTC裸鼠模型,随机分为三组。治疗结束后1周,杀死全部瘤鼠,切取瘤体,测算瘤质量和IR以评价肿瘤生长情况,瘤组织石腊切片分别行HE、免疫组化(IHC)和DNA末端原位标记法(TUNEL法)染色以评价组织病理构造、VEGF与Survivin蛋白表达和细胞凋亡的变化。结果HE染色显示ASODN组具有明显减低的血管新生特点。此外,相对于正常组和SODN组,ASODN组具有显著的VEGF[(0.12±0.02)、(0.15±0.02)、(0.08±0.02)]和Sur-vivin[(0.17±0.03),(0.18±0.02),(0.09±0.02)]低表达、低瘤质量[(0.53±0.02)g,(0.54±0.03)g,(0.45±0.02)g]、高抑瘤率[(0±3.44)%,(-2.36±4.72)%、(15.57±3.22)%]和高凋亡[(4.91±0.67)%,(4.46±1.01)%,(24.68±1.22)%]特点(各P<0.01),而正常组与SODN组间未见上述各特点的统计学差异(各P>0.05)。结论针对人MTCVEGF基因沉默治疗能够达到明显抑瘤效果,此效果至少部分通过抑制肿瘤血管新生和促进肿瘤调亡而实现。这提示VEGF基因在人MTC中具有重要意义,可能成为人MTC基因靶向沉默治疗的重要候选基因之一。 展开更多
关键词 血管内皮生长因子 反义寡核苷酸 甲状腺癌 裸鼠
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VEGF反义寡核苷酸对舌鳞癌影响的实验研究 被引量：4
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作者 李晓光 王延秀 +2 位作者 高德安 杨宪勇 刘爱华 《口腔颌面外科杂志》 CAS 2009年第6期395-399,共5页
目的:研究血管内皮细胞生长因子反义寡核苷酸(VEGF-ASODN)对裸鼠荷人舌癌肿瘤的生长抑制作用。方法:20只BALB/C裸鼠分为4组,每组5只,实验1～3组建立人舌癌荷瘤裸鼠移植瘤模型,并注射相应试剂;第4组为未荷瘤对照组。①VEGF-ASODN组:于瘤... 目的:研究血管内皮细胞生长因子反义寡核苷酸(VEGF-ASODN)对裸鼠荷人舌癌肿瘤的生长抑制作用。方法:20只BALB/C裸鼠分为4组,每组5只,实验1～3组建立人舌癌荷瘤裸鼠移植瘤模型,并注射相应试剂;第4组为未荷瘤对照组。①VEGF-ASODN组:于瘤体及瘤周注射VEGF-ASODN66μg。②错义寡核苷酸组:注射错义寡核苷酸66μg。③生理盐水组:注射生理盐水。各组每3天注射1次,共注射7次。实验结束后2d,处死动物,取血清测VEGF蛋白,测量肿瘤大小及重量,取肿瘤组织切片用免疫组织化学方法检测VEGF、PCNA、CD34的表达,计算微血管密度(microvesseldensity,MVD)和增殖细胞核抗原标记指数(PCNALabelindex,PLI),分子原位杂交测VEGFmRNA表达。结果:VEGF-ASODN组荷瘤裸鼠血清VEGF蛋白水平,肿瘤的体积和重量,VEGFmRNA及其蛋白和PCNA、CD34的表达均显著低于对照组。结论:VEGF-ASODN通过抑制VEGF表达,从而抑制舌癌细胞的生长、增殖。 展开更多
关键词 血管内皮细胞生长因子 反义寡核苷酸 裸鼠 基因技术 舌 鳞状细胞癌
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半乳糖基修饰的反义硫代寡核苷酸对肝癌多药耐药细胞株MDR_1基因过度表达的抑制作用 被引量：2
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作者 郭军 王宝成 +2 位作者 董冰 师秋丽 狄剑时 《中国肿瘤临床》 CAS CSCD 北大核心 1998年第7期480-483,共4页
设计合成三种互补ＭＤＲ１ｍＲＮＡ的反义硫代寡核苷酸（ＡＳＯＤＮ），分别互补ＭＤＲ１ｍＲＮＡ序列起始区、含ＡＵＧ起始密码子区及针对Ｌｏｏｐ形成位点区的序列，作用于阿霉素（ＤＯＸ）诱导的肝癌多药耐药细胞株ＢＥＬ－７４０２... 设计合成三种互补ＭＤＲ１ｍＲＮＡ的反义硫代寡核苷酸（ＡＳＯＤＮ），分别互补ＭＤＲ１ｍＲＮＡ序列起始区、含ＡＵＧ起始密码子区及针对Ｌｏｏｐ形成位点区的序列，作用于阿霉素（ＤＯＸ）诱导的肝癌多药耐药细胞株ＢＥＬ－７４０２／ＤＯＸ。经流式细胞分析及ＲＴ－ＰＣＲ的方法检测，发现三种ＡＳＯＤＮ均能不同程度地降低ＢＥＬ－７４０２／ＤＯＸ细胞膜表面Ｐ－ＧＰ含量；同时ＭＤＲ１ｍＲＮＡ的表达也有轻度降低，其中尤以互补ＭＤＲ１ｍＲ－ＮＡＬｏｏｐ形成位点的ＡＳＯＤＮ抑制作用最强。以导向配体Ｇａｌ１０－ＰＬＬ修饰此ＡＳＯＤＮ后，作用于ＢＥＬ－７４０２／ＤＯＸ细胞，发现与相同剂量未修饰ＡＳＯＤＮ比较，Ｐ－ＧＰ含量由７６．８％降至１９．８％；对ＡＤＭ的ＩＣ５０由１．２８μｇ／ｍｌ降至０．４２μｇ／ｍｌ。实验说明，半乳糖基修饰的互补ＭＤＲ１ｍＲＮＡＬｏｏｐ形成位点的ＡＳＯＤＮ能够明显降低肝癌多药耐药细胞膜表面Ｐ－ＧＰ的含量，并较大程度地逆转多药耐药细胞ＢＥＬ－７４０２／ＤＯＸ对化疗药物的耐受性。 展开更多
关键词 肝肿瘤 药物疗法 半乳糖 asodn 多药耐药
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端粒酶活性的抑制对顺铂诱导HL-60细胞凋亡的影响 被引量：3
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作者 何冬梅 张洹 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 2001年第3期215-219,共5页
采用端粒酶聚合酶链反应 酶联免疫吸附测定 (PCRELISA)的方法 ,检测人类端粒酶逆转录酶 (hTERT)基因反义寡脱氧核苷酸 (ASODN)处理HL 60细胞前后端粒酶活性的改变 ,并进一步通过姬姆萨染色及流式细胞术方法 ,分析HL 60细胞的端粒酶活... 采用端粒酶聚合酶链反应 酶联免疫吸附测定 (PCRELISA)的方法 ,检测人类端粒酶逆转录酶 (hTERT)基因反义寡脱氧核苷酸 (ASODN)处理HL 60细胞前后端粒酶活性的改变 ,并进一步通过姬姆萨染色及流式细胞术方法 ,分析HL 60细胞的端粒酶活性受到抑制后顺铂对HL 60细胞凋亡的影响。结果显示 :hTERT基因ASODN作用于HL 60细胞后 ,端粒酶活性表现逐渐下降 ;hTERTASODN与顺铂联合可诱导HL 60细胞出现一系列特征性的凋亡细胞的形态学变化 ;hTERT基因ASODN作用于HL 60细胞 2 4小时再加入顺铂 ,用流式细胞术测定凋亡细胞的百分率明显高于正义寡核苷酸 (SODN)联合顺铂作用组和单用顺铂作用组 (P <0 .0 1)。然而 ,hTERT基因的ASODN下调HL 60细胞的端粒酶活性以后 ,再用DNR和Ara c处理不能加速HL 60细胞的凋亡。以上的结果表明了端粒酶活性的下调可选择性促进顺铂诱导HL 展开更多
关键词 端粒酶 反义寡脱氧核苷酸 asodn 顺铂 HTERT 细胞凋亡 HL-60细胞 白血病
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以jetPEI-RGD为载体的^(125)I-(α_v)ASODN投递对人肝癌细胞侵袭力的影响 被引量：1
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作者 蔡海东 谯娱 +5 位作者 袁雪宇 余飞 杨越华 袁世栋 孙明 吕中伟 《实用医学杂志》 CAS 北大核心 2010年第9期1496-1499,共4页
目的:探讨以jetPEI-RGD为转染载体的125I-(αV)ASODN投递在体外对HepG2细胞侵袭力的影响。方法:125I标记整合素αV亚基的ASODN,以聚乙烯亚胺衍生物jetPEI-RGD为载体,通过受体介导的转染方式进入HepG2细胞,利用Boyden小室侵袭模型评估复... 目的:探讨以jetPEI-RGD为转染载体的125I-(αV)ASODN投递在体外对HepG2细胞侵袭力的影响。方法:125I标记整合素αV亚基的ASODN,以聚乙烯亚胺衍生物jetPEI-RGD为载体,通过受体介导的转染方式进入HepG2细胞,利用Boyden小室侵袭模型评估复合物对HepG2细胞侵袭力的影响,并计算实验组和各对照组的抑制率。结果:jetPEI-RGD/125I-(αV)ASODN组、jetPEI-RGD/(αV)ASODN组、jetPEI-RGD组、125I-(αV)ASODN组、(αV)ASODN组和Na125I组的抑制率分别为(52.60±4.11)%、(39.73±3.40)%、(30.05±5.19)%、(14.14±2.94)%、(12.79±2.68)%和(0.91±2.91)%,相对于其他各实验对照组,jetPEI-RGD/125I-(αV)ASODN组减低了HepG2细胞的侵袭能力(P<0.01)。结论:以jetPEI-RGD为载体投递125I-(αv)ASODN能有效抑制HepG2细胞的侵袭力。 展开更多
关键词 肝肿瘤 jetPEI-RGD 整合素αV亚基 asodn 细胞侵袭
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ILK反义寡核苷酸对人上皮性卵巢癌裸鼠皮下移植瘤的治疗作用 被引量：1
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作者 李奇 李琛 +2 位作者 张云艳 孙静 刘艳雨 《哈尔滨医科大学学报》 CAS 北大核心 2012年第4期346-349,353,共5页
目的探讨整合素连接激酶(integrin linked kinase,ILK)反义寡核苷酸(antisense oligonucleoti-de,ASODN)对人卵巢癌裸鼠皮下移植瘤的治疗作用。方法将人卵巢癌HO-8910细胞株接种于裸鼠皮下,建立人卵巢癌裸鼠模型,并将裸鼠随机分为对照... 目的探讨整合素连接激酶(integrin linked kinase,ILK)反义寡核苷酸(antisense oligonucleoti-de,ASODN)对人卵巢癌裸鼠皮下移植瘤的治疗作用。方法将人卵巢癌HO-8910细胞株接种于裸鼠皮下,建立人卵巢癌裸鼠模型,并将裸鼠随机分为对照组和治疗组,每次腹腔注射治疗后称量裸鼠体重、肿瘤体积及重量,并计算抑瘤率。同时,分别用脂质体和脂质体-ILK-ASODN转染HO-8910细胞,用WST-1法检测转染后两组细胞体外的增殖情况,用流式细胞术检测细胞凋亡情况。结果治疗组裸鼠肿瘤体积及重量增长速度受到明显抑制,与对照组比较差异有统计学意义(P<0.01)。转染了ILK-ASODN的治疗组细胞增殖受到显著抑制,凋亡率明显增高,与对照组比较差异均具有极显著意义(P<0.01)。结论 ILK-ASODN在体外能抑制细胞生长、促进细胞凋亡;在体内能明显地抑制肿瘤生长,对人卵巢癌裸鼠移植瘤具有一定的治疗作用。 展开更多
关键词 ILK asodn 转染 基因治疗 裸鼠 移植瘤
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反义核酸药物癌泰得对乳腺癌细胞株的体外杀伤作用 被引量：3
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作者 张帆 冯帆 +3 位作者 任磊 谢文秀 李自健 杨俊兰 《军医进修学院学报》 CAS 2010年第4期370-371,共2页
目的探讨反义核酸药物癌泰得对乳腺癌细胞株的体外杀伤作用。方法1)MTT法测定不同浓度癌泰得对乳腺癌细胞株BT474的抑制率。2)Annexin/PI双染法,流式细胞仪检测细胞凋亡比率。结果MTT法观察到癌泰得对BT474细胞的杀伤作用,流式细胞仪检... 目的探讨反义核酸药物癌泰得对乳腺癌细胞株的体外杀伤作用。方法1)MTT法测定不同浓度癌泰得对乳腺癌细胞株BT474的抑制率。2)Annexin/PI双染法,流式细胞仪检测细胞凋亡比率。结果MTT法观察到癌泰得对BT474细胞的杀伤作用,流式细胞仪检测到BT474细胞凋亡率达16.82%,以晚期凋亡为主。结论癌泰得对BT474细胞有抑制作用,抑制率与浓度呈线性相关。 展开更多
关键词 反义寡核苷酸 乳腺肿瘤 端粒 末端转移酶
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