半抗原的设计、修饰及人工抗原的制备 被引量：59

1

作者 宋娟 王榕妹 +2 位作者 王悦秋 唐雨榕 邓安平 《分析化学》 SCIE EI CAS CSCD 北大核心 2010年第8期1211-1218,共8页

制备具有良好免疫原性的人工抗原是建立测定小分子化合物的免疫分析方法的最关键步骤。本文对半抗原的设计、修饰(修饰位点的选择、修饰物的制备、连接臂的选择)、载体的选择、半抗原与载体的偶联(偶联方式、偶联条件、最佳偶联率)、人... 制备具有良好免疫原性的人工抗原是建立测定小分子化合物的免疫分析方法的最关键步骤。本文对半抗原的设计、修饰(修饰位点的选择、修饰物的制备、连接臂的选择)、载体的选择、半抗原与载体的偶联(偶联方式、偶联条件、最佳偶联率)、人工抗原的纯化与鉴定等方面作了详细的介绍。 展开更多

关键词 半抗原 人工抗原 设计 修饰 免疫分析 评述

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农药人工抗原的合成研究进展 被引量：30

2

作者 周思祥 刘福成 《农药》 CAS 北大核心 2005年第8期337-341,共5页

免疫分析法是以抗原、抗体的特异性识别和可逆性结合反应为基础,以抗体作为生物检测器而建立的一种灵敏、简便、快速的超微量分析方法。抗原的质量决定了抗体的特异性和亲和性,最终影响免疫分析的质量。在农药残留的分析中,建立免疫分... 免疫分析法是以抗原、抗体的特异性识别和可逆性结合反应为基础,以抗体作为生物检测器而建立的一种灵敏、简便、快速的超微量分析方法。抗原的质量决定了抗体的特异性和亲和性,最终影响免疫分析的质量。在农药残留的分析中,建立免疫分析方法的关键是农药人工抗原的合成,包括半抗原的设计(强调连接臂的位置、长度、性质和功能基团的引入)、半抗原的合成、载体的选择、半抗原与载体的偶联方法和条件、最佳结合比的讨论、人工抗原的纯化与鉴定。 展开更多

关键词 农药 半抗原 人工抗原 设计 合成 进展

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兽药人工抗原合成的研究进展 被引量：7

3

作者 张泽英 袁宗辉 《中国兽药杂志》 2006年第5期44-47,共4页

在兽药的免疫化学残留分析中,能否合成稳定的具有良好免疫原性的人工抗原是制备抗体和建立免疫分析方法的最关键步骤。综述了国内外兽药人工抗原合成过程中载体的选择、半抗原的设计(强调偶联部位和间隔臂的引入)、半抗原与载体的偶联... 在兽药的免疫化学残留分析中,能否合成稳定的具有良好免疫原性的人工抗原是制备抗体和建立免疫分析方法的最关键步骤。综述了国内外兽药人工抗原合成过程中载体的选择、半抗原的设计(强调偶联部位和间隔臂的引入)、半抗原与载体的偶联方法、人工抗原的纯化与鉴定等方面的研究进展。 展开更多

关键词 兽药 半抗原 人工抗原 合成 进展

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农药人工抗原合成方法的设计与优选 被引量：9

4

作者 贲亚琍 朱德锐 刘德立 《农药》 CAS 北大核心 2008年第1期10-14,共5页

农药人工抗原的合成直接影响后期制备抗体的质量,对于建立农药分子特异、灵敏的免疫分析方法具有关键性作用。综述了国内外农药人工抗原合成过程中的农药分子半抗原的设计原则、合成方法,人工抗原的设计、优选及影响因素等方面的研究进... 农药人工抗原的合成直接影响后期制备抗体的质量,对于建立农药分子特异、灵敏的免疫分析方法具有关键性作用。综述了国内外农药人工抗原合成过程中的农药分子半抗原的设计原则、合成方法,人工抗原的设计、优选及影响因素等方面的研究进展。并对农药残留免疫分析技术存在的问题和应用前景进行了讨论。 展开更多

关键词 农药 人工抗原 合成方法 设计 优选

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雌二醇多克隆抗体的制备与鉴定 被引量：8

5

作者 高富红 戴小华 吴国娟 《畜牧与兽医》 北大核心 2007年第10期19-22,共4页

制备雌二醇完全抗原,并通过免疫家兔得到多克隆抗体,为下一步制备雌二醇单克隆抗体和雌二醇检测ELISA试剂盒奠定基础。试验以牛血清白蛋白(BSA)、卵清蛋白(OVA)为载体,采用碳化二亚胺法,合成了雌二醇(E2)的2种免疫偶合物:免疫原E2-BSA... 制备雌二醇完全抗原,并通过免疫家兔得到多克隆抗体,为下一步制备雌二醇单克隆抗体和雌二醇检测ELISA试剂盒奠定基础。试验以牛血清白蛋白(BSA)、卵清蛋白(OVA)为载体,采用碳化二亚胺法,合成了雌二醇(E2)的2种免疫偶合物:免疫原E2-BSA和包被原E2-OVA;通过紫外光谱定性证明偶合物偶联成功与否,并对偶合物的蛋白含量、结合比进行测定并以免疫原E2-BSA免疫家兔,制备多克隆抗体,用包被原E2-OVA进行ELISA,对多克隆抗体特异性及效价进行检测。结果表明成功合成了雌二醇人工抗原即免疫原E2-BSA和包被原E2-OVA,二者的蛋白浓度分别为5.455和7.533mg/mL,结合比分别为7:1和8:1;制备的多克隆抗体特异性好,血清效价为1:106。 展开更多

关键词 雌二醇 人工抗原 多克隆抗体

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人工抗原的鉴定 被引量：9

6

作者 张丽芳 李伟岭 薛飞群 《畜牧与饲料科学》 2009年第10期116-118,共3页

综述了目前国内外对人工抗原的鉴定方法,即:紫外分光光度法、红外分光光度法、电泳法、质谱法。并分析了各鉴定方法的优缺点,认为质谱法是鉴定人工抗原的最佳方法。

关键词 人工抗原 紫外分光光度法 电泳法 红外分光光度法 质谱法

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采用广义S变换的电能质量扰动免疫分类算法 被引量：8

7

作者 全惠敏 王炼红 戴瑜兴 《高电压技术》 EI CAS CSCD 北大核心 2009年第9期2280-2285,共6页

针对电能质量扰动分类问题,提出了一种基于广义S变换和人工免疫算法相结合的电能质量扰动分类新方法。给出了广义S变换的定义,对比了信号经广义S变换和S变换后的变换结果,推导了一维广义S变换实现过程,给出了调节因子λ随信号中频率组... 针对电能质量扰动分类问题,提出了一种基于广义S变换和人工免疫算法相结合的电能质量扰动分类新方法。给出了广义S变换的定义,对比了信号经广义S变换和S变换后的变换结果,推导了一维广义S变换实现过程,给出了调节因子λ随信号中频率组成不同而进行自适应取值的方法。分类过程中,首先使用广义S变换提取出各种扰动信号的特征量形成抗原,然后对不同扰动样本按照提出的免疫分类算法步骤进行训练形成可以分类的抗体,计算抗体和待分类的抗原之间的欧氏距离并用最近邻法则输出最终分类结果。仿真实验结果表明广义S变换比S变换精度高,采用的分类方法能够实现电能质量扰动的自动分类,且对噪声不敏感,分类正确率很高。 展开更多

关键词 电能质量 广义S变换 人工免疫 分类 抗原 特征量

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多菌灵人工抗原的合成及其鼠源性多克隆抗体的制备

8

作者 张宇彤 李洋洋 +1 位作者 郑佳慧 艾金霞 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2024年第2期163-167,共5页

目的合成多菌灵人工抗原,制备多菌灵多克隆抗体并鉴定其特性。方法利用混合酸酐法引入羧基制备多菌灵半抗原。将小分子半抗原与大分子载体牛血清白蛋白(BSA)和卵清蛋白(OVA)偶联合成多菌灵人工抗原和包被抗原,利用聚丙烯酰胺凝胶电泳(SD... 目的合成多菌灵人工抗原,制备多菌灵多克隆抗体并鉴定其特性。方法利用混合酸酐法引入羧基制备多菌灵半抗原。将小分子半抗原与大分子载体牛血清白蛋白(BSA)和卵清蛋白(OVA)偶联合成多菌灵人工抗原和包被抗原,利用聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)对人工抗原进行鉴定。用制备的人工抗原免疫小鼠获得抗多菌灵多克隆抗体,利用间接ELISA对抗体效价以及特异性进行测定。结果成功制备多菌灵人工抗原。免疫小鼠后获得的抗体效价可达1:12800。抗体对多菌灵的半数抑制剂量(IC_(50))为0.107μg/mL,且与苯菌灵、噻菌灵的交叉反应率均<1%。结论成功获得高敏感性、高特异性的多克隆抗体,为多菌灵残留快速检测方法的建立奠定了基础。 展开更多

关键词 多菌灵 人工抗原 多克隆抗体

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戊二醛法合成石杉碱甲人工抗原及其鉴定 被引量：5

9

作者 滕海英 余宇燕 +2 位作者 卢玲 张红艳 吴水生 《福建中医药大学学报》 2012年第6期41-44,共4页

目的合成石杉碱甲人工抗原并进行鉴定。方法采用戊二醛法,将石杉碱甲与牛血清白蛋白偶联,通过紫外光谱扫描和SDS-PAGE凝胶电泳鉴定偶联是否成功,根据摩尔分子比公式测定其偶联比,并通过L9(33)正交试验考察反应物起始摩尔比、反应时间和... 目的合成石杉碱甲人工抗原并进行鉴定。方法采用戊二醛法,将石杉碱甲与牛血清白蛋白偶联,通过紫外光谱扫描和SDS-PAGE凝胶电泳鉴定偶联是否成功,根据摩尔分子比公式测定其偶联比,并通过L9(33)正交试验考察反应物起始摩尔比、反应时间和戊二醛加入量对偶联率的影响。结果人工抗原的紫外光谱扫描与半抗原和载体蛋白的紫外光谱相比均发生变化;人工抗原SDS-PAGE凝胶电泳条带与载体蛋白相比发生偏移;半抗原与载体蛋白的偶联比为10.8∶1。结论该方法成功合成石杉碱甲的人工抗原,并且确定戊二醛法的最佳反应条件为:反应物起始摩尔比100∶1,反应时间8 h,戊二醛加入量80μL。 展开更多

关键词 石杉碱甲 人工抗原 戊二醛 偶联率

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苦马豆素人工抗原的合成及其免疫原性的研究 被引量：5

10

作者 王帅 陈根元 +3 位作者 吴书奇 张玲 马春晖 胡建军 《塔里木大学学报》 2011年第3期46-53,共8页

本实验用溴乙酸制备的活性酯与苦马豆素(SW)反应得到季铵盐,与牛血清白蛋白(BSA)偶联后,产物经透析、冻干后呈白色片状结晶。通过化学检验,制备的结晶为SW-BSA人工抗原,经SDS-PAGE电泳分析,分子量为29.0 Kda,平均每个牛血清蛋白分子上结... 本实验用溴乙酸制备的活性酯与苦马豆素(SW)反应得到季铵盐,与牛血清白蛋白(BSA)偶联后,产物经透析、冻干后呈白色片状结晶。通过化学检验,制备的结晶为SW-BSA人工抗原,经SDS-PAGE电泳分析,分子量为29.0 Kda,平均每个牛血清蛋白分子上结合47个季铵盐分子。将SW-BSA免疫小鼠后,采用间接ELISA实验检测血清抗体效价,结果表明合成的人工抗原具有较好的免疫原性,为动物小花棘豆中毒的防治奠定了基础。 展开更多

关键词 苦马豆素 人工抗原 合成 鉴定

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拟除虫菊酯类农药通用人工抗原合成及免疫原性鉴定 被引量：4

11

作者 王东方 刘爽 +2 位作者 付骋宇 赵吉建 祁志军 《农药》 CAS CSCD 北大核心 2015年第7期480-484,共5页

[目的]为建立拟除虫菊酯类农药多残留免疫分析方法,对拟除虫菊酯通用人工抗原的合成鉴定进行研究。[方法]根据拟除虫菊酯农药公共结构设计合成了3种通用半抗原,并通过高分辨质谱和核磁共振氢谱对其结构进行鉴定。通过活性酯法将3种通用... [目的]为建立拟除虫菊酯类农药多残留免疫分析方法,对拟除虫菊酯通用人工抗原的合成鉴定进行研究。[方法]根据拟除虫菊酯农药公共结构设计合成了3种通用半抗原,并通过高分辨质谱和核磁共振氢谱对其结构进行鉴定。通过活性酯法将3种通用半抗原分别与多聚赖氨酸(PLL)和牛血清蛋白(BSA)偶联制备成免疫抗原和包被抗原,采用紫外吸收法鉴定。将3种免疫抗原免疫小鼠,制备了拟除虫菊酯抗血清,非竞争间接酶联免疫吸附分析方法测定抗血清效价。[结果]通用半抗原和人工抗原制备成功,合成的人工抗原具有较高的免疫原性,3种抗血清效价分别达到3.2×104、3.2×104、6.4×104。[结论]成功制备了拟除虫菊酯通用人工抗原,为拟除虫菊酯农药多残留免疫分析的方法研究奠定了基础。 展开更多

关键词 拟除虫菊酯 半抗原 人工抗原 免疫原性

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岩沙海葵毒素人工抗原的合成及鉴定 被引量：4

12

作者 刘必勇 焦红 王家骥 《中国生化药物杂志》 CAS CSCD 2005年第4期196-199,共4页

目的制备岩沙海葵毒素(PTX)的人工抗原和抗血清,为建立PTX的酶联免疫检测方法提供技术基础.方法用小分子succinimidyl 3-(2-pyridyldithio) propionate(SPDP)将PTX巯基化成半抗原PTX-PDP,用2-iminothiolane将大分子载体蛋白质匙眼血蓝蛋... 目的制备岩沙海葵毒素(PTX)的人工抗原和抗血清,为建立PTX的酶联免疫检测方法提供技术基础.方法用小分子succinimidyl 3-(2-pyridyldithio) propionate(SPDP)将PTX巯基化成半抗原PTX-PDP,用2-iminothiolane将大分子载体蛋白质匙眼血蓝蛋白(KLH)巯基化成KLH-SH,再将PTX-PDP和KLH-SH反应合成人工抗原PTX-PDP-KLH免疫雌性6～8周龄Balb/c小鼠,进行多抗的制备.用同样的方法制备酶联免疫反应之包被抗原PTX-PDP-BSA,用于检测血清抗体效价.结果根据紫外检测图谱,PTX的最大吸收波长在264 nm处,KLH及BSA的最大吸收波长在278及279 nm处,而合成的人工抗原PTX-PDP-KLH和PTX-PDP-BSA的最大吸收波长分别在267和273 nm处.抗血清经间接酶联免疫吸附法检测,效价达到1∶3 200,且与正常Balb/c小鼠、昆明种小鼠及兔血清间无交叉反应.结论合成的人工抗原纯度高,具有较好的免疫原性. 展开更多

关键词 岩沙海葵毒素 人工抗原 酶联免疫吸附分析

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对氯甲基苯甲酸链接的莱克多巴胺人工抗原的合成与鉴定 被引量：3

13

作者 陈臣 罗顺菁 +3 位作者 刘成梅 邹常春 汪志宇 王文飞 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2013年第1期180-184,共5页

采用对氯甲基苯甲酸(CBA)为链接臂,用混合酸酐法将莱克多巴胺(RAC)与牛血清白蛋白(BSA)偶联制备人工抗原(RAC-CBA-BSA),通过紫外、红外、电泳鉴定抗原合成成功;再以卵清蛋白(OVA)为载体蛋白合成包被抗原(RAC-CBA-OVA),测定其与抗体的亲... 采用对氯甲基苯甲酸(CBA)为链接臂,用混合酸酐法将莱克多巴胺(RAC)与牛血清白蛋白(BSA)偶联制备人工抗原(RAC-CBA-BSA),通过紫外、红外、电泳鉴定抗原合成成功;再以卵清蛋白(OVA)为载体蛋白合成包被抗原(RAC-CBA-OVA),测定其与抗体的亲和力和抑制率。间接竞争ELISA结果以对CBA为链接臂合成的包被抗原对应的抗体滴度为7047.3、IC50为17.05ng/mL,结果表明,CBA可以用于RAC人工抗原的合成,使用RAC-CBA-OVA作为包被抗原可以提高ELISA检测灵敏度。 展开更多

关键词 莱克多巴胺 对氯甲基苯甲酸 ELISA灵敏度 人工抗原

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不同潮气量机械通气对大鼠肺组织内毒素CD14受体表达的影响 被引量：2

14

作者 李克忠 姚尚龙 马利 《中华麻醉学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2006年第8期742-744,共3页

目的观察不同潮气量机械通气对大鼠肺组织内毒素CD14受体表达的影响。方法成年雄性SD大鼠30只,体重200～300 g,随机分为3组(n=10)：正常对照组(C组)、小湖气量机械通气组(S组)和大潮气量机械通气组(L组)。S组潮气量(V_T)8 ml/kg,N组V_τ... 目的观察不同潮气量机械通气对大鼠肺组织内毒素CD14受体表达的影响。方法成年雄性SD大鼠30只,体重200～300 g,随机分为3组(n=10)：正常对照组(C组)、小湖气量机械通气组(S组)和大潮气量机械通气组(L组)。S组潮气量(V_T)8 ml/kg,N组V_τ40ml/kg；吸：呼比均为1：1；调整呼吸频率60～80次/min,维持呼气末二氧化碳分压在35～45 mm Hg。分别于机械通气前(基础值)、机械通气1、2、3 h行动脉血气分析,机械通气3h时放血处死大鼠,采用逆转录聚合酶链反应测定肺组织内毒素CD14受体mRNA表达；用免疫组织化学法测定左肺支气管灌洗液内毒素CD14受体蛋白表达。结果与C组比较,L组机械通气1h时动脉血pH值、氧分压升高,动脉血二氧化碳分压降低,肺组织内毒素CD14受体蛋白及mRNA表达均升高(P＜0．01)。结论大潮气量机械通气3 h可上调大鼠肺组织内毒素CD14受体表达。 展开更多

关键词 潮气量 呼吸 人工 抗原 CD14 内毒素类 肺

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非生物型人工肝对重型肝炎患者血清细胞因子影响的研究 被引量：1

15

作者 李勇忠 符政远 +7 位作者 蒋建勇 邓英 彭吉军 胡文祥 李淮 于红缨 马孝政 谢知兵 《中国医师杂志》 CAS 2006年第12期1633-1636,共4页

目的探讨血清细胞因子和非生物型人工肝在重型肝炎发病机制及治疗中的意义。方法测定正常组、重型肝炎保守治疗组及重型肝炎人工肝治疗组治疗前后血清IL-2、IL-6、TGFβ1、TNF-α、sFas、IFN-α的水平,并进行比较。结果人工肝治疗组和... 目的探讨血清细胞因子和非生物型人工肝在重型肝炎发病机制及治疗中的意义。方法测定正常组、重型肝炎保守治疗组及重型肝炎人工肝治疗组治疗前后血清IL-2、IL-6、TGFβ1、TNF-α、sFas、IFN-α的水平,并进行比较。结果人工肝治疗组和保守治疗组患者治疗前血清IL-2、IFN-α水平明显低于对照组(P<0.01),IL-6、TGFβ1、TNFα-、sFas水平明显高于对照组(P<0.01);人工肝治疗后血清IL-2、IFN-α水平较治疗前明显升高(P<0.05),IL-6、TGFβ1、TNF-α、sFas水平较治疗前明显下降(P<0.05)。保守治疗后血清IL-2、IL-6、sFas、IFN-α水平较治疗前变化不明显(P>0.05),TGFβ1、、TNF-α水平较治疗前下降(P<0.05)。死亡及疗效差自动出院的患者经人工肝治疗后血清细胞因子水平极易反弹,治愈及好转的患者经人工肝治疗后血清细胞因子水平不易反弹。结论非生物型人工肝对IL-6、TGFβ1、TNF-α、sFas有较好的清除作用,可使IL-2、IFN-α水平升高,对重型肝炎疗效明显。观察重型肝炎患者血清细胞因子水平对病情评估及预后有重要的临床意义。 展开更多

关键词 肝 人工 肝炎 白细胞介素2 白细胞介素6 转化生长因子Β 干扰素Α 抗原 CD95

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海洋生物岩沙海葵毒素血清免疫抗体的制备 被引量：1

16

作者 焦红 刘必勇 +3 位作者 郭素珍 席静 林峰 王家骥 《检验检疫科学》 2005年第2期3-6,共4页

〔目的〕　为建立岩沙海葵毒素(PTX)的酶联免疫快速测试方法提供特异性免疫抗体。〔方法〕　巯基化标准PTX成半抗原PTX -PDP ;巯基化匙眼血蓝蛋白(KLH)成KLH -SH ,两者合成反应人工抗原PTX -PDP -KLH。用PTX -PDP -KLH免疫雌性6～8周龄B... 〔目的〕　为建立岩沙海葵毒素(PTX)的酶联免疫快速测试方法提供特异性免疫抗体。〔方法〕　巯基化标准PTX成半抗原PTX -PDP ;巯基化匙眼血蓝蛋白(KLH)成KLH -SH ,两者合成反应人工抗原PTX -PDP -KLH。用PTX -PDP -KLH免疫雌性6～8周龄Balb/c小鼠,制备PTX多克隆抗体。用同样方法制备包被抗原PTX-PDP -BSA ,用以检测血清抗体效价。〔结果〕　紫外检测标准品PTX的最大吸收波长在2 6 4nm处,纯品KLH及BSA的最大吸收波长在2 78nm及2 79nm处,小鼠血清多克隆抗体PTX -PDP -KLH和PTX -PDP -BSA的最大吸收波长分别在2 6 7nm和2 73nm处。抗血清效价达到1:32 0 0 ,与正常Balb/c小鼠、昆明小鼠及兔血清间无交叉反应。〔结论〕　合成的PTX人工抗原纯度高,成功制备PTX多克隆抗体血清。 展开更多

关键词 免疫抗体 制备 毒素 海葵 Balb/c小鼠 生物岩 最大吸收波长 多克隆抗体 海洋 血清抗体效价 FIX 人工抗原 PDP BSA 测试方法 酶联免疫 血蓝蛋白 合成反应 包被抗原 紫外检测 交叉反应 昆明小鼠 抗体血清 巯基化 特异性

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日落黄和柠檬黄人工抗原的合成与鉴定 被引量：2

17

作者 林菲 刘丽强 +4 位作者 匡华 彭池方 宋珊珊 胡金伟 胥传来 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2011年第1期124-126,共3页

通过综合分析日落黄和柠檬黄的化学结构,构建半抗原,采用多种偶联方式将其与载体蛋白偶联,制备完全抗原。通过采用紫外光谱扫描和液相色谱-质谱联用技术对合成产物进行了鉴定和分析,结果表明,日落黄的半抗原合成不够理想,偶联比率为6;... 通过综合分析日落黄和柠檬黄的化学结构,构建半抗原,采用多种偶联方式将其与载体蛋白偶联,制备完全抗原。通过采用紫外光谱扫描和液相色谱-质谱联用技术对合成产物进行了鉴定和分析,结果表明,日落黄的半抗原合成不够理想,偶联比率为6;而柠檬黄的完全抗原经鉴定偶联成功,偶联比率是12。该实验结果可为制备可特异性地识别柠檬黄的抗体提供参考。 展开更多

关键词 日落黄 柠檬黄 人工抗原 合成

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永生化人肝细胞系的建立及其鉴定 被引量：1

18

作者 潘小平 杜维波 +8 位作者 盛国平 虞晓鹏 喻成波 吕国良 曹红翠 李君 章益民 陈瑜 李兰娟 《中华传染病杂志》 CAS CSCD 北大核心 2009年第7期394-397,共4页

目的建立永生化的人肝细胞系，为生物人工肝、肝细胞移植、体外药物代谢等提供细胞模型。方法应用胶原酶等四步灌流法分离获得原代人肝细胞，以含有SV40大T抗原（SV40LT）的重组反转录病毒对原代人肝细胞进行永生化，并对永生化人肝细... 目的建立永生化的人肝细胞系，为生物人工肝、肝细胞移植、体外药物代谢等提供细胞模型。方法应用胶原酶等四步灌流法分离获得原代人肝细胞，以含有SV40大T抗原（SV40LT）的重组反转录病毒对原代人肝细胞进行永生化，并对永生化人肝细胞进行生物学特性鉴定。结果原代人肝细胞经含有SV40LT的重组反转录病毒感染3～4周后，获得2株永生化人肝细胞系，分别命名为HepLi2和HepLi3，永生化人肝细胞在相差显微镜下具有典型的肝细胞形态。Western印迹显示有SV40LT基因的蛋白表达；RT-PCR显示永生化人肝细胞有Alb、谷胱甘肽S转移酶（GSTp）、人凝血因子X（HBCF-X）和β-actinmRNA表达，有细胞色素（CY）P450亚型（CYP3A5、CYP2E1、CYP2C8—19、CYP3A4）mRNA的表达；在HepLi2和HepLi3永生化人肝细胞的培养上清液中可检测到ALT、乳酸脱氢酶（LDH）和Alb。结论新建立的永生化人肝细胞系具有正常人肝细胞的生物学特性以及完善的肝细胞CYP450酶功能，可进一步用于肝细胞药物代谢研究。 展开更多

关键词 肝 人工 细胞系 猴病毒40 抗原 病毒 肿瘤 肝细胞 细胞色素P450酶系统

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环丙沙星人工完全抗原的制备与鉴定 被引量：1

19

作者 杨燕燕 樊海平 +3 位作者 辛志明 吴斌 曾占壮 余培建 《福州大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2012年第4期541-545,共5页

分别采用碳二亚胺法和氯甲酸异丁酯法制备环丙沙星的牛血清白蛋白与卵清白蛋白载体的人工完全抗原CPFX-BSA和CPFX-OVA.人工完全抗原经SDS-PAGE凝胶电泳初步鉴定后,考马斯亮蓝染色法测定蛋白质含量分别为1.24和0.58 mg.mL-1,将偶联抗原... 分别采用碳二亚胺法和氯甲酸异丁酯法制备环丙沙星的牛血清白蛋白与卵清白蛋白载体的人工完全抗原CPFX-BSA和CPFX-OVA.人工完全抗原经SDS-PAGE凝胶电泳初步鉴定后,考马斯亮蓝染色法测定蛋白质含量分别为1.24和0.58 mg.mL-1,将偶联抗原稀释至一定浓度,紫外分光光度法测其波形,根据偶联前后波形及吸收峰的变化鉴定偶联物分子量大于载体蛋白,证实CPFX与BSA和OVA偶联成功,根据游离半抗原、载体蛋白和完全抗原偶联物各自的紫外吸光度、摩尔吸光系数,初步定量计算出偶联结合比分别为7.2∶1和6.4∶1.质谱法测定CPFX-BSA和CPFX-OVA分子量分别为6.895×104和4.586×104,推算偶联比分别为5.6∶1和4.2∶1,进一步证实了偶联比和人工抗原制备成功.制备的人工完全抗原CPFX-BSA和CPFX-OVA可分别作为免疫抗原和包被抗原,为环丙沙星单克隆抗体的制备以及环丙沙星快速检测试剂盒的研制奠定基础. 展开更多

关键词 环丙沙星 人工抗原 偶联 鉴定

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呋喃唑酮人工抗原的制备 被引量：1

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作者 张绍娜 李子平 +1 位作者 郭英香 单明辉 《畜牧与饲料科学》 2017年第6期7-9,共3页

[目的]制备呋喃唑酮人工抗原。[方法]通过重氮化法和戊二醛法将半抗原FZ与载体蛋白质牛血清白蛋白(BSA)和卵清蛋白(OVA)耦联,制备人工免疫抗原和检测抗原,经SDS-PAGE电泳鉴定人工抗原是否耦联成功,用紫外可见分光光度计法测定耦联蛋白... [目的]制备呋喃唑酮人工抗原。[方法]通过重氮化法和戊二醛法将半抗原FZ与载体蛋白质牛血清白蛋白(BSA)和卵清蛋白(OVA)耦联,制备人工免疫抗原和检测抗原,经SDS-PAGE电泳鉴定人工抗原是否耦联成功,用紫外可见分光光度计法测定耦联蛋白浓度。[结果]SDS-PAGE结果显示,用2种方法制备的人工抗原FZ-BSA和BSA、FZ-OVA和OVA的2组蛋白条带迁移距离均发生了变化,耦联物的迁移距离均小于其相对应的载体蛋白。[结论]通过SDS-PAGE鉴定呋喃唑酮人工抗原制备成功。 展开更多

关键词 呋喃唑酮 人工抗原 耦联物 SDS-PAGE

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