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解读AGO蛋白结构及其功能 被引量:22
1
作者 李超 杜志游 陈集双 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第11期969-976,共8页
RNA沉默是由小RNA特异向导和RNA诱导的沉默复合物(RISC)切割或者抑制靶标mRNA翻译的一种调控系统.作为RISC的核心成分,AGO蛋白(argonaute proteins)由N末端、PAZ、MID和PIWI4个结构域组成.PAZ区能非序列特异性识别结合双链小RNA3′末端... RNA沉默是由小RNA特异向导和RNA诱导的沉默复合物(RISC)切割或者抑制靶标mRNA翻译的一种调控系统.作为RISC的核心成分,AGO蛋白(argonaute proteins)由N末端、PAZ、MID和PIWI4个结构域组成.PAZ区能非序列特异性识别结合双链小RNA3′末端悬垂的2个核苷酸,MID与PIWI界面处的"保守口袋"识别结合小RNA5′端第1位核苷酸,PIWI区具有切割mRNA的催化中心.根据系统进化学分析,AGO蛋白家族分为3个组:AGO-like、PIWI-like和GROUP3.拟南芥共编码10种AGO蛋白.目前已经证实,具有切割活性的为AtAGO1、AtAGO4和AtAGO7,三者参与的小RNA通路也已得到确认.在拟南芥10种AGO蛋白中,AtAGO1与AtAGO10、AtAGO1与AtAGO7、AtAGO4与AtAGO6存在功能上的部分冗余. 展开更多
关键词 AGO蛋白 RNA沉默 小RNA通路 功能冗余
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RNA诱导沉默复合体中的生物大分子及其装配 被引量:13
2
作者 宋雪梅 燕飞 杜立新 《遗传》 CAS CSCD 北大核心 2006年第6期761-766,共6页
在RNA干扰机制中,双链RNA诱导同源RNA降解的过程依赖于RNA诱导沉默复合体(RISC)的活性。RISC由Dicer酶,Argonaute蛋白,siRNA等多种生物大分子装配而成,对这些大分子的结构和功能进行深入细致的研究,有助于进一步了解RISC的形成过程、作... 在RNA干扰机制中,双链RNA诱导同源RNA降解的过程依赖于RNA诱导沉默复合体(RISC)的活性。RISC由Dicer酶,Argonaute蛋白,siRNA等多种生物大分子装配而成,对这些大分子的结构和功能进行深入细致的研究,有助于进一步了解RISC的形成过程、作用方式,以及阐明整个RNAi过程的作用机制。研究表明,RISC中的Dicer具有RNaseIII结构域,在RNAi的起始阶段负责催化siRNA的产生,在RISC装配过程中起稳定RISC中间体结构和功能的作用;Argonaute蛋白是RISC中的核心蛋白,有PAZ和PIWI两个主要的结构域,前者为siRNA的传递提供结合位点,后者是RISC中的酶切割活性中心;siRNA是RISC完成特异性切割作用的向导,在成熟的RISC中虽然只包含siRNA的一条链,但siRNA在RISC形成过程中的双链结构是保证RNAi效应的决定因素。尽管RISC中还存在其他一些功能未知的蛋白质,但在RISC组分结构及功能研究方面取得的进展为建立一个可能的RISC装配模型提供了理论基础。 展开更多
关键词 RNA诱导沉默复合体 装配 DICER argonaute蛋白 R2D2
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杨树ARGONAUTE基因的克隆及序列分析 被引量:13
3
作者 胥猛 谢雯凡 +3 位作者 潘惠新 苏晓华 张守攻 黄敏仁 《林业科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2011年第3期46-51,共6页
作为RNA诱导沉默复合体的核心元件,Argonaute(AGO)蛋白在植物生长发育过程中发挥着重要作用。以欧美杨和美洲黑杨不定根cDNA为模板,采用RT-PCR技术分离得到PeAGO5和PdAGO5基因的cDNA克隆,测序和序列分析结果表明2个目的cDNA片段均为2809... 作为RNA诱导沉默复合体的核心元件,Argonaute(AGO)蛋白在植物生长发育过程中发挥着重要作用。以欧美杨和美洲黑杨不定根cDNA为模板,采用RT-PCR技术分离得到PeAGO5和PdAGO5基因的cDNA克隆,测序和序列分析结果表明2个目的cDNA片段均为2809bp,基因内部含有完整的开放阅读框,可编码907个氨基酸,预测蛋白质分子量分别为102.31ku和102.34ku,理论等电点(pI)分别为9.34和9.7。所推导的2个氨基酸序列之间仅有7个差异位点,含有3个保守的结构域,DUF1785、PAZ和Piwi结构域。它们与拟南芥AtAGO5蛋白的相似性分别为64.8%和64.3%,故将其命名为PeAGO5和PdAGO5。系统进化分析发现,PeAGO5和PdAGO5,与拟南芥AtAGO1,AtAGO5和AtAGO10蛋白同属一个进化分支。此外,采用实时定量PCR技术检测PeAGO5基因在杨树硬枝插穗不定根发育过程中的表达模式,推测该基因参与不定根发育调控。 展开更多
关键词 杨树 硬枝插穗 argonaute蛋白 表达模式 QRT-PCR
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RNA干扰机制研究进展 被引量:7
4
作者 燕飞 成卓敏 《遗传》 CAS CSCD 北大核心 2005年第1期167-172,共6页
RNAi是多种生物体内由dsRNA介导的同源mRNA降解现象。这是一个高度特异化的过程,涉及多种蛋白质的共同参与。在这一过程中,siRNA的结构影响其两条链装配到RISC中去的能力。除了与RISC结合外,siRNA还引导了RITS复合物结合到同源染色质,... RNAi是多种生物体内由dsRNA介导的同源mRNA降解现象。这是一个高度特异化的过程,涉及多种蛋白质的共同参与。在这一过程中,siRNA的结构影响其两条链装配到RISC中去的能力。除了与RISC结合外,siRNA还引导了RITS复合物结合到同源染色质,介导异染色质化过程。干扰效应的扩散,即系统性沉默可能依赖于跨膜蛋白的转运,并且很可能是在多因素调控下完成的。 展开更多
关键词 RNA干扰 小干扰RNA RNA诱导沉默复合物 argonaute蛋白
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兔抗人PIWIL4蛋白多克隆抗体的制备和鉴定 被引量:6
5
作者 王迎昕 郜恒骏 +1 位作者 陈锡美 孟逊 《免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2008年第1期83-85,89,共4页
目的制备兔抗人PIWIL4的多克隆抗体,并鉴定其特异性,应用组织芯片初步探讨其在人类正常及肿瘤组织中的分布。方法合成特异性PIWIL4多肽,以马来酰胺活化匙孔血蓝蛋白(KLH)作为载体构建多肽免疫原,通过致敏大白兔,制备兔抗人PIWIL4多克隆... 目的制备兔抗人PIWIL4的多克隆抗体,并鉴定其特异性,应用组织芯片初步探讨其在人类正常及肿瘤组织中的分布。方法合成特异性PIWIL4多肽,以马来酰胺活化匙孔血蓝蛋白(KLH)作为载体构建多肽免疫原,通过致敏大白兔,制备兔抗人PIWIL4多克隆抗体,然后用亲和层析法纯化抗体。用ELISA和western方法进行抗体验证,并应用人组织芯片进行PIWIL4的免疫组化研究。结果通过构建PIWIL4多肽-KLH载体复合物致敏大白兔,我们制备了兔抗人PIWIL4蛋白多克隆抗体,经ELISA及Western blot证实兔抗人PIWIL4抗体可特异性识别PIWIL4多肽,在人组织芯片中通过免疫组化染色显示该抗体在BU部分正常组织和肿瘤组织中呈阳性染色。结论本项研究成功制备兔抗人PIWIL4多克隆抗体,为进一步研究PIWIL4在人类疾病中的意义提供了有利工具。 展开更多
关键词 argonaute蛋白 多克隆抗体 组织芯片
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胃癌组织芯片中Argonaute蛋白表达分析 被引量:5
6
作者 毛鑫礼 朱洪源 +3 位作者 虞朝辉 叶丽萍 郜恒骏 厉有名 《中华消化杂志》 CAS CSCD 北大核心 2009年第11期751-754,共4页
目的检测胃癌Argonaute1、Argonaute2、Argonaute3和Argonaute4蛋白表达,探讨其临床意义。方法利用组织芯片技术结合免疫组化法检测100例胃癌组织和癌旁组织中Argonaute1、Argonaute2、Argonaute3和Argonaute4蛋白的表达。结果胃癌组织... 目的检测胃癌Argonaute1、Argonaute2、Argonaute3和Argonaute4蛋白表达,探讨其临床意义。方法利用组织芯片技术结合免疫组化法检测100例胃癌组织和癌旁组织中Argonaute1、Argonaute2、Argonaute3和Argonaute4蛋白的表达。结果胃癌组织中Argonaute1、Argonaute2,Argonaute3和Argonaute4蛋白表达均显著高于癌旁组织(P〈0.05);I~Ⅱ期胃癌中4种蛋白表达均显著高于癌旁组织(P〈0.05);Argonaute4蛋白在Ⅲ期胃癌中的表达显著高于I~Ⅱ期胃癌(P〈0.05),Argonaute1、Argonaute2、Argonaute3蛋白在在I~Ⅱ期胃癌与Ⅲ期胃癌间差异无统计学意义(P〉0.05)。四种Argonaute蛋白的表达与胃癌患者的性别、年龄、淋巴结转移无相关性(P〉0.05)。在胃癌组织中Argonaute1、Argonaute2、Argonaute3和Argonaute4蛋白两两间表达存在相关性(P〈O.01)。结论胃癌的发生发展可能与Argonaute1、Argonaute2、Argonaute3和Argonaute4蛋白过表达有关。 展开更多
关键词 胃肿瘤 蛋白质阵列分析 argonaute蛋白
原文传递
微小RNA调控靶基因作用机制的研究进展 被引量:4
7
作者 高宁 李龙江 《国际口腔医学杂志》 CAS 2008年第1期35-37,共3页
微小RNA是一类通过转录后调控机制对基因进行调控的非编码的短链RNA。研究发现微小RNA的功能涉及多种生物学过程,与肿瘤的发生、发展和多种疾病密切相关。本文就微小RNA形成过程及对靶基因调控机制的研究进展作一综述。
关键词 微小RNA RNA诱导沉默复合体 argonaute蛋白 基因调控 P小体
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RNAi及沉默通路调控研究进展 被引量:4
8
作者 邓清华 刘国文 +8 位作者 付世新 刘磊 王晓旭 朱晓岩 王建国 白鸽 王振全 李小兵 王哲 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2011年第1期92-95,共4页
RNA干扰(RNA interference,RNAi)是由双链RNA(double-stranded RNA,dsRNA)介导的细胞内双链mRNA特异性降解的现象,属于转录后的基因沉默机制。迄今为止,RNAi已经是一种广泛应用于研究基因功能的最新和最有效的方法,并且在治疗人类和动... RNA干扰(RNA interference,RNAi)是由双链RNA(double-stranded RNA,dsRNA)介导的细胞内双链mRNA特异性降解的现象,属于转录后的基因沉默机制。迄今为止,RNAi已经是一种广泛应用于研究基因功能的最新和最有效的方法,并且在治疗人类和动物疾病中也有很大潜力。作者主要综述了RNAi的过程、小RNA的生物发生学及沉默通路的保护和调控。 展开更多
关键词 小RNA 小干扰RNA RISC argonaute蛋白
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Modeling and analysis of Schistosoma Argonaute protein molecular spatial conformation 被引量:4
9
作者 Jianhua Zhang Zhigang Shang +1 位作者 Xiaohui Zhang Yuntao Zhang 《Asian Pacific Journal of Tropical Biomedicine》 SCIE CAS 2011年第4期275-278,共4页
Objective:To analyze the amino acid sequence composition,secondary structure,the spatial conformation of its domain and other characteristics of Argonaute protein.Methods:Bioinformatics tools and the internet server w... Objective:To analyze the amino acid sequence composition,secondary structure,the spatial conformation of its domain and other characteristics of Argonaute protein.Methods:Bioinformatics tools and the internet server were used.Firstly,the amino acid sequence composition features of the Argonaute protein were analyzed,and the phylogenetic tree was constructed.Secondly,Argonaute protein's distribution of secondary structure and its physicochemical properties were predicted.Lastly,the protein functional expression form of the domain group was established through the Phyre-based analysis on the spatial conformation of Argonaute protein domains.Results:593 amino acids were encoded by Argonaute protein,the phylogenetic tree was constructed,and Argonaute protein's distribution of secondary structure and its physicochemical properties were obtained through analysis.In addition,the functional expression form which comprised the N-terminal PAZ domain and C-terminal Piwi domain for the Argonaute protein was obtained with Phyre.Conclusions:The information relationship between the structure and function of the Argonaute protein can be initially established with bioinformatics tools and the internet server,and this provides the theoretical basis for further clarifying the function of Schistosoma Argonaute protein. 展开更多
关键词 argonaute protein Distribution of SECONDARY structure Phyre Domain SCHISTOSOMA SPATIAL CONFORMATION AMINO acid sequence
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新型Argonaute蛋白的挖掘及体外活性表征
10
作者 方蒙君 司振军 +2 位作者 沈培杰 黄迪 徐志南 《海南师范大学学报(自然科学版)》 CAS 2023年第4期440-446,共7页
本研究旨在挖掘新的具有可编码核酸切割活性的Argonaute(Ago)核酸酶。利用已报道的Ago核酸酶的氨基酸序列在NCBI中进行序列比对获得同源性较高的新型Ago蛋白作为候选蛋白;以大肠杆菌为异源表达系统,对候选蛋白的基因进行密码子优化;表... 本研究旨在挖掘新的具有可编码核酸切割活性的Argonaute(Ago)核酸酶。利用已报道的Ago核酸酶的氨基酸序列在NCBI中进行序列比对获得同源性较高的新型Ago蛋白作为候选蛋白;以大肠杆菌为异源表达系统,对候选蛋白的基因进行密码子优化;表达后的目的蛋白利用亲和层析进行分离和纯化;设计核酸定向切割体系以测试纯化蛋白的可编码核酸酶活性。结果显示,序列比对共获得4个候选Ago蛋白,均可在大肠杆菌中可溶表达,再通过亲和层析得到了高纯度的目的蛋白;纯化后的4个候选Ago蛋白经测试均具有可编码核酸内切酶活性。本研究建立的Ago核酸酶的挖掘和体外活性表征的方法,可高效获取新型Ago,对于后继Ago核酸酶的研究工作具有借鉴和参考价值。 展开更多
关键词 argonaute蛋白 可编码核酸内切酶 核酸酶活性表征
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烟草基因组中AGO蛋白的生物信息学分析 被引量:4
11
作者 蔡健宇 武晓云 +1 位作者 郭玉双 李翔宇 《江西农业学报》 CAS 2017年第2期1-8,共8页
对在NCBI上登录的烟草AGO蛋白(argonaute proteins)的信息进行了整理,并对其组成成分、系统发育树、信号肽、跨膜结构域、细胞定位、亲水性/疏水性、蛋白质的二/三级结构等进行了预测和分析。结果表明:在烟草基因组中共有22个AGO蛋白,... 对在NCBI上登录的烟草AGO蛋白(argonaute proteins)的信息进行了整理,并对其组成成分、系统发育树、信号肽、跨膜结构域、细胞定位、亲水性/疏水性、蛋白质的二/三级结构等进行了预测和分析。结果表明:在烟草基因组中共有22个AGO蛋白,可分为8类;烟草的AGO蛋白与拟南芥的AGO一样在进化上分为3个分支,其编码的蛋白是一个无跨膜结构域、无信号肽/导肽的亲水性蛋白,α-螺旋散布于整个蛋白质中,具有PAZ和PIWI两个特征结构域。此外,烟草的AGO2/4/7/16/PNH1定位在细胞核中,AGO10定位在细胞质中,AGO5定位在线粒体中。 展开更多
关键词 生物信息学 烟草 argonaute(AGO) 分子结构 功能预测
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Argonaute系列蛋白多克隆抗体制备和鉴定及组织定位 被引量:2
12
作者 卢峪霞 黄志刚 +3 位作者 陈锡美 郜恒骏 胡莺 张小燕 《同济大学学报(医学版)》 CAS 2009年第1期23-26,31,共5页
目的制备一系列Argonaute(简称AGO)蛋白多克隆抗体,并鉴定其特异性,应用组织芯片初步探讨其在人类组织中的分布。方法合成特异性AGO多肽,以马来酰胺活化匙孔血蓝蛋白(keyhole limpet hemocyanin,KLH)作为载体构建多肽免疫原,通过致敏大... 目的制备一系列Argonaute(简称AGO)蛋白多克隆抗体,并鉴定其特异性,应用组织芯片初步探讨其在人类组织中的分布。方法合成特异性AGO多肽,以马来酰胺活化匙孔血蓝蛋白(keyhole limpet hemocyanin,KLH)作为载体构建多肽免疫原,通过致敏大白兔,制备系列兔抗人AGO多克隆抗体,然后用亲和层析法纯化抗体。用ELISA和western方法进行抗体验证,并应用人组织芯片进行AGO的免疫组化研究。结果通过构建系列AGO多肽-KLH载体复合物致敏大白兔,成功制备了3个兔抗人AGO蛋白多克隆抗体,经ELISA及Western blot证实兔抗人AGO抗体可特异性识别AGO多肽,在人组织芯片中通过免疫组化染色显示该抗体在部分肿瘤组织上皮来源细胞胞浆中呈阳性染色。结论本项研究成功制备系列兔抗人AGO多克隆抗体,为进一步研究AGO在miRNA/RNAi通路中的作用及在人类疾病中的意义提供了有利工具。 展开更多
关键词 argonaute蛋白 多克隆抗体 组织芯片
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植物Argonaute基因研究进展 被引量:3
13
作者 翟立红 孙伟 +1 位作者 李知洪 腾峰 《生命科学》 CSCD 北大核心 2018年第11期1210-1220,共11页
Argonaute (AGO)蛋白是一类在小RNA介导的基因沉默中起关键作用的RNA结合蛋白。AGO家族在不同物种中高度保守,由可变N端、PAZ、MID和PIWI等4个结构域组成。根据系统进化学以及AGO基因结合的小RNA类型可将该家族分为3个亚族,即AGO-like、... Argonaute (AGO)蛋白是一类在小RNA介导的基因沉默中起关键作用的RNA结合蛋白。AGO家族在不同物种中高度保守,由可变N端、PAZ、MID和PIWI等4个结构域组成。根据系统进化学以及AGO基因结合的小RNA类型可将该家族分为3个亚族,即AGO-like、PIWI-like和Group^3亚家族,目前发现的植物中的AGO基因均属于AGO-like亚家族。研究表明,不同类型的小RNA结合特定种类的AGO蛋白在植物不同生长发育和响应胁迫过程中扮演着重要角色。最近发掘的许多AGO蛋白新的生物学功能表明,AGO在调控配子生成和发育过程中也具有重要意义。现对植物AGO家族的分类、结构特点、结合的小RNA类别以及最新的功能研究进行详细综述。 展开更多
关键词 argonaute蛋白 小RNA 沉默复合体 生物学功能
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Argonaute蛋白与小RNA的作用机制 被引量:3
14
作者 赵文文 韩颖颖 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第12期1182-1189,共8页
RNA干扰(RNA interference,RNAi)是在植物、动物、线虫、真菌以及昆虫等生物体中普遍存在的通过双链RNA(double-strand RNA,dsRNA)诱导的抑制同源基因表达的一种保守的调控机制.小分子RNA通过特异性地识别结合RNA诱导的沉默复合体(RNA-i... RNA干扰(RNA interference,RNAi)是在植物、动物、线虫、真菌以及昆虫等生物体中普遍存在的通过双链RNA(double-strand RNA,dsRNA)诱导的抑制同源基因表达的一种保守的调控机制.小分子RNA通过特异性地识别结合RNA诱导的沉默复合体(RNA-induced silencing complex,RISC)对目标mRNA的表达在转录和翻译水平进行抑制.作为RISC的重要组成成分,Argonaute蛋白(Ago)发挥了至关重要的作用.为了进一步阐明Ago蛋白在RNA干扰中对小分子RNA的作用机制,本文介绍了Ago蛋白的结构、分类及其在RNA干扰机制中的作用,并着重阐述了目前已知的植物Ago蛋白对小分子RNA的几种作用机制,以及目前研究发现的Ago蛋白的功能作用,从而更进一步证实Ago蛋白对小分子RNA的作用是一个复杂的过程. 展开更多
关键词 argonaute蛋白 小RNA RNA干扰 作用机制
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植物RNA沉默的分子机制研究进展 被引量:2
15
作者 王鹏 赵旵军 朱国萍 《生命科学》 CSCD 2008年第5期784-789,共6页
RNA沉默(RNA silencing)是真核生物中的一种抵抗外源遗传因子(病毒、转座子或转基因)及调控基因表达的防御机制。参与植物RNA沉默的酶及蛋白质主要包括6种RNA依赖的RNA聚合酶、4种Dicer-like(DCL)核酸内切酶和10种Argonautes蛋白。植物... RNA沉默(RNA silencing)是真核生物中的一种抵抗外源遗传因子(病毒、转座子或转基因)及调控基因表达的防御机制。参与植物RNA沉默的酶及蛋白质主要包括6种RNA依赖的RNA聚合酶、4种Dicer-like(DCL)核酸内切酶和10种Argonautes蛋白。植物中4条RNA沉默途径分别由微小RNA (miRNAs)和3种小干扰RNA(siRNAs)介导,包括反式作用siRNAs(ta-siRNAs)、天然反义siRNAs(nat- siRNAs)和异染色质siRNAs(hc-siRNAs)。在植物RNA沉默的系统性传播中,由DCL4或DCL2将dsRNAs裁剪为次级siRNAs,以放大RNA沉默信号和增强沉默效应。 展开更多
关键词 RNA沉默 RNA依赖的RNA聚合酶 Dicer-like核酸内切酶 argonaute蛋白 微小RNA 小干扰RNA 沉默途径 系统性RNA沉默
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PIWI和肿瘤 被引量:2
16
作者 程子昊 尤永平 傅震 《医学研究生学报》 CAS 2008年第6期635-637,642,共4页
PIWI家族成员包含保守的PAZ和PIWI区域,在干细胞自我更新、精子发生、RNA干扰和翻译调控中扮演重要角色。最近研究发现,一些PIWI在肿瘤中呈特异性表达,并与肿瘤的发生、发展相关。PIWI将有可能成为肿瘤诊断和预后判断的一个新的重要指... PIWI家族成员包含保守的PAZ和PIWI区域,在干细胞自我更新、精子发生、RNA干扰和翻译调控中扮演重要角色。最近研究发现,一些PIWI在肿瘤中呈特异性表达,并与肿瘤的发生、发展相关。PIWI将有可能成为肿瘤诊断和预后判断的一个新的重要指标。研究PIWI表达调控机制,可探讨PIWI在肿瘤基因治疗方面的可行性。 展开更多
关键词 PIWI argonaute蛋白 肿瘤 基因治疗
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Argonaute蛋白质在miRNA基因调控中的作用 被引量:1
17
作者 周佳坤 刘马峰 贾仁勇 《中国细胞生物学学报》 CAS CSCD 2016年第12期1535-1540,共6页
miRNA(microRNA)是一类长约22 nt,具有调控功能的内源性非编码小RNA。成熟miRNA由RNA聚合酶II/III转录的初级转录物经过一系列酶剪切加工产生,最终与Argonaute蛋白质等复合为沉默效应复合物(RNA-induced silencing complex,RISC)。miRN... miRNA(microRNA)是一类长约22 nt,具有调控功能的内源性非编码小RNA。成熟miRNA由RNA聚合酶II/III转录的初级转录物经过一系列酶剪切加工产生,最终与Argonaute蛋白质等复合为沉默效应复合物(RNA-induced silencing complex,RISC)。miRNA通过与靶基因完全或部分序列互补配对,指导RISC对靶基因进行降解或翻译抑制。Argonaute作为RISC的主要效应蛋白,在miRNA的生成及靶基因的调控过程中起着重要作用。该文综述了Argonaute在miRNA介导的基因调控中的作用,以期有助于miRNA调控网络的研究及机制的阐释。 展开更多
关键词 argonaute蛋白质 MIRNA 基因调控
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盐地碱蓬AGO蛋白基因家族的分离及表达分析 被引量:1
18
作者 王闻 范士亮 +4 位作者 李晋 高伟 金玉休 郑明刚 郑立 《海洋科学进展》 CAS CSCD 北大核心 2019年第2期306-314,共9页
AGO蛋白(Argonature protein)作为RNA诱导沉默复合物的核心元件,在植物的非生物胁迫过程中发挥着重要作用。以前期获得的盐地碱蓬转录组数据为基础,开展了针对盐地碱蓬(Suaeda salsa)AGO蛋白的生物信息学及盐胁迫下的表达规律研究。采用... AGO蛋白(Argonature protein)作为RNA诱导沉默复合物的核心元件,在植物的非生物胁迫过程中发挥着重要作用。以前期获得的盐地碱蓬转录组数据为基础,开展了针对盐地碱蓬(Suaeda salsa)AGO蛋白的生物信息学及盐胁迫下的表达规律研究。采用RACE技术克隆2个AGO基因家族成员(SsAGO1、SsAGO16)的cDNA全长序列,并对其蛋白结构、进化关系、表达模式等进行分析。结果表明:盐地碱蓬2类AGO蛋白家族成员基因长度分别为3 212 bp和3 766 bp,编码的蛋白均是一个无跨膜结构域、无信号肽的亲水性蛋白,α-螺旋散布于每个蛋白质的整体结构中;SsAGO1和SsAGO16都含有一个未知的结构域DUF1785,除此之外,SsAGO1还含有PAZ和PIWI两个特征结构域,而SsAGO16仅含有PIWI结构域,SsAGO1和SsAGO16亲缘关系较远,且具有不同的时空表达模式。首次从盐地碱蓬鉴定了AGO蛋白基因并进行了盐胁迫下的表达规律分析,为研究AGO蛋白家族在盐生植物耐盐生理过程中的作用奠定了基础。 展开更多
关键词 盐地碱蓬 argonaute蛋白 功能预测 表达模式
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Argonaute蛋白结构及其在植物中的研究进展 被引量:1
19
作者 谷少伟 《湖北农业科学》 2020年第8期11-16,共6页
在真核细胞中,许多小的非编码RNA与Argonaute蛋白结合形成RNA诱导沉默复合体,并通过识别互补的靶标RNA来调控基因表达,此过程叫RNA干扰。在植物的RNA干扰途径中,Argonaute-sRNA复合物可以通过多种不同的机制发挥作用,进而参与病原体防... 在真核细胞中,许多小的非编码RNA与Argonaute蛋白结合形成RNA诱导沉默复合体,并通过识别互补的靶标RNA来调控基因表达,此过程叫RNA干扰。在植物的RNA干扰途径中,Argonaute-sRNA复合物可以通过多种不同的机制发挥作用,进而参与病原体防御、植物发育调控等关键的生物过程。综述了Argonaute蛋白的分类和结构特征、在植物体中参与RNA干扰的机制及生物学功能等研究进展。 展开更多
关键词 argonaute蛋白 结构 RNA干扰 功能
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PIWIL系列蛋白多克隆抗体制备、鉴定及组织分布
20
作者 卢峪霞 黄志刚 +4 位作者 陈锡美 郜恒骏 胡莺 张小燕 孟逊 《基础医学与临床》 CSCD 北大核心 2009年第4期414-417,共4页
目的制备PIWIL蛋白多克隆抗体,鉴定其特异性,初步探讨其在人类正常及肿瘤组织中的分布。方法合成特异性PIWIL多肽,以马来酰胺活化匙孔血蓝蛋白(KLH)作为载体构建多肽免疫原,通过致敏大白兔,制备兔抗人PIWIL多克隆抗体,用亲和层析法纯化... 目的制备PIWIL蛋白多克隆抗体,鉴定其特异性,初步探讨其在人类正常及肿瘤组织中的分布。方法合成特异性PIWIL多肽,以马来酰胺活化匙孔血蓝蛋白(KLH)作为载体构建多肽免疫原,通过致敏大白兔,制备兔抗人PIWIL多克隆抗体,用亲和层析法纯化抗体。用ELISA和Western blot方法进行抗体验证,应用人组织芯片进行PIWIL免疫组化研究。结果通过构建系列PIWIL多肽-KLH载体复合物致敏大白兔,成功制备4个兔抗人PIWIL蛋白多克隆抗体,证实兔抗人PIWIL抗体可特异性识别PIWIL多肽,该抗体在大多数正常及肿瘤组织上皮来源细胞胞质中呈阳性染色。结论成功制备系列兔抗人PIWIL多克隆抗体,为进一步研究PIWIL在miRNA/RNAi通路中的作用及在人类疾病中的意义提供了有利工具。 展开更多
关键词 argonaute蛋白 多克隆抗体 组织i吝片
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