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阿糖胞苷分别联合去甲氧柔红霉素、柔红霉素治疗急性髓细胞白血病对恶性分子表达影响的差异 被引量:13
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作者 努尔比亚.阿布都热西提 维尼拉.吐尔洪 +1 位作者 努尔阿米娜.依明尼亚孜 帕力旦.艾沙 《海南医学院学报》 CAS 2018年第5期601-603,607,共4页
目的:研究去甲氧柔红霉素+阿糖胞苷(IA)方案以及柔红霉素+阿糖胞苷(DA)方案治疗急性髓细胞白血病对恶性分子表达影响的差异。方法:选择在本院诊断为急性髓细胞白血病的56例患者作为研究对象并随机分为IA组和DA组,接受不同化疗方案后2个... 目的:研究去甲氧柔红霉素+阿糖胞苷(IA)方案以及柔红霉素+阿糖胞苷(DA)方案治疗急性髓细胞白血病对恶性分子表达影响的差异。方法:选择在本院诊断为急性髓细胞白血病的56例患者作为研究对象并随机分为IA组和DA组,接受不同化疗方案后2个周期时测定骨髓组织中增殖基因、凋亡基因、侵袭基因的表达量。结果:化疗两个疗程后,IA组患者骨髓组织中Daxx、CDX2、MCL1、BCL2、SOX4、S100A6、MMP9、N-cadherin、ICAM-1、SDF-1的蛋白表达量均显著低于DA组,SHIP1、Bax、C/EBPα的蛋白表达量均显著高于DA组。结论:IA方案治疗急性髓细胞白血病能够较DA方案更为有效地抑制增殖及侵袭基因的表达、增加凋亡基因的表达。 展开更多
关键词 急性髓细胞白血病 去甲氧柔红霉素 柔红霉素 阿糖胞苷 恶性分子
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基于交通量的公路路面设计方案及技术分析 被引量:3
2
作者 章煦 王爱国 司直 《建筑技术开发》 2016年第11期31-32,共2页
近年来随着我国经济持续稳定增长,人均生活水平逐渐提高。在这样的背景下,我国的道路交通流量逐渐增长。为了适应相关道路的交通流量发展速度,有关道路建设部门都加强以交通流量为基础的公路路面设计,以某省的道路建设为例,分析探讨基... 近年来随着我国经济持续稳定增长,人均生活水平逐渐提高。在这样的背景下,我国的道路交通流量逐渐增长。为了适应相关道路的交通流量发展速度,有关道路建设部门都加强以交通流量为基础的公路路面设计,以某省的道路建设为例,分析探讨基于交通流量的公路路面设计方案及其技术。 展开更多
关键词 交通流量 公路路面 改性沥青
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调控表达LacI蛋白的猪霍乱沙门氏杆菌C500Δasd株的构建
3
作者 许可 刘晶 +4 位作者 高兴 胡译文 杨桂连 王春凤 姜延龙 《黑龙江畜牧兽医》 CAS 北大核心 2019年第21期11-17,共7页
为了构建具有asd基因缺失和LacI蛋白表达调控的猪霍乱沙门氏杆菌C500株,试验以猪霍乱沙门氏杆菌C500株为载体,对其基因组进行改造,使沙门氏杆菌asd基因缺失,随后将araC PBADLacI序列置于其中,构建包含araC PBAD-LacI基因表达框的猪霍乱... 为了构建具有asd基因缺失和LacI蛋白表达调控的猪霍乱沙门氏杆菌C500株,试验以猪霍乱沙门氏杆菌C500株为载体,对其基因组进行改造,使沙门氏杆菌asd基因缺失,随后将araC PBADLacI序列置于其中,构建包含araC PBAD-LacI基因表达框的猪霍乱沙门氏杆菌C500Δasd基因突变株以及包含Ptrc启动子的EGFP表达质粒pYA4514-EGFP,并验证是否有LacI蛋白表达。结果表明:试验成功构建出包含araC PBAD-LacI基因表达框的猪霍乱沙门氏杆菌C500Δasd基因突变株,以及包含Ptrc启动子的EGFP表达质粒pYA4514-EGFP;Western-blot检测验证了突变菌在阿拉伯糖存在的条件下可大量表达LacI蛋白,而当pYA4514-EGFP质粒上的Ptrc启动子受到抑制时,EGFP蛋白不表达;用IPTG诱导后可以消除LacI对Ptrc启动子的抑制作用,EGFP蛋白表达。说明试验成功构建了调控表达LacI蛋白的猪霍乱沙门氏杆菌C500Δasd基因突变株。 展开更多
关键词 猪霍乱沙门氏杆菌C500株 C500Δasd基因突变株 arac PBAD启动子 LacI蛋白表达
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Molecular Cloning and Bioinformatics Analysis of araC Gene of Vibrio alginolyticus
4
作者 Fangling MO Gyamfua AFRIYIE +6 位作者 Jialing HU Junling WANG Shihui ZHOU Zhongduo WANG F.K.A.KUEBUTORNYE Chuanhao PAN Huanying PANG 《Asian Agricultural Research》 2021年第2期19-23,共5页
[Objective]To clone araC gene of Vibrio alginolyticus HY9901 strain,and analyze bioinformatics.[Methods]the whole genome sequence of Vibrio alginolyticus on GenBank was used to design specific primers.According to the... [Objective]To clone araC gene of Vibrio alginolyticus HY9901 strain,and analyze bioinformatics.[Methods]the whole genome sequence of Vibrio alginolyticus on GenBank was used to design specific primers.According to the principle of PCR amplification sequence,the target gene araC was amplified,and then the sequence was further analyzed by bioinformatics method to establish the phylogenetic tree of araC gene and its corresponding subunit three-dimensional structure model.[Results]Sequence analysis revealed araC gene is 711 bp and encodes a putative protein of 236 amino acids.The predicted molecular mass of AraC was 26.92 ku.Using Signal P 4.0 and TMHMM Server 2.0 software for analysis,it was predicted that the AraC protein did not contain a signal peptide or a transmembranous region.The AraC protein had two cAMP and cGMP dependent protein kinase phosphorylation site,five protein kinase C phosphorylation sites,three casein kinase II phosphorylation sites,one prenyl group binding site(CAAX box)and five microbodies C-terminal targeting signal.The predicted results of protein subcellular localization showed that AraC was located in the mitochondria,nucleus and cytoplasm.Its protein is unstable and hydrophilic.The AraC protein is a transcriptional regulatory protein which belongs to HTH_18 superfamily.According to the prediction,secondary structure:a-helix(Alpha helix)accounted for 52.12%,random coil(31.78%),extended strand(11.02%),b-fold(Beta turn)accounted for 5.08%.V.alginolyticus,Vibrio parahaemolyticus and Vibrio palustris were clustered together,which implies that the genetic relationship between these three species was the closest. 展开更多
关键词 Vibrio alginolyticus arac gene Gene cloning Bioinformatics analysis
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Different influence of Arac combined with idarubicin and with daunorubicin on malignant molecule expression of acute myelocytic leukemia
5
作者 Abudourexiti Nuerbiya Tuerhong Weinila +1 位作者 Yimingniyazi Nueramina Palerdan Aisha 《Journal of Hainan Medical University》 2018年第5期27-30,共4页
Objective:To study the different influence of idarubicin + Arac (IA) therapy and daunorubicin + Arac (DA) therapy on malignant molecule expression of acute myelocytic leukemia. Methods: A total of 56 patients who were... Objective:To study the different influence of idarubicin + Arac (IA) therapy and daunorubicin + Arac (DA) therapy on malignant molecule expression of acute myelocytic leukemia. Methods: A total of 56 patients who were diagnosed with acute myelocytic leukemia in Kashgar Prefecture First People's Hospital between January 2014 and September 2017 were selected as the research subjects and randomly divided into IA group and DA group, and the expression levels of proliferation genes, apoptosis genes and invasion genes in bone marrow tissue were determined after they accepted two courses of different chemotherapy regimens. Results:After two courses of chemotherapy, Daxx, CDX2, MCL1, BCL2, SOX4, S100A6, MMP9, N-cadherin, ICAM-1 and SDF-1 protein expression in bone marrow tissue of IA group were significantly lower than those of DA group whereas SHIP1, Bax and C/EBP protein expression were significantly higher than those of DA group.Conclusion:IA solution for acute myelocytic leukemia can be more effective than DA solution to inhibit the expression of proliferation and invasion genes and increase the expression of apoptosis genes. 展开更多
关键词 Acute myelocytic LEUKEMIA IDARUBICIN DAUNORUBICIN arac MALIGNANT MOLECULE
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毛蚶水解液降血糖降血脂的实验研究 被引量:14
6
作者 窦昌贵 严永清 张征 《中国海洋药物》 CAS CSCD 1996年第1期13-15,共3页
毛蚶水解液ig10g/kg、20g/kg,能显著降低实验性糖尿病小鼠的血糖水平(P<0.01),并显著降低食物性高脂血症鹌鹑的血清甘油三酯(P<0.01)和血清胆固醇水平(P<0.05)。表明毛蚶水解液具有降血糖、降血脂作用。
关键词 毛蚶水解液 血糖 甘油三酯 胆固醇
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钢渣掺量对橡胶沥青混合料ARAC-13性能的影响 被引量:5
7
作者 柳力 朱晓明 +4 位作者 刘朝晖 李文博 杨程程 黄优 刘磊鑫 《材料导报》 EI CAS CSCD 北大核心 2023年第10期62-68,共7页
为提高钢铁废渣的综合利用率和经济效益、优化环境,采用体积替代法进行钢渣沥青混合料组成设计,通过设计膨胀破坏试验新方法分析钢渣沥青混合料的体积稳定性,基于车辙试验、冻融劈裂试验和低温小梁弯曲试验等,开展不同钢渣掺量下的ARAC... 为提高钢铁废渣的综合利用率和经济效益、优化环境,采用体积替代法进行钢渣沥青混合料组成设计,通过设计膨胀破坏试验新方法分析钢渣沥青混合料的体积稳定性,基于车辙试验、冻融劈裂试验和低温小梁弯曲试验等,开展不同钢渣掺量下的ARAC-13沥青混合料路用性能研究,并依托广西滨海公路项目对钢渣沥青混合料路面进行经济效益评估。结果表明,ARAC-13沥青混合料的毛体积相对密度和最佳油石比均与钢渣掺量呈正相关性,钢渣掺量的增加会降低混合料的体积稳定性,增大体积膨胀风险。当钢渣100%等体积替代粗集料时,ARAC-13沥青混合料的动稳定度、残留稳定度、冻融劈裂强度比、最大弯拉应变(-10℃)、摆值和构造深度均有不同程度的提高,可显著提升ARAC-13沥青混合料的路用性能,且可节约7.0%左右的材料成本,具有较大的应用前景和经济价值。 展开更多
关键词 钢渣 arac-13 路用性能 体积稳定性 经济效益
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大剂量阿糖胞苷治疗儿童血液恶性肿瘤药物浓度测定和远期疗效研究 被引量:10
8
作者 李本尚 石苇 +5 位作者 付晓燕 梅竹 林洁靓 詹琼 李莉 谢晓恬 《临床血液学杂志》 CAS 2003年第1期18-20,共3页
目的 :对以大剂量阿糖胞苷 (HD AraC)为主的联合化疗方案的远期疗效进行综合分析和判定 ,对方案中使用不同剂量Ara C的血和脑脊液浓度进行测定。方法 :选择儿童血液恶性肿瘤患者 5 8例 ,在初治缓解后分别给予常规剂量阿糖胞苷 (Ara C)... 目的 :对以大剂量阿糖胞苷 (HD AraC)为主的联合化疗方案的远期疗效进行综合分析和判定 ,对方案中使用不同剂量Ara C的血和脑脊液浓度进行测定。方法 :选择儿童血液恶性肿瘤患者 5 8例 ,在初治缓解后分别给予常规剂量阿糖胞苷 (Ara C)的化疗方案COAP和HD AraC为主的化疗方案CAT、DA进行早期和定期强化治疗 ,然后继续接受其它联合化疗的序贯治疗。采用积极的化疗副反应综合防治措施 ,以保证强烈化疗顺利进行 ,随访观察远期疗效。通过高效液相色谱法 (HPLC)对部分患儿血和脑脊液中药物浓度进行动态测定。结果 :其中 3 9例仍处于完全缓解 (CR)中 ,初治CR率为 10 0 % ,持续完全缓解 (CCR)时间平均为 60 .6个月 ,CCR率为75 .0 % ,无一例发生化疗相关死亡。HPLC显示 :HD AraC治疗时血药高峰浓度平均为 ( 49.94± 2 6.0 3 ) μmol/L ,约为常规剂量的 5 0倍 ,脑脊液中药物浓度可达血药浓度的 10 %~ 2 0 %。结论 :本文资料显示 ,HD AraC为主的化疗方案治疗儿童血液恶性肿瘤取得了较为显著的远期疗效 ,CCR率接近发达国家水平。毒副反应可以有效防治 ,患儿均能够耐受 ,适用于我国儿童血液恶性肿瘤的系统正规治疗 。 展开更多
关键词 血液恶性肿瘤 大剂量 阿糖胞苷 远期疗效 脑脊液 药物浓度 治疗
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我国花生根结线虫种和小种鉴定及其细微结构观察和地区分布 被引量:7
9
作者 陈品三 彭德良 《中国油料》 CAS CSCD 北大核心 1989年第2期47-50,F003,共5页
本研究首次对我国4个重病区的花生根结线虫(Meloidogyne hapla、M.aren-aria)病病原统一进行了较系统的形态学观察、测量、描述及鉴别寄主鉴定、明确了我国花生上的两个根结线虫种按南,北方两个重病区有其明确的区系分布界限,未发现混... 本研究首次对我国4个重病区的花生根结线虫(Meloidogyne hapla、M.aren-aria)病病原统一进行了较系统的形态学观察、测量、描述及鉴别寄主鉴定、明确了我国花生上的两个根结线虫种按南,北方两个重病区有其明确的区系分布界限,未发现混生现象,即各分别为:在南方—北纬25°的广东省遂溪县等地区是花生根结线虫1号(Meloidogyne arenaria race 1)生理小种;在北方—北纬37°以北的山东省栖霞县、文登县以及河北省滦县等地区是北方根结线虫(M.hapla);而且在本研究所取样本地区均为单一根结线虫种,亦未发现有其它根结线虫种为害花生。同时还看出北方根结线虫种内四个群体间的二龄幼虫头部细微结构有所不同。 展开更多
关键词 花生 根结线虫 形态学 分布 鉴定
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橡胶改性沥青混合料ARAC-20中面层应用技术研究 被引量:5
10
作者 李田琳 张洪刚 《西部交通科技》 2018年第7期6-10,共5页
文章通过实验室试验和工程试验段应用,对沥青路面中面层应用橡胶改性沥青技术进行研究,提出了中面层橡胶改性沥青混合料的原材料控制技术指标和配合比设计要求,并阐述了中面层橡胶改性沥青混合料的施工技术参数与工艺控制要求。室内试... 文章通过实验室试验和工程试验段应用,对沥青路面中面层应用橡胶改性沥青技术进行研究,提出了中面层橡胶改性沥青混合料的原材料控制技术指标和配合比设计要求,并阐述了中面层橡胶改性沥青混合料的施工技术参数与工艺控制要求。室内试验和工程施工质量检测指标表明,用于沥青路面中面层的橡胶改性沥青混合料ARAC-20具有良好的体积参数、水稳定性和高温抗车辙性能,可为橡胶改性沥青在沥青路面中面层的技术应用提供指导与参考。 展开更多
关键词 橡胶改性沥青arac-20 中面层 抗车辙 级配设计 施工技术
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橡胶沥青混合料性能与工程应用研究 被引量:3
11
作者 陆恩光 杨群 《上海公路》 2020年第4期71-74,I0006,共5页
采用马歇尔设计方法制备了ARAC-13级配上线、级配中线、级配下线三组橡胶沥青混合料,并对这三组橡胶沥青混合料开展了室内马歇尔、高温稳定性、水稳定性等路用性能研究。研究结果表明,三组橡胶沥青混合料的体积指标、高温稳定性能、水... 采用马歇尔设计方法制备了ARAC-13级配上线、级配中线、级配下线三组橡胶沥青混合料,并对这三组橡胶沥青混合料开展了室内马歇尔、高温稳定性、水稳定性等路用性能研究。研究结果表明,三组橡胶沥青混合料的体积指标、高温稳定性能、水稳定性能均符合要求。结合实际工程应用,对试验段混合料进行了检验,试验段橡胶沥青混合料矿料级配、渗水系数等指标均符合设计要求。 展开更多
关键词 橡胶沥青混合料 arac级配 路用性能 工程应用
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ARAC-13橡胶改性沥青混合料面层碾压工艺研究 被引量:3
12
作者 韦程元 涂福韵 +1 位作者 谭毅 张嘉豪 《西部交通科技》 2022年第5期105-107,135,共4页
为了研究碾压工艺对ARAC-13橡胶改性沥青混合料面层压实特性的影响,文章提出两种碾压工艺,并检测了两种碾压工艺对ARAC-13橡胶改性沥青混合料面层碾压效果的影响。结果表明:较仅采用钢轮压路机碾压而言,采用钢轮压路机和胶轮压路机搭配... 为了研究碾压工艺对ARAC-13橡胶改性沥青混合料面层压实特性的影响,文章提出两种碾压工艺,并检测了两种碾压工艺对ARAC-13橡胶改性沥青混合料面层碾压效果的影响。结果表明:较仅采用钢轮压路机碾压而言,采用钢轮压路机和胶轮压路机搭配碾压工艺铺筑的路面质量更好;建议在ARAC-13橡胶改性沥青混合料面层碾压过程中,采用钢轮压路机、胶轮压路机搭配的工艺进行碾压,并在复压环节中采用胶轮压路机碾压1~2遍,以保障沥青路面的压实度及整体粘聚性。 展开更多
关键词 arac-13 橡胶沥青 混合料 碾压 道路工程
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转录调控因子Lmo2672对LM环境适应性和应激的调控作用 被引量:1
13
作者 李杰 张星星 +5 位作者 孟庆玲 乔军 李妍 王晓婷 李静 才学鹏 《西南农业学报》 CSCD 北大核心 2020年第9期2112-2117,共6页
【目的】本文为了解AraC家族转录调控因子Lmo2672对单核增生李斯特菌(LM)环境适应性和应激的影响。【方法】利用温控型质粒pKSV7构建LM-Δlmo2672缺失株,比较母源株LM EGD-e和缺失株LM-Δlmo2672在不同应激环境中生长情况的差异,并利用q... 【目的】本文为了解AraC家族转录调控因子Lmo2672对单核增生李斯特菌(LM)环境适应性和应激的影响。【方法】利用温控型质粒pKSV7构建LM-Δlmo2672缺失株,比较母源株LM EGD-e和缺失株LM-Δlmo2672在不同应激环境中生长情况的差异,并利用qRT-PCR方法分析转录调控因子Lmo2672缺失对应激调控基因及氧化应激相关基因转录水平的影响。【结果】与LM EGD-e相比,LM-Δlmo2672在37、42℃及含5%NaCl、0.3%胆酸盐、5 mM H2O2、1%Triton X-100的培养基中生长速度均显著降低(P<0.05);且环境适应性及应激相关基因(prfA、lexA、fri、perR、kat、sod)转录水平显著降低(P<0.05)。【结论】提示lmo2672基因在LM环境适应性和应激中发挥重要的调控作用。 展开更多
关键词 单核增生李斯特菌 arac家族 lmo2672基因 环境适应性
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民机电传飞控系统ARAC25.671符合性验证思路研究
14
作者 曹春泉 《成都航空职业技术学院学报》 2022年第1期46-50,共5页
鉴于电传飞行控制系统相对于传统的机械式系统具有新颖性和独特性,CCAR25.671条款作为电传飞行控制系统的审查总则已不完全适用。参考国内外民机的适航审定经验,采用ARAC25.671作为电传飞行控制系统的审查总则。通过对比分析CCAR25.671... 鉴于电传飞行控制系统相对于传统的机械式系统具有新颖性和独特性,CCAR25.671条款作为电传飞行控制系统的审查总则已不完全适用。参考国内外民机的适航审定经验,采用ARAC25.671作为电传飞行控制系统的审查总则。通过对比分析CCAR25.671与ARAC25.671的异同点,结合国内民机的适航经历,按照AP-21《航空器型号合格审定程序》规定的适航符合性方法,提出了ARAC25.671条款的符合性验证思路。 展开更多
关键词 电传飞行控制系统 适航符合性 CCAR25.671 arac25.671
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ARAC-13橡胶沥青混合料在城市道路翻修中的应用 被引量:1
15
作者 谢孔云 《城市道桥与防洪》 2015年第5期217-218,共2页
基于温州地区多雨水、骨料偏酸性特点,采用废旧轮胎制作的橡胶沥青混合料ARAC-13,较好地解决了路面裂缝、麻面、松散、坑槽、沉陷、车辙等缺陷,具有较好的环保效益和工程应用价值。
关键词 橡胶沥青 arac-13 城市道路 翻修 应用
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公路工程沥青路面ARAC-16混合料施工关键技术研究
16
作者 林伟光 《交通世界》 2023年第13期66-68,共3页
以某公路工程为例,分析了沥青路面ARAC-16混合料施工关键技术的应用。研究结果表明,在公路工程中预处理典型路面病害后,将ARAC-16橡胶沥青混凝土罩面加铺在旧路面上,通过加强混合料拌制、摊铺、碾压、施工接缝等工序控制,能够提高路面... 以某公路工程为例,分析了沥青路面ARAC-16混合料施工关键技术的应用。研究结果表明,在公路工程中预处理典型路面病害后,将ARAC-16橡胶沥青混凝土罩面加铺在旧路面上,通过加强混合料拌制、摊铺、碾压、施工接缝等工序控制,能够提高路面路用性能,改善路面服务质量。 展开更多
关键词 公路工程 沥青路面 arac-16混合料 橡胶沥青
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调节高致病力CA—MRSA α-毒素表达的基因筛选及功能研究 被引量:1
17
作者 李敏 胡锦辉 +3 位作者 李茹 张心菊 阮斐诒 吕元 《中华检验医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2010年第7期680-685,共6页
目的 从CA-MILSA全基因组水平筛选出除域值感知(quorum sensing)基因系统以外对α-毒素表达有明显调节作用的基因,并研究其调节机制.方法 使用本实验室构建并已申请国家专利的真核转座酶为基础的转座系统构建CA-MKSA转座子,并随机插... 目的 从CA-MILSA全基因组水平筛选出除域值感知(quorum sensing)基因系统以外对α-毒素表达有明显调节作用的基因,并研究其调节机制.方法 使用本实验室构建并已申请国家专利的真核转座酶为基础的转座系统构建CA-MKSA转座子,并随机插入突变文库.通过用5%羊血平板筛选出与野生株相比溶血明显改变的克隆,接着用定量RT-PCR以及WB等实验筛选出α-毒素表达明显下降的突变菌株,运用随机引物反向PCB和测序等方法鉴定出突变基因.通过基因互补表达实验、小鼠菌血症与皮肤脓肿模型实验以及荧光定量RT-PCR等方法对目标基因以及其编码蛋白的功能进行研究.结果 在CA-MRSA中建立了一个库容量约为104个克隆的转座子随机插入突变库,最终筛选出25株α-毒素表达明显下降的突变菌株.CA-MRSA野生株溶血直径平均为212 mm,而其中AraC转录调节子突变株(AraC-)几乎无溶血,当将AraC基因互补回突变株(AraC-pT181araC)后,其溶血直径平均为197 mm,部分恢复到野生株溶血水平.荧光定量RT-PCR结果显示,与CA-MRSA野生株(PSMα为257.30±37.33,agr为115.60±0.81,α-毒素为3.23±0.21)相比,在AraC-中α-毒素、PSMα以及agr表达均明显下调(α-毒素1.09±0.01:t=10.18,P〈0.01;PSMα 34.85±2.15:t=5.95,P〈0.05;agr 35.19±1.72:t=42.33,P〈0.01).小鼠菌血症模型实验结果为CA-MRSA野生株与AraC-((x)±5)差异具有统计学意义(χ2=21.34,P〈0.01).AraC-p1F181araC中PSMα、agr、α-毒素(hla)表达(分别为PSMα:180.10±15.29,agr:101.50±8.96,α-毒素:2.59±0.26)均部分恢复到野生株表达水平,与CA-MRSA野生株相比,差异无统计学意义(PSMα:t=1.914,P〉0.05;agr:t=1.563,P〉0.05;α-毒素:t=1.923,P〉0.05).CIpP在MaC-(0.21±0.01)和AraC-pT181araC(0.17±0.03)中的表达与CA-MRSA野生株(0.20±0.01)相比,差异无统计学意义(t=0.555,P〉0.05和t=0.851,P〉0.05).小鼠皮肤脓肿� 展开更多
关键词 甲氧西林抗药性 葡萄球菌 金黄色 arac转录因子 毒力因子类 细菌毒素类
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类鼻疽伯克霍尔德菌AraC转录因子基因的原核表达及纯化
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作者 曾慧 黄玮晨 +3 位作者 高洁 江昱颖 胡琪 修皓 《中国病原生物学杂志》 CSCD 北大核心 2022年第7期761-765,共5页
目的从海南类鼻疽伯克霍尔德菌菌株BPHN001中克隆得到AraC转录因子基因,构建类鼻疽伯克霍尔德菌(Burkholderia pseudomallei)AraC转录因子基因原核表达质粒,对该转录因子基因进行原核表达,并对表达产物进行纯化。方法根据AraC转录因子... 目的从海南类鼻疽伯克霍尔德菌菌株BPHN001中克隆得到AraC转录因子基因,构建类鼻疽伯克霍尔德菌(Burkholderia pseudomallei)AraC转录因子基因原核表达质粒,对该转录因子基因进行原核表达,并对表达产物进行纯化。方法根据AraC转录因子基因设计特异性扩增引物,将PET-28a(+)质粒和扩增得到的AraC转录因子基因产物同时用BamHⅠ和HindⅢ双酶切,构建带His标签的重组质粒。经测序验证后,将重组质粒转化至大肠埃希菌BL21(DE3),采用最佳浓度IPTG进行诱导,采用SDS-PAGE鉴定重组蛋白的表达情况。通过Ni^(2+)柱纯化目的蛋白,采用Western blot检测纯化蛋白的免疫反应性。结果特异性引物扩增得到的产物大小约为1000 bp,与目的基因片段1032 bp基本一致。将扩增产物与PET-28a(+)载体连接后测序,与预期完全一致。重组载体转化BL21(DE3)后用最适IPTG浓度(0.5 mmol/L)诱导过夜(约16 h),SDS-PAGE检测表达产物分子质量在40~55 ku之间,与预期相符。表达蛋白纯化后进行Western blot,能被相应抗体识别。结论成功克隆得到AraC转录因子基因,,构建的含AraC转录因子基因原核表达载体转化DE3后经IPTG诱导可表达出融合蛋白,经Ni^(2+)柱纯化得到具有免疫反应原性的AraC转录因子蛋白,为AraC转录因子的功能研究奠定了基础。 展开更多
关键词 类鼻疽伯克霍尔德菌 arac转录因子 原核表达
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恶臭假单胞菌SJTE-1中氧化17β-雌二醇的17β-羟甾类脱氢酶2及其转录调控因子AraC的鉴定
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作者 孙欣 郑达宁 +1 位作者 彭万里 梁如冰 《微生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2020年第2期306-319,共14页
[目的]假单胞菌SJTE-1可高效转化17β-雌二醇,但其代谢机制尚不清楚。本文鉴定和表征了该菌株中参与雌二醇降解与调控过程的17β-羟甾类脱氢酶2(17β-HSD2)和转录调控因子AraC。[方法]我们通过荧光定量PCR分析了17β-hsd2和araC的转录水... [目的]假单胞菌SJTE-1可高效转化17β-雌二醇,但其代谢机制尚不清楚。本文鉴定和表征了该菌株中参与雌二醇降解与调控过程的17β-羟甾类脱氢酶2(17β-HSD2)和转录调控因子AraC。[方法]我们通过荧光定量PCR分析了17β-hsd2和araC的转录水平;我们在大肠杆菌BL21(DE3)菌株中异源表达了17β-HSD2和AraC基因,并利用金属离子亲和层析法纯化获得了重组蛋白;我们体外表征了17β-HSD2的酶学性质,利用高效液相色谱鉴定了其产物;通过电泳迁移转移法和DNase酶I足迹试验,我们鉴定了重组蛋白AraC的结合能力与结合位点。[结果]17β-HSD2和AraC可被17β-雌二醇诱导表达;蛋白序列比对结果表明17β-HSD2含有短链脱氢酶/还原酶(SDR)和β-羟甾类脱氢酶的保守结构与残基。该酶以NAD+为辅助因子,在C17位点氧化17β-雌二醇,其Km值为0.082 mmol/L,Vmax值为56.26±0.02μmol/(min·mg);5 min内可转化97.4%以上的雌二醇。转录调控因子AraC可直接结合17β-hsd2基因启动子区的特异位点;雌二醇与雌酮可解除这一结合,启动17β-hsd2基因转录;过表达AraC蛋白可抑制17β-hsd2的转录。[结论]假单胞菌SJTE-1的17β-羟甾类脱氢酶2可高效催化17β-雌二醇转化,并受到转录因子AraC的直接调控。本工作可推进细菌的雌激素降解酶学机制与调控网络研究。 展开更多
关键词 17β-羟甾类脱氢酶2 17Β-雌二醇 转录因子arac 雌酮 生物降解
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lmo2672基因缺失对LM在不同环境下生物被膜形成的影响
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作者 李杰 孟庆玲 +4 位作者 乔军 伍晔晖 王熙凤 王立霞 才学鹏 《西北农业学报》 CAS CSCD 北大核心 2020年第1期150-156,共7页
旨在了解AraC家族转录调控因子lmo2672对单核增生李斯特菌(LM)生物被膜(BF)形成的影响。根据同源重组技术构建LM-△lmo2672基因缺失株,利用结晶紫染色法比较LM EGD-e和LM-△lmo2672在不同温度、渗透压、H 2O 2和胆酸盐环境中BF形成量的... 旨在了解AraC家族转录调控因子lmo2672对单核增生李斯特菌(LM)生物被膜(BF)形成的影响。根据同源重组技术构建LM-△lmo2672基因缺失株,利用结晶紫染色法比较LM EGD-e和LM-△lmo2672在不同温度、渗透压、H 2O 2和胆酸盐环境中BF形成量的差异;通过qRT-PCR分析上述不同应激环境中BF相关基因相对转录水平的变化。研究结果证实:与LM EGD-e相比,LM-△lmo2672在4℃,30℃,5%NaCl,8%NaCl,5 mmol/L H 2O 2和0.3%胆酸盐培养环境中BF形成量显著降低;在37℃LM-△lmo2672 BF形成能力极显著降低;在不同应激环境中,LM-△lmo2672 BF形成相关基因的表达量均出现不同程度下降。研究结果表明,lmo2672基因在LM BF形成过程中发挥重要作用。 展开更多
关键词 单核增生李斯特菌 arac家族 lmo2672基因 生物被膜
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