软坚消瘿汤对自身免疫性甲状腺炎大鼠细胞因子及凋亡蛋白Fas、Fasl表达的影响 被引量：4

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作者 张兰 方振伟 《中国中医药信息杂志》 CAS CSCD 2010年第3期24-26,共3页

目的观察软坚消瘿汤对实验性自身免疫性甲状腺炎(EAT)大鼠自身抗体、白细胞介素-1(IL-1)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和凋亡蛋白Fas、Fasl的影响,从细胞因子和凋亡蛋白关系角度探讨其作用机制。方法SPF级SD雌性大鼠60只分为正常组、模型组... 目的观察软坚消瘿汤对实验性自身免疫性甲状腺炎(EAT)大鼠自身抗体、白细胞介素-1(IL-1)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和凋亡蛋白Fas、Fasl的影响,从细胞因子和凋亡蛋白关系角度探讨其作用机制。方法SPF级SD雌性大鼠60只分为正常组、模型组,模型组运用甲状腺球蛋白与弗氏佐剂混合免疫注射法,联合饮用高碘水模拟大鼠EAT。造模完成后的大鼠分为中药组、雷公藤组、模型组。酶联免疫法检测甲状腺抗体、IL-1及TNF-α水平,免疫组化染色法检测大鼠甲状腺细胞Fas、Fasl变化。结果软坚消瘿汤能显著降低EAT大鼠血清自身抗体、IL-1及TNF-α水平,降低甲状腺细胞Fas、Fasl表达。结论软坚消瘿汤通过降低EAT血清中自身抗体及细胞因子水平,致使凋亡相关蛋白Fas、Fasl表达下降,从而起到减轻甲状腺细胞凋亡作用。 展开更多

关键词 软坚消瘿汤 自身免疫性甲状腺炎 细胞因子 凋亡蛋白 大鼠

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叶酸缺乏的小鼠胚胎干细胞ES-D3中miR-302a、Bcl2L11表达观察及其靶向关系预测和验证 被引量：2

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作者 梁燕 曹丁丁 +2 位作者 李媛媛 刘卓 吴建新 《山东医药》 CAS 2020年第30期40-44,共5页

目的观察叶酸缺乏的小鼠胚胎干细胞系ES-D3中微小RNA302a(miR-302a)、Bcl2L11的表达变化,并对miR-302a与Bcl2L11的靶向关系进行预测和验证。方法取适量ES-D3细胞,置于缺乏叶酸的培养液中培养,分别于培养0、24、48、72 h(A、B、C、D组)... 目的观察叶酸缺乏的小鼠胚胎干细胞系ES-D3中微小RNA302a(miR-302a)、Bcl2L11的表达变化,并对miR-302a与Bcl2L11的靶向关系进行预测和验证。方法取适量ES-D3细胞,置于缺乏叶酸的培养液中培养,分别于培养0、24、48、72 h(A、B、C、D组)时收集细胞,实时荧光定量PCR法检测miR-302a、Bcl2L11 mRNA,Western blotting法检测细胞Bcl2L11蛋白(BimEL、BimL及BimS蛋白)。生物信息学软件预测Bcl2L11与miR-302a的靶向结合位点。以小鼠3T3细胞基因组DNA为模板,设计3’UTR扩增引物,PCR扩增基因的3’UTR序列,将其克隆到pmiR-RB-REPORT双荧光素酶报告载体中,构建Bcl2L11-3’UTR野生载体;设计突变引物将靶标序列突变,构建突变载体,miRNA-302a mimics及Negative Control分别与Bcl2L113’UTR双报告基因野生载体及突变载体共转染,分别为1组(Bcl2L113’UTR野生型载体+Negative Control)、2组(Bcl2L113’UTR野生型载体+miR-302a mimics)、3组(Bcl2L113’UTR突变型载体+Negative Control)、4组(Bcl2L113’UTR突变型载体+miR-302a mimics),转染后测算各组报告基因hRluc的相对荧光值,验证miR-302a与Bcl2L11是否存在相互作用。结果A、B、C、D组细胞miR-302a相对表达量分别为1.00±0.20、0.65±0.32、0.50±0.22、0.43±0.24,与A组比较,D组miR-302a相对表达量下降(P<0.05);A、B、C、D组细胞Bcl2L11 mRNA相对表达量分别为1.00±0.00、1.22±0.19、1.82±0.37、3.49±0.45,与A组比较,D组Bcl2L11 mRNA相对表达量升高(P<0.05);A、B、C、D组细胞BimEL相对表达量分别为0.86±0.02、0.87±0.03、0.92±0.02、1.10±0.06,与A组比较,C、D组BimEL相对表达量升高(P<0.05);A、B、C、D组细胞BimL相对表达量分别为0、0.09±0.02、0.16±0.04、0.26±0.03,与A组比较,B、C、D组BimL相对表达量升高(P<0.05);A、B、C、D组细胞BimS相对表达量分别为0、0、0.11±0.04、0.18±0.04,与A组比较,C、D组BimS相对表达量升高(P<0.05)。miR-302a和Bcl2L11存在相互作用。1、2、3、4组报告基因h 展开更多

关键词 微小RNA 微小RNA302a 凋亡调节蛋白 Bcl2L11基因 叶酸缺乏 胚胎干细胞 细胞凋亡 胚胎发育

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调控Hippo信号通路对间充质干细胞氧化应激耐受能力的影响

3

作者 董亮 李朗 +5 位作者 惠姣洁 高飞 王秋卉 杨岚 张江茜 严洁 《中国急救医学》 CAS CSCD 北大核心 2018年第5期414-420,I0001,共8页

目的 探讨调控Hippo信号通路对小鼠骨髓来源间充质干细胞（mMSCs）氧化应激耐受能力的影响.方法 直接贴壁法分离C57BL/6小鼠原代mMSCs,通过流式细胞学检测和诱导其成骨、成软骨、成脂分化进行鉴定,采用非接触共培养诱导其向ATⅡ细胞分化... 目的 探讨调控Hippo信号通路对小鼠骨髓来源间充质干细胞（mMSCs）氧化应激耐受能力的影响.方法 直接贴壁法分离C57BL/6小鼠原代mMSCs,通过流式细胞学检测和诱导其成骨、成软骨、成脂分化进行鉴定,采用非接触共培养诱导其向ATⅡ细胞分化;通过2-脱氧-D-葡萄糖（2-DG）及XMU-MP-1调节Hippo信号通路,根据不同浓度的双氧水（H2O2）共培养来模拟氧化应激损伤.应用MTT法评估H2O2诱导氧化应激损伤对mMSCs存活的影响;Western blot法检测mMSCs中Hippo信号通路关键组分,评估H2O2诱导氧化应激损伤对Hippo信号通路的影响;同时应用Western blot法检测凋亡相关蛋白Bax及Bcl-2的表达,评估Hippo信号通路调控mMSCs氧化应激耐受能力的机制.结果 2-DG呈浓度依赖性的激活Hippo信号通路,而通过XMU-MP-1可抑制Hippo信号通路活化.H2O2能导致mMSCs损伤和抑制其Hippo信号通路的活性,凋亡相关蛋白Bcl-2/Bax表达比例下调是导致mMSCs损伤的可能机制;而活化Hippo信号通路能通过上调Bcl-2/Bax表达比例,增强mMSCs氧化应激耐受能力;通过抑制Hippo信号通路下调Bcl-2/Bax表达比例,减弱mMSCs氧化应激耐受和存活能力.结论 Hippo信号通路可通过调控凋亡相关蛋白Bcl-2/Bax表达比例,影响mMSCs的存活和氧化应激耐受能力. 展开更多

关键词 Hippo信号通路 间充质干细胞(mMSCs) 氧化应激耐受 凋亡相关蛋白 BCL-2/BAX

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Zn(PMFPCl)_2对肝癌HepG2细胞的抑制作用及其机制

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作者 赵成亮 宋有鑫 +2 位作者 赵龙 张四喜 李连泰 《中国生化药物杂志》 CAS 2015年第10期11-14,共4页

目的探究Zn(PMFPCl)2对肝癌Hep G2细胞的抑制作用及其机制。方法 Hep G2细胞分组为对照组及实验组(10、30、70μmol/L)。MTT法检测Zn(PMFPCl)2对肝癌Hep G2细胞增殖的影响,流式细胞仪检测细胞凋亡及细胞周期,倒置显微镜下观察Zn(PMFPCl)... 目的探究Zn(PMFPCl)2对肝癌Hep G2细胞的抑制作用及其机制。方法 Hep G2细胞分组为对照组及实验组(10、30、70μmol/L)。MTT法检测Zn(PMFPCl)2对肝癌Hep G2细胞增殖的影响,流式细胞仪检测细胞凋亡及细胞周期,倒置显微镜下观察Zn(PMFPCl)2作用后肿瘤细胞的形态学变化,Western blot检测凋亡蛋白p53、p21、caspase-3、bax、bcl-2的表达情况。结果各实验组(10、30、70μmol/L)在24、48、72 h对细胞的抑制率均显著高于对照组(P<0.05)。当Zn(PMFPCl)2浓度70μmol/L,作用72 h时细胞的抑制率最高,达63.29%。各实验组在48 h时的细胞凋亡率显著高于对照组(P<0.05)。Zn(PMFPCl)2使细胞的生长停滞在G1期,阻碍细胞增殖。当Zn(PMFPCl)2作用细胞后贴壁细胞数量减少,细胞皱缩,细胞膜出现突起,细胞变圆、变亮。Western blot法检测p53、p21、caspase-3、bax随配合物浓度的增加而增加,而bcl-2随之减少(P<0.05)。结论 Zn(PMFPCl)2对肝癌Hep G2细胞具有抑制增殖及促进凋亡的作用,其机制与促进p53、p21、caspase-3、bax表达而降低bcl-2表达有关。 展开更多

关键词 Zn(PMFPCl)2 HEPG2细胞 增殖 细胞周期 凋亡相关蛋白

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黄芪对病毒性心肌炎小鼠热休克蛋白70及Bcl-2、Bax基因表达的影响 被引量：13

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作者 涂柳 向平 +1 位作者 李芳 易岂建 《临床心血管病杂志》 CAS CSCD 北大核心 2011年第2期105-109,共5页

目的:研究黄芪对病毒性心肌炎(VMC)小鼠热休克蛋白(HSP)70及凋亡相关基因蛋白产物表达的影响。方法:体外培养乳鼠心肌细胞,用Western Blot观察心肌细胞HSP70、Bcl-2及Bax变化;120只Balb/c小鼠随机分为正常对照组、病毒组以及黄芪干预组... 目的:研究黄芪对病毒性心肌炎(VMC)小鼠热休克蛋白(HSP)70及凋亡相关基因蛋白产物表达的影响。方法:体外培养乳鼠心肌细胞,用Western Blot观察心肌细胞HSP70、Bcl-2及Bax变化;120只Balb/c小鼠随机分为正常对照组、病毒组以及黄芪干预组,采用腹腔接种柯萨奇病毒制做VMC小鼠模型,免疫组化检测各组小鼠Bcl-2和Bax基因表达的情况,并用图像分析系统进行分析。结果:黄芪干预组心肌细胞HSP70及Bcl-2表达明显高于病毒组,2组Bax表达无差异;黄芪干预组心肌组织Bcl-2表达明显高于病毒组,2组Bax表达亦无差异。结论:黄芪可能通过上调心肌细胞Bcl-2、HSP70的表达来抑制病毒所致的心肌细胞凋亡。 展开更多

关键词 心肌炎 病毒性 黄芪 热休克蛋白70 凋亡相关蛋白 小鼠

原文传递

特异性环氧合酶-2抑制剂SC236诱导胃癌细胞株凋亡的实验研究 被引量：3

6

作者 高枫 符兆英 《现代肿瘤医学》 CAS 2009年第8期1423-1425,共3页

目的:探讨环氧合酶-2(COX-2)特异性抑制剂SC236诱导胃癌细胞株SGC7901凋亡的机制。方法:SC236对人胃癌来源的SGC7901细胞进行凋亡诱导。以吖啶橙染色后荧光显微镜下观察凋亡细胞形态并计算凋亡指数。Western blot法检测凋亡调节蛋白Bcl-... 目的:探讨环氧合酶-2(COX-2)特异性抑制剂SC236诱导胃癌细胞株SGC7901凋亡的机制。方法:SC236对人胃癌来源的SGC7901细胞进行凋亡诱导。以吖啶橙染色后荧光显微镜下观察凋亡细胞形态并计算凋亡指数。Western blot法检测凋亡调节蛋白Bcl-2、Bak、Bax与CED-9的表达情况。流式细胞仪检测细胞凋亡率。结果:SGC7901细胞经SC236作用后,细胞中凋亡促进因子Bak的表达水平明显增高、凋亡抑制因子Bcl-2的表达水平显著下降、而凋亡促进因子Bax和凋亡抑制因子CED-9表达水平无明显变化。细胞凋亡指数或凋亡率则随SC236浓度的增加和作用的时间延长而升高。结论:COX-2特异抑制剂SC236可通过上调凋亡促进因子Bak表达和下调凋亡抑制因子Bcl-2表达而诱导胃癌细胞株SGC7901的凋亡。 展开更多

关键词 环氧合酶-2 细胞凋亡 胃癌 COX-2抑制剂 凋亡调节蛋白

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中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白对大鼠肾脏缺血再灌注损伤肾小管上皮细胞的保护作用 被引量：3

7

作者 臧秀娟 宫丽 +4 位作者 洪海娟 姜燕 郑峰 刘梅 于青 《中华肾脏病杂志》 CAS CSCD 北大核心 2012年第10期804-807,共4页

目的探讨中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白（NGAL）对大鼠缺血再灌注损伤。肾脏肾小管上皮细胞凋亡的保护作用及机制。方法建立大鼠肾脏缺血再灌注模型，雄性SD大鼠随机分为对照组、缺血再灌注模型组、NGAL组；HE染色观察3组大鼠肾组... 目的探讨中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白（NGAL）对大鼠缺血再灌注损伤。肾脏肾小管上皮细胞凋亡的保护作用及机制。方法建立大鼠肾脏缺血再灌注模型，雄性SD大鼠随机分为对照组、缺血再灌注模型组、NGAL组；HE染色观察3组大鼠肾组织病理变化；TUNEL法检测肾小管上皮细胞凋亡；实时定量PCR、Western印迹法检测凋亡蛋白fas、bcl－2的表达变化。结果与缺血再灌注模型组比较，NGAL组肾小管上皮细胞凋亡数量显著减少[（8．6＋3．4）／HP比（20．8±3．7）／HP，P〈0．05]；NGAL组肾组织fasmRNA（2．34＋0．51比6．84±2．34，P〈0．05）、fas蛋白（0．65±0．05比0．95±0．08，P〈0．05）表达显著下调，bcl-2蛋白（0．33±0．05比0．24±0．03，P〈0．05）表达显著上调，但bcl－2mRNA表达无明显改变。结论NGAL对大鼠缺血再灌注损伤肾小管上皮细胞有保护作用，其作用可能与减少细胞凋亡、改变凋亡蛋白的表达有关。 展开更多

关键词 再灌注损伤 细胞凋亡 肾小管上皮细胞 凋亡蛋白 中性粒细胞 明胶酶相关脂质运载蛋白

原文传递

继发性甲状旁腺功能亢进患者血清对内皮细胞的影响及Klotho蛋白的保护作用 被引量：1

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作者 陈铖 俞香宝 +6 位作者 孙彬 曾鸣 赵秀芬 钱军 刘佳 邢昌赢 毛慧娟 《肾脏病与透析肾移植杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第6期504-512,共9页

目的：观察继发性甲状旁腺功能亢进（SHPT）患者血清对人脐静脉内皮细胞（HUVEC）增生、凋亡、一氧化氮（NO）合成的影响,并探讨Klotho蛋白的保护作用及机制. 方法：分别收集15例健康人、10例不伴SHPT的CKD 5期患者、15例SHPT拟手术治... 目的：观察继发性甲状旁腺功能亢进（SHPT）患者血清对人脐静脉内皮细胞（HUVEC）增生、凋亡、一氧化氮（NO）合成的影响,并探讨Klotho蛋白的保护作用及机制. 方法：分别收集15例健康人、10例不伴SHPT的CKD 5期患者、15例SHPT拟手术治疗的患者混合血清,体外培养HUVEC.以健康人血清为正常对照,观察SHPT患者血清、不伴SHPT的CKD5期患者血清处理细胞24h后对细胞增生的影响（CCK-8）,观察不同浓度、不同时间SHPT血清对HUVEC增生的影响.在10％ SHPT血清环境下,以不同浓度Klotho蛋白干预24h,检测HUVEC增生、凋亡（流式细胞术）、NO合成（硝酸盐还原法）.加/不加PD98059[细胞外调节蛋白激酶（ERK） 1/2抑制剂],检测总ERK（t-ERK）、磷酸化ERK（p-ERK）（Western印迹法检测）. 结果：不伴SHPT的CKD 5期患者血清和SHPT患者血清均可抑制细胞增生,且SHPT血清对于细胞增生的抑制作用较不伴SHPT的CKD5期患者血清显著（P＜0.05）.在一定浓度范围内（5％～20％）,随着SHPT血清浓度增加,细胞增生受抑制（P＜0.05）,呈现浓度依赖性.10％ SHPT血清处理细胞6h、12h、24h,随着处理时间延长,细胞增生受抑制（P＜0.05）,呈现时间依赖性.50～ 100 ng/ml Klotho蛋白干预可部分恢复10％ SHPT血清处理后HUVEC的增生活力（P＜0.05）、抑制其凋亡,并上调p-ERK表达,且可被PD98059阻断.SHPT血清作用下,HUVEC中NO合成减少（P＜0.05）,Klotho蛋白干预可促进NO合成（P＜0.05）. 结论：SHPT血清抑制HUVEC增生和NO合成.Klotho蛋白可部分拮抗SHPT血清对HUVEC增生的抑制作用,并促进NO合成,其促进HUVEC增生的机制可能与其抗凋亡作用及上调p-ERK有关. 展开更多

关键词 继发性甲状旁腺功能亢进 人脐静脉内皮细胞 KLOTHO蛋白 凋亡 外调节蛋白激酶 一氧化氮

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NS-398诱导尖锐湿疣患者外周血PBMC凋亡及对调控蛋白表达的影响

9

作者 徐超 栗玉珍 《中国麻风皮肤病杂志》 2010年第3期161-163,共3页

目的:评价环氧化酶2(COX-2)抑制剂NS-398对尖锐湿疣患者外周血单个核细胞(PBMC)凋亡及凋亡调控蛋白表达的影响。方法:采用流式细胞仪检测不同浓度NS-398作用CA患者PBMC24 h后细胞凋亡及凋亡调控蛋白的表达。结果:100-200μmol/L的NS-398... 目的:评价环氧化酶2(COX-2)抑制剂NS-398对尖锐湿疣患者外周血单个核细胞(PBMC)凋亡及凋亡调控蛋白表达的影响。方法:采用流式细胞仪检测不同浓度NS-398作用CA患者PBMC24 h后细胞凋亡及凋亡调控蛋白的表达。结果:100-200μmol/L的NS-398对PBMC具有明显诱导凋亡的作用,随NS-398浓度增加,凋亡调控蛋白Apo-1、Apo-2.7表达水平呈下降趋势,Bcl-2表达水平呈上升趋势。结论:NS-398可以通过抑制COX-2的途径促进PBMC凋亡,使PBMC的凋亡调控失衡得以恢复。 展开更多

关键词 PBMC 环氧化酶抑制剂 细胞凋亡 凋亡调控蛋白

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胆囊癌和胆囊炎组织中c-FLIP和P53的表达分析 被引量：1

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作者 何凯亮 杜立学 宋勇 《中华临床医师杂志（电子版）》 CAS 2011年第17期5003-5008,共6页

目的检测c-FLIP与P53在胆囊癌和胆囊炎组织中的表达,比较c-FLIP和P53各自在胆囊癌和胆囊炎组织中的表达差异,探讨它们是否与肿瘤的生物学行为相关,以及两者之间表达的相互关系。方法采用免疫组化法检测c-FLIP和P53在49例胆囊癌标本和30... 目的检测c-FLIP与P53在胆囊癌和胆囊炎组织中的表达,比较c-FLIP和P53各自在胆囊癌和胆囊炎组织中的表达差异,探讨它们是否与肿瘤的生物学行为相关,以及两者之间表达的相互关系。方法采用免疫组化法检测c-FLIP和P53在49例胆囊癌标本和30例慢性胆囊炎标本中的表达,并对结果进行统计学分析。结果胆囊癌组织中c-FLIP和P53表达(85.71%和65.31%)显著高于胆囊炎组织(26.67%和26.67%)。c-FLIP和P53在胆囊癌组织中的表达与患者性别、胆囊癌的分化程度、TNM分期及有无淋巴结转移之间无显著关联。c-FLIP和P53在胆囊癌组织中表达有明显差异(χ2=5.06,P<0.05),但无显著联系(χ2=1.82,P>0.05)。结论 c-FLIP和突变型P53的过表达与胆囊癌的发生关系密切,可能都属于早期事件。c-FLIP与突变型P53在胆囊癌发生过程中的作用机制、途径可能不同。 展开更多

关键词 CASP8和FADD样细胞凋亡调节蛋白质 肿瘤抑制蛋白质P53 胆囊肿瘤 胆囊炎

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cFLIP与黑素瘤研究进展

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作者 陆捷洁 杨井 +1 位作者 陶娟 涂亚庭 《国际皮肤性病学杂志》 2009年第5期327-329,共3页

cFLIP是近年来发现的一种凋亡抑制蛋白，通过抑制caspase-8的活化阻断死亡受体介导的凋亡信号。cFLIP还参与多种信号通路的传递。最近研究发现，cFLIPL还可以活化caspase-8。cFLIP的高表达与许多肿瘤相关，在黑素瘤组织及多种黑素瘤细... cFLIP是近年来发现的一种凋亡抑制蛋白，通过抑制caspase-8的活化阻断死亡受体介导的凋亡信号。cFLIP还参与多种信号通路的传递。最近研究发现，cFLIPL还可以活化caspase-8。cFLIP的高表达与许多肿瘤相关，在黑素瘤组织及多种黑素瘤细胞系中存在cFLIP的高表达，向黑素瘤细胞引入cFLIP小干扰RNA，通过化疗药物或者UVB联合TRAIL阻断cFLIP的功能，能促进黑素瘤细胞的凋亡。 展开更多

关键词 黑色素瘤 CASP8和FADD样细胞凋亡调节蛋白质 受体 TNF相关凋亡诱导配体

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