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筛选日本血吸虫童虫早期诊断抗原的研究
被引量：
6
1
作者
吴栋才
刘湘
+3 位作者
何立
蒋明森
杨孟祥
易新元
《中国血吸虫病防治杂志》
CAS
CSCD
2006年第2期83-87,共5页
目的筛选日本血吸虫童虫早期诊断抗原及其表位。方法制备日本血吸虫可溶性童虫抗原(SSA),经十二烷基磺酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)及Westernblot后分别与日本血吸虫感染后10、21、42天兔血清进行酶联免疫印迹试验(EITB),筛选出...
目的筛选日本血吸虫童虫早期诊断抗原及其表位。方法制备日本血吸虫可溶性童虫抗原(SSA),经十二烷基磺酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)及Westernblot后分别与日本血吸虫感染后10、21、42天兔血清进行酶联免疫印迹试验(EITB),筛选出能被早期感染血清所识别的抗原组分。用日本血吸虫感染后21天血清从噬菌体12随机肽库中筛选、富集、纯化、扩增与早期感染兔血清有高亲和力的噬菌体克隆,经动物实验初步评估其对日本血吸虫感染的早期诊断效果。结果SDS-PAGE显示SSA的总条带数多于可溶性成虫抗原(SAWA),但大多为共同抗原。EITB结果显示SSA共出现12条早期反应抗原带,其中97kDa和47kDa抗原分子只能被感染后10天兔血清特异性识别;SAWA仅出现7条反应带,未显示只能被感染后10天兔血清识别的期特异性抗原分子。挑选出3个与感染后21天兔血清具有高亲和力的单克隆噬菌体,混合后分别用于检测感染日本血吸虫10、21d鼠血清中IgG特异性抗体,阳性检出率分别为48.8%和64.4%。结论SSA中的97kDa和44kDa抗原分子及3个噬菌体随机12肽抗原模拟表位可能具有日本血吸虫感染早期诊断价值。
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关键词
日本血吸虫
早期诊断
可溶性成虫抗原
可溶性童虫抗原
表位
下载PDF
职称材料
基于可溶性童虫抗原(SSA)的IHA法早期诊断日本血吸虫病的初步研究
2
作者
孙成松
章乐生
+6 位作者
汪峰峰
王玥
尹晓梅
周莉
汪奇志
张世清
汪天平
《热带病与寄生虫学》
2015年第4期189-192,共4页
目的建立基于可溶性童虫抗原(SSA)早期诊断日本血吸虫病的IHA法。方法收集日本血吸虫感染后第13d童虫,制备SSA;探索SSA致敏红细胞的最佳体积比例以及灭活补体阴性兔血清的最佳封闭浓度,制备基于SSA的IHA法诊断试剂(以下简称"SSA-IH...
目的建立基于可溶性童虫抗原(SSA)早期诊断日本血吸虫病的IHA法。方法收集日本血吸虫感染后第13d童虫,制备SSA;探索SSA致敏红细胞的最佳体积比例以及灭活补体阴性兔血清的最佳封闭浓度,制备基于SSA的IHA法诊断试剂(以下简称"SSA-IHA法"),并检测日本血吸虫感染前及感染后第1、2、3、4、5、6周兔血清。结果 SSA致敏红细胞的最佳体积比例为1:1,灭活补体阴性兔血清的最佳封闭浓度(V/V)为3%。SSA-IHA法检测日本血吸虫感染前及感染后第1、2、3、4、5、6周兔血清的阳性率依次为0%、0%、0%、90.91%、100%、100%和100%。结论基于可溶性童虫抗原(SSA)的IHA法在早期诊断日本血吸虫病方面具有一定的价值。
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关键词
可溶性童虫抗原
间接红细胞凝集试验
早期诊断
日本血吸虫病
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职称材料
人自身抗原SSA/Ro60的基因克隆和原核表达
被引量：
4
3
作者
魏权
杨湘越
兰小鹏
《实用医技杂志》
2005年第12A期3393-3394,共2页
目的:克隆并表达人自身抗原SSA/Ro60。方法:应用RT-PCR技术,从HL-60细胞株中克隆人自身抗原SSA/Ro60全长基因,将PCR产物直接TA克隆、鉴定及测序,再定向克隆至pGEX-5T载体中,转入大肠杆菌BL-21,阳性克隆鉴定后在IPTG诱导下表达,产物行SDS...
目的:克隆并表达人自身抗原SSA/Ro60。方法:应用RT-PCR技术,从HL-60细胞株中克隆人自身抗原SSA/Ro60全长基因,将PCR产物直接TA克隆、鉴定及测序,再定向克隆至pGEX-5T载体中,转入大肠杆菌BL-21,阳性克隆鉴定后在IPTG诱导下表达,产物行SDS-PAGE和Western blot。结果:PCR产物约为1.6 kb,与预期1614 bp接近,测序结果与Genebank报道的完全一致。pGEX-5T-SSA/Ro60重组阳性克隆酶切鉴定正确,SDS-PAGE和Western blot结果显示融合蛋白分子量为86 KD,具有天然人自身抗原SSA/Ro60的免疫原性。结论:成功克隆表达人自身抗原SSA/Ro60,为下一步工作奠定了基础。
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关键词
自身抗原
ssa
/Ro60
基因克隆
融合表达
原核表达
下载PDF
职称材料
题名
筛选日本血吸虫童虫早期诊断抗原的研究
被引量：
6
1
作者
吴栋才
刘湘
何立
蒋明森
杨孟祥
易新元
机构
武汉大学医学院寄生虫学教研室
中南大学湘雅医学院寄生虫学教研室
出处
《中国血吸虫病防治杂志》
CAS
CSCD
2006年第2期83-87,共5页
基金
国家自然科学基金项目(30471509)
湖北省科技攻关项目(2003AA3003B04)
湖北省卫生厅科研基金重点项目(JX1A11)
文摘
目的筛选日本血吸虫童虫早期诊断抗原及其表位。方法制备日本血吸虫可溶性童虫抗原(SSA),经十二烷基磺酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)及Westernblot后分别与日本血吸虫感染后10、21、42天兔血清进行酶联免疫印迹试验(EITB),筛选出能被早期感染血清所识别的抗原组分。用日本血吸虫感染后21天血清从噬菌体12随机肽库中筛选、富集、纯化、扩增与早期感染兔血清有高亲和力的噬菌体克隆,经动物实验初步评估其对日本血吸虫感染的早期诊断效果。结果SDS-PAGE显示SSA的总条带数多于可溶性成虫抗原(SAWA),但大多为共同抗原。EITB结果显示SSA共出现12条早期反应抗原带,其中97kDa和47kDa抗原分子只能被感染后10天兔血清特异性识别;SAWA仅出现7条反应带,未显示只能被感染后10天兔血清识别的期特异性抗原分子。挑选出3个与感染后21天兔血清具有高亲和力的单克隆噬菌体,混合后分别用于检测感染日本血吸虫10、21d鼠血清中IgG特异性抗体,阳性检出率分别为48.8%和64.4%。结论SSA中的97kDa和44kDa抗原分子及3个噬菌体随机12肽抗原模拟表位可能具有日本血吸虫感染早期诊断价值。
关键词
日本血吸虫
早期诊断
可溶性成虫抗原
可溶性童虫抗原
表位
Keywords
Schistosoma
japonicum
Early
diagnosis
Soluble
adult
worm
antigen
（SAWA）
Soluble
schistosomulum
antigen
（
ssa
）
Epitope
分类号
R383.24 [医药卫生—医学寄生虫学]
下载PDF
职称材料
题名
基于可溶性童虫抗原(SSA)的IHA法早期诊断日本血吸虫病的初步研究
2
作者
孙成松
章乐生
汪峰峰
王玥
尹晓梅
周莉
汪奇志
张世清
汪天平
机构
安徽省血吸虫病防治研究所
出处
《热带病与寄生虫学》
2015年第4期189-192,共4页
基金
国家科技重大专项(2012ZX10004-220
2008ZX10004-011)
安徽省自然科学基金项目(1408085MH194)
文摘
目的建立基于可溶性童虫抗原(SSA)早期诊断日本血吸虫病的IHA法。方法收集日本血吸虫感染后第13d童虫,制备SSA;探索SSA致敏红细胞的最佳体积比例以及灭活补体阴性兔血清的最佳封闭浓度,制备基于SSA的IHA法诊断试剂(以下简称"SSA-IHA法"),并检测日本血吸虫感染前及感染后第1、2、3、4、5、6周兔血清。结果 SSA致敏红细胞的最佳体积比例为1:1,灭活补体阴性兔血清的最佳封闭浓度(V/V)为3%。SSA-IHA法检测日本血吸虫感染前及感染后第1、2、3、4、5、6周兔血清的阳性率依次为0%、0%、0%、90.91%、100%、100%和100%。结论基于可溶性童虫抗原(SSA)的IHA法在早期诊断日本血吸虫病方面具有一定的价值。
关键词
可溶性童虫抗原
间接红细胞凝集试验
早期诊断
日本血吸虫病
Keywords
Soluble
schistosomula
antigen
（
ssa
）；
Indirect
hemagglutination
a
ssa
y
（IHA）；
Early
diag-nosis；
Schistosomiasis
japonicum
分类号
R532.21 [医药卫生—内科学]
下载PDF
职称材料
题名
人自身抗原SSA/Ro60的基因克隆和原核表达
被引量：
4
3
作者
魏权
杨湘越
兰小鹏
机构
龙岩人民医院
南京军区福州总医院
出处
《实用医技杂志》
2005年第12A期3393-3394,共2页
基金
福建省青年人才科技创新基金资助项目(项目编号:2002J060)
文摘
目的:克隆并表达人自身抗原SSA/Ro60。方法:应用RT-PCR技术,从HL-60细胞株中克隆人自身抗原SSA/Ro60全长基因,将PCR产物直接TA克隆、鉴定及测序,再定向克隆至pGEX-5T载体中,转入大肠杆菌BL-21,阳性克隆鉴定后在IPTG诱导下表达,产物行SDS-PAGE和Western blot。结果:PCR产物约为1.6 kb,与预期1614 bp接近,测序结果与Genebank报道的完全一致。pGEX-5T-SSA/Ro60重组阳性克隆酶切鉴定正确,SDS-PAGE和Western blot结果显示融合蛋白分子量为86 KD,具有天然人自身抗原SSA/Ro60的免疫原性。结论:成功克隆表达人自身抗原SSA/Ro60,为下一步工作奠定了基础。
关键词
自身抗原
ssa
/Ro60
基因克隆
融合表达
原核表达
Keywords
Human
autoimmune
antigen
ssa
/Ro60,Gene
clone
,Fusion
expression
分类号
R392.1 [医药卫生—免疫学]
下载PDF
职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
筛选日本血吸虫童虫早期诊断抗原的研究
吴栋才
刘湘
何立
蒋明森
杨孟祥
易新元
《中国血吸虫病防治杂志》
CAS
CSCD
2006
6
下载PDF
职称材料
2
基于可溶性童虫抗原(SSA)的IHA法早期诊断日本血吸虫病的初步研究
孙成松
章乐生
汪峰峰
王玥
尹晓梅
周莉
汪奇志
张世清
汪天平
《热带病与寄生虫学》
2015
0
下载PDF
职称材料
3
人自身抗原SSA/Ro60的基因克隆和原核表达
魏权
杨湘越
兰小鹏
《实用医技杂志》
2005
4
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职称材料
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