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基于磁固相萃取和液相色谱-质谱联用技术的日本医蛭抗凝活性成分研究
被引量:
3
1
作者
黄小清
汪波
+1 位作者
肖凌
聂晶
《医药导报》
CAS
北大核心
2021年第5期651-657,共7页
目的使用磁固相萃取、转录组文库及液相色谱-质谱联用(LC-MS/MS)鉴定技术,筛选和鉴定日本医蛭中的抗凝活性成分。方法采用通用合成方法制备凝血酶固定化磁纳米粒,日本医蛭粗提液经磁固相萃取后,洗脱溶液使用高效液相串联三重四级杆飞行...
目的使用磁固相萃取、转录组文库及液相色谱-质谱联用(LC-MS/MS)鉴定技术,筛选和鉴定日本医蛭中的抗凝活性成分。方法采用通用合成方法制备凝血酶固定化磁纳米粒,日本医蛭粗提液经磁固相萃取后,洗脱溶液使用高效液相串联三重四级杆飞行时间质谱联用(TripleTOF LC-MS/MS)技术并结合日本医蛭唾液腺转录组文库,进行抗凝多肽的筛选。结果经傅立叶变换红外分光光度计及透射电镜表征,凝血酶成功固定于磁珠上,凝血酶磁珠的酶活性稳定性良好(37℃,19 d,RSD为4.74%);洗脱液经扫描比对含有5种水蛭素变体,均为凝血酶抑制剂,洗脱液冻干粉抗凝活性为70 U·g^(-1)。结论将磁固相萃取、转录组文库以及LC-MS/MS技术相结合成功开发了一种能快速筛选和鉴定日本医蛭中抗凝多肽分子的方法,该方法方便易行,可为动物药活性成分发掘提供参考。
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关键词
日本医蛭
抗凝活性成分
磁固相萃取
液相色谱-质谱联用
凝血酶固定化磁珠
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职称材料
题名
基于磁固相萃取和液相色谱-质谱联用技术的日本医蛭抗凝活性成分研究
被引量:
3
1
作者
黄小清
汪波
肖凌
聂晶
机构
武汉大学药学院组合生物合成与新药发现教育部重点实验室
湖北省药品监督检验研究院国家药品监督管理局中药质量控制重点实验室
出处
《医药导报》
CAS
北大核心
2021年第5期651-657,共7页
基金
湖北省科技计划项目(2016CFB404)。
文摘
目的使用磁固相萃取、转录组文库及液相色谱-质谱联用(LC-MS/MS)鉴定技术,筛选和鉴定日本医蛭中的抗凝活性成分。方法采用通用合成方法制备凝血酶固定化磁纳米粒,日本医蛭粗提液经磁固相萃取后,洗脱溶液使用高效液相串联三重四级杆飞行时间质谱联用(TripleTOF LC-MS/MS)技术并结合日本医蛭唾液腺转录组文库,进行抗凝多肽的筛选。结果经傅立叶变换红外分光光度计及透射电镜表征,凝血酶成功固定于磁珠上,凝血酶磁珠的酶活性稳定性良好(37℃,19 d,RSD为4.74%);洗脱液经扫描比对含有5种水蛭素变体,均为凝血酶抑制剂,洗脱液冻干粉抗凝活性为70 U·g^(-1)。结论将磁固相萃取、转录组文库以及LC-MS/MS技术相结合成功开发了一种能快速筛选和鉴定日本医蛭中抗凝多肽分子的方法,该方法方便易行,可为动物药活性成分发掘提供参考。
关键词
日本医蛭
抗凝活性成分
磁固相萃取
液相色谱-质谱联用
凝血酶固定化磁珠
Keywords
Hirudo
nipponica
anticoagulant
biomolecules
Magnetic
solid-phase
extraction
Liquid
chromatography-tandem
mass
spectrometry
Thrombin-immobilized
magnetic
nanobeads
分类号
R917 [医药卫生—药物分析学]
R973.2 [医药卫生—药学]
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题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
基于磁固相萃取和液相色谱-质谱联用技术的日本医蛭抗凝活性成分研究
黄小清
汪波
肖凌
聂晶
《医药导报》
CAS
北大核心
2021
3
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