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我国雷氏按蚊和嗜人按蚊的分子鉴别和分类地位的探讨 被引量:42
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作者 马雅军 瞿逢伊 +1 位作者 曹毓存 杨宝金 《中国寄生虫学与寄生虫病杂志》 CAS CSCD 北大核心 2000年第6期325-329,共5页
[目的 ]论证我国雷氏按蚊与嗜人按蚊的分类地位。 [方法 ]采用分子鉴别法 (鉴别PCR和rDNA ITS2序列 )检测辽宁及山东两省现场按蚊标本 ,并依据ITS2区序列建立分子系统树。 [结果 ]分子鉴别显示 ,辽宁和山东两省均存在雷氏按蚊和嗜人按... [目的 ]论证我国雷氏按蚊与嗜人按蚊的分类地位。 [方法 ]采用分子鉴别法 (鉴别PCR和rDNA ITS2序列 )检测辽宁及山东两省现场按蚊标本 ,并依据ITS2区序列建立分子系统树。 [结果 ]分子鉴别显示 ,辽宁和山东两省均存在雷氏按蚊和嗜人按蚊。我国雷氏按蚊 (辽宁和山东省 ,n =6 )和嗜人按蚊 (辽宁、云南、河南和四川省 ,n =10 )ITS2序列长度和GC含量分别为 45 1bp、 46 2 % ,44 8bp、 46 0 % ;各地雷氏按蚊和嗜人按蚊序列均无差异 ,但各地嗜人按蚊与对照组江苏的嗜人按蚊相比 ,种内序列差异为 0 88% ;雷氏按蚊与嗜人按蚊种间序列差异为 2 5 7%。分子系统树显示雷氏按蚊与中华按蚊、嗜人按蚊与凉山按蚊亲缘关系较近。 [结论 ]根据分子鉴别 ,确认我国雷氏按蚊与嗜人按蚊为同域分布的 展开更多
关键词 雷氏按蚊 嗜人按蚊 分子鉴别 分类地位 中国
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PCR-RFLP技术用于鉴别赫坎按蚊复合体近缘种按蚊的研究 被引量:14
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作者 周华云 高琪 +3 位作者 顾政诚 朱国鼎 李菊林 曹俊 《中国血吸虫病防治杂志》 CAS CSCD 2004年第5期367-370,共4页
目的 区别赫坎按蚊种团内近缘种。方法 应用聚合酶链式反应连接的限制性片段长度多态性方法 (PCR- RFL P)技术 ,对辽宁省现场捕获的按蚊用特异性 ITS2 引物进行 PCR扩增 ,限制性内切酶 Rsa 和 Hinf 消化 ,琼脂糖凝胶电泳分析。结果 ... 目的 区别赫坎按蚊种团内近缘种。方法 应用聚合酶链式反应连接的限制性片段长度多态性方法 (PCR- RFL P)技术 ,对辽宁省现场捕获的按蚊用特异性 ITS2 引物进行 PCR扩增 ,限制性内切酶 Rsa 和 Hinf 消化 ,琼脂糖凝胶电泳分析。结果 中华按蚊的 PCR扩增产物能被限制性内切酶 Rsa 酶切成 35 0 bp和 2 0 0 bp两条酶切 DNA条带 ;嗜人按蚊核糖体 DNA (r DNA)的 PCR扩增产物能被限制性内切酶 Hinf 酶切成 4 10 bp的酶切 DNA条带 ;雷氏按蚊的 ITS2 基因 PCR扩增产物能分别被限制性内切酶 Rsa 和 Hinf 酶切 ,分别显示 35 0 bp和 4 0 0 bp的酶切 DNA条带 ;八代按蚊的 PCR扩增产物没有显示明显的限制性内切酶 Rsa 或 Hinf 酶切条带。结论 依据r DNA的 ITS2 区段基因特征建立的 PCR- RFL P技术可用于鉴别赫坎按蚊种团的中华按蚊、嗜人按蚊、雷氏按蚊和八代按蚊 展开更多
关键词 嗜人按蚊 中华按蚊 八代按蚊 雷氏按蚊 ITS2 PCR 核糖体DNA
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基于mtDNA-COI基因序列的雷氏按蚊分子群体遗传结构研究 被引量:13
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作者 杨曼尼 马雅军 《昆虫学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第9期1000-1007,共8页
【目的】探讨我国雷氏按蚊Anopheles lesteri的群体差异和分化程度。【方法】采用PCR方法,从分子水平鉴别了采自我国和韩国的雷氏按蚊共9个群体139个样本,扩增其线粒体DNA细胞色素氧化酶亚基Ⅰ基因,并进行序列测定和分析。【结果】本研... 【目的】探讨我国雷氏按蚊Anopheles lesteri的群体差异和分化程度。【方法】采用PCR方法,从分子水平鉴别了采自我国和韩国的雷氏按蚊共9个群体139个样本,扩增其线粒体DNA细胞色素氧化酶亚基Ⅰ基因,并进行序列测定和分析。【结果】本研究共获得49个单倍型,各单倍型呈高水平的平行演化,来自云南群体的单倍型显示是扩张的源头。分子变异等级分析(AMOVA)的计算结果显示,群体内变异占总变异的比例(64.95%)大于群体间(35.05%),FST值为0.3504,各群体间出现遗传分化。Mantel检验结果显示基因流水平与地理距离呈负相关关系(R2=0.1322),群体遗传结构符合距离隔离模型。【结论】雷氏按蚊韩国和辽宁群体与其他分布地群体间差异大,已出现明显分化,我国其他分布地群体间的遗传差异小。 展开更多
关键词 雷氏按蚊 群体遗传结构 线粒体DNA 单倍型 中国
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我国嗜人按蚊订正为雷氏按蚊的学术探讨 被引量:10
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作者 瞿逢伊 《中国寄生虫学与寄生虫病杂志》 CAS CSCD 北大核心 2008年第3期234-235,共2页
本文对我国重要传疟媒介嗜人按蚊和雷氏按蚊的分类地位和学名使用作了历史性回顾和探讨。根据当前我国文献记载,已具有充足的形态学和分子生物学论据,表明嗜人按蚊为雷氏按蚊的同物异名,订正并恢复使用雷氏按蚊学名已刻不容缓。
关键词 嗜人按蚊 雷氏按蚊 订正
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应用形态、染色体和分子特征研究我国雷氏按蚊的分类鉴别(双翅目:蚊科) 被引量:8
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作者 马雅军 杨频 +2 位作者 徐建农 陈哲 潘波 《Entomotaxonomia》 CSCD 北大核心 2005年第3期199-208,共10页
为确定可靠的雷氏按蚊Anopheleslesteri Baisaset Hu,1936分类鉴别特征,对采自不同地区的雷氏按蚊进行了形态、染色体和分子特征的观察和分析。检视了辽宁、广东现场标本,江苏实验室品系的成蚊、虫卵特征,描述了染色体核型,并测定了采... 为确定可靠的雷氏按蚊Anopheleslesteri Baisaset Hu,1936分类鉴别特征,对采自不同地区的雷氏按蚊进行了形态、染色体和分子特征的观察和分析。检视了辽宁、广东现场标本,江苏实验室品系的成蚊、虫卵特征,描述了染色体核型,并测定了采自广东、辽宁、河南和云南4省的现场标本,以及江苏、海南和广西实验室品系的核糖体DNA间隔2区(ITS2)和D3序列。结果显示成蚊、虫卵形态变异较大,不具备稳定、明确的鉴别特征;染色体核型具有多态现象,性染色体X、Y分别有3个和2个类型,可分为染色体型A与B;唯有ITS2分子序列具有客观、稳定的种间差异,系雷氏按蚊可靠、可行的鉴别特征。 展开更多
关键词 双翅目 雷氏按蚊 形态 染色体核型 核糖DNA
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福建省雷氏按蚊历史分布区疟疾媒介种类调查 被引量:8
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作者 陈朱云 谢汉国 +2 位作者 肖丽贞 欧阳榕 张山鹰 《中国媒介生物学及控制杂志》 CAS 2019年第3期348-349,353,共3页
目的了解福建省雷氏按蚊历史分布区传播疟疾媒介种类情况,为巩固当地消除疟疾成果制定媒介防治措施提供依据。方法 2011-2017年每年5-10月蚊媒活动季节,采用诱捕法和全搜捕法在福建省雷氏按蚊历史分布区闽西北的南平和三明市开展疟疾媒... 目的了解福建省雷氏按蚊历史分布区传播疟疾媒介种类情况,为巩固当地消除疟疾成果制定媒介防治措施提供依据。方法 2011-2017年每年5-10月蚊媒活动季节,采用诱捕法和全搜捕法在福建省雷氏按蚊历史分布区闽西北的南平和三明市开展疟疾媒介种类调查,2014-2017年每年6-10月,在南平市疟疾媒介监测点采用夜间通宵室外人帐诱捕法开展媒介按蚊种群密度监测。结果 2011-2017年在南平和三明市共调查10个县、68个调查点,仅捕获3 006只中华按蚊,未发现雷氏按蚊。2014-2017年南平市监测点中华按蚊平均叮人率为4.33只/(人·夜)。结论福建省雷氏按蚊闽西北历史分布区目前疟疾媒介有中华按蚊,其叮人率仍然较高,提示当地卫生部门仍需进一步加强疟疾媒介监测工作。 展开更多
关键词 雷氏按蚊 中华按蚊 疟疾媒介种类 闽西北
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雷氏按蚊多态微卫星DNA位点的筛选和特征 被引量:6
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作者 马雅军 樊勇 吴静 《寄生虫与医学昆虫学报》 CAS 2008年第3期150-153,共4页
本研究对雷氏按蚊的微卫星DNA序列进行了分离,并筛选了其中具有多态性的微卫星位点。应用雷氏按蚊基因组DNA的酶切片段与生物素标记的寡核苷酸探针杂交,亲合素富集和超滤离心浓缩目的片段,扩增放大后克隆并测序,获得雷氏按蚊微卫星... 本研究对雷氏按蚊的微卫星DNA序列进行了分离,并筛选了其中具有多态性的微卫星位点。应用雷氏按蚊基因组DNA的酶切片段与生物素标记的寡核苷酸探针杂交,亲合素富集和超滤离心浓缩目的片段,扩增放大后克隆并测序,获得雷氏按蚊微卫星DNA序列。在其中挑选合适的微卫星位点,建立扩增体系。应用雷氏按蚊现场样本对不同的微卫星DNA进行扩增,聚丙烯酰胺凝胶电泳筛选具有多态性的位点。本研究结果获得了雷氏按蚊微卫星DNA序列58条,GenBank注册登记号为EF620299~EF620356。其中,完整序列41条,占70.7%;非完整序列7条,占12.1%,复合序列9条,占15.7%;仅1条为非典型序列。电泳结果显示其中14个微卫星位点中有11个具有多态性。 展开更多
关键词 雷氏按蚊 微卫星DNA 多态性
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中华按蚊和雷氏按蚊实时荧光定量PCR鉴定方法的建立与应用
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作者 舒黄芳 王可艺 +6 位作者 吴德 林荣幸 卢文成 阮彩文 邓卓晖 张萌 宋铁 《应用昆虫学报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第1期304-312,共9页
【目的】建立中华按蚊Anopheles sinensis与雷氏按蚊Anopheles lesteri实时荧光定量PCR(qPCR)检测技术,为2种传疟按蚊的准确鉴定提供分子鉴定方法。【方法】建立2种按蚊的样本库,利用形态学方法和基因测序对蚊虫样本进行鉴定;合成并克... 【目的】建立中华按蚊Anopheles sinensis与雷氏按蚊Anopheles lesteri实时荧光定量PCR(qPCR)检测技术,为2种传疟按蚊的准确鉴定提供分子鉴定方法。【方法】建立2种按蚊的样本库,利用形态学方法和基因测序对蚊虫样本进行鉴定;合成并克隆阳性质粒质控品。从NCBI数据库上下载中华按蚊和雷氏按蚊的rDNA-ITS2序列,利用Prime3软件在线设计2种按蚊的引物和探针,并验证该PCR方法的最低检测限、敏感性、特异性和可重复性。【结果】收集并鉴定4种383头蚊虫,其中中华按蚊159头、雷氏按蚊104头、致倦库蚊Culex pipiens quinquefasciatus 60头和白纹伊蚊Aedes albopictus 60头。中华按蚊和雷氏按蚊的qPCR的最低检测限均为31.50拷贝/反应,标准曲线线性关系相关系数(R^(2))均为0.99。敏感性和特异性均为100%,重复性试验结果显示,中华按蚊和雷氏按蚊的组内和组间变异系数均小于2%。【结论】本方法所建立的TaqMan探针qPCR方法灵敏度高,特异性高,可用于中华按蚊和雷氏按蚊的分子鉴别。 展开更多
关键词 中华按蚊 雷氏按蚊 TAQMAN探针 实时荧光定量PCR
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湖北省雷氏按蚊历史分布区传疟媒介种群调查 被引量:2
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作者 万伦 张华勋 +5 位作者 夏菁 吴冬妮 张娟 曹慕民 朱红 张聪 《热带医学杂志》 CAS 2022年第9期1270-1274,共5页
目的了解湖北省雷氏按蚊历史分布区传疟媒介种群情况,为制定媒介防治措施提供依据。方法湖北省雷氏按蚊历史分布区各选取3个乡镇各1个自然村为调查点,于2016-2018年每年7-9月,每村于室内(人房或牲畜棚)、室外(靠近水稻田)各选取2个调查... 目的了解湖北省雷氏按蚊历史分布区传疟媒介种群情况,为制定媒介防治措施提供依据。方法湖北省雷氏按蚊历史分布区各选取3个乡镇各1个自然村为调查点,于2016-2018年每年7-9月,每村于室内(人房或牲畜棚)、室外(靠近水稻田)各选取2个调查场所开展1次种群调查,采用灯诱法(19:00至次日07:00)和人工捕蚊法(清晨室内)捕蚊,连续调查3 d。分析雷氏按蚊历史分布区灯诱法和人工捕蚊法捕获按蚊密度差异,人房、牲畜棚和室外等不同捕蚊场所捕获按蚊密度差异。结果2016-2018年,湖北省雷氏按蚊历史分布区灯诱法共捕获按蚊54903只,均为中华按蚊,未发现雷氏按蚊及其他按蚊;三年灯诱按蚊平均密度差异无统计学意义(F=0.158,P>0.05);不同地区三年灯诱平均密度差异有统计学意义(F=4.151,P<0.05),汉川市按蚊密度[169.85只/(灯·夜)]显著高于其他地区。2016-2018年各年度人房、牲畜棚和室外等不同捕蚊场所按蚊密度差异均有统计学意义(F=4.673,P<0.05;F=3.748,P<0.05;F=4.774,P<0.05),牲畜棚捕获的按蚊密度各年均最高。2016-2018年,湖北省雷氏按蚊历史分布区人工捕蚊法共捕获按蚊1318只,均为中华按蚊,未发现雷氏按蚊及其他按蚊;三年人工捕蚊法按蚊平均密度差异无统计学意义(F=1.902,P>0.05);不同地区三年人工捕蚊法平均密度差异无统计学意义(F=1.694,P>0.05)。结论湖北省传疟媒介中华按蚊广泛存在,有潜在的疟疾传播风险,应继续开展持续、规范的监测工作,防止输入性疟疾的本地传播。 展开更多
关键词 疟疾 雷氏按蚊 中华按蚊
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基于多态微卫星DNA的中国雷氏按蚊群体遗传结构研究 被引量:1
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作者 周秋明 林琳 +5 位作者 董昊炜 袁浩 白洁 李翔宇 彭恒 马雅军 《中国媒介生物学及控制杂志》 CAS 北大核心 2021年第5期526-532,共7页
目的应用微卫星DNA检测中国雷氏按蚊群体的遗传差异和结构,探讨群体遗传分化的影响因素。方法用吸蚊管人工吸取成蚊,依据形态与核糖体DNA第2内转录间隔区分子特征鉴定雷氏按蚊,对9个微卫星位点进行基因扫描,基于微卫星DNA的片段长度多态... 目的应用微卫星DNA检测中国雷氏按蚊群体的遗传差异和结构,探讨群体遗传分化的影响因素。方法用吸蚊管人工吸取成蚊,依据形态与核糖体DNA第2内转录间隔区分子特征鉴定雷氏按蚊,对9个微卫星位点进行基因扫描,基于微卫星DNA的片段长度多态性,计算群体内和群体间的遗传差异,Structure软件推论分支数,并计算有效群体规模。结果在17个采集地获取雷氏按蚊216只,合并为9个群体进行分析。雷氏按蚊群体平均等位基因数范围为3.22~7.44,平均期望杂合度和观察杂合度范围分别为0.48~0.71和0.33~0.47;群体间固定指数范围为-0.01~0.25,平均为0.13;群体内的遗传变异(86.55%)远大于群体间(13.45%),群体间的遗传变异水平与地理距离呈正相关。Structure结果显示雷氏按蚊群体可划分成2支,第Ⅰ支包括辽宁和广东群体,第Ⅱ支包括我国的海南、湖北、河南、云南、四川群体和韩国群体。结论我国雷氏按蚊群体的遗传变异主要存在于群体个体间,其变异水平中等,群体遗传结构符合地理隔离模型。研究结果提示雷氏按蚊属于2个基因库,云南群体为原始基因库,向东、北方向扩散的过程中,逐渐出现另一基因库的个体。 展开更多
关键词 雷氏按蚊 微卫星DNA 群体遗传 群体结构
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