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过氧化氢酶的研究进展 被引量:58
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作者 于德玲 王昌留 《中国组织化学与细胞化学杂志》 CAS CSCD 2016年第2期189-194,共6页
过氧化氢酶是一类广泛存在于动物、植物和微生物体内的末端氧化酶,是生物体内抗氧化酶体系的重要成员。本文对过氧化氢酶的种类、结构特点以及在动植物和微生物中的生理功能进行了综述,并分析了该酶的基因序列研究现状以及对该酶研究的... 过氧化氢酶是一类广泛存在于动物、植物和微生物体内的末端氧化酶,是生物体内抗氧化酶体系的重要成员。本文对过氧化氢酶的种类、结构特点以及在动植物和微生物中的生理功能进行了综述,并分析了该酶的基因序列研究现状以及对该酶研究的展望。 展开更多
关键词 过氧化氢酶 结构 功能 序列分析 基因表达
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籽粒苋苹果酸酶(NAD-ME)基因密码子偏好性分析 被引量:55
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作者 李平 白云凤 +2 位作者 冯瑞云 王原媛 张维锋 《应用与环境生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第1期12-17,共6页
遗传密码子是生命信息的基本遗传单位,每种氨基酸对应1~6个同义密码子.特定物种在长期进化中形成了适应自身基因组环境的密码子使用偏性.运用CHIPS、CUSP和CodonW程序分析自主克隆的籽粒苋NAD-ME基因的密码子偏好性,并与马铃薯等7种植... 遗传密码子是生命信息的基本遗传单位,每种氨基酸对应1~6个同义密码子.特定物种在长期进化中形成了适应自身基因组环境的密码子使用偏性.运用CHIPS、CUSP和CodonW程序分析自主克隆的籽粒苋NAD-ME基因的密码子偏好性,并与马铃薯等7种植物的ME基因密码子偏好性进行比较,以期为该基因在作物遗传改良中选择合适的受体植物提供依据.结果表明,籽粒苋NAD-ME基因偏好于以A或T结尾的密码子,其它几种被比较作物的ME基因也有同样的趋势,但双子叶植物的偏好性更强.基于NAD-ME基因的密码子使用偏性的系统聚类分析表明,籽粒苋与马铃薯、拟南芥、葡萄、蓖麻、毛果杨等双子叶植物聚为1类,玉米和高粱这2个单子叶植物聚为1类,预示籽粒苋NAD-ME基因更适合导入马铃薯等双子叶植物.对籽粒苋NAD-ME基因的密码子偏好性与大肠杆菌和酵母的基因组密码子偏好性进行比较,发现均存在差异,与大肠杆菌的差异高于酵母,表明酵母表达系统要优于大肠杆菌表达系统.若要进一步提高籽粒苋NAD-ME基因在大肠杆菌或酵母中的表达水平,尚需对其密码子进行优化. 展开更多
关键词 籽粒苋 苹果酸酶基因 密码子偏好性 聚类分析 基因表达
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植物体细胞胚胎发生机理的研究进展 被引量:33
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作者 陈金慧 施季森 +1 位作者 诸葛强 黄敏仁 《南京林业大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2003年第1期75-80,共6页
介绍了植物体细胞胚胎发生技术的产生历史及国内外的研究进展;从细胞学、生物化学和分子生物学等方面综述了体细胞胚胎发生机理的研究现状;分析了体胚再生植株的遗传稳定性以及体胚系统作为遗传转化系统的重要应用价值和最新研究成果;... 介绍了植物体细胞胚胎发生技术的产生历史及国内外的研究进展;从细胞学、生物化学和分子生物学等方面综述了体细胞胚胎发生机理的研究现状;分析了体胚再生植株的遗传稳定性以及体胚系统作为遗传转化系统的重要应用价值和最新研究成果;同时对植物体胚发生研究中试验设计的重要性作了述评。 展开更多
关键词 植物 发生机理 体细胞胚胎 生化分析 基因表达 遗传变异
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番茄LBD基因家族的全基因组序列鉴定及其进化和表达分析 被引量:36
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作者 王小非 刘鑫 +4 位作者 苏玲 孙永江 张世忠 郝玉金 由春香 《中国农业科学》 CAS CSCD 北大核心 2013年第12期2501-2513,共13页
【目的】从番茄全基因组中鉴定LBD基因,并进行基因进化、基因结构、染色体定位以及组织表达和诱导表达分析,为番茄LBD基因的功能研究与利用奠定基础。【方法】利用番茄基因组数据库,通过生物信息学手段,鉴定番茄LBD家族成员;采用MEGA5... 【目的】从番茄全基因组中鉴定LBD基因,并进行基因进化、基因结构、染色体定位以及组织表达和诱导表达分析,为番茄LBD基因的功能研究与利用奠定基础。【方法】利用番茄基因组数据库,通过生物信息学手段,鉴定番茄LBD家族成员;采用MEGA5软件进行系统进化树分析;通过perl程序、MapDRAW及GSDS工具进行基因结构及染色体定位分析;利用已有的番茄芯片数据进行组织表达谱和基因表达响应分析。【结果】系统分析鉴定了46个番茄LBD家族基因,根据基因结构及系统进化分析将其分成class I与class II两类,细分为5个亚家族(Ia、Ib、Ic、Id与II)。基因定位表明,12条染色体中的10条均有LBD基因,该基因家族的分布具有广泛性。各个发育阶段表达谱的分析结果表明,LBD家族基因具有不同的组织表达模式,在各个发育时期均有LBD基因的表达。基因响应分析发现,不同LBD基因响应不同的外界信号。【结论】通过全基因组分析,番茄LBD家族基因包括46个成员,在进化上分为两大类,5个亚家族,分布于10条染色体上,组织表达模式及基因响应具有多样性。这些信息为番茄LBD基因家族的功能分析奠定了基础。 展开更多
关键词 番茄 LBD基因家族 系统进化 基因表达
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粳稻叶绿体基因组的密码子用法 被引量:32
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作者 刘庆坡 薛庆中 《作物学报》 CAS CSCD 北大核心 2004年第12期1220-1224,共5页
基因组密码子使用受多种因素的影响 ,本试验通过对应分析探讨了若干重要因子对粳稻品种“日本晴”叶绿体全基因组序列密码子用法的效应。结果指出 ,在影响最大的第一条向量轴上 ,基因的位置坐标与该基因的表达水平(CAI)和GC3s极显著相关... 基因组密码子使用受多种因素的影响 ,本试验通过对应分析探讨了若干重要因子对粳稻品种“日本晴”叶绿体全基因组序列密码子用法的效应。结果指出 ,在影响最大的第一条向量轴上 ,基因的位置坐标与该基因的表达水平(CAI)和GC3s极显著相关 (r =0 785 和 - 0 80 4 ) ,而CAI与GC3s高度负相关 (r =- 0 917 ) ;说明基因表达水平的高低是影响密码子使用的主要因素 ,并且高表达的基因强烈偏好使用以T或A结尾的密码子。基因编码区碱基组成的影响力远不及基因的表达水平 ,G +C含量与ENC、CAI以及第一条向量轴上基因位置坐标的相关系数分别为0 344 、- 0 4 2 2 和 - 0 4 2 1 ;相关性测验和方差分析均表明基因长度对密码子的使用影响不大 ,估计与那些编码未知功能的ORFs的存在有关 ;复制转录对密码子的使用没有明显的选择。将高表达优越密码子分析法和高频密码子分析法相结合 ,确定了TGT和GAA等 12个密码子为叶绿体基因组的主要偏爱密码子。 展开更多
关键词 水稻 叶绿体基因组 密码子使用 对应分析 基因表达水平 G+C含量
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Genome-wide Analysis of Plant-specific Dof Transcription Factor Family in Tomato 被引量:29
6
作者 Xiaofeng Cai Yuyang Zhang +7 位作者 Chanjuan Zhang Tingyan Zhang Tixu Hu Jie Ye Junhong Zhang Taotao Wang Hanxia Li Zhibiao Ye 《Journal of Integrative Plant Biology》 SCIE CAS CSCD 2013年第6期552-566,共15页
The Dof (DNA binding with One Finger) family encoding single zinc finger proteins has been known as a family of plant-specific transcription factors. These transcription factors are involved in a variety of function... The Dof (DNA binding with One Finger) family encoding single zinc finger proteins has been known as a family of plant-specific transcription factors. These transcription factors are involved in a variety of functions of importance for different biological processes in plants. In the current study, we identified 34 Dof family genes in tomato (Solanum lycopersicum L.), distributed on 11 chromosomes. A complete overview of SlDof genes in tomato is presented, including the gene structures, chromosome locations, phylogeny, protein motifs and evolution pattern. Phylogenetic analysis of 34 SlDof proteins resulted in four classes constituting six clusters. In addition, a comparative analysis between these genes in tomato, Arabidopsis (Arabidopsis thaliana L.) and rice (Oryza sativa L.) was also performed. The tomato Dof family expansion has been dated to recent duplication events, and segmental duplication is predominant for the SlDof genes. Furthermore, the SlDof genes displayed differential expression either in their transcript abundance or in their expression patterns under normal growth conditions. This is the first step towards genome-wide analyses of the Dof genes in tomato. Our study provides a very useful reference for cloning and functional analysis of the members of this gene family in tomato and other species. 展开更多
关键词 DOF TOMATO DUPLICATION gene expression MOTIF phylogenetic analysis.
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茶树芽叶紫化的生理生化分析及其关键酶基因的表达 被引量:29
7
作者 周琼琼 孙威江 《生物技术通报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第1期86-91,共6页
从生理生化和分子水平方面比较了茶树紫化芽叶与成熟绿色叶片的差异。结果表明,紫色幼嫩新梢中茶多酚、儿茶素总量、咖啡碱含量高于成熟绿色叶片,差异达到极显著。光合色素中,成熟绿叶样品中叶绿素及叶绿素a、b的含量、类胡萝卜素的含... 从生理生化和分子水平方面比较了茶树紫化芽叶与成熟绿色叶片的差异。结果表明,紫色幼嫩新梢中茶多酚、儿茶素总量、咖啡碱含量高于成熟绿色叶片,差异达到极显著。光合色素中,成熟绿叶样品中叶绿素及叶绿素a、b的含量、类胡萝卜素的含量极显著高于幼嫩紫叶样品,花青素含量极显著低于幼嫩紫叶;在研究的9个花青素合成途径关键酶基因中,实时荧光定量PCR分析表明,PAL、C4H、CHS、CHI、F3H、F3'H、F3'5'H、DFR和ANS在幼嫩紫叶中均呈上调表达,从而促进花青素的合成,使芽叶呈现紫色。 展开更多
关键词 茶树 紫色叶片 理化分析 基因表达
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猪L-FABP基因的克隆、表达特征及遗传多态性研究(英文) 被引量:26
8
作者 姜延志 李学伟 杨光希 《Acta Genetica Sinica》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2006年第7期598-606,共9页
FABPs属于脂结合蛋白超家族成员,是一类分子量较小而对脂肪酸有高亲和力的蛋白质,广泛存在于脊椎动物和非脊椎动物的细胞质中。FABPs担当细胞内脂肪酸的运输任务,它们与脂肪酸结合将其运输到脂肪酸氧化的位置、脂肪酸脂化成甘油三醋或... FABPs属于脂结合蛋白超家族成员,是一类分子量较小而对脂肪酸有高亲和力的蛋白质,广泛存在于脊椎动物和非脊椎动物的细胞质中。FABPs担当细胞内脂肪酸的运输任务,它们与脂肪酸结合将其运输到脂肪酸氧化的位置、脂肪酸脂化成甘油三醋或磷脂的位置,或者进入细胞核内发挥其可能的调控功能。因此FABPs对脂类代谢具有重要的调控作用。本研究把L-FABP基因作为影响猪肌内脂肪含量的候选基因。为此,利用cDNA末端快速扩增(RACE)和PCR技术,克隆到猪肝脏型脂肪酸结合蛋白基因(L-FABP)的全长cDNA序列(GenBank登录号:AY960623)和部分基因组序列(GenBank登录号:DQ182323)。猪L-FABP基因的cDNA序列全长518bp,该序列包括起始密码子TGA和38bp的5′末端非编码区(5′URT),终止密码子TAG和99bp的3′末端非编码区(3′URT),在3′URT结构区域中包含polyA加尾信号序列AATAAA。猪L-FABP基因与其他FABPs基因一样,也由4个外显子(67bp、173bp、93bp和51bp)和3个内含子组成,内含子1和3的大小是1679bp和565bp,没有获得内含子2的序列,外显子和内含子剪接处符合GT/AG规律。应用ClustalW/X程序对猪L-FABP与其他物种的L-FABP进行多重序列比对,发现猪L-FABP与人、大鼠、鸡的L-FABP的相似性分别为89.8%、81.9%和72.4%。亲水性分析表明,猪L-FABP也是一个潜在的跨膜蛋白,在氨基酸残基57–65之间有一个明显的跨膜α螺旋。应用半定量RT-PCR分析发现,猪L-FABP在猪体组织中广泛存在,但在肝脏和小肠组织中表达量最为丰富。分析还发现,所克隆得到的编码区核苷酸序列与已知猪L-FABP基因的编码区核苷酸序列存在一定的变异,分别是外显子2中T→C(116位)、C→T(231位)、C→A(236位)和A→C(258位),演绎成氨基酸在Leu74Met存在差异。为进一步证实这些突变位点在猪群中真实存在,利用PCR-SSCP检测方法对4个猪种(藏猪、大河猪、雅南猪和约克夏)的157头� 展开更多
关键词 L-FABP基因 半定量RT-PCR 遗传多态性 遗传效应分析
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聚类分析中类数估计方法的实验比较 被引量:24
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作者 王开军 李健 +1 位作者 张军英 过立新 《计算机工程》 CAS CSCD 北大核心 2008年第9期198-199,202,共3页
在基因表达数据的探索性聚类分析中,聚类个数的确定是决定聚类质量的关键因素。许多聚类有效性评价指标和方法可用于PAM聚类算法。该文讨论适合于PAM算法的7种常用评价指标和方法,采用4种不同聚类结构特征的基因表达数据对它们的性能进... 在基因表达数据的探索性聚类分析中,聚类个数的确定是决定聚类质量的关键因素。许多聚类有效性评价指标和方法可用于PAM聚类算法。该文讨论适合于PAM算法的7种常用评价指标和方法,采用4种不同聚类结构特征的基因表达数据对它们的性能进行实验比较。结果表明,系统演化方法和稳定性方法估计聚类个数的性能最好,正确率分别为100%与90%。 展开更多
关键词 聚类有效性 聚类个数估计 聚类分析 基因表达数据
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转录组平台技术及其在代谢工程中的应用 被引量:23
10
作者 史硕博 陈涛 赵学明 《生物工程学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第9期1187-1198,共12页
组学技术在系统水平上对细胞代谢进行全面的分析,极大地促进了代谢工程的发展和应用。全基因组水平的转录分析可以使研究者更加精确地评估细胞表型,加深对细胞代谢的理解。而且转录组分析也有助于研究者鉴定菌种改良的目标基因,加速对... 组学技术在系统水平上对细胞代谢进行全面的分析,极大地促进了代谢工程的发展和应用。全基因组水平的转录分析可以使研究者更加精确地评估细胞表型,加深对细胞代谢的理解。而且转录组分析也有助于研究者鉴定菌种改良的目标基因,加速对微生物细胞工厂的合理设计及构建。文中介绍了3种主要转录组平台技术的原理,并总结了转录组学在代谢工程领域中应用的最新进展和未来发展趋势。 展开更多
关键词 转录组 代谢工程 基因芯片 SERIAL analysis of gene expression(SAGE) massively parallel signature sequencing(MPSS) RNA-seq
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芥菜型油菜黄籽性状的遗传、基因定位和起源探讨 被引量:22
11
作者 刘显军 袁谋志 +3 位作者 官春云 陈社员 刘淑艳 刘忠松 《作物学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第5期839-847,共9页
油菜种皮颜色既是一个形态指示性状,又与种子休眠和品质有关。以芥菜型油菜种皮颜色分离的2个BC6F2群体为作图群体,用微卫星(SSR)等标记进行连锁定位,并用定位标记对22份材料进行关联分析,通过反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)分析12份材料... 油菜种皮颜色既是一个形态指示性状,又与种子休眠和品质有关。以芥菜型油菜种皮颜色分离的2个BC6F2群体为作图群体,用微卫星(SSR)等标记进行连锁定位,并用定位标记对22份材料进行关联分析,通过反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)分析12份材料种皮中4-二氢黄酮醇还原酶(DFR)、花色素合酶(ANS)和花色素还原酶(ANR)基因的表达,对6份黄籽材料的种皮颜色基因等位性进行测定,结果将芥菜型油菜控制种皮颜色的2个基因位点分别定位到A9和B3连锁群,并找到其两侧紧密连锁标记,发现黄籽材料种皮颜色基因位点附近0.9cM和1.5cM区域高度保守,所有黑色种皮中DFR、ANS和ANR基因均表达,所有黄色种皮中DFR和ANS均不表达,但ANR基因表达或不表达,黄籽材料的种皮颜色基因等位。根据这些结果结合前人研究,认为芥菜型油菜种皮颜色基因是调控基因,黄籽为单一起源。 展开更多
关键词 芥菜型油菜 种皮颜色 基因定位 关联分析 等位性测定 基因表达
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杨树同义密码子用法的初步分析(英文) 被引量:22
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作者 周猛 童春发 施季森 《植物生理与分子生物学学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第4期285-293,共9页
杨树是世界上广泛栽培的重要造林树种之一,已经成为林木基因工程研究的模式植物。用杨树的314个蛋白编码基因,通过对应分析和ENC-plot分析探讨了若干重要因子对杨树密码子用法的效应。从分析结果中可以看出,在影响最大的第一条向量轴上... 杨树是世界上广泛栽培的重要造林树种之一,已经成为林木基因工程研究的模式植物。用杨树的314个蛋白编码基因,通过对应分析和ENC-plot分析探讨了若干重要因子对杨树密码子用法的效应。从分析结果中可以看出,在影响最大的第一条向量轴上,基因的坐标位置与该基因的表达水平(CAI)极显著负相关(r=-0.94**),其次是与GC3S和基因长度极显著相关(r=0.86**和r=-0.57**),说明基因表达水平高低是影响密码子发挥作用的主要因素,基因编码区碱基组成和基因长度次之。ENC-plot分析结果也证明了这一点。相对密码子使用值(RSCU)的计算结果表明,高表达基因强烈偏好以A或T结尾的密码子,并确定了TTA和ATA等10个密码子为杨树的主要偏爱密码子。将杨树的密码子使用频率与拟南芥、水稻、大肠杆菌和人等不同模式生物种比较后发现,杨树密码子的偏爱性与同为双子叶植物的拟南芥最为相似,与人和大肠杆菌之间的差异较大。 展开更多
关键词 密码子用法 对应分析 GC35含量 基因长度 基因表达水平 优越密码子 杨树
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柑橘磷酸蔗糖合酶基因CsSPS的鉴定和表达 被引量:22
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作者 魏清江 马张正 +3 位作者 勒思 雷常玉 马巧利 辜青青 《园艺学报》 CAS CSCD 北大核心 2020年第2期334-344,共11页
为探索柑橘磷酸蔗糖合酶(sucrose-phosphate synthase,SPS)基因特性及其在果实发育和成熟过程中的表达,从甜橙基因组中鉴定了4个SPS基因(CsSPS1~CsSPS4)。它们分布在不同染色体上,属于3个不同的亚家族,均含有SPS家族的特征功能域。定量... 为探索柑橘磷酸蔗糖合酶(sucrose-phosphate synthase,SPS)基因特性及其在果实发育和成熟过程中的表达,从甜橙基因组中鉴定了4个SPS基因(CsSPS1~CsSPS4)。它们分布在不同染色体上,属于3个不同的亚家族,均含有SPS家族的特征功能域。定量PCR分析表明,4个CsSPS在所检测的组织中均有表达,其中CsSPS4具有明显的果实特异表达特点。进一步研究发现,CsSPS3和CsCSPS4在‘融安金柑’和‘滑皮金柑’果实发育过程中的表达量高于CsSPS1和CsCSPS2。此外CsSPS4在果皮和果肉中的表达量均随着果实发育迅速升高,推测其在金柑果实蔗糖的合成和积累中起关键作用。 展开更多
关键词 柑橘 磷酸蔗糖合酶 序列分析 基因表达
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聚类分析在自身免疫病基因表达谱研究中的初步应用 被引量:22
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作者 韩光明 陈顺乐 +1 位作者 沈南 王元 《中华检验医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2003年第8期473-475,T001,共4页
目的 探讨聚类分析方法在自身免疫病基因表达谱研究中的应用价值。方法 从正常对照及自身免疫病患者外周血提取总RNA ,逆转录合成单链、双链cDNA后 ,体外转录合成生物素标记的cRNA与基因芯片进行杂交 ,再经抗原抗体反应和标记荧光染料... 目的 探讨聚类分析方法在自身免疫病基因表达谱研究中的应用价值。方法 从正常对照及自身免疫病患者外周血提取总RNA ,逆转录合成单链、双链cDNA后 ,体外转录合成生物素标记的cRNA与基因芯片进行杂交 ,再经抗原抗体反应和标记荧光染料Cy3标记后 ,用基因芯片扫描仪进行图像扫描。经QuantArray分析软件将扫描的图像信息转化为数据。然后 ,进一步将标准化的数据用GeneSpring分析软件进行试验样本和基因的聚类分析。 结果  10例系统红斑狼疮 (SLE)、1例多发性肌炎 (PM )和 1例类风湿关节炎 (RA)患者与 1名正常对照外周血细胞的基因表达谱是不同的 ,患者之间的表达谱因临床表现的异质性 ,其表达谱也有差别 ,但SLE的聚类可与PM、RA相区分 ,同一SLE患者 ,2次采血所得的表达谱具有极强的相似性。基因聚类分析显示 ,具有相似功能的基因具有相似表达模式 ,据此可发现许多已知基因的免疫功能。结论 聚类分析方法能根据基因表达谱 ,将基因进行功能分类 ,故可将自身免疫病的样本进行疾病分类。因此 。 展开更多
关键词 聚类分析 自身免疫病 基因表达谱 研究 临床应用
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非洲菊查尔酮合酶基因的克隆、序列分析及在大肠杆菌中的表达 被引量:17
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作者 谢修志 陈兆平 王小菁 《热带亚热带植物学报》 CAS CSCD 北大核心 2004年第5期431-434,共4页
利用RT-PCR方法,从非洲菊(Gerberahybrida)花瓣的cDNA中克隆到了查尔酮合酶(ChalconeSynthase,CHS)基因CHS,进行了序列分析。结果表明,克隆到的CHS基因全长为1197bps,编码一个由398个氨基酸残基组成的多肽,与Helariutta等发表的非洲菊... 利用RT-PCR方法,从非洲菊(Gerberahybrida)花瓣的cDNA中克隆到了查尔酮合酶(ChalconeSynthase,CHS)基因CHS,进行了序列分析。结果表明,克隆到的CHS基因全长为1197bps,编码一个由398个氨基酸残基组成的多肽,与Helariutta等发表的非洲菊查尔酮合酶CHS1基因的cDNA序列的CHS基因同源性高达99%。进一步将该基因克隆到表达载体pET32a上,经IPTG诱导表达,得到高效表达的融合蛋白。 展开更多
关键词 非洲菊 查尔酮合酶 序列分析 基因表达
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梨CBL基因家族全基因组序列的鉴定及非生物胁迫下的表达分析 被引量:20
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作者 许园园 蔺经 +1 位作者 李晓刚 常有宏 《中国农业科学》 CAS CSCD 北大核心 2015年第4期735-747,共13页
【目的】最近在植物中发现了一类Ca2+传感蛋白——类钙调磷酸酶B亚基蛋白CBL(calcineurin B-likeproteins),CBL及其靶蛋白CIPK(CBL-interacting protein kinase)构成CBL/CIPK信号网络系统,在植物干旱、盐渍、低温等逆境胁迫应答中起重... 【目的】最近在植物中发现了一类Ca2+传感蛋白——类钙调磷酸酶B亚基蛋白CBL(calcineurin B-likeproteins),CBL及其靶蛋白CIPK(CBL-interacting protein kinase)构成CBL/CIPK信号网络系统,在植物干旱、盐渍、低温等逆境胁迫应答中起重要作用。鉴定梨基因组中CBL家族基因成员,对其基因进化、结构与表达特征进行分析,为植物CBL基因功能分析与利用提供依据。【方法】通过生物信息学手段,结合梨基因组注释信息,鉴定梨CBL家族成员序列信息;利用MEGA6.0程序进行多序列比对、分类并构建系统进化树;利用per1程序、GSDS工具以及ClustalX软件进行基因结构与保守性分析;通过qRT-PCR技术进行多种非生物胁迫处理下PbCBLs表达分析。【结果】成功鉴定出7个CBL家族成员,基因结构预测表明PbCBL9含5个内含子,其余PbCBLs均含有7—8个内含子;预测的PbCBLs均含4个EF-hand功能域,且相邻EF-hand功能域之间氨基酸数目非常保守;通过系统发育树分析,将7个PbCBLs分为2类;qRT-PCR技术进行不同胁迫处理下杜梨叶片PbCBLs的表达分析,结果表明,在NaCl胁迫下,PbCBL1表达量6h降至最低,24h则明显升高;与之相反,PbCBL2和PbCBL3的表达量在6h达最高,24h最低;PbCBL4和PbCBL8表达量在3h明显增加,随后表达量下降;PbCBL9表现明显的上调趋势,24h达到最大;PbCBL10则在6h表达量最高。10%(w/v)PEG6000胁迫处理下,PbCBL2、PbCBL4和PbCBL8表达量上调,PbCBL1表达量下调;PbCBL3、PbCBL9和PbCBL10表达量均在6h最低,12h和24h较6h明显升高,PbCBL3和PbCBL10于24h表达量达到最高,而PbCBL9在12h表达量最高。4℃低温处理下,PbCBL2、PbCBL4、PbCBL8表达量上调;而PbCBL1和PbCBL3表达量下调;PbCBL9和PbCBL10表达量表现上下波动的变化趋势,均在3h有明显增加,随后显著降低。42℃高温胁迫处理下,PbCBL1、PbCBL3和PbCBL4表达量下调;PbCBL2表达量整体上调,6h达到最高;PbCBL8、PbCBL9和PbCBL10总体呈现相同的变化趋 展开更多
关键词 CBL家族基因 全基因组鉴定 系统进化 胁迫响应 基因表达
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激光捕获显微切割技术应用研究新进展 被引量:17
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作者 闫峰 李宗芳 《癌症》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2004年第7期860-864,共5页
对疾病发生过程中的组织损害要进行分子水平分析,首要步骤就是纯净目标细胞的分离。近年发展起来的激光捕获显微切割(lasercapturemicrodissection,LCM)技术可以在显微镜直视下快速、准确地获取所需的单一细胞亚群,甚至单个细胞,从而成... 对疾病发生过程中的组织损害要进行分子水平分析,首要步骤就是纯净目标细胞的分离。近年发展起来的激光捕获显微切割(lasercapturemicrodissection,LCM)技术可以在显微镜直视下快速、准确地获取所需的单一细胞亚群,甚至单个细胞,从而成功解决了组织中细胞异质性问题。本文介绍了LCM技术的原理及其优缺点,并对其在DNA分析和基因表达分析两个方面的应用研究新进展进行综述,同时对LCM技术的发展和完善提出了可能的方向。 展开更多
关键词 激光捕获显微切割 DNA分析 基因表达分析
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辣椒全基因组中LBD转录因子的鉴定与表达分析 被引量:19
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作者 郑忠凡 张亚利 +3 位作者 胡灿 戴雄泽 刘峰 袁祖华 《园艺学报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第4期683-694,共12页
利用生物信息学的方法,从辣椒基因组中鉴定出45个LBD基因,这些基因分布于辣椒9条染色体上。该家族成员内含子数整体上不超过3个,结构相对简单。进化关系显示辣椒LBD基因可分为ClassⅠ和ClassⅡ两大类,细分为Ⅰa、Ⅰb、Ⅰc、Ⅰd、Ⅰe、Ⅱ... 利用生物信息学的方法,从辣椒基因组中鉴定出45个LBD基因,这些基因分布于辣椒9条染色体上。该家族成员内含子数整体上不超过3个,结构相对简单。进化关系显示辣椒LBD基因可分为ClassⅠ和ClassⅡ两大类,细分为Ⅰa、Ⅰb、Ⅰc、Ⅰd、Ⅰe、Ⅱa和Ⅱb等7个亚类。不同组织和发育时期的表达模式研究发现,该基因家族具有一定的时空表达特异性。qRT-PCR结果表明,热激胁迫可以明显激活或抑制部分LBD基因的表达,其中ClassⅡ类基因较ClassⅠ类对高温具有更高的敏感性。 展开更多
关键词 辣椒 LBD基因家族 进化分析 基因表达
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胃癌中癌基因ras c-mycm RNA表达的临床意义 被引量:17
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作者 施秀清 李功 +3 位作者 李春生 倪灿荣 栾汛 曲阳 《华人消化杂志》 1998年第2期123-124,共2页
目的探索癌基因ras和cmycmRNA在胃癌发生中单独和协同作用关系,选择胃癌的早期诊断依据.方法应用原位分子杂交(ISH)技术,检测88例胃癌组织中Hras,Kras,CmycmRNA的表达,结合临床资料综... 目的探索癌基因ras和cmycmRNA在胃癌发生中单独和协同作用关系,选择胃癌的早期诊断依据.方法应用原位分子杂交(ISH)技术,检测88例胃癌组织中Hras,Kras,CmycmRNA的表达,结合临床资料综合分析.结果Kras,Hras,CmycmRNA在肿瘤区的阳性表达分别为784%,705%和580%,在癌旁区的阳性表达分别为284%,273%和205%,呈梯度下降趋势,3种癌基因的表达与胃癌的临床分型、组织学分类及有无淋巴结转移无关,CmycmRNA的表达与患者生存期关系密切(P<005).结论Kras,Hras,CmycmRNA的表达可作为胃癌早期诊断的参考依据. 展开更多
关键词 基因表达 胃肿瘤 遗传学 MRNA RAS C-MYC
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红花查尔酮合成酶基因的克隆、生物信息学分析及表达 被引量:16
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作者 康亚兰 裴瑾 +3 位作者 刘薇 罗静 刘维 陈翠平 《中草药》 CAS CSCD 北大核心 2014年第16期2385-2389,共5页
目的克隆红花查尔酮合成酶基因(chalcone synthase,CHS),运用生物信息学分析CHS,比较花期中每天CHS的表达,为红花有效成分合成及调控机制研究提供基础。方法从新鲜红花花冠中提取RNA,反转录为cDNA,设计特异性引物,克隆获得CHS。通过生... 目的克隆红花查尔酮合成酶基因(chalcone synthase,CHS),运用生物信息学分析CHS,比较花期中每天CHS的表达,为红花有效成分合成及调控机制研究提供基础。方法从新鲜红花花冠中提取RNA,反转录为cDNA,设计特异性引物,克隆获得CHS。通过生物信息学对该基因蛋白的特征进行分析,使用MEGA5.1构建CHS与相关物种CHS的系统进化树,利用real-time PCR分析花期中每天红花CHS的表达量,并进行分析和比较。结果克隆获得的红花CHS,序列全长为1 149 bp,具有1 041 bp的完整开放阅读框,编码346个氨基酸。将该蛋白通过NCBI上的Blastp比对发现,该蛋白属于CHS家族,比对结果显示红花CHS与100余种NCBI上登录的植物有相似性,其中与水飞蓟、翠菊、菊花、红凤菜的相似性分别达95%、95%、94%、94%。将相似性在90%以上的物种用MEGA5.1构建进化树,结果显示红花CHS与水飞蓟CHS亲缘关系最近。通过ProtParam预测红花CHS蛋白分子式为C1678H2693N451O493S20,相对分子质量为37 700,等电点为6.10,负电荷的氨基酸残基数(Asp+Glu)为42,正电荷的氨基酸残基数(Arg+Lys)为38。基因表达分析结果表明红花CHS在花期第3天的相对表达量最高,远远高于花期其余时间。结论成功克隆、分析并表达了红花CHS,为红花有效成分合成及调控机制研究提供基础。 展开更多
关键词 红花 查尔酮合成酶基因 基因克隆 生物信息学分析 基因表达
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