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党参多糖对Ana-1巨噬细胞和小鼠的免疫调节作用
被引量：
21
1
作者
史宝忠
胡建燃
+1 位作者
李平
徐凯
《生物技术通报》
CAS
CSCD
北大核心
2019年第6期114-118,共5页
以中药党参为材料,研究其多糖成分对小鼠巨噬细胞Ana-1 和小鼠的免疫活性的影响。通过MTT 实验,检测党参多糖对Ana-1 细胞增殖的影响。利用ELISA 实验,检测不同浓度的党参多糖对Ana-1 细胞释放TNF-α和IL-1β的影响。用不同剂量的党参...
以中药党参为材料,研究其多糖成分对小鼠巨噬细胞Ana-1 和小鼠的免疫活性的影响。通过MTT 实验,检测党参多糖对Ana-1 细胞增殖的影响。利用ELISA 实验,检测不同浓度的党参多糖对Ana-1 细胞释放TNF-α和IL-1β的影响。用不同剂量的党参多糖灌胃小鼠,分别测定小鼠脾脏指数、淋巴细胞增殖活力以及血清中TNF-α和IL-1β的含量。体外实验结果显示党参多糖不影响Ana-1 细胞的增殖,却显著提高TNF-α和IL-1β的分泌,并呈浓度依赖关系。体内实验结果显示:与对照组相比,党参多糖中、高剂量组小鼠胸腺指数、淋巴细胞增殖指数以及血清中TNF-α和IL-1β的含量均显著增高,呈剂量依赖关系。因此,党参多糖能够有效提高小鼠巨噬细胞Ana-1 的免疫活力,增强小鼠的免疫功能。
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关键词
党参多糖
ana
-
1
巨噬细胞
TNF-Α
IL-
1
Β
免疫调节
下载PDF
职称材料
鸟分枝杆菌PPE25-MAV蛋白的原核表达及其对巨噬细胞凋亡的影响
被引量：
1
2
作者
翟凯新
刘丽婷
+3 位作者
陈晓文
陈越
高婧华
吴利先
《中国病原生物学杂志》
CSCD
北大核心
2020年第11期1257-1261,共5页
目的构建鸟分枝杆菌PPE25-MAV蛋白的重组质粒并诱导表达和纯化,观察其对Ana-1系巨噬细胞凋亡的影响。方法在GenBank中查找到鸟分枝杆菌编码PPE25-MAV蛋白的MAV-2928基因序列,合成全基因并构建质粒。将质粒亚克隆至表达载体pET-32a(+)上...
目的构建鸟分枝杆菌PPE25-MAV蛋白的重组质粒并诱导表达和纯化,观察其对Ana-1系巨噬细胞凋亡的影响。方法在GenBank中查找到鸟分枝杆菌编码PPE25-MAV蛋白的MAV-2928基因序列,合成全基因并构建质粒。将质粒亚克隆至表达载体pET-32a(+)上,构建重组表达质粒pET-32a-ppe25,转入感受态细胞BL21(DE3)后,通过IPTG诱导表达融合蛋白PPE25-MAV。用Ni Resin FF纯化蛋白,并作用于巨噬系Ana-1细胞,流式细胞术(FCM)检测巨噬细胞凋亡率并且分析其变化。结果鸟分枝杆菌PPE25-MAV蛋白表达载体构建成功,转化至BL21(DE3)后经IPTG诱导表达约59ku的蛋白,与预期大小相符;Western blot检测该蛋白能被His抗体识别。用纯化的PPE25-MAV蛋白作用小鼠巨噬系Ana-1细胞,与空白对照组相比,作用2h后细胞的早期凋亡率差异无统计学意义(P>0.05),细胞的晚期凋亡率和总凋亡率在0.5μg/ml与1μg/ml时均低于空白组(P<0.05),2μg/ml与5μg/ml的凋亡率与对照组比较差异无统计学意义;作用10h细胞的早期凋亡率仅在5μg/ml时升高(P<0.05),0.5、1和2μg/ml剂量组差异无统计学意义(P>0.05),细胞晚期凋亡率和总凋亡率在2μg/ml和5μg/ml时显著降低(P<0.05),0.5μg/ml和1μg/ml组凋亡率差异无统计学意义(P>0.05)。结论重组质粒诱导表达的PPE25-MAV蛋白存在于上清和包涵体中,但主要以包涵体形式表达。纯化的PPE25-MAV蛋白对巨噬细胞凋亡有抑制作用,且主要作用于巨噬细胞的晚期凋亡阶段。
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关键词
鸟分枝杆菌
PPE25-MAV蛋白
ana
-
1
巨噬细胞
细胞凋亡
原文传递
题名
党参多糖对Ana-1巨噬细胞和小鼠的免疫调节作用
被引量：
21
1
作者
史宝忠
胡建燃
李平
徐凯
机构
长治学院生物科学与技术系
出处
《生物技术通报》
CAS
CSCD
北大核心
2019年第6期114-118,共5页
基金
山西省重点学科建设经费资助(FSKSC)
山西省1331重点学科建设经费资助(1331KSC)
文摘
以中药党参为材料,研究其多糖成分对小鼠巨噬细胞Ana-1 和小鼠的免疫活性的影响。通过MTT 实验,检测党参多糖对Ana-1 细胞增殖的影响。利用ELISA 实验,检测不同浓度的党参多糖对Ana-1 细胞释放TNF-α和IL-1β的影响。用不同剂量的党参多糖灌胃小鼠,分别测定小鼠脾脏指数、淋巴细胞增殖活力以及血清中TNF-α和IL-1β的含量。体外实验结果显示党参多糖不影响Ana-1 细胞的增殖,却显著提高TNF-α和IL-1β的分泌,并呈浓度依赖关系。体内实验结果显示:与对照组相比,党参多糖中、高剂量组小鼠胸腺指数、淋巴细胞增殖指数以及血清中TNF-α和IL-1β的含量均显著增高,呈剂量依赖关系。因此,党参多糖能够有效提高小鼠巨噬细胞Ana-1 的免疫活力,增强小鼠的免疫功能。
关键词
党参多糖
ana
-
1
巨噬细胞
TNF-Α
IL-
1
Β
免疫调节
Keywords
polysaccharides
in
Codonopsis
pilosula
ana
-1
macrophages
TNF-α
IL-
1
β
immunoregulatory
effect
分类号
R285.5 [医药卫生—中药学]
下载PDF
职称材料
题名
鸟分枝杆菌PPE25-MAV蛋白的原核表达及其对巨噬细胞凋亡的影响
被引量：
1
2
作者
翟凯新
刘丽婷
陈晓文
陈越
高婧华
吴利先
机构
大理大学基础医学院微生物与免疫学教研室
出处
《中国病原生物学杂志》
CSCD
北大核心
2020年第11期1257-1261,共5页
基金
国家自然科学基金项目(No.81760357)。
文摘
目的构建鸟分枝杆菌PPE25-MAV蛋白的重组质粒并诱导表达和纯化,观察其对Ana-1系巨噬细胞凋亡的影响。方法在GenBank中查找到鸟分枝杆菌编码PPE25-MAV蛋白的MAV-2928基因序列,合成全基因并构建质粒。将质粒亚克隆至表达载体pET-32a(+)上,构建重组表达质粒pET-32a-ppe25,转入感受态细胞BL21(DE3)后,通过IPTG诱导表达融合蛋白PPE25-MAV。用Ni Resin FF纯化蛋白,并作用于巨噬系Ana-1细胞,流式细胞术(FCM)检测巨噬细胞凋亡率并且分析其变化。结果鸟分枝杆菌PPE25-MAV蛋白表达载体构建成功,转化至BL21(DE3)后经IPTG诱导表达约59ku的蛋白,与预期大小相符;Western blot检测该蛋白能被His抗体识别。用纯化的PPE25-MAV蛋白作用小鼠巨噬系Ana-1细胞,与空白对照组相比,作用2h后细胞的早期凋亡率差异无统计学意义(P>0.05),细胞的晚期凋亡率和总凋亡率在0.5μg/ml与1μg/ml时均低于空白组(P<0.05),2μg/ml与5μg/ml的凋亡率与对照组比较差异无统计学意义;作用10h细胞的早期凋亡率仅在5μg/ml时升高(P<0.05),0.5、1和2μg/ml剂量组差异无统计学意义(P>0.05),细胞晚期凋亡率和总凋亡率在2μg/ml和5μg/ml时显著降低(P<0.05),0.5μg/ml和1μg/ml组凋亡率差异无统计学意义(P>0.05)。结论重组质粒诱导表达的PPE25-MAV蛋白存在于上清和包涵体中,但主要以包涵体形式表达。纯化的PPE25-MAV蛋白对巨噬细胞凋亡有抑制作用,且主要作用于巨噬细胞的晚期凋亡阶段。
关键词
鸟分枝杆菌
PPE25-MAV蛋白
ana
-
1
巨噬细胞
细胞凋亡
Keywords
Mycobacterium
avium
PPE25-MAV
protein
ana
-1
macrophages
apoptosis
分类号
R378.91 [医药卫生—病原生物学]
原文传递
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
党参多糖对Ana-1巨噬细胞和小鼠的免疫调节作用
史宝忠
胡建燃
李平
徐凯
《生物技术通报》
CAS
CSCD
北大核心
2019
21
下载PDF
职称材料
2
鸟分枝杆菌PPE25-MAV蛋白的原核表达及其对巨噬细胞凋亡的影响
翟凯新
刘丽婷
陈晓文
陈越
高婧华
吴利先
《中国病原生物学杂志》
CSCD
北大核心
2020
1
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