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藤茶叶片总RNA的提取及苯丙氨酸解氨酶基因(pal)片段的克隆 被引量：7
1
作者 许明 杨志坚 郑金贵 《生物学杂志》 CAS CSCD 2015年第2期96-99,共4页
藤茶叶片富含多酚、多糖以及黄酮类化合物，严重干扰了其总RNA的提取。实验在裂解前先用70％丙酮对藤茶叶片冷冻研磨材料进行多次抽提，然后采用试剂盒提取法、Trizol法和异硫氰酸胍法提取总RNA。结果表明，经丙酮预处理后，上述3种方... 藤茶叶片富含多酚、多糖以及黄酮类化合物，严重干扰了其总RNA的提取。实验在裂解前先用70％丙酮对藤茶叶片冷冻研磨材料进行多次抽提，然后采用试剂盒提取法、Trizol法和异硫氰酸胍法提取总RNA。结果表明，经丙酮预处理后，上述3种方法均能从藤茶叶片中成功提取到高质量的RNA，其完整性好，纯度高， D260 nm／D280 nm值介于1.8～2.0之间，产率为22.74～33.66μg／g。以提取的总RNA逆转录的cDNA为模板进行RT-PCR，克隆到一条长度为817 bp的pal片段。经Blast比对分析，该基因片段与葡萄、茶树等物种的pal之间具有较高的同源性。 展开更多
关键词 藤茶 叶片 总RNA提取 PAL
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显齿蛇葡萄叶细胞悬浮培养体系的建立及其产多酚类物质研究 被引量：2
2
作者 凌丽娟 钟伊嘉 +5 位作者 潘晓洋 梁琦 陈雨琴 唐道邦 陈继光 尹忠平 《食品科学技术学报》 EI CAS CSCD 北大核心 2023年第2期104-120,163,共18页
显齿蛇葡萄叶富含多酚类化合物,是一种具有很高开发利用价值的新资源食品原料。以显齿蛇葡萄幼叶为外植体诱导出了2种典型的愈伤组织,通过激素优化和连续筛选获得了性状优良的愈伤组织,在此基础上建立并优化了显齿蛇葡萄叶细胞悬浮培养... 显齿蛇葡萄叶富含多酚类化合物,是一种具有很高开发利用价值的新资源食品原料。以显齿蛇葡萄幼叶为外植体诱导出了2种典型的愈伤组织,通过激素优化和连续筛选获得了性状优良的愈伤组织,在此基础上建立并优化了显齿蛇葡萄叶细胞悬浮培养体系,对悬浮培养细胞中的主要多酚类物质进行了鉴定,并评价了多酚的抗氧化活性。采用超高压液相色谱飞行时间质谱(UPLC-Q-TOF MS/MS)和高效液相色谱(HLPC)检测技术,分别从愈伤组织和悬浮培养细胞中鉴定出了7种和10种多酚类化合物,其中原花青素B1、(+)-儿茶素、表儿茶素没食子酸酯为愈伤组织和悬浮培养细胞中共有的物质,且含量较高,其中以表儿茶素没食子酸酯含量最高,在愈伤组织和悬浮培养细胞中分别达到了5 020.965μg/g和1 044.725μg/g。抗氧化活性评价结果显示,悬浮培养细胞多酚提取物具有很强的抗氧化活性,对2,2-联氮-二(3-乙基-苯并噻唑-6-磺酸)二铵盐(ABTS+)和2,2-联苯基-1-苦基肼基(DPPH)自由基清除的IC50分别为30.681μg/mL和3.685μg/mL,相同质量浓度下对DPPH自由基的清除和总还原能力均强于维生素C,其抗氧化能力主要源于表儿茶素没食子酸酯和(+)-儿茶素。希望研究可为显齿蛇葡萄细胞培养及其多酚类次生代谢产物的合成调控提供参考。 展开更多
关键词 显齿蛇葡萄叶 藤茶 愈伤组织 悬浮培养 细胞 多酚
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藤茶总黄酮对PM2.5所致大鼠肺损伤的作用研究
3
作者 郭丹 张月芬 +2 位作者 戴雅彬 黄慧 熊蔚 《药品评价》 CAS 2023年第10期1193-1196,共4页
目的评价藤茶总黄酮对大气细颗粒物(PM2.5)所致大鼠肺损伤的作用。方法雄性Wistar大鼠35只随机分为5组:对照组,模型组,藤茶总黄酮(TF)高、中、低剂量组,每组7只。模型组、TF各组气管滴注PM2.5混悬液10 mg/kg,每周1次,共4次,对照组则以... 目的评价藤茶总黄酮对大气细颗粒物(PM2.5)所致大鼠肺损伤的作用。方法雄性Wistar大鼠35只随机分为5组:对照组,模型组,藤茶总黄酮(TF)高、中、低剂量组,每组7只。模型组、TF各组气管滴注PM2.5混悬液10 mg/kg,每周1次,共4次,对照组则以生理盐水进行气管滴注。滴注次日起,对照组、模型组以0.5%羧甲基纤维素钠灌胃,TF组以不同剂量(500、250、125 mg/kg)藤茶总黄酮灌胃,每周5次,共4周。收集大鼠肺组织、肺泡灌洗液(BALF),观察肺组织病理形态,检测肺组织中超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px),酶联免疫吸附试验(ELISA)检测BALF中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-6(IL-6)、白细胞介素-1β(IL-1β)。结果与对照组相比,模型组大鼠肺组织损伤明显,SOD、GSH-Px活性显著降低,MDA含量、BALF中TNF-α、IL-6、IL-1β水平显著升高。在中高剂量TF干预下,PM2.5肺损伤模型大鼠的肺组织损伤减轻,SOD、GSH-Px活性显著增强,MDA含量、BALF中TNF-α、IL-6、IL-1β水平显著下降,差异有统计学意义。结论藤茶总黄酮对PM2.5所致大鼠肺损伤具有一定的保护作用,这一作用与减轻大鼠肺部的氧化应激和炎症反应有关。 展开更多
关键词 显齿蛇葡萄叶 细颗粒物(PM2.5) 大鼠 Wistar 肺损伤 藤茶总黄酮
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显齿蛇葡萄组织培养的研究 被引量：1
4
作者 向博文 刘德华 +3 位作者 黄红芳 王树芝 刘黎 唐道方 《湖南农业科学》 2010年第4期28-30,33,共4页
以显齿蛇葡萄茎、叶为外植体,研究了植株再生的条件。结果表明,茎段培养宜以MS、MT培养基为基本培养基,叶宜以BM培养基为基本培养基。茎段最适培养基为MS+TDZ0.07mg/L,腋芽萌发率为100%。茎外植体在L6培养基上诱导出的愈伤组织,转至L4、... 以显齿蛇葡萄茎、叶为外植体,研究了植株再生的条件。结果表明,茎段培养宜以MS、MT培养基为基本培养基,叶宜以BM培养基为基本培养基。茎段最适培养基为MS+TDZ0.07mg/L,腋芽萌发率为100%。茎外植体在L6培养基上诱导出的愈伤组织,转至L4、L12、L10培养基上诱导出了胚状体。叶诱导不定芽的最适培养基为BM+TDZ0.1mg/L+IBA0.5mg/L,诱导率可达45%。 展开更多
关键词 显齿蛇葡萄 组织培养 胚状体 叶 不定芽
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