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肠道α-防御素-5、β-防御素-2在急性肝衰竭时的表达
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作者 滕丽娟 李双杰 欧阳文献 《中华实用儿科临床杂志》 CSCD 北大核心 2019年第7期510-512,共3页
目的观察肠道α-防御素-5(RD-5)、β-防御素-2(BD-2) mRNA在急性肝衰竭(ALF)小鼠造模后不同时间的动态表达,探讨其在ALF发病机制中的作用。方法将60只C57BL6小鼠按随机数字表法分为4组:正常对照组、ALF造模组、大肠埃希菌(E.coli)灌胃组... 目的观察肠道α-防御素-5(RD-5)、β-防御素-2(BD-2) mRNA在急性肝衰竭(ALF)小鼠造模后不同时间的动态表达,探讨其在ALF发病机制中的作用。方法将60只C57BL6小鼠按随机数字表法分为4组:正常对照组、ALF造模组、大肠埃希菌(E.coli)灌胃组和ALF+E.coli灌胃组。采用氨基半乳糖500 mg/kg+脂多糖10 μg/kg腹腔注射造模,另对ALF小鼠予E.coli灌胃,观察时间点为造模后6 h、12 h、24 h,每个时间点6个标本。采用实时荧光定量PCR方法检测小鼠回肠末端组织RD-5、BD-2 mRNA的表达。结果RD-5,BD-2水平在实验性ALF中呈动态变化,与正常对照组(11.25±0.74、23.86±0.39)相比,ALF造模组与ALF+E.coli灌胃组在造模后6 h显著升高(分别为14.19±0.39、26.79±0.36,12.57±0.68、26.45±0.85),差异均有统计学意义(均P<0.05);12 h达高峰(分别为15.76±0.33、29.10±0.61,12.90±0.96、27.42±0.71),差异均有统计学意义(均P<0.05);后逐渐下降;BD-2水平较RD-5水平升高更明显。结论RD-5、BD-2可能在实验性小鼠ALF肠源性内毒素血症发病机制中起一定作用。 展开更多
关键词 α-防御素-5 Β-防御素-2 抗菌肽 内毒素 氨基半乳糖 急性肝衰竭
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人α-防御素5前体蛋白在毕赤酵母中分泌表达的研究 被引量：1
2
作者 汪芳 吴晖 +5 位作者 李健兴 余以刚 李晓凤 袁琨 王少沛 唐语谦 《现代食品科技》 EI CAS 2010年第11期1181-1184,1216,共5页
为了探索人α-防御素5(HD5)前体蛋白基因在酵母中高效分泌表达的可行性,将其对应基因克隆到载体pPIC9K,得到重组载体pPIC9K-preproHD5,经SacI线性化后,转入Pichiapastoris GS115,得到重组毕赤酵母菌GS115/pPIC9K-preproHD5。应用PCR技... 为了探索人α-防御素5(HD5)前体蛋白基因在酵母中高效分泌表达的可行性,将其对应基因克隆到载体pPIC9K,得到重组载体pPIC9K-preproHD5,经SacI线性化后,转入Pichiapastoris GS115,得到重组毕赤酵母菌GS115/pPIC9K-preproHD5。应用PCR技术筛选高拷贝转化株,用BMGY培养GS115/pPIC9K-HD5至OD600为2～6时,用BMMY诱导培养120h,离心取上清液,用Tricien-SDS-PAGE和蛋白定量试剂盒分析人α-防御素5前体蛋白的表达量。琼脂扩散法检测人α-防御素5前体蛋白的抑菌活性,发现其对金黄色葡萄球菌(ATCC6538)和大肠杆菌(ATCC10231)2种标准菌株具明显的抑菌活性。人α-防御素5前体基因可在毕赤酵母实现分泌型表达,该策略可能成为防御素工业化开发的有效途径。 展开更多
关键词 人α-防御素5前体蛋白 分泌表达 生物活性
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