甘肃省张掖地区苜蓿花叶病病原的检测 被引量：17

1

作者 文朝慧 南志标 《草业学报》 CSCD 北大核心 2015年第4期121-126,共6页

2011年7月在甘肃省张掖地区发现发生花叶病的苜蓿田块,地块中病株呈现黄斑花叶、叶柄扭曲及整株矮化的症状。为明确其病原,采集病株后利用血清学和分子生物学方法对病样进行了检测。DAS-ELISA、RT-PCR-RFLP及病毒CP基因序列测定分析结... 2011年7月在甘肃省张掖地区发现发生花叶病的苜蓿田块,地块中病株呈现黄斑花叶、叶柄扭曲及整株矮化的症状。为明确其病原,采集病株后利用血清学和分子生物学方法对病样进行了检测。DAS-ELISA、RT-PCR-RFLP及病毒CP基因序列测定分析结果表明,苜蓿病样受到番茄花叶病毒(Tomato mosaic virus,ToMV)和苜蓿花叶病毒(Alfalfa mosaic virus,AMV)的复合侵染。这是国际上首次报道番茄花叶病毒对苜蓿的侵染,讨论了由这两种病毒引致病害的发生与防治。 展开更多

关键词 苜蓿 番茄花叶病毒 苜蓿花叶病毒 病毒病

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苜蓿花叶病毒外壳蛋白基因对红三叶的遗传转化及转基因植株的抗病性分析 被引量：10

2

作者 赵桂琴 慕平 《西北植物学报》 CAS CSCD 2004年第10期1850-1855,共6页

以红三叶(TrifoliumpratenseL.)子叶为转化体,用农杆菌介导法将外源的苜蓿花叶病毒外壳蛋白基因AMV4转入红三叶,经过筛选、分化和再生,得到了具有卡拉霉素抗性的转基因植株。对这些植株进行PCR、South-ern印迹杂交和Northern杂交分析,... 以红三叶(TrifoliumpratenseL.)子叶为转化体,用农杆菌介导法将外源的苜蓿花叶病毒外壳蛋白基因AMV4转入红三叶,经过筛选、分化和再生,得到了具有卡拉霉素抗性的转基因植株。对这些植株进行PCR、South-ern印迹杂交和Northern杂交分析,结果表明,外源目的基因已经整合到红三叶基因组中并且得到了表达。对Northern分析呈阳性的植株进行了抗病性检测,结果表明,表达苜蓿花叶病毒外壳蛋白基因的植株病症减轻,发病率、病情指数及病毒积累量都明显低于对照,有的甚至不表现症状,达到了免疫的程度。 展开更多

关键词 苜蓿花叶病毒 土壤农杆菌 转基因红三叶 分子检测 抗病性

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苜蓿花叶病毒提纯方法的改进 被引量：5

3

作者 陈集双 冯明光 《微生物学通报》 CAS CSCD 北大核心 2001年第1期68-72,共5页

用来自于白车根草 (Trifolium repens)上的一个苜蓿花叶病毒分离物 AMV- SY为材料 ,比较了 3种以差速离心为主结合 PEG沉淀和超速离心提纯病毒的方法 ,对提纯病毒进行紫外吸收测定、电镜检查和SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳检测的结果显示 :... 用来自于白车根草 (Trifolium repens)上的一个苜蓿花叶病毒分离物 AMV- SY为材料 ,比较了 3种以差速离心为主结合 PEG沉淀和超速离心提纯病毒的方法 ,对提纯病毒进行紫外吸收测定、电镜检查和SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳检测的结果显示 :以交替使用含有 0 .1mol/LEDTA和 0 .1mol/L Mg SO4 的磷酸缓冲液作为病毒悬浮介质的提纯程序最为理想。该方法提取苜蓿花叶病毒的得率为 4 7.6 mg/10 0 g昆诺藜鲜病叶 ,该病毒分离物的外壳蛋白分子量为 2 9k D。该方法的病毒得率较高、杂蛋白较少、病毒粒子完整 ,是比较理想的提纯方法。 展开更多

关键词 苜蓿花叶病毒 白车根草 提纯方法 外壳蛋白 植物病毒

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苜蓿不同品种AMV和WCMV带毒检测及生理生化特性研究 被引量：7

4

作者 程守丰 梁巧兰 +2 位作者 魏列新 桑旭文 姜玉玲 《草业学报》 CSCD 北大核心 2020年第12期140-149,共10页

为明确甘肃省大面积种植的苜蓿品种苜蓿花叶病毒(AMV)和白三叶草花叶病毒(WCMV)带毒情况及这两种病毒侵染后对苜蓿生理生化特性的影响。利用双抗夹心酶联免疫吸附分析法(DAS-ELISA)和生理生化方法分别对种植于实验室30 d苗龄的12个苜蓿... 为明确甘肃省大面积种植的苜蓿品种苜蓿花叶病毒(AMV)和白三叶草花叶病毒(WCMV)带毒情况及这两种病毒侵染后对苜蓿生理生化特性的影响。利用双抗夹心酶联免疫吸附分析法(DAS-ELISA)和生理生化方法分别对种植于实验室30 d苗龄的12个苜蓿品种进行了带病毒检测及携带不同病毒的苜蓿叶绿素、可溶性蛋白含量、防御酶活性的测定。结果表明12个苜蓿品种可分为不携带病毒、携带病毒AMV、携带病毒WCMV、携带病毒AMV和WCMV,病毒检出率为66.7%,其中AMV检出率为50.0%、WCMV检出率为41.7%、AMV和WCMV复合侵染率为25.0%。方差分析表明,两种病毒复合侵染、AMV、WCMV单独侵染与不带病毒(CK)相比,苜蓿叶绿素、可溶性蛋白含量均显著降低,而3种防御酶过氧化物酶(POD)、多酚氧化酶(PPO)、苯丙氨酸解氨酶(PAL)的活性均显著升高,且两种病毒复合侵染的苜蓿叶绿素、可溶性蛋白含量均低于两种病毒单独侵染;而POD、PPO、PAL均高于两种病毒单独侵染。结果表明AMV、WCMV侵染不同品种苜蓿对其生理生化活性有较大的影响。 展开更多

关键词 苜蓿 苜蓿花叶病毒 白三叶草花叶病毒 带毒情况 叶绿素 防御酶 可溶性蛋白

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苜蓿花叶病毒RT-PCR和RT-qPCR检测技术体系的建立与应用 被引量：7

5

作者 高艳玲 范国权 +6 位作者 程胜群 张威 邱彩玲 申宇 聂先舟 白艳菊 吕文河 《植物保护学报》 CAS CSCD 北大核心 2022年第2期515-527,共13页

为准确检测侵染马铃薯核心种苗和种薯的苜蓿花叶病毒(alfalfa mosaic virus,AMV),以AMV马铃薯分离株为阳性材料,建立AMV RNA 1、RNA 2和RNA 3的反转录-聚合酶链式反应(reverse transcription-polymerase chain reaction,RT-PCR)和基于Ev... 为准确检测侵染马铃薯核心种苗和种薯的苜蓿花叶病毒(alfalfa mosaic virus,AMV),以AMV马铃薯分离株为阳性材料,建立AMV RNA 1、RNA 2和RNA 3的反转录-聚合酶链式反应(reverse transcription-polymerase chain reaction,RT-PCR)和基于EvaGreen及TaqMan探针的反转录实时荧光定量PCR(reverse transcription real-time fluorescent quantitative PCR,RT-qPCR)检测技术,比较3种方法的检测灵敏度,并测定不同马铃薯品种6种组织和桃蚜Myzus persicae、蓟马体内AMV RNA 1、RNA 2和RNA 3的含量。结果表明:建立的TaqMan探针RT-qPCR法对RNA 1和RNA 2的检测灵敏度分别为1.45×10^(1) copies/μL和1.46×10^(1) copies/μL,分别是EvaGreen RT-qPCR法和RT-PCR法的10倍;建立的TaqMan探针RT-qPCR法对RNA 3的检测灵敏度与EvaGreen RT-qPCR法相同,为1.15×10^(2) copies/μL,是RT-PCR法的10倍。丽薯15号6种组织中AMV RNA 1、RNA 2和RNA 3的含量为3.04×10^(6)~1.67×10^(8) copies/μL,以叶片中病毒平均含量最高;中薯21号6种组织中AMV RNA 1、RNA 2和RNA 3的含量为2.94×10^(2)~4.78×10^(8) copies/μL,未发现明显分布规律。蓟马体内AMV RNA 1、RNA 2和RNA 3的含量分别为8.64×10^(4)~4.76×10^(7)、2.13×10^(3)~1.50×10^(5)和8.08×10^(3)~4.96×10^(5) copies/μL,RNA 1的含量高于RNA 2和RNA 3。桃蚜体内AMV RNA 1、RNA 2和RNA 3的含量分别为4.71×10^(3)~3.44×10^(4)、2.22×10^(2)~1.32×10^(5)和5.41×10^(1)~8.08×10^(2) copies/μL,RNA 3的含量最低。表明RT-PCR法、TaqMan探针RT-qPCR法和EvaGreen RT-qPCR法均可有效扩增马铃薯6种组织和2种昆虫中的AMV。 展开更多

关键词 苜蓿花叶病毒 TaqMan探针RT-qPCR EvaGreen RT-qPCR RT-PCR 马铃薯

原文传递

不同症状类型苜蓿病毒病AMV病原检测及其寄主范围测定

6

作者 周建玲 梁巧兰 +5 位作者 魏列新 周其宇 田龙 陈应娥 王存颖 张国印 《草业学报》 CSCD 北大核心 2024年第1期126-137,共12页

为明确采自田间不同症状类型苜蓿病毒病病样中苜蓿花叶病毒(alfalfa mosaic virus,AMV)的带毒情况、症状表现与叶绿素含量的相关性及AMV的寄主范围,本试验通过田间调查采样、症状归类、丙酮乙醇混合液法和双抗体夹心酶联免疫吸附测定(DA... 为明确采自田间不同症状类型苜蓿病毒病病样中苜蓿花叶病毒(alfalfa mosaic virus,AMV)的带毒情况、症状表现与叶绿素含量的相关性及AMV的寄主范围,本试验通过田间调查采样、症状归类、丙酮乙醇混合液法和双抗体夹心酶联免疫吸附测定(DAS-ELISA)法对不同病样的叶绿素和AMV含量进行测定和检测,并对提纯至不同症状类型病样中AMV对9科32种植物的致病性进行测定。结果表明田间苜蓿病毒病病样有轻花叶、重花叶、叶片边缘褪绿黄化型和叶片畸形皱缩花叶矮化型4种症状类型,均带有AMV,且叶绿素含量、AMV含量与症状表现之间具有正相关性,症状表现最严重的叶片畸形皱缩花叶矮化型病样的叶绿素a、b、总叶绿素含量均比对照低58.00%以上,类胡萝卜素含量比对照高134.06%,AMV含量最高,为252.96 pg·mL^(-1);寄主范围测定表明AMV可侵染7科27种植物,对西葫芦致病性最强,症状表现为局部枯斑,30 d时AMV浓度为316.19 pg·mL^(-1)。 展开更多

关键词 苜蓿 病毒病 苜蓿Detection of AMV pathogen of alfalfa virus diseases with different symptom types and its host ranges花叶病毒 寄主植物 叶绿素 致病性 症状表现

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苜蓿花叶病毒和白三叶草花叶病毒复合侵染本氏烟的发病流行因素 被引量：2

7

作者 陈应娥 梁巧兰 +5 位作者 魏列新 王冬 田龙 同发宇 张国印 程守丰 《草业科学》 CAS CSCD 北大核心 2023年第1期90-100,共11页

为明确苜蓿花叶病毒(AMV)和白三叶草花叶病毒(WCMV)在室内条件下复合侵染本氏烟(Nicotiana benthamiana)的发病流行因素,以接种磷酸缓冲盐溶液(PBS)的本氏烟为对照,通过对AMV和WCMV单独接种侵染、复合侵染的不同接种浓度、不同温度和相... 为明确苜蓿花叶病毒(AMV)和白三叶草花叶病毒(WCMV)在室内条件下复合侵染本氏烟(Nicotiana benthamiana)的发病流行因素,以接种磷酸缓冲盐溶液(PBS)的本氏烟为对照,通过对AMV和WCMV单独接种侵染、复合侵染的不同接种浓度、不同温度和相对湿度(RH)对本氏烟发病的影响及本氏烟中两种病毒含量变化进行了研究。结果表明最适合本氏烟发病的AMV和WCMV单独接种浓度分别为20%(AMV:PBS=1:4)和50%(WCMV:PBS=1:1),两种病毒复合侵染接种的浓度为75%和25%(AMV:WCMV=3:1);最适宜发病的温度为25℃、RH为60%,在此条件下,AMV和WCMV复合接种侵染本氏烟的平均病情指数为80.12,比单独接种AMV、WCMV的病情指数分别提高了22.36%、45.28%,其病毒含量是两种病毒单独接种本氏烟中的2.11和1.60倍。综上可见,当温度为25℃、RH为60%以及AMV和WCMV复合侵染接种浓度为75%和25%时,本氏烟发病最严重。 展开更多

关键词 苜蓿花叶病毒 白三叶草花叶病毒 复合侵染 本氏烟 发病条件 接种浓度 温湿度

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基于小RNA深度测序技术的苜蓿病毒病鉴定与分析

8

作者 杜江 马振男 +3 位作者 王晨燕 张丽 王德富 牛颜冰 《草业学报》 CSCD 北大核心 2023年第12期115-125,共11页

紫花苜蓿是一种重要的牧草,然而紫花苜蓿病毒病的侵染严重影响其品质。本研究通过小RNA深度测序技术和RT-PCR/PCR的方法对采自山西农业大学植物园中表现花叶、皱缩、卷曲的紫花苜蓿样品进行病毒病原的鉴定,结果表明病样被苜蓿花叶病毒(A... 紫花苜蓿是一种重要的牧草,然而紫花苜蓿病毒病的侵染严重影响其品质。本研究通过小RNA深度测序技术和RT-PCR/PCR的方法对采自山西农业大学植物园中表现花叶、皱缩、卷曲的紫花苜蓿样品进行病毒病原的鉴定,结果表明病样被苜蓿花叶病毒(AMV)、豌豆线条病毒(PeSV)、苜蓿矮化病毒(ADV)和苜蓿卷叶病毒(ALCV)4种病毒复合侵染。PCR扩增获得了ALCV山西太谷紫花苜蓿分离物SXTG(OP748371)的全基因组序列,分析表明该分离物与ALCV阿根廷紫花苜蓿分离物Colonia Dora(MG792026)的序列相似性最高,达到97.34%。对扩增获得的AMV CP基因(OP748369)核苷酸序列及其编码的氨基酸序列进行序列比对分析显示,AMV山西太谷紫花苜蓿分离物SX与阿根廷紫花苜蓿AMV分离物ACat(MW835977)相似性最高,核苷酸和氨基酸相似性分别为99.24%和99.54%。同样将扩增获得的ADV CP基因序列上传至GenBank获得登录号OP957285,命名为ADV山西太谷紫花苜蓿分离物(SXJZ),通过序列分析表明该分离物与ADV分离物N1(MZ221810)亲缘关系最近,氨基酸序列相似性达到99.43%。进一步对扩增获得的PeSV CP基因编码的氨基酸(OQ108501)进行序列比对分析显示,PeSV山西紫花苜蓿分离物(SXJZ)与其他PeSV分离物CP基因编码的氨基酸相似性达到100%。这是首次从种植于山西的紫花苜蓿上检测到ALCV、ADV、AMV和PeSV的复合侵染,该研究结果有助于深入了解侵染紫花苜蓿的病毒病分子进化,为病毒病的防控提供一定的理论依据。 展开更多

关键词 紫花苜蓿 苜蓿花叶病毒 苜蓿卷叶病毒 苜蓿矮缩病毒 豌豆线条病毒 序列分析

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西藏部分地区紫花苜蓿病毒病病原鉴定

9

作者 常峰华 钟志明 +4 位作者 李凡 朱新强 王明涛 陈功 兰平秀 《草业科学》 CAS CSCD 北大核心 2023年第8期2091-2098,共8页

对西藏自治区扎囊县、达孜县和林芝市部分地区紫花苜蓿(Medicago sativa)病毒病进行调查,发现病毒病在以上地区均有发生,症状表现为花叶、小叶、斑驳、皱缩、红化、黄化等。利用深度测序技术结合RT-PCR,对2020年8月和2021年7月采自扎囊... 对西藏自治区扎囊县、达孜县和林芝市部分地区紫花苜蓿(Medicago sativa)病毒病进行调查,发现病毒病在以上地区均有发生,症状表现为花叶、小叶、斑驳、皱缩、红化、黄化等。利用深度测序技术结合RT-PCR,对2020年8月和2021年7月采自扎囊县、达孜县和林芝市的211份疑似病毒病的紫花苜蓿样品进行检测,发现侵染西藏紫花苜蓿的病毒有苜蓿花叶病毒(AMV)、苜蓿混合病毒1(MsAV1)、苜蓿暂时性线条病毒(LTSV)和黄瓜花叶病毒(CMV)4种,病毒总检出率为31.8%,AMV、MsAV1、LTSV和CMV的检出率分别为17.1%、10.4%、3.3%和5.7%。存在两种病毒复合侵染的现象,检出率分别为AMV+MsAV11.4%、AMV+LSTV 2.4%、CMV+MsAV10.5%、AMV+CMV0.5%。这是MsAV1、AMV和LTSV在西藏地区的首次报道,也是CMV在中国苜蓿上的首次报道,研究结果将为西藏地区紫花苜蓿病毒病的防控提供参考。 展开更多

关键词 紫花苜蓿病毒病 病害调查 病毒鉴定 苜蓿花叶病毒 苜蓿混合病毒1 苜蓿暂时性线条病毒 黄瓜花叶病毒

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苜蓿花叶病毒的研究进展 被引量：6

10

作者 李梅蓉 孙媛 +3 位作者 卢建霖 苏荣 沈并兵 朱芹 《贵州农业科学》 CAS 2019年第4期69-73,共5页

苜蓿花叶病毒(Alfalfa mosaic virus,AMV)是一种世界性分布病毒,其寄主范围广泛,能对多种重要经济作物和豆科牧草造成危害,给畜牧业生产和经济发展带来严重损失。为苜蓿花叶病毒病的防治及深入研究提供理论基础,从AMV的生物学特性、基... 苜蓿花叶病毒(Alfalfa mosaic virus,AMV)是一种世界性分布病毒,其寄主范围广泛,能对多种重要经济作物和豆科牧草造成危害,给畜牧业生产和经济发展带来严重损失。为苜蓿花叶病毒病的防治及深入研究提供理论基础,从AMV的生物学特性、基因组结构、检测及防治方法等方面对其研究现状进行了综述,并对其研究方向进行了展望。 展开更多

关键词 苜蓿 花叶病毒 基因组 检测 防治

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苜蓿花叶病毒复制酶基因的克隆、序列分析及其植物表达载体的构建 被引量：5

11

作者 张竞秋 哈斯阿古拉 +1 位作者 张丽 张鹤龄 《内蒙古大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2003年第5期536-541,共6页

以侵染苜蓿的苜蓿花叶病毒中国分离株(AlfalfamosaicvirusChineseisolate,A1MV-Ch)RNA2为模板,利用人工合成的特异性引物,进行反转录及PCR扩增,分两段分别扩增了复制酶基因的5′端1.32kb和3′端及其非编码区的1.23kbcDNA序列.用限制性... 以侵染苜蓿的苜蓿花叶病毒中国分离株(AlfalfamosaicvirusChineseisolate,A1MV-Ch)RNA2为模板,利用人工合成的特异性引物,进行反转录及PCR扩增,分两段分别扩增了复制酶基因的5′端1.32kb和3′端及其非编码区的1.23kbcDNA序列.用限制性内切酶切割PCR产物后,与pUC19重组,转化大肠杆菌DH5α,筛选重组质粒,用限制性内切酶分析及PCR鉴定,得到分别含有5′端序列和3′端序列的重组质粒,已由上述两种重组质粒构建了含有完整复制酶基因的重组质粒.进行了全序列测定,并与国外报道的A1MV-425株系的相应序列相比较,其复制酶基因编码区核苷酸序列同源性达97.8%,推测的氨基酸序列的同源性达97.6%,3′端非编码区核苷酸序列同源性为98.2%.并将全长复制酶基因与植物表达载体pROK 重组,得植物转化载体pAlMV-FL. 展开更多

关键词 苜蓿花叶病毒 复制酶基因 核苷酸序列 分子克隆

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AMV和WCMV复合侵染对本氏烟4种内源激素的影响

12

作者 田龙 梁巧兰 +2 位作者 魏列新 陈应娥 程守丰 《中国草地学报》 CSCD 北大核心 2023年第11期99-108,共10页

为明确苜蓿花叶病毒(AMV)和白三叶草花叶病毒(WCMV)混合接种协生作用以及对本氏烟中4种内源激素的影响,以接种0.02 mol/L磷酸盐缓冲溶液(PBS,pH 7.0)的本氏烟为空白对照,对AMV+WCMV(3∶1)混合接种本氏烟发病症状以及接种后不同时间本氏... 为明确苜蓿花叶病毒(AMV)和白三叶草花叶病毒(WCMV)混合接种协生作用以及对本氏烟中4种内源激素的影响,以接种0.02 mol/L磷酸盐缓冲溶液(PBS,pH 7.0)的本氏烟为空白对照,对AMV+WCMV(3∶1)混合接种本氏烟发病症状以及接种后不同时间本氏烟中病毒浓度和生长素(IAA)、玉米素核苷(ZR)、赤霉素(GA)、脱落酸(ABA)4种内源激素含量变化进行了研究。结果表明:AMV和WCMV混合接种后,主要表现为接种叶片褪绿、黄化、后期死亡脱落,新生叶变小、卷曲呈圆筒状、叶面呈现畸形皱缩,植株矮化;本氏烟叶中两种病毒浓度在接种后第10 d时最大,比单独接种AMV、WCMV的病毒浓度分别提高了1.70倍和1.48倍,症状加重,表明AMV和WCMV两种病毒存在复合侵染协生作用,WCMV为协生病毒,AMV为被协生病毒;AMV和WCMV混合接种后第2、6、10 d的IAA、ZR、GA含量均显著低于单独接种和对照,ABA含量则显著高于单独接种和对照,在接种后第10 d,混合接种处理的IAA、ZR、GA含量较CK分别降低了59.40%、63.39%、64.56%,而ABA含量提高了287.30%(P<0.01)。综上所述,AMV+WCMV(3∶1)混合接种使本氏烟症状表现加重,病毒浓度增加,显著降低IAA、ZR、GA含量,提高ABA含量。 展开更多

关键词 苜蓿花叶病毒 白三叶草花叶病毒 复合侵染 本氏烟 症状表现 病毒含量 内源激素

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紫花苜蓿种带病毒的检测 被引量：4

13

作者 文朝慧 余玲 王玉青 《草业科学》 CAS CSCD 2018年第11期2704-2710,共7页

为明确甘肃省紫花苜蓿(Medicago sativa)种子携带的主要病毒病原,利用双抗体夹心酶联免疫吸附分析(DASELISA)方法对收集的甘肃省紫花苜蓿种子样品进行检测,并采用RT-PCR方法对DAS-ELISA检测呈阳性的代表性样本进行复检,结果表明,在52份... 为明确甘肃省紫花苜蓿(Medicago sativa)种子携带的主要病毒病原,利用双抗体夹心酶联免疫吸附分析(DASELISA)方法对收集的甘肃省紫花苜蓿种子样品进行检测,并采用RT-PCR方法对DAS-ELISA检测呈阳性的代表性样本进行复检,结果表明,在52份紫花苜蓿种子样品中有45份携带苜蓿花叶病毒(alfalfa mosaic virus,AMV)、3份携带菜豆黄花叶病毒(bean yellow mosaic virus,BYMV),携带AMV和BYMV的样品分别占样品总数的86.5%和5.8%。该地区紫花苜蓿种子携带的病毒为AMV、BYMV。本研究为防治苜蓿病毒病提供了参考。 展开更多

关键词 紫花苜蓿 苜蓿花叶病毒 菜豆黄花叶病毒 种子

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大豆品种对苜蓿花叶病毒的抗性鉴定 被引量：1

14

作者 武晓云 姜雪 +8 位作者 王馨玥 杨英帅 张莹 王宇婷 马廷帅 刘琦 刘鑫磊 栾晓燕 程晓非 《东北农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第2期1-7,共7页

近年来,由苜蓿花叶病毒(alfalfa mosaic virus,AMV)引起的大豆病害在东北地区时有发生,并有流行扩大之势。研究通过病情等级和反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)对197个北方大豆品种进行抗病性筛选。结果表明,AMV可侵染所有测试大豆品种,无对... 近年来,由苜蓿花叶病毒(alfalfa mosaic virus,AMV)引起的大豆病害在东北地区时有发生,并有流行扩大之势。研究通过病情等级和反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)对197个北方大豆品种进行抗病性筛选。结果表明,AMV可侵染所有测试大豆品种,无对AMV完全免疫的抗性品种。综合病情等级和RT-PCR结果,其中30份大豆品种耐病性较好,在两次接种试验中均未表现出明显AMV症状,是AMV流行区域大豆栽培和育种的良好抗性资源。 展开更多

关键词 苜蓿花叶病毒 病情等级 分子检测 抗性 耐病性

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苜蓿花叶病毒ELISA检测方法的建立及其在大豆病毒调查和抗性资源鉴定中的应用

15

作者 战笑蕾 王馨玥 +7 位作者 李小宇 张春雨 刘建青 王晨 王斌 梁雨欣 王永志 程晓非 《植物保护》 CAS CSCD 北大核心 2023年第2期256-263,271,共9页

苜蓿花叶病毒(alfalfa mosaic virus,AMV)是一种世界性分布、宿主范围广、具有严重危害性的植物病毒,能引起大豆的严重病害。本研究利用原核表达的AMV CP蛋白制备的抗血清,建立了高效、准确的AMV间接ELISA检测方法,并应用于病害调查和... 苜蓿花叶病毒(alfalfa mosaic virus,AMV)是一种世界性分布、宿主范围广、具有严重危害性的植物病毒,能引起大豆的严重病害。本研究利用原核表达的AMV CP蛋白制备的抗血清,建立了高效、准确的AMV间接ELISA检测方法,并应用于病害调查和抗性鉴定,结果表明制备的3份抗血清对重组蛋白和AMV感染的大豆植物粗提液的效价均达到256000倍,血清特异性分析结果显示3份抗血清仅识别感染AMV的大豆叶片,不识别感染大豆花叶病毒(soybean mosaic virus,SMV)的大豆叶片。通过建立的AMV间接ELISA与常规RT-PCR同时对采集的50份疑似感染AMV的大豆样品进行检测,有46份样品检测结果一致,符合率达92%。利用建立的AMV ELISA方法和课题组已建立的SMV ELISA方法对吉林省大豆主产区的大豆样品进行病毒检测的结果表明,病毒检出率为38.30%,SMV的检出率达30.85%,AMV的检出率达17.06%,复合侵染率为9.61%。对接种AMV的40个大豆品种进行抗性鉴定,结果显示40份大豆全部感染AMV,但是病毒载量存在差异,部分品种表现出AMV抗性,其中大豆抗性资源11份,首次发现AMV造成的大豆病害已经成为吉林省大豆的主要病害之一。 展开更多

关键词 大豆 苜蓿花叶病毒 抗性鉴定 间接ELISA

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凤仙花花叶病的病原鉴定 被引量：2

16

作者 吴婷婷 马凯歌 +3 位作者 包程伟 栾奕 张艳敬 高洁 《植物病理学报》 CAS CSCD 北大核心 2022年第2期291-295,共5页

0引言凤仙花(Impatiens balsamina)为凤仙花科(Balsaminaceae)凤仙花属(Impatiens)一年生草本植物,在我国大部分地区均有分布。栽培过程中凤仙花真菌病害主要有白粉病、褐斑病、炭疽病和立枯病等[1-2]。有关凤仙花病毒病的报道,如番茄... 0引言凤仙花(Impatiens balsamina)为凤仙花科(Balsaminaceae)凤仙花属(Impatiens)一年生草本植物,在我国大部分地区均有分布。栽培过程中凤仙花真菌病害主要有白粉病、褐斑病、炭疽病和立枯病等[1-2]。有关凤仙花病毒病的报道,如番茄斑萎病毒(tomato spotted wilt virus,TSWV)[3]、凤仙花坏死斑点病毒(impatiens necrotic spot virus,INSV)[4]、黄瓜花叶病毒(cucumber mosaic virus,CMV)[5-6]、烟草花叶病毒(tobacco mosaic virus,TMV)[7]、番茄花叶病毒(tomato mosaic virus,ToMV)[8]、长叶车前花叶病毒(ribgrass mosaic virus,RMV)[9]等均可侵染凤仙花。 展开更多

关键词 烟草花叶病毒 黄瓜花叶病毒 番茄斑萎病毒 番茄花叶病毒 凤仙花 病原鉴定 立枯病

原文传递

苜蓿花叶病毒侵染对菜豆胁迫响应基因表达的影响 被引量：2

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作者 张玉秀 柴团耀 《园艺学报》 CAS CSCD 北大核心 1998年第4期394-401,共8页

苜蓿花叶病毒（ＡｌｆａｌｆａＭｏｓａｉｃＶｉｒｕｓＡＭＶ）侵染菜豆（ＰｈａｓｅｏｌｕｓｖｕｌｇａｒｉｓＬ．）叶片后，能强烈地诱导病程相关蛋白ＰＲ２基因的表达，促进富含脯氨酸细胞壁蛋白、ｄｅｈｙｄｒｉｎ、ｐｏｌｙｕｂｉ... 苜蓿花叶病毒（ＡｌｆａｌｆａＭｏｓａｉｃＶｉｒｕｓＡＭＶ）侵染菜豆（ＰｈａｓｅｏｌｕｓｖｕｌｇａｒｉｓＬ．）叶片后，能强烈地诱导病程相关蛋白ＰＲ２基因的表达，促进富含脯氨酸细胞壁蛋白、ｄｅｈｙｄｒｉｎ、ｐｏｌｙｕｂｉｑｕｉｔｉｎ和ＤａｎＪｌｉｋｅ蛋白等基因的转录水平。这些防御蛋白共同作用对于保护细胞免受病毒伤害和维持细胞的正常代谢有重要作用。 展开更多

关键词 苜蓿花叶病毒 菜豆 胁迫响应基因

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苜蓿花叶病毒粒子的统计学特征和分组 被引量：1

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作者 陈集双 冯明光 《浙江大学学报（农业与生命科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2000年第5期477-482,共6页

以一株来自于白车根草 (Trifolium repens L.)上的苜蓿花叶病毒分离物 AMV- SY为材料 ,在电镜下观察测量经醋酸铀负染的 196个提纯病毒粒子 ,按其长度分成等距离的 5个组 ,用统计分析方法确定组间的差异 .所得各组粒子的平均大小依次是... 以一株来自于白车根草 (Trifolium repens L.)上的苜蓿花叶病毒分离物 AMV- SY为材料 ,在电镜下观察测量经醋酸铀负染的 196个提纯病毒粒子 ,按其长度分成等距离的 5个组 ,用统计分析方法确定组间的差异 .所得各组粒子的平均大小依次是组 :(2 0 .4± 2 .5) nm× (18.7± 2 .3) nm,组 :(2 8.0± 2 .4 ) nm× (18.1± 2 .1) nm,组 :(36 .0± 2 .4 ) nm× (17.2± 2 .0 ) nm,组 :(4 4 .8± 2 .7)nm× (16 .9± 2 .0 ) nm,组 :(52 .0± 3.0 ) nm× (17.4± 1.0 ) nm.它们分别相当于前人根据 X-射线衍射或核磁共振所测定的 Ta- t,Ta- b,Tb,M和 B型病毒粒子 .方差分析表明 ,5组病毒粒子间长度差异极显著 ,即组 <组 <组 <组 <组 ;病毒粒子宽度差异也极显著 ,但仅组 粒子的宽度明显大于组 和组 ,说明在没有病毒 RNA参与的情况下 ,单由不含病毒 RNA的外壳蛋白亚基所构成的粒子其横向结构较为松散 .对 AMV统计分析的结果与前人根据对病毒粒子结晶中典型的粒子进行 X射线衍射分析或计算机模拟所获得的结果基本吻合 ,但组 粒子 ,即最长一组 AMV病毒粒子的统计长度明显小于结晶中 X-射线衍射分析所测得最长的 展开更多

关键词 苜蓿花叶病毒 病毒粒子 统计分组 白车根草

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苜蓿花叶病毒复制酶基因全长cDNA植物表达载体的构建和对烟草的转化 被引量：1

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作者 张竞秋 邢燕平 哈斯阿古拉 《内蒙古大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2004年第4期423-427,共5页

将苜蓿花叶病毒中国分离株(AlfalfamosaicvirusChineseisolate,A1MV-Ch)的复制酶P2亚基(90kD蛋白)基因的全长cDNA构建到植物表达载体pROK 中,得到重组植物表达载体pAlMV-FL.用三亲融合法导入农杆菌LBA4404,并转化烟草,经PCR检测,获得了... 将苜蓿花叶病毒中国分离株(AlfalfamosaicvirusChineseisolate,A1MV-Ch)的复制酶P2亚基(90kD蛋白)基因的全长cDNA构建到植物表达载体pROK 中,得到重组植物表达载体pAlMV-FL.用三亲融合法导入农杆菌LBA4404,并转化烟草,经PCR检测,获得了含全长cDNA的转基因烟草植株. 展开更多

关键词 苜蓿花叶病毒 复制酶基因 植物表达载体 转基因

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应用微机进行苜蓿花叶病毒株系分类的研究

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作者 李毅 魏宁生 张文军 《西北农林科技大学学报（自然科学版）》 CSCD 1990年第1期48-53,共6页

应用主成分分析和模糊聚类法在微机上研究了苜蓿花叶病毒毒株的分类问题。结果表明,H-10分离物与苜蓿花叶典型株系完全相同,属同一株系。Wc分离物自成一株系且与黄化斑块株系最接近。这些结果得到血清方法的证实,并部分得到病毒外壳蛋... 应用主成分分析和模糊聚类法在微机上研究了苜蓿花叶病毒毒株的分类问题。结果表明,H-10分离物与苜蓿花叶典型株系完全相同,属同一株系。Wc分离物自成一株系且与黄化斑块株系最接近。这些结果得到血清方法的证实,并部分得到病毒外壳蛋白AA分析的证实。 展开更多

关键词 苜蓿花叶病毒 病毒株系 分类学 计算机应用

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