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红外荧光素Alexa Fluor 647标记的2型腺相关病毒保持天然的感染活性
被引量：
3
1
作者
贾书勤
张凤兰
丁卫
《中国生物化学与分子生物学报》
CAS
CSCD
北大核心
2008年第12期1152-1157,共6页
近年来红外荧光素的研发及相应的标记技术的进展在生物医学领域的研究中备受关注,通过与尖端仪器的结合在一系列生物样本的检测中得到广泛的应用.然而,红外荧光标记技术在病毒感染生物学研究中的应用却少见报道.本文建立了Alexa Fluor 6...
近年来红外荧光素的研发及相应的标记技术的进展在生物医学领域的研究中备受关注,通过与尖端仪器的结合在一系列生物样本的检测中得到广泛的应用.然而,红外荧光标记技术在病毒感染生物学研究中的应用却少见报道.本文建立了Alexa Fluor 647(AF647)红外荧光素标记重组2型腺相关病毒(AAV2)的方法,并通过凝胶电泳的银染、红外荧光成像和透射电镜分析等手段,对标记病毒的结构和形态与未标记的病毒进行了细致的比较,同时进一步鉴定了其感染293T细胞后的转导活性.结果发现,AAV2在标记后的理化性质和感染活性均未发生改变.应用狭缝印迹和激光共聚焦显微成像技术,分别对标记病毒的细胞摄取效率和在宿主细胞内的分布进行描述,为红外标记AAV2在研究中的应用提供了范例.AF647标记的AAV2为腺相关病毒的感染动力学研究提供了新的手段,具有敏感度高、抗荧光漂白和低非特异干扰等优点,并且对直接有效地结合形态学分析和生化分子生物学检测,具有重要的应用价值.
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关键词
腺相关病毒
荧光标记
alexa
fluor
647
红外成像
下载PDF
职称材料
荧光自相关光谱技术检测抗原抗体亲和力
2
作者
骆亚梅
蹇林
+6 位作者
罗浩奇
黄科赢
张沃伦
王柱楼
张会芝
肖茜
黄韶辉
《光学学报》
EI
CAS
CSCD
北大核心
2021年第17期207-218,共12页
本文对荧光自相关光谱(FACS)技术作为免疫分析技术的具体实现和潜在应用进行探究。实验分别以Alexa Fluor647荧光分子和绿色荧光蛋白抗原与抗体相互作用为模型,利用一款桌面式荧光相关光谱仪分别采集荧光分子抗原与不同浓度抗体混合液...
本文对荧光自相关光谱(FACS)技术作为免疫分析技术的具体实现和潜在应用进行探究。实验分别以Alexa Fluor647荧光分子和绿色荧光蛋白抗原与抗体相互作用为模型,利用一款桌面式荧光相关光谱仪分别采集荧光分子抗原与不同浓度抗体混合液的荧光自相关数据。将传统FACS技术与最大熵值法相结合,我们可以对抗原-抗体结合程度进行定量和定性评估。使用自主开发的数据分析软件对采集的荧光自相关数据进行分析以获取抗原-抗体解离常数。实验结果表明,FACS技术应用于抗原-抗体亲和力检测,具有简便、快速、灵敏的特点;检测限在皮摩尔和纳摩尔之间;模块化的数据分析软件可标准化操作流程、提高数据分析准确性和可重复性。
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关键词
光谱学
荧光自相关光谱
最大熵值法
荧光免疫分析技术
解离常数
alexa
fluor
647
绿色荧光蛋白
原文传递
题名
红外荧光素Alexa Fluor 647标记的2型腺相关病毒保持天然的感染活性
被引量：
3
1
作者
贾书勤
张凤兰
丁卫
机构
首都医科大学生物化学与分子生物学系
出处
《中国生物化学与分子生物学报》
CAS
CSCD
北大核心
2008年第12期1152-1157,共6页
基金
北京市属市管高等学校人才强教计划(No.BAHED2007-2008)
国家自然科学基金项目(No.30771062)资助~~
文摘
近年来红外荧光素的研发及相应的标记技术的进展在生物医学领域的研究中备受关注,通过与尖端仪器的结合在一系列生物样本的检测中得到广泛的应用.然而,红外荧光标记技术在病毒感染生物学研究中的应用却少见报道.本文建立了Alexa Fluor 647(AF647)红外荧光素标记重组2型腺相关病毒(AAV2)的方法,并通过凝胶电泳的银染、红外荧光成像和透射电镜分析等手段,对标记病毒的结构和形态与未标记的病毒进行了细致的比较,同时进一步鉴定了其感染293T细胞后的转导活性.结果发现,AAV2在标记后的理化性质和感染活性均未发生改变.应用狭缝印迹和激光共聚焦显微成像技术,分别对标记病毒的细胞摄取效率和在宿主细胞内的分布进行描述,为红外标记AAV2在研究中的应用提供了范例.AF647标记的AAV2为腺相关病毒的感染动力学研究提供了新的手段,具有敏感度高、抗荧光漂白和低非特异干扰等优点,并且对直接有效地结合形态学分析和生化分子生物学检测,具有重要的应用价值.
关键词
腺相关病毒
荧光标记
alexa
fluor
647
红外成像
Keywords
adeno-associated
virus
（AAV）
fluor
escent
labeling
alexa
fluor
647
Infrared
imaging
分类号
Q786 [生物学—分子生物学]
下载PDF
职称材料
题名
荧光自相关光谱技术检测抗原抗体亲和力
2
作者
骆亚梅
蹇林
罗浩奇
黄科赢
张沃伦
王柱楼
张会芝
肖茜
黄韶辉
机构
中国科学院生物物理研究所交叉科学实验室
广东中科奥辉科技有限公司
中国科学院大学
出处
《光学学报》
EI
CAS
CSCD
北大核心
2021年第17期207-218,共12页
基金
国家自然科学基金面上项目(21874147)。
文摘
本文对荧光自相关光谱(FACS)技术作为免疫分析技术的具体实现和潜在应用进行探究。实验分别以Alexa Fluor647荧光分子和绿色荧光蛋白抗原与抗体相互作用为模型,利用一款桌面式荧光相关光谱仪分别采集荧光分子抗原与不同浓度抗体混合液的荧光自相关数据。将传统FACS技术与最大熵值法相结合,我们可以对抗原-抗体结合程度进行定量和定性评估。使用自主开发的数据分析软件对采集的荧光自相关数据进行分析以获取抗原-抗体解离常数。实验结果表明,FACS技术应用于抗原-抗体亲和力检测,具有简便、快速、灵敏的特点;检测限在皮摩尔和纳摩尔之间;模块化的数据分析软件可标准化操作流程、提高数据分析准确性和可重复性。
关键词
光谱学
荧光自相关光谱
最大熵值法
荧光免疫分析技术
解离常数
alexa
fluor
647
绿色荧光蛋白
Keywords
spectroscopy
fluor
escence
auto-correlation
spectroscopy
maximum
entropy
method
fluor
escence
immunoassay
dissociation
constant
alexa
fluor
647
green
fluor
escent
protein
分类号
Q631 [生物学—生物物理学]
原文传递
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
红外荧光素Alexa Fluor 647标记的2型腺相关病毒保持天然的感染活性
贾书勤
张凤兰
丁卫
《中国生物化学与分子生物学报》
CAS
CSCD
北大核心
2008
3
下载PDF
职称材料
2
荧光自相关光谱技术检测抗原抗体亲和力
骆亚梅
蹇林
罗浩奇
黄科赢
张沃伦
王柱楼
张会芝
肖茜
黄韶辉
《光学学报》
EI
CAS
CSCD
北大核心
2021
0
原文传递
已选择
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参考文献
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