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重组白蛋白结合肽融合人白介素-11的原核可溶表达、纯化、表征及初步活性评价
1
作者 孟奂 粟乙梵 +4 位作者 王洒 张淑雯 郑永祥 余蓉 张纯 《中国生物工程杂志》 CAS CSCD 北大核心 2023年第7期44-52,共9页
目的:改善重组人白介素-11在原核表达体系中的可溶表达水平以及在体内的循环半衰期。方法:通过构建白蛋白结合肽融合人白介素-11重组蛋白表达载体[pET-30a(+)-ABD-rhIL11],实现融合蛋白在原核表达体系中的可溶表达;基于疏水层析、离子... 目的:改善重组人白介素-11在原核表达体系中的可溶表达水平以及在体内的循环半衰期。方法:通过构建白蛋白结合肽融合人白介素-11重组蛋白表达载体[pET-30a(+)-ABD-rhIL11],实现融合蛋白在原核表达体系中的可溶表达;基于疏水层析、离子交换层析和凝胶层析建立从破菌上清液中纯化ABD-rhIL-11的方法;通过圆二色光谱及荧光发射光谱分析等鉴定ABD-rhIL-11空间结构,并进行体内外活性及药效学评价。结果:成功获得纯度高于95%的重组融合蛋白,体外结合实验结果表明,ABD-rhIL-11能够迅速与人血清白蛋白(human serum albumin,HSA)结合;细胞增殖实验结果显示,ABD-rhIL-11与对照品活性相当;药代动力学结果显示,融合蛋白能够显著延长白介素-11在大鼠体内的循环半衰期;血小板计数实验结果显示,ABD-rhIL-11能够有效刺激大鼠血小板增殖。结论:为基于白蛋白结合肽融合策略的白介素-11药物长效设计提供了新的思路。 展开更多
关键词 人白介素-11 白蛋白结合肽 可溶表达 血小板增殖
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白蛋白结合肽-多柔比星耦合物的设计、制备、表征及初步评价
2
作者 刘立平 张纯 +5 位作者 殷爽 王祺 张耀 余蓉 刘永东 苏志国 《中国生物工程杂志》 CAS CSCD 北大核心 2017年第4期68-75,共8页
为了改善多柔比星在血液中的循环半衰期,基于白蛋白在血浆中含量丰富、性质稳定、半衰期持久的特点,通过大肠杆菌体系重组表达了源于细菌表面蛋白中白蛋白结合肽段,并建立了纯化工艺,获得了纯度高于95%的重组白蛋白结合多肽,并证明重组... 为了改善多柔比星在血液中的循环半衰期,基于白蛋白在血浆中含量丰富、性质稳定、半衰期持久的特点,通过大肠杆菌体系重组表达了源于细菌表面蛋白中白蛋白结合肽段,并建立了纯化工艺,获得了纯度高于95%的重组白蛋白结合多肽,并证明重组多肽在体外能够迅速地与人血清白蛋白结合。通过与DOXO-EMCH分子化学耦联,制备获得重组白蛋白结合肽-多柔比星耦合物。A549细胞毒力实验结果显示耦合物的IC50浓度升高,药代动力学结果显示重组白蛋白结合肽能够显著延长多柔比星在血液中的循环半衰期,相对于多柔比星或DOXO-EMCH分别提高了5.6倍和3.8倍。荷瘤小鼠肿瘤生长抑制实验结果显示耦合物的抗肿瘤效力得到提升。证明了基于白蛋白结合机制可为小分子药物长效设计提供新的思路。 展开更多
关键词 多柔比星 白蛋白结合肽 血清白蛋白 长效性 抗肿瘤
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人血清白蛋白在蛋白多肽类药物长效化中的应用 被引量：11
3
作者 徐欢 周美玲 +1 位作者 葛琳 王志明 《中国生物工程杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第1期82-89,共8页
重组蛋白/多肽类药物在人体血清内半衰期较短,很大程度上限制了其临床应用。人血清白蛋白(HSA)具有半衰期长、生物相容性好、低免疫原性等优点,是理想的药物载体。各种基于HSA的蛋白质药物长效化技术得到了广泛的应用和发展,目前主要包... 重组蛋白/多肽类药物在人体血清内半衰期较短,很大程度上限制了其临床应用。人血清白蛋白(HSA)具有半衰期长、生物相容性好、低免疫原性等优点,是理想的药物载体。各种基于HSA的蛋白质药物长效化技术得到了广泛的应用和发展,目前主要包括构建HSA融合蛋白,通过共价化学键与HSA偶联,通过非共价键与HSA可逆性结合。总结了近年来基于白蛋白药物长效化技术的发展,各项技术的优缺点及药物开发现状。 展开更多
关键词 白蛋白融合 连接肽 化学偶联 脂肪酸修饰 白蛋白结合肽
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