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发根农杆菌对短叶红豆杉的转化及毛状根中紫杉醇的产生 被引量：58
1
作者 黄遵锡 慕跃林 +5 位作者 周玉敏 陈文久 许坤一 余尊祥 卞云萍 杨桂仙 《云南植物研究》 CAS CSCD 1997年第3期292-296,共5页
发根农杆菌（Ａｇｒｏｂａｃｔｅｒｉｕｍｒｈｉｚｏｇｅｎｅｓ）Ａ４（ＡＴＣＣ３１７８９）感染短叶红豆杉（Ｔａｘｕｓｂｒｅｖｉｆｏｌｉ－ａ）芽外植体，３０～３５ｄ后可诱导出毛状根，４０ｄ后转化率可达３０％，毛状根经农杆碱... 发根农杆菌（Ａｇｒｏｂａｃｔｅｒｉｕｍｒｈｉｚｏｇｅｎｅｓ）Ａ４（ＡＴＣＣ３１７８９）感染短叶红豆杉（Ｔａｘｕｓｂｒｅｖｉｆｏｌｉ－ａ）芽外植体，３０～３５ｄ后可诱导出毛状根，４０ｄ后转化率可达３０％，毛状根经农杆碱单克隆抗体酶联免疫分析，证明已被转化。毛状根生长速度较快，５株毛状根在无激素的Ｂ５液体培养基中悬浮培养２０ｄ，生物量平均增加约９倍，是同等条件下短叶红豆杉愈伤组织液体悬浮培养的２．９倍。经紫杉醇单克隆抗体酶联免疫反应检测，毛状根中含有紫杉醇，其含量为短叶红豆杉愈伤组织的１．３～８．０倍，悬浮培养过程中，毛状根也向培养液中分泌０．０１～０．０３ｍｇ／Ｌ的紫杉醇。 展开更多
关键词 短叶红豆杉 紫杉醇 发根农杆菌 毛状根培养
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何首乌毛状根培养及其活性成分的产生 被引量：61
2
作者 王莉 于荣敏 +1 位作者 张辉 程克棣 《生物工程学报》 CAS CSCD 北大核心 2002年第1期69-73,共5页
利用发根农杆菌LBA940 2诱导药用植物何首乌产生毛状根。PCR扩增和Southern印迹杂交实验证实发根农杆菌中Ri质粒的T DNA片段已整合进入植物核基因组中。经过基本培养基的筛选和毛状根生长动力学的考察 ,确立了何首乌毛状根在MS培养基中... 利用发根农杆菌LBA940 2诱导药用植物何首乌产生毛状根。PCR扩增和Southern印迹杂交实验证实发根农杆菌中Ri质粒的T DNA片段已整合进入植物核基因组中。经过基本培养基的筛选和毛状根生长动力学的考察 ,确立了何首乌毛状根在MS培养基中的最佳继代时间为 30d左右。HPLC实验测定结果显示 ,毛状根培养物中大黄酸的含量是原植物的 2 展开更多
关键词 何首乌 毛状根培养 活性成分 发根农杆菌 蒽醌类化合物 诱导
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Ri质粒人参转化系统的建立及鉴定 被引量：53
3
作者 刘峻 丁家宜 +1 位作者 徐红 王建波 《中国中药杂志》 CAS CSCD 北大核心 2001年第2期95-99,共5页
目的 :建立人参毛状根转化体系。方法 :利用含有Ri质粒的发根农杆菌Agrobacteriumrhizogenes感染人参Panaxginseng进行毛状根诱导 ,利用PCR技术及TLC分析方法对毛状根进行鉴定。 结果 :首次从人参带叶幼茎处诱导出毛状根 ,用激素和AS(... 目的 :建立人参毛状根转化体系。方法 :利用含有Ri质粒的发根农杆菌Agrobacteriumrhizogenes感染人参Panaxginseng进行毛状根诱导 ,利用PCR技术及TLC分析方法对毛状根进行鉴定。 结果 :首次从人参带叶幼茎处诱导出毛状根 ,用激素和AS(乙酰丁香酮 )处理可提高转化率并缩短转化时间。毛状根在无激素B5培养基上生长并失去向地性 ,月增长倍数可达 5 0倍 (鲜重 )。PCR分析证实农杆菌Ri质粒含有rolC序列 (5 6 4bp)的T DNA已整合到人参转化株的染色体组中 ,TLC分析证明T DNA特异的表达产物冠瘿碱在转化细胞中合成。人参毛状根中人参总皂苷含量为 2 .486 % (干重 ) ,而人参原药材总皂苷含量为 1.40 3% (干重 )。结论 :人参毛状根生长迅速 ,皂苷含量高于原药材 ,该体系的建立为利用生物技术工业化生产人参活性成分奠定了基础。 展开更多
关键词 RI质粒 人参 毛状根转化系统 鉴定 聚合酶链反应
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新疆雪莲毛状根的诱导及其植株再生体系的建立 被引量：38
4
作者 付春祥 金治平 +2 位作者 杨睿 吴风燕 赵德修 《生物工程学报》 CAS CSCD 北大核心 2004年第3期366-371,共6页
利用发根农杆菌R16 0 1、R10 0 0、LBA94 0 2感染新疆雪莲的叶片、叶柄和根段外植体 ,诱导产生毛状根。毛状根接种量为 2 8g L(FW)时 ,2 0d生长量可达 6 6 7g L ,黄酮含量达到干重的 10 2 3%。冠瘿碱的检测和rolB基因的PCR分析表明 ... 利用发根农杆菌R16 0 1、R10 0 0、LBA94 0 2感染新疆雪莲的叶片、叶柄和根段外植体 ,诱导产生毛状根。毛状根接种量为 2 8g L(FW)时 ,2 0d生长量可达 6 6 7g L ,黄酮含量达到干重的 10 2 3%。冠瘿碱的检测和rolB基因的PCR分析表明 ,Ri质粒中的T_DNA片段已经整合到毛状根细胞的基因组中。预培养时间、外植体类型以及发根农杆菌的菌株属性对毛状根诱导有着重要的影响。其中预培养 2d的新疆雪莲根段外植体 ,经过R16 0 1感染后 ,毛状根的诱导率可达 10 0 %。诱导产生的毛状根在附加生长素的液体培养基中 ,有少量愈伤组织产生。由毛状根再生的植株与雪莲外植体再生的植株在形态上无明显区别 ,但前者的黄酮含量仅为后者的 5 3%。 展开更多
关键词 新疆雪莲 发根农杆菌 毛状根 黄酮
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宁夏枸杞发根农杆菌转化系的建立及影响转化因素的研究 被引量：29
5
作者 胡忠 杨军 +1 位作者 郭光沁 郑国锠 《西北植物学报》 CAS CSCD 2000年第5期766-771,共6页
以发根农杆菌 A4 菌株介导 ,对宁夏枸杞叶片和茎切段的遗传转化进行了初步研究 ,建立了发状根体系 ,并优化了转化条件。乙酰丁香酮的添加、农杆菌液的浓度、共培养时间、外植体取材部位及时间 ,均可以影响发状根的诱导频率。采用添加 1 ... 以发根农杆菌 A4 菌株介导 ,对宁夏枸杞叶片和茎切段的遗传转化进行了初步研究 ,建立了发状根体系 ,并优化了转化条件。乙酰丁香酮的添加、农杆菌液的浓度、共培养时间、外植体取材部位及时间 ,均可以影响发状根的诱导频率。采用添加 1 0 0 μmol/L的乙酰丁香酮、振荡培养 2 4 h的 A4 菌液感染 3周龄的叶片切段 ,并共培养 3d,可以得到最佳的转化效果 ,发状根的诱导率为 48.9%。在同样的转化条件下 ,只有 1 3.6%的茎切段上能诱导出发状根。在感染菌液之前 ,外植体预培养 3d对发状根的诱导也有一定的促进作用。 展开更多
关键词 宁夏枸杞 发根农杆菌 转化系 发状根
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膜荚黄芪毛状根培养系统的建立和外界因子对其生长的影响 被引量：25
6
作者 胡之璧 郑志仁 +1 位作者 李幸平 刘涤 《Acta Botanica Sinica》 CSCD 1998年第5期448-452,共5页
建立了由发根农杆菌（Ａｇｒｏｂａｃｔｅｒｉｕｍｒｈｉｚｏｇｅｎｅｓ）感染膜荚黄芪（Ａｓｔｒａｇａｌｕｓｍｅｍｂｒａｎａｃｅｕｓ（Ｆｉｓｃｈ．）Ｂｇｅ．）叶片外植体形成的毛状根培养系统并研究了外界因子对其生长的影响。Ｍ... 建立了由发根农杆菌（Ａｇｒｏｂａｃｔｅｒｉｕｍｒｈｉｚｏｇｅｎｅｓ）感染膜荚黄芪（Ａｓｔｒａｇａｌｕｓｍｅｍｂｒａｎａｃｅｕｓ（Ｆｉｓｃｈ．）Ｂｇｅ．）叶片外植体形成的毛状根培养系统并研究了外界因子对其生长的影响。ＭＳ基本培养基（无激素）适合于黄芪毛状根的生长，但是由于ＮＨ４ＮＯ３具有抑制作用而被省略。３％的蔗糖和培养基ｐＨ６适宜毛状根生长。光抑制毛状根生长。每天１２ｈ的１５℃处理对黄芪毛状根生长的影响不明显。与黄芪药用根生物活性成分比较表明，毛状根组织含有较多的粗皂甙和可溶性多糖。讨论了毛状根培养技术在中药材生产中的应用和潜力。 展开更多
关键词 膜荚黄芪 发根农杆菌 毛状根 体外培养 生物活性成分
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少花龙葵毛状根的诱导和次生代谢物的产生 被引量：25
7
作者 龚玉莲 施和平 +1 位作者 李玲 潘瑞炽 《热带亚热带植物学报》 CAS CSCD 北大核心 2002年第1期58-62,T001,共6页
研究了发根农杆菌(Agrobacteriumrhizogenes)对少花龙葵(Solanumphoteinocarpum)的转化和毛状根的诱导,分析了影响转化的因素,并初步检测了毛状根的生长和次生代谢物的产生。发根农杆菌菌株R1000、R1601分别感染少花龙葵的叶片、茎段,... 研究了发根农杆菌(Agrobacteriumrhizogenes)对少花龙葵(Solanumphoteinocarpum)的转化和毛状根的诱导,分析了影响转化的因素,并初步检测了毛状根的生长和次生代谢物的产生。发根农杆菌菌株R1000、R1601分别感染少花龙葵的叶片、茎段,约7d后得到毛状根。菌株R1000感染的外植体的生根率分别为90.2%和50.0%,根诱导频率分别为6.2和4.6;菌株R1601感染的外植体的生根率分别为92.1%和49.2%,根诱导频率分别为6和5.5;对照两周内不出根。冠瘿碱检测证实所得毛状根为转化根。感染在MS+PP333培养基上生长的矮壮苗叶片,毛状根诱导频率显著提高;用MS液体培养基稀释1倍的菌液感染叶片,转化效率也得到提高。毛状根生长速度快,培养4周后干重增加420倍,总糖苷生物碱和皂甙含量分别为原植株根的31和107倍。 展开更多
关键词 发根农杆菌 少花龙葵 毛状根 次生代谢物 诱导 中草药
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商陆毛状根的诱导、培养及其皂甙的产生 被引量：17
8
作者 施和平 梁朋 权宏 《生物工程学报》 CAS CSCD 北大核心 2003年第1期46-49,共4页
发根农杆菌 (Agrobacteriumrhizogenes)R16 0 1感染商陆叶片外植体 1周后 ,在其切口处产生毛状根 ,2 0d后产生毛状根的外植体比例达 70 % ;毛状根可直接从叶片外植体叶脉处或从叶脉处产生的愈伤组织上产生。毛状根能在无激素的MS培养基... 发根农杆菌 (Agrobacteriumrhizogenes)R16 0 1感染商陆叶片外植体 1周后 ,在其切口处产生毛状根 ,2 0d后产生毛状根的外植体比例达 70 % ;毛状根可直接从叶片外植体叶脉处或从叶脉处产生的愈伤组织上产生。毛状根能在无激素的MS培养基上自主生长 ,其呼吸速率比对照根提高 85 6 %。冠瘿碱检测和PCR扩增结果表明 ,发根农杆菌RiT DNA的冠瘿碱合成酶基因及其Ri质粒的rol基因均已在商陆毛状根基因组中得到表达。毛状根中总皂甙含量约为自然根的 1 5 4倍 ,但其多糖含量则仅为非转化根的 70 %。 展开更多
关键词 商陆 毛状根 诱导 培养 皂甙
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人参发根的诱导及其适宜培养条件的研究 被引量：30
9
作者 赵寿经 李昌禹 +4 位作者 钱延春 骆晓佩 张昕 王雪松 康波愈 《生物工程学报》 CAS CSCD 北大核心 2004年第2期215-220,共6页
利用发根农杆菌A4 菌株在人参根外植体上直接诱导产生发根。在 1 2MS固体培养基上建立起发根离体培养系 ,经连续多代的培养 ,发根仍保持旺盛生长状态。PCR扩增结果表明 ,发根农杆菌Ri 质粒的rolC基因已在人参发根基因组中整合并得到表... 利用发根农杆菌A4 菌株在人参根外植体上直接诱导产生发根。在 1 2MS固体培养基上建立起发根离体培养系 ,经连续多代的培养 ,发根仍保持旺盛生长状态。PCR扩增结果表明 ,发根农杆菌Ri 质粒的rolC基因已在人参发根基因组中整合并得到表达。液体培养基中发根生长速度约为固体培养的 2倍。经对发根中人参皂苷含量及比生长速率的测定 ,筛选出高产发根系R992 3。利用HPLC法测定了R992 3发根系中单体皂苷Rg1、Re、Rf、Rb1、Rc、Rb2和Rd的含量 ,人参总皂苷含量达 15 2mg g。确定 1 2MS培养液 (3 0g L蔗糖 )、摇床转速 110r min、每 2周更换一次培养液、继代培养时间 4周 ,为人参发根生长适宜条件。探讨了培养容积。 展开更多
关键词 发根农杆菌 人参 根外植体 诱导 固体培养基 质粒 基因 整合 表达 人参皂苷
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发根农杆菌介导的药用植物遗传转化研究进展 被引量：23
10
作者 陈敏 王和勇 +1 位作者 廖志华 孙敏 《天然产物研究与开发》 CAS CSCD 2000年第3期98-102,共5页
发根农杆菌介导的植物遗传转化是近年来发展起来的一项新的植物遗传转化技术。本文就发根农杆菌 Ri质粒的结构、发根农杆菌介导的植物遗传转化的方法和步骤 。
关键词 发根农杆菌 R1质粒 毛状根 药用植物 遗传转化
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超声波辅助发根农杆菌对黄瓜遗传转化的影响 被引量：21
11
作者 姚春娜 王亚馥 《园艺学报》 CAS CSCD 北大核心 2001年第1期80-82,共3页
由于超声波处理可增加农杆菌与外植体之间的接触面积 ,提高农杆菌对外植体的转化频率。本试验用野生型发根农杆菌A4菌株感染黄瓜无菌苗的子叶和下胚轴 ,建立了黄瓜的发根遗传体系。并对超声波处理时间、外植体放置方向、预培养时间、外... 由于超声波处理可增加农杆菌与外植体之间的接触面积 ,提高农杆菌对外植体的转化频率。本试验用野生型发根农杆菌A4菌株感染黄瓜无菌苗的子叶和下胚轴 ,建立了黄瓜的发根遗传体系。并对超声波处理时间、外植体放置方向、预培养时间、外植体类型、乙酰丁香酮等影响因素进行了优化。 展开更多
关键词 农杆菌 黄瓜 超声波 发根 遗传转化
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发根土壤杆菌对葛属药用植物的遗传转化 被引量：22
12
作者 刘传飞 于树宏 +2 位作者 李玲 施和平 潘瑞炽 《Acta Botanica Sinica》 SCIE CAS CSCD 2000年第9期936-939,共4页
葛根是传统中药。利用发根土壤杆菌 (Agrobacteriumrhizogenes (Rikeretal.)Conn)R16 0 1转化野葛 (Puerarialobata (Willd .)Ohwi)、山葛 (P .lobatavar.montana)和三裂叶野葛 (P .phaseoloides (Roxb .)Benth .)离体叶片 ,在叶片表面... 葛根是传统中药。利用发根土壤杆菌 (Agrobacteriumrhizogenes (Rikeretal.)Conn)R16 0 1转化野葛 (Puerarialobata (Willd .)Ohwi)、山葛 (P .lobatavar.montana)和三裂叶野葛 (P .phaseoloides (Roxb .)Benth .)离体叶片 ,在叶片表面直接形成毛状根。毛状根的诱导频率分别为 16 .6 %、16 .2 %和 2 6 .6 %。三种药用葛毛状根均表现出生长快、多分支、负向重力性的典型特征。毛状根离体培养均具有激素自主特性和抗卡那霉素特性 ,毛状根的冠瘿碱纸电泳、rol基因扩增及分子杂交实验均证实了其转基因性质。 展开更多
关键词 发根土壤杆菌 毛状根 遗传转化 药用葛 葛根素
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Ri质粒转化西洋参的研究Ⅰ.西洋参毛状根培养系统的建立及鉴定 被引量：23
13
作者 王冲之 丁家宜 《药物生物技术》 CAS CSCD 1999年第2期80-84,共5页
以西洋参（ＰａｎａｘｑｕｉｎｑｕｅｆｏｌｉｕｍＬ．）的胚为材料，在附加ＧＡ３和ＩＢＡ的培养基上获得无菌苗。分别用含有Ｒｉ质粒的发根农杆菌（Ａｇｒｏｂａｃｔｅｒｉｕｍｒｈｉｚｏｇｅｎｅｓ）１５８３４菌株及经过胡萝卜提取... 以西洋参（ＰａｎａｘｑｕｉｎｑｕｅｆｏｌｉｕｍＬ．）的胚为材料，在附加ＧＡ３和ＩＢＡ的培养基上获得无菌苗。分别用含有Ｒｉ质粒的发根农杆菌（Ａｇｒｏｂａｃｔｅｒｉｕｍｒｈｉｚｏｇｅｎｅｓ）１５８３４菌株及经过胡萝卜提取液处理后的该菌株感染无菌苗切段，在外加萘乙酸６ｍｇ／Ｌ的ＭＳ琼脂培养基培养后获得毛状根。胡萝卜处理组较未处理组转化率提高１倍，出根时间提前１０ｄ。转化根在不含激素的培养基上可快速生长，表现为典型的毛状根性状。ＰＣＲ分析证实内含５７７ｂｐｒｏｌＣ序列的ＴＬ－ＤＮＡ已整合人转化株的染色体组。 展开更多
关键词 发根农杆菌 西洋参 毛状根 鉴定
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银杏毛状根的诱导和培养 被引量：24
14
作者 张伦 张熙 +1 位作者 吴建军 莫明和 《贵州科学》 1999年第2期132-134,共3页
利用3个发根农杆菌菌株：R15834，R1000和A4分别对银杏幼叶、幼芽和幼茎外植体进行成功的转化：除A4外，均诱导获得了毛状根．通过对毛状根中冠瘿碱的检测，农杆菌Ri质粒的T-DNA部分已整合到银杏细胞的基因组中．
关键词 毛状根 银杏 诱导 组织培养
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发根农杆菌介导的茶树发根高频诱导与遗传转化 被引量：29
15
作者 张广辉 梁月荣 陆建良 《茶叶科学》 CAS CSCD 北大核心 2006年第1期1-10,共10页
以两种野生型发根农杆菌菌株、三种共培养培养基和六种外植体为试材，建立了茶树发根高频诱导体系，最高发根诱导频率达30％以上。最佳发根诱导体系为：OD600为0．5-0．8的发根农杆菌菌液侵染已培养60-70d苗龄无菌苗茎段10-50min，在添... 以两种野生型发根农杆菌菌株、三种共培养培养基和六种外植体为试材，建立了茶树发根高频诱导体系，最高发根诱导频率达30％以上。最佳发根诱导体系为：OD600为0．5-0．8的发根农杆菌菌液侵染已培养60-70d苗龄无菌苗茎段10-50min，在添加100mmol／L乙酰丁香酮的YMB固体培养基上共培养2d，在含500mg／L头胞噻肟钠的MS培养基上诱导发根。发根在不含激素的LG0培养基上生长迅速，产生大量侧枝和根毛。PCR证实，发根农杆菌Ri质粒T．DNA的rolA、rolB和roIC基因已经插入到发根基因组DNA中。应用此发根诱导体系，以含携带Bt基因的双元载体质粒pCAMBIA2301的发根农杆菌15834，侵染茶树外植体诱导出发根，PCR和GUS组织化学染色证实外源基因已经插入到基因组DNA中并获得表达。 展开更多
关键词 茶树 发根农杆菌 发根培养 遗传转化
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粟米草毛状根的研究 被引量：26
16
作者 许铁峰 张汉明 +3 位作者 丁如贤 李博华 张巧艳 郑汉臣 《第二军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 1999年第10期764-766,F003,共4页
目的：建立粟米草（Ｍｏｌｌｕｇｏ ｐｅｎｔａｐｈｙｌｌａ Ｌ．）的毛状根培养系统并研究毛状根的生长特性。方法：分别用发根农杆菌Ｒ１６０１，ＡＴＣＣ １５８３４和Ａ４感染粟米草无菌苗的子叶，获得毛状根，并筛选优质株系；用... 目的：建立粟米草（Ｍｏｌｌｕｇｏ ｐｅｎｔａｐｈｙｌｌａ Ｌ．）的毛状根培养系统并研究毛状根的生长特性。方法：分别用发根农杆菌Ｒ１６０１，ＡＴＣＣ １５８３４和Ａ４感染粟米草无菌苗的子叶，获得毛状根，并筛选优质株系；用高压纸电泳法对毛状根进行甘露碱检测；测定其生长曲线；比较不同基本培养液、不同ｐＨ 值对毛状根生长的影响。结果：高压纸电泳结果显示，所获毛状根中均含有甘露碱，表明毛状根中确已转入发根农杆菌的Ｔ－ＤＮＡ；１／２ ＭＳ０培养液ｐＨ ５．４～５．８最适合粟米草毛状根的生长。结论：快速生长的粟米草毛状根在药用活性成分的生产上将具有较大潜力。 展开更多
关键词 粟米草 毛状根 发根农杆菌 避孕药
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金铁锁毛状根诱导及培养体系的建立 被引量：30
17
作者 李景滨 刘同祥 +1 位作者 王培忠 张宗申 《中国中药杂志》 CAS CSCD 北大核心 2011年第5期547-551,共5页
目的:研究金铁锁毛状根制备方法及液体培养条件,为规模化生产金铁锁提供技术支持。方法:利用发根农杆菌ACCC10060菌株侵染金铁锁幼叶及茎段。结果:将外植体与菌液(A6000.8)在含有20 mg.L-1乙酰丁香酮的B5培养基上共培养48 h,可以有效地... 目的:研究金铁锁毛状根制备方法及液体培养条件,为规模化生产金铁锁提供技术支持。方法:利用发根农杆菌ACCC10060菌株侵染金铁锁幼叶及茎段。结果:将外植体与菌液(A6000.8)在含有20 mg.L-1乙酰丁香酮的B5培养基上共培养48 h,可以有效地诱导金铁锁毛状根;叶片比茎段的诱导率高。转化的毛状根具有激素自养和抗卡那霉素的特性,并且组织中含有冠瘿碱,证明该菌对金铁锁组织成功地进行了转化。在无激素的1/2 MS液体培养基中培养35 d后,金铁锁毛状根生物量增加了14.11倍(鲜重)和8.39倍(干重),其总皂苷为0.857%(干重),愈伤组织和原植物中分别为0.388%,0.217%。结论:金铁锁毛状根离体培养系统的成功建立,对进一步规模化培养金铁锁毛状根具有重要意义。 展开更多
关键词 金铁锁 毛状根 发根农杆菌
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发根农杆菌对柑桔的离体转化和植株再生作用 被引量：18
18
作者 李名扬 罗金华 陈红 《西南农业学报》 CSCD 1996年第1期90-95,共6页
用处于对数生长期的发根农杆菌（Ｒ１０００，Ａ４和１５８３４）感染甜橙子叶外植体，与菌体共培养３天后，转至含头孢霉素的无激素ＭＴ培养基进行选择培养，１５天后开始产生毛状根，转化率在２５％～３６％之间。毛状根在分单根进行... 用处于对数生长期的发根农杆菌（Ｒ１０００，Ａ４和１５８３４）感染甜橙子叶外植体，与菌体共培养３天后，转至含头孢霉素的无激素ＭＴ培养基进行选择培养，１５天后开始产生毛状根，转化率在２５％～３６％之间。毛状根在分单根进行的克隆培养中能稳定地保持激素自主性生长。在无激素的ＭＴ培养基上，毛状根可自发地产生不定芽，适当添加一定种类及浓度植物生长调节剂，可明显提高毛状根再生芽的频率。再生植株叶片和毛状根提取液的电泳检测表明，甘露碱合成酶及农杆碱合成酶均呈阳性，证明Ｒｉ质粒的Ｔ—ＤＮＡ转移并整合到甜橙细胞核基因组中，在转化体及再生植株中得到了表达。 展开更多
关键词 柑桔 发根农杆菌 离体转化 植株再生
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超声波辅助的发根农杆菌对黄瓜的遗传转化 被引量：18
19
作者 姚春娜 王亚馥 《兰州大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2001年第5期77-81,共5页
由于超声波处理可在外植体上产生许多微小伤口 ,从而提高农杆菌与外植体之间的接触面积 ,提高农杆菌对外植体的转化频率 .用野生型发根农杆菌 (Agrobacterium rhizogenes) A4 菌株感染黄瓜 (Cucumis sativus L.)无菌苗的子叶和下胚轴 ,... 由于超声波处理可在外植体上产生许多微小伤口 ,从而提高农杆菌与外植体之间的接触面积 ,提高农杆菌对外植体的转化频率 .用野生型发根农杆菌 (Agrobacterium rhizogenes) A4 菌株感染黄瓜 (Cucumis sativus L.)无菌苗的子叶和下胚轴 ,建立了黄瓜的发根遗传转化体系 .同时 ,对超声波处理时间、外植体放置方向、预培养时间、外植体类型、乙酰丁香酮的添加与否等影响因素进行了研究 .结果表明 ,采用外植体在添加 0 .5 m g/ L NAA和 2 mg/ L 6 - BA的 MS培养基上预培养 4 d,超声波处理 2 s,共培养 3d,在预培养共培养期间子叶上表皮向下可以取得最佳的转化效果 ,发根诱导率为 94 .7% .乙酰丁香酮对发根诱导频率影响不明显 .冠瘿碱检测表明 。 展开更多
关键词 发根农杆菌 黄瓜 超声波 转化 发根 SAAT 遗传
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超声波辅助处理对发根农杆菌介导的苦豆子遗传转化的影响 被引量：21
20
作者 赵东利 陈红波 +2 位作者 聂秀菀 王新宇 郑国锠 《西北植物学报》 CAS CSCD 2003年第3期468-472,共5页
以发根农杆菌转化苦豆子的子叶和下胚轴外植体,结果表明,辅助以超声波处理有助于转化率的提高,当超声波(功率120W,震荡频率50kHz)处理25min时,转化率达到最高峰(子叶为83.7％,下胚轴为39.1％),分别高于对照(14.4％和9.8％)69.3％和29.3... 以发根农杆菌转化苦豆子的子叶和下胚轴外植体,结果表明,辅助以超声波处理有助于转化率的提高,当超声波(功率120W,震荡频率50kHz)处理25min时,转化率达到最高峰(子叶为83.7％,下胚轴为39.1％),分别高于对照(14.4％和9.8％)69.3％和29.3％。在此条件下,进一步添加AS100μmol/L,可使转化率再进一步提高9.9％和7.6％。 展开更多
关键词 苦豆子 超声波处理 发根农杆菌 遗传转化 乙酰丁香酮 药用植物
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