-
题名ATP6AP2基因的克隆与其表达载体的构建
被引量：1
- 1
-
-
作者
孙宜琳
刘淑芹
蒋扬帆
曾玲玲
杨细凤
刘杰
-
机构
湖北理工学院肾脏疾病发生与干预湖北省重点实验室
-
出处
《湖北理工学院学报》
2021年第4期60-64,共5页
-
基金
湖北理工学院大学生创新创业训练计划项目(项目编号:201810920008)
湖北理工学院人才引进项目(项目编号:16xjz08R)。
-
文摘
为了研究ATP6AP2的生物学功能,利用NCBI数据库确定了人源ATP6AP2基因的CDS序列,设计上游及下游引物。采用TRIZOl法提取293T细胞RNA并反转录合成cDNA,PCR扩增ATP6AP2基因全长序列并将得到的PCR产物经双酶切后与载体连接,转化大肠杆菌。通过PCR菌液鉴定和酶切验证,获得融合ATP6AP2基因序列的真核表达载体。用脂质体包裹该重组质粒转染293T细胞后,Western blot检测ATP6AP2的表达。结果表明,通过基因克隆成功构建了人源ATP6AP2重组真核表达载体,转染后的293T细胞高效表达EGFP-ATP6AP2融合蛋白,为进一步探究ATP6AP2基因的生物学功能提供了研究基础。
-
关键词
atp酶转运辅助蛋白
真核表达载体
基因克隆
-
Keywords
atpase H^(+)transporting accessory protein 2(atp6AP2)
eukaryotic expression vector
gene clone
-
分类号
Q786
[生物学—分子生物学]
-
