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ATPase抑制因子1是与HCMV pUL23蛋白相作用的宿主蛋白分子-酵母双杂交技术筛选与鉴定
被引量：
7
1
作者
曾涛
李实骞
+3 位作者
姚伙旺
邹奕
周天鸿
李弘剑
《中国病理生理杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2009年第7期1360-1364,共5页
目的:利用酵母双杂交技术筛选与人巨细胞病毒相互作用的宿主蛋白分子,为探讨人巨细胞病毒pUL23蛋白在HCMV生活周期中的作用机制提供依据。方法:利用GAL4酵母双杂交系统筛选人胚肾cDNA文库,以获得与人巨细胞病毒pUL23蛋白相互作用的宿主...
目的:利用酵母双杂交技术筛选与人巨细胞病毒相互作用的宿主蛋白分子,为探讨人巨细胞病毒pUL23蛋白在HCMV生活周期中的作用机制提供依据。方法:利用GAL4酵母双杂交系统筛选人胚肾cDNA文库,以获得与人巨细胞病毒pUL23蛋白相互作用的宿主蛋白分子,再通过回交试验和体外GST-pulldown试验验证两者之间的相互作用。结果:酵母双杂交筛选得到宿主蛋白分子ATPase inhibitory factor1(ATIF1),回交试验和体外GST-pulldown试验再次确认ATIF1能够与人巨细胞病毒pUL23蛋白相互作用。结论:pUL23确实能够与ATIF1相互作用,它们之间的相互作用可能为研究pUL23在病毒生活周期发挥的功能提供依据。
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关键词
巨细胞病毒
蛋白质pUL23
酵母双杂交实验
atp酶
抑制
因子
1
下载PDF
职称材料
ATP酶抑制因子1对脂多糖诱导的小鼠肺泡巨噬细胞炎症反应及线粒体自噬的影响
被引量：
2
2
作者
胡琪
李瑞语
+4 位作者
施昌盛
孙彩霞
方石磊
马瑞
邵东华
《中国病理生理杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2023年第5期846-854,共9页
目的:本研究旨在探索ATP酶抑制因子1(ATPase inhibitory factor 1,IF1)在脂多糖(lipopolysaccha⁃ride,LPS)诱导的肺泡巨噬细胞炎症模型中的作用。方法:用LPS刺激小鼠肺泡巨噬细胞系MH-S作为体外细胞炎症模型。利用CRISRP activation质...
目的:本研究旨在探索ATP酶抑制因子1(ATPase inhibitory factor 1,IF1)在脂多糖(lipopolysaccha⁃ride,LPS)诱导的肺泡巨噬细胞炎症模型中的作用。方法:用LPS刺激小鼠肺泡巨噬细胞系MH-S作为体外细胞炎症模型。利用CRISRP activation质粒构建过表达IF1的MH-S细胞系,采用Western blot及RT⁃qPCR检测IF1的表达;ELISA法检测细胞炎症因子白细胞介素6(interleukin-6,IL-6)、肿瘤坏死因子α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)和IL-1β水平;JC-1和MitoSOX™Red分别检测细胞线粒体膜电位(mitochondrial membrane potential,MMP)和活性氧(reactive oxygen species,ROS)水平;Western blot检测自噬相关蛋白LC3、线粒体膜蛋白TOM20和线粒体自噬蛋白parkin水平;荧光共定位检测线粒体的标记探针MitoTracker Red与自噬相关蛋白LC3的共定位情况。结果:LPS刺激肺泡巨噬细胞后IF1表达水平降低,细胞炎症因子分泌增加(P<0.01),MMP下降,ROS水平升高、LC3-II/LC3-I比值与parkin蛋白水平升高,TOM20蛋白水平下降(P<0.01),Mito-Tracker Red与LC3蛋白共定位增加。上调IF1后,过表达组中IF1表达水平升高,细胞炎症因子分泌也相应减少,MMP和ROS水平恢复,LC3-II/LC3-I比值与parkin蛋白水平下降,TOM20蛋白水平升高,MitoTracker Red与LC3蛋白共定位减少。结论:IF1可能通过抑制肺泡巨噬细胞线粒体自噬并改善线粒体功能,从而减轻巨噬细胞炎症因子的分泌。
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关键词
atp酶
抑制
因子
1
肺泡巨噬细胞
炎症反应
线粒体功能
线粒体自噬
下载PDF
职称材料
题名
ATPase抑制因子1是与HCMV pUL23蛋白相作用的宿主蛋白分子-酵母双杂交技术筛选与鉴定
被引量：
7
1
作者
曾涛
李实骞
姚伙旺
邹奕
周天鸿
李弘剑
机构
暨南大学生命科学技术学院
出处
《中国病理生理杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2009年第7期1360-1364,共5页
基金
国家自然科学基金项目(No.30770106)
广东省自然科学基金项目(No.06025162)资助项目
教育部科学技术研究重点项目(No.207114)
文摘
目的:利用酵母双杂交技术筛选与人巨细胞病毒相互作用的宿主蛋白分子,为探讨人巨细胞病毒pUL23蛋白在HCMV生活周期中的作用机制提供依据。方法:利用GAL4酵母双杂交系统筛选人胚肾cDNA文库,以获得与人巨细胞病毒pUL23蛋白相互作用的宿主蛋白分子,再通过回交试验和体外GST-pulldown试验验证两者之间的相互作用。结果:酵母双杂交筛选得到宿主蛋白分子ATPase inhibitory factor1(ATIF1),回交试验和体外GST-pulldown试验再次确认ATIF1能够与人巨细胞病毒pUL23蛋白相互作用。结论:pUL23确实能够与ATIF1相互作用,它们之间的相互作用可能为研究pUL23在病毒生活周期发挥的功能提供依据。
关键词
巨细胞病毒
蛋白质pUL23
酵母双杂交实验
atp酶
抑制
因子
1
Keywords
Cytomegalovirus
Protein pUL23
Yeast two - hybrid experiment
atp
ase inhibitory factor
1
分类号
Q71 [生物学—分子生物学]
下载PDF
职称材料
题名
ATP酶抑制因子1对脂多糖诱导的小鼠肺泡巨噬细胞炎症反应及线粒体自噬的影响
被引量：
2
2
作者
胡琪
李瑞语
施昌盛
孙彩霞
方石磊
马瑞
邵东华
机构
江苏大学附属人民医院麻醉科
安徽医科大学附属安庆市第一人民医院骨科
出处
《中国病理生理杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2023年第5期846-854,共9页
基金
镇江市第一人民医院科研项目(No.Y2020004-S)
江苏省中医药科技发展计划(No.MS2021083)
镇江市科技计划项目(No.SH2022071)。
文摘
目的:本研究旨在探索ATP酶抑制因子1(ATPase inhibitory factor 1,IF1)在脂多糖(lipopolysaccha⁃ride,LPS)诱导的肺泡巨噬细胞炎症模型中的作用。方法:用LPS刺激小鼠肺泡巨噬细胞系MH-S作为体外细胞炎症模型。利用CRISRP activation质粒构建过表达IF1的MH-S细胞系,采用Western blot及RT⁃qPCR检测IF1的表达;ELISA法检测细胞炎症因子白细胞介素6(interleukin-6,IL-6)、肿瘤坏死因子α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)和IL-1β水平;JC-1和MitoSOX™Red分别检测细胞线粒体膜电位(mitochondrial membrane potential,MMP)和活性氧(reactive oxygen species,ROS)水平;Western blot检测自噬相关蛋白LC3、线粒体膜蛋白TOM20和线粒体自噬蛋白parkin水平;荧光共定位检测线粒体的标记探针MitoTracker Red与自噬相关蛋白LC3的共定位情况。结果:LPS刺激肺泡巨噬细胞后IF1表达水平降低,细胞炎症因子分泌增加(P<0.01),MMP下降,ROS水平升高、LC3-II/LC3-I比值与parkin蛋白水平升高,TOM20蛋白水平下降(P<0.01),Mito-Tracker Red与LC3蛋白共定位增加。上调IF1后,过表达组中IF1表达水平升高,细胞炎症因子分泌也相应减少,MMP和ROS水平恢复,LC3-II/LC3-I比值与parkin蛋白水平下降,TOM20蛋白水平升高,MitoTracker Red与LC3蛋白共定位减少。结论:IF1可能通过抑制肺泡巨噬细胞线粒体自噬并改善线粒体功能,从而减轻巨噬细胞炎症因子的分泌。
关键词
atp酶
抑制
因子
1
肺泡巨噬细胞
炎症反应
线粒体功能
线粒体自噬
Keywords
atp
synthase inhibitory factor
1
alveolar macrophages
inflammatory response
mitochondrial function
mitophagy
分类号
R364.5 [医药卫生—病理学]
R363.2 [医药卫生—基础医学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
ATPase抑制因子1是与HCMV pUL23蛋白相作用的宿主蛋白分子-酵母双杂交技术筛选与鉴定
曾涛
李实骞
姚伙旺
邹奕
周天鸿
李弘剑
《中国病理生理杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2009
7
下载PDF
职称材料
2
ATP酶抑制因子1对脂多糖诱导的小鼠肺泡巨噬细胞炎症反应及线粒体自噬的影响
胡琪
李瑞语
施昌盛
孙彩霞
方石磊
马瑞
邵东华
《中国病理生理杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2023
2
下载PDF
职称材料
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