年龄、分娩损伤因素对小鼠肛提肌组织中ArfGAP 3表达的影响 被引量：2

1

作者 郝梦磊 洪莉 +4 位作者 汤剑明 胡鸣 李素廷 王琳琳 陈乾 《中国计划生育和妇产科》 2019年第11期56-59,共4页

目的探究年龄、分娩损伤因素对C 57 BL/6小鼠肛提肌组织中ADP-核糖基化因子GTP酶活化蛋白3(ADP-ribosylation factor GTPase-activating protein 3,ArfGAP 3)表达的影响。方法选取健康3月龄雌性处鼠、9月龄雌性处鼠、9月龄雌性分娩6~7... 目的探究年龄、分娩损伤因素对C 57 BL/6小鼠肛提肌组织中ADP-核糖基化因子GTP酶活化蛋白3(ADP-ribosylation factor GTPase-activating protein 3,ArfGAP 3)表达的影响。方法选取健康3月龄雌性处鼠、9月龄雌性处鼠、9月龄雌性分娩6~7次小鼠各6只,分别为年轻未孕组、中老年未孕组、中老年多产组,共3组。取各组小鼠肛提肌组织,采用Western-blot、免疫组化技术检测ArfGAP 3在肛提肌组织中的表达及组织内的定位。进一步通过生物信息学手段分析数据集GSE 34388、GSE 103726中ArfGAP 3表达的影响。结果 Western-blot和免疫组织化学检测结果均显示ArfGAP 3在中老年多产组小鼠肛提肌组织中的表达量显著低于年轻未孕组和中老年未孕组,差异有统计学意义(P<0.05);年轻未孕组和中老年未孕组肛提肌组织中的ArfGAP 3表达差异无统计学意义(P>0.05)。GSE 34388、GSE 103726数据集分析显示年龄因素对骨骼肌组织表达ArfGAP 3基因无影响,机械损伤能够使骨骼肌组织中ArfGAP 3表达降低。结论年龄因素对小鼠肛提肌组织中ArfGAP 3的表达无明显影响,分娩因素能降低影响肛提肌组织中ArfGAP 3表达,可能与分娩造成的肛提肌损伤相关。 展开更多

关键词 arfgap 3 肛提肌 盆底功能障碍性疾病

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ARFGAP 3在小鼠盆底肌损伤模型中的表达 被引量：2

2

作者 陈茂 洪莉 +6 位作者 胡鸣 汤剑明 王琳琳 李素廷 陈乾 李秉枢 洪莎莎 《中国计划生育和妇产科》 2019年第10期84-87,96,I0002,共6页

目的探讨ADP核糖基化因子GTP结合蛋白3(ADP ribosylation factor GTPase binding protein 3,ARFGAP 3)在小鼠盆底肌损伤模型中的表达变化以及在压力性尿失禁(stress urinary incontinence, SUI)靶向治疗中的初步分析。方法选择雌性成年... 目的探讨ADP核糖基化因子GTP结合蛋白3(ADP ribosylation factor GTPase binding protein 3,ARFGAP 3)在小鼠盆底肌损伤模型中的表达变化以及在压力性尿失禁(stress urinary incontinence, SUI)靶向治疗中的初步分析。方法选择雌性成年处鼠C 57 BL/6小鼠40只,随机分为5组,每组8只。根据造模后取材时间点的不同分为1 d、3 d、7 d、14 d组和对照组。造模采用经典的阴道扩张法模拟产伤构建盆底肌损伤小鼠模型,分别于处理后第1、3、7、14 d处死小鼠,取盆底肌组织进行分析,对照组常规饲养1周后取盆底肌作相同处理。HE染色观察盆底肌病理变化,确定损伤的存在及持续时间;免疫组织化学法和Western-blot法检测ARFGAP 3蛋白水平表达变化;q-PCR检测ARFGAP 3的mRNA表达变化。结果①1 d、3 d组盆底肌损伤变化明显,肌膜间可见大量炎性细胞浸润,部分肌纤维小灶性坏死,肌间隙增宽,肌束结构不清晰;7 d组盆底肌组织损伤趋于修复,少量肌纤维萎缩,炎性浸润减少,结缔组织增生;14 d组小鼠盆底肌纤维、肌束结构与对照组相比基本恢复正常,肌间隙略宽。②免疫组化染色、Western-blot检测以及q-PCR结果相一致,各造模组较对照组小鼠盆底肌组织中ARFGAP 3表达上调(P<0.05),3 d组上调较各造模组最明显。结论①模拟产伤法构建的盆底肌损伤模型中盆底肌损伤明显,成功构建盆底肌损伤小鼠模型,有助于进一步探究SUI发病机制;②小鼠盆底肌损伤后ARFGAP 3表达上调,且于第3 d增高最明显,随后表达逐渐降低,这表明ARFGAP 3可能参与了盆底肌损伤修复过程。 展开更多

关键词 arfgap 3 盆底肌损伤 模拟产伤 损伤修复

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商陆小G蛋白激活蛋白基因PaAGAP在逆境下表达研究 被引量：2

3

作者 刘芳 吴亮其 +2 位作者 王辉 张媛雅 柴团耀 《中国科学院研究生院学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第1期116-124,共9页

利用同源克隆和RACE方法在商陆(Phytolacca acinosa)中得到一个推测的小G蛋白ArfGTPase激活蛋白ArfGAP(ArfGTPase activating protein)的全长cDNA序列PaAGAP.PaAGAP序列编码332个氨基酸.蛋白含有保守的锌指结构域(CX2CX16 CX2C类)和C2... 利用同源克隆和RACE方法在商陆(Phytolacca acinosa)中得到一个推测的小G蛋白ArfGTPase激活蛋白ArfGAP(ArfGTPase activating protein)的全长cDNA序列PaAGAP.PaAGAP序列编码332个氨基酸.蛋白含有保守的锌指结构域(CX2CX16 CX2C类)和C2结构域.实时荧光定量PCR表明在寒、旱、盐和重金属的不同时间胁迫下,PaAGAP可以被诱导,表达量有不同程度的上调.由此推测PaAGAP可能是通过快速启动转录和翻译,使ARF失活,抑制植物生长素极性运输,来参与植物逆境反应的. 展开更多

关键词 商陆 arfgap 锌指 逆境 表达

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细叶百合LpAGD14基因的克隆与表达分析 被引量：1

4

作者 汪王 田忠平 +2 位作者 苏小霞 杨柳慧 周蕴薇 《草业学报》 CSCD 北大核心 2018年第2期117-123,共7页

从细叶百合cDNA文库中克隆得到ArfGAP基因,该基因ORF序列编码640个氨基酸,具有一个典型的C4型ArfGAP保守结构域。蛋白相对分子量约为69.43kDa,理论等电点为8.95,为亲水性蛋白,没有跨膜结构。氨基酸序列与油棕的GTPase同源性达到59%,与... 从细叶百合cDNA文库中克隆得到ArfGAP基因,该基因ORF序列编码640个氨基酸,具有一个典型的C4型ArfGAP保守结构域。蛋白相对分子量约为69.43kDa,理论等电点为8.95,为亲水性蛋白,没有跨膜结构。氨基酸序列与油棕的GTPase同源性达到59%,与芭蕉、海枣、石刁柏、凤梨的同源性都在50%以上,命名为LpAGD14。qRT-PCR分析LpAGD14表达量呈不断升高的趋势,其中休眠完全解除时基因表达量显著高于其他时期。亚细胞定位显示该基因定位在细胞膜上。超微结构观察发现随低温贮藏时间的延长高尔基体囊泡层数逐渐增多。这些结果表明LpAGD14可能通过影响囊泡运输参与细叶百合鳞茎休眠解除进程。该研究为深入了解该基因功能奠定了基础。 展开更多

关键词 细叶百合 arfgap 克隆 表达

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裸燕麦麸皮提取物和低频脉冲刺激干预PFD大鼠对ArfGAP3通路的影响

5

作者 李碧慧 王悦棠 +3 位作者 刘完美 时欢 徐赛群 何娴婕 《生物化工》 CAS 2023年第3期80-82,共3页

目的:分析裸燕麦麸皮提取物和低频脉冲刺激分别干预盆底功能障碍(PFD)大鼠对ADP核糖基化因子GTP结合蛋白3(ArfGAP3)信号通路的影响。方法:将30只大鼠随机均分为模型组、药物干预组、物理干预组,比较各组干预后病灶局部组织中ArfGAP3、... 目的:分析裸燕麦麸皮提取物和低频脉冲刺激分别干预盆底功能障碍(PFD)大鼠对ADP核糖基化因子GTP结合蛋白3(ArfGAP3)信号通路的影响。方法:将30只大鼠随机均分为模型组、药物干预组、物理干预组,比较各组干预后病灶局部组织中ArfGAP3、透明质酸(HA)、层粘连蛋白(LN)、Ⅳ型胶原蛋白(Ⅳ-C)含量的统计学差异。用回归模型分析HA、LN、Ⅳ-C和ArfGAP3的综合关联。结果:药物干预组和模型组、物理干预组和模型组、物理干预组和药物干预组两两比较,各指标差异均有统计意义(P<0.05)。各指标对ArfGAP3蛋白影响程度依次为LN蛋白、HA蛋白、Ⅳ-C蛋白。结论:低频脉冲刺激和裸燕麦麸皮提取物虽然均能对PFD大鼠病灶局部ArfGAP3通路产生激活作用,但低频脉冲刺激物理治疗方式能更为快捷且显著的降低LN蛋白表达,增加HA、Ⅳ-C蛋白表达,可能对病灶局部肌功能恢复有更好促进作用。 展开更多

关键词 低频 脉冲刺激 裸燕麦麸皮 盆底功能障碍 arfgap3信号通路

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鸟苷酸结合蛋白5和二磷酸腺苷核糖化因子鸟苷酸激酶1基因在肺结核患者和潜伏结核感染人群中的表达研究 被引量：6

6

作者 巩伟伟 李金凤 +2 位作者 隋爱华 朱新红 林存智 《中国医师进修杂志》 2018年第6期485-489,共5页

目的探讨鸟苷酸结合蛋白5（GBP5）和二磷酸腺苷核糖化因子鸟苷酸激酶1（ASAP1）基因在肺结核患者及潜伏结核感染人群中的表达情况。 方法选取2016年8月至2017年5月确诊肺结核患者40例（肺结核组）、潜伏结核感染患者40例（潜伏结核感... 目的探讨鸟苷酸结合蛋白5（GBP5）和二磷酸腺苷核糖化因子鸟苷酸激酶1（ASAP1）基因在肺结核患者及潜伏结核感染人群中的表达情况。 方法选取2016年8月至2017年5月确诊肺结核患者40例（肺结核组）、潜伏结核感染患者40例（潜伏结核感染组）及健康对照者40例（健康对照组），取入选者外周抗凝血4 ml，应用实时荧光定量逆转录-聚合酶链反应（RT-PCR）技术检测这三组人群GBP5、ASAP1基因表达情况。 结果肺结核组、潜伏结核感染组和健康对照组GBP5基因相对表达量分别为1.58 ± 0.80、1.09 ± 0.68和1.04 ± 0.61，差异有统计学意义（F=7.23，P=0.001）；肺结核组GBP5基因相对表达量高于潜伏结核感染组（t=2.93，P=0.004）和健康对照组（t=3.40，P=0.010），差异有统计学意义；潜伏结核感染组GBP5基因相对表达量与健康对照组比较差异无统计学意义（t=0.39，P=0.700）。三组ASAP1基因表达量比较差异无统计学意义（F=0.26，P=0.770）。 结论GBP5基因表达在肺结核患者、潜伏结核感染患者和健康对照者中存在差异，GBP5基因检测可能筛选出潜伏结核感染人群，可作为筛选潜伏结核感染人群的标志物。 展开更多

关键词 结核 肺 潜伏结核感染 鸟苷酸结合蛋白5 二磷酸腺苷核糖化因子鸟苷酸 激酶1 基因表达

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细胞内物质转运调节分子ARFGAP3的克隆表达及生化活性

7

作者 刘晓勤 张成岗 +2 位作者 邢桂春 陈清棠 贺福初 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2001年第4期507-513,共7页

ADP核糖基化因子 GTP酶活化蛋白 (ARFGAP)是重要的细胞内物质转运调节分子 .在 2 2周孕龄人胎肝cDNA文库中发现一种新基因 ,其编码的氨基酸序列与大鼠ARF1GAP有 32 %同源性 .将这种新基因命名为“ARFGAP3” ,对其进行功能研究 ,利用逆... ADP核糖基化因子 GTP酶活化蛋白 (ARFGAP)是重要的细胞内物质转运调节分子 .在 2 2周孕龄人胎肝cDNA文库中发现一种新基因 ,其编码的氨基酸序列与大鼠ARF1GAP有 32 %同源性 .将这种新基因命名为“ARFGAP3” ,对其进行功能研究 ,利用逆转录 聚合酶链式反应 (RT PCR ) ,从人胎盘总RNA中扩增ARFGAP3全长cDNA序列 ,并将其亚克隆到 pGEM T载体 ;采用RNA印迹法和斑点杂交法 ,检测其组织表达谱 ,发现在多种腺体和睾丸中有很高水平ARFGAP3基因转录 ,并且只有一种约 2 7kb的转录本 .利用基因重组技术 ,构建表达质粒 pBAD/Thio ARFGAP3,在大肠杆菌中表达 ,采用亲和层析法纯化表达产物 ,利用肠激酶切除重组融合蛋白N端引导序列 .检测重组ARFGAP3的生化活性 ,证实ARFGAP3对ARF1具有GAP活性 ,促进ARF1结合的GTP水解为GDP ,磷脂酰肌醇二磷酸 (PIP2 )增强其GAP活性 ,而磷脂酰胆碱 (PC) 展开更多

关键词 arfgap3 细胞内物质转运 ADP核糖基化因子 GTP酶活化蛋白 生化活性

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环状RNA ADP核糖基化因子GTP酶激活蛋白调控类风湿关节炎滑膜成纤维细胞增殖及迁移机制 被引量：1

8

作者 欧阳峰松 向忠军 +3 位作者 熊瑛 王少林 丁乐 曹彪 《中华实验外科杂志》 CAS 北大核心 2022年第11期2105-2108,共4页

目的探讨环状RNA(circRNA)ADP核糖基化因子GTP酶激活蛋白(ASAP1)调控类风湿关节炎(RA)滑膜成纤维细胞(SFs)增殖及迁移机制。方法提取RA及关节外伤患者SFs行后续实验。分别用Lipofectamine 3000将si-NC、si-circASAP1、miR-NC、miR-144-3... 目的探讨环状RNA(circRNA)ADP核糖基化因子GTP酶激活蛋白(ASAP1)调控类风湿关节炎(RA)滑膜成纤维细胞(SFs)增殖及迁移机制。方法提取RA及关节外伤患者SFs行后续实验。分别用Lipofectamine 3000将si-NC、si-circASAP1、miR-NC、miR-144-3p mimics、pcDNA-NC、pcDNA-circASAP1、抗miR-NC与si-circASAP1、抗miR-144-3p与si-circASAP1分别转染RA-SFs(记为si-NC组、si-circASAP1组、miR-NC组、miR-144-3p组、pcDNA-NC组、pcDNA-circASAP1组、抗miR-NC+si-circASAP1组、抗miR-144-3p+si-circASAP1组)。未转染RA-SFs记为对照组(NC组)。细胞计数试剂盒-8(CCK-8)检测细胞增殖;实时荧光定量聚合酶链式反应(qRT-PCR)检测circASAP1和微小核糖核酸144-3p(miR-144-3p)表达;蛋白质印迹法检测基质金属蛋白酶2(MMP-2)及基质金属蛋白酶9(MMP-9)蛋白表达;Transwell检测细胞迁移;双荧光素酶报告基因实验检测circASAP1靶向调控miR-144-3p表达。两组间比较采用t检验;多组间比较用单因素方差分析(两组间比较用SNK-q检验)。结果RA患者滑膜组织及SFs中circASAP1表达高于关节外伤患者滑膜组织及SFs(滑膜组织2.46±0.28比1.00±0.12,SFs中3.16±0.15比1.00±0.11),miR-144-3p低于关节外伤患者滑膜组织及SFs(滑膜组织0.43±0.11比1.00±0.15,SFs中0.38±0.03比1.00±0.08),差异有统计学意义(t=40.949、26.182,P<0.05)。si-circASAP1组RA-SFs的circASAP1、MMP-2、MMP-9表达、细胞活力和细胞迁移数均低于NC组和si-NC组(0.47±0.03比1.00±0.07、1.02±0.10,0.41±0.03比0.83±0.07、0.81±0.06,0.35±0.03比0.77±0.06、0.75±0.06,0.57±0.05比1.12±0.07、1.11±0.09,97.00±7.23比194.00±13.25、203.00±11.54),差异有统计学意义(F=166.272、161.234、187.111、194.126、258.352,P<0.05)。miR-144-3p组RA-SFs的miR-144-3p表达高于miR-NC组(2.09±0.15比1.00±0.09),MMP-2、MMP-9表达、细胞活力和细胞迁移数均低于miR-NC组(0.37±0.02比0.83±0.07、0.31±0.02比0.74±0.06、0.62±0.05比1.21±0.07、115.00±7.36比197.00±12.51),差异 展开更多

关键词 类风湿关节炎 环状RNA ADP核糖基化因子GTP酶激活蛋白 微小RNA-144-3p 细胞增殖 细胞迁移

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人源细胞内物质转运调节分子ARFGAP1对细胞分泌功能的影响 被引量：1

9

作者 刘晓勤 张成岗 +2 位作者 邢桂春 陈清棠 贺福初 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2001年第2期237-243,共7页

ARF GAP是重要的细胞内物质转运调节分子 .最近 ,在人胎肝 c DNA文库中发现一种新基因 ,其编码的氨基酸序列与大鼠的 ARF1 GAP有 32 %同源性 ,故将其命名为“ARFGAP1”.对ARFGAP1进行功能研究 ,利用分子克隆技术构建绿色荧光蛋白 (GFP) ... ARF GAP是重要的细胞内物质转运调节分子 .最近 ,在人胎肝 c DNA文库中发现一种新基因 ,其编码的氨基酸序列与大鼠的 ARF1 GAP有 32 %同源性 ,故将其命名为“ARFGAP1”.对ARFGAP1进行功能研究 ,利用分子克隆技术构建绿色荧光蛋白 (GFP) - ARFGAP1融合基因表达质粒 (p EGFP- C1 - ARFGAP1 ) ,经脂质体转染将其导入 COS- 7细胞瞬时表达 ,利用绿色荧光确定ARFGAP1的亚细胞定位 .结果显示 ,ARFGAP1位于细胞质部分 ,表达量高时 ,在核周高尔基体区聚集呈团块状或颗粒状 .构建真核表达质粒 pc DNA3.1 /myc- His- ARFGAP1 ,在 COS- 7细胞中表达 ,并用 ARFGAP1和分泌型碱性磷酸酶 (SEAP)真核表达质粒共同转染 COS- 7细胞 ,发现ARFGAP1在细胞中过表达能部分抑制 SEAP的分泌 .结果证明 ,ARFGAP1对细胞的物质转运和分泌功能有调节作用 . 展开更多

关键词 细胞内物质转运 细胞分泌功能 arfgap1 分泌型碱性磷酸酶

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敲低ASAP1降低结核分枝杆菌感染小鼠RAW264.7细胞的迁移能力

10

作者 崔佳 温炟 +1 位作者 王玉环 吴长新 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第12期1064-1068,共5页

目的观察含SH3结构域-ADP-核糖基化因子(Arf)GTP酶激活蛋白-锚蛋白重复序列和PH结构域1(ASAP1)介导小鼠RAW264.7巨噬细胞对结核分枝杆菌感染过程的影响以及ASAP1对巨噬细胞迁移能力的影响。方法建立ASAP1敲低的RAW264.7细胞系,感染结核... 目的观察含SH3结构域-ADP-核糖基化因子(Arf)GTP酶激活蛋白-锚蛋白重复序列和PH结构域1(ASAP1)介导小鼠RAW264.7巨噬细胞对结核分枝杆菌感染过程的影响以及ASAP1对巨噬细胞迁移能力的影响。方法建立ASAP1敲低的RAW264.7细胞系,感染结核分枝杆菌H37Ra后,利用荧光共聚焦显微镜和平板计数方法对胞内细菌的载量进行检测,采用TranswellTM法检测ASAP1敲低细胞的迁移能力。结果与对照组细胞相比,ASAP1敲低的RAW264.7细胞感染H37Ra后胞内细菌载量增多,且细胞迁移能力降低。结论敲低ASAP1降低RAW264.7细胞的迁移能力。 展开更多

关键词 含SH3结构域-Arf GTP酶激活蛋白-锚蛋白重复序列和PH结构域1(ASAP1) 敲低 RAW264.7细胞 结核分枝杆菌 细胞迁移

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Crystal Structure of C-terminal of ACAP1 in Endocytic Recycling

11

作者 Victor W. Hsu 《生物物理学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第S1期354-354,共1页

ACAP1, a GTPase-activating protein (GAP) for ADP-ribosylation factor (ARF) 6, is part of a novel clathrin coat complex that is regulated by ARF6 for endocytic recycling in

关键词 ACAP1 endocytic recycling GTPase-activating protein INTEGRIN arfgap ankyrin-repeat

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