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题名应用免疫捕获RT-PCR检测槟榔APV1病毒
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作者
张怀文
赵雪
王颢
王洪星
黄惜
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机构
海南大学热带作物学院
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出处
《分子植物育种》
CAS
北大核心
2023年第15期5037-5042,共6页
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基金
海南省自然科学基金面上项目(320MS007)资助。
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文摘
槟榔黄化病的蔓延已经严重威胁海南的槟榔种植业,其病原被鉴定为APV1 (Areca palm velarivirus1)病毒。为了提高APV1病毒检测的效率及灵敏度,本研究拟采用免疫捕获RT-PCR (IC-RT-PCR)对APV1病毒进行检测。首先制备APV1病毒外壳蛋白的单克隆抗体,然后将抗体包被PCR管,加入槟榔黄化叶片或者与APV1病毒虫媒粗提取液进行免疫捕获,最后进行RT-PCR检测。研究结果显示,IC-RT-PCR对槟榔黄化病叶片样品中APV1病毒的检测灵敏度比普通RT-PCR高2 500倍,对粉蚧样品中APV1病毒的检测灵敏度比普通RT-PCR高125倍。IC-RT-PCR避免了RNA提取的环节,检测效率提高,且检测灵敏度更高,对检测的浓度样品具有巨大技术优势。本研究结果为APV1病毒的检测提供技术支撑。
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关键词
槟榔
apv1病毒
免疫捕获RT-PCR
检测技术
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Keywords
Betel palm
apv1
IC-RT-PCR
Detection
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分类号
S85
[农业科学—兽医学]
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题名槟榔APV1病毒多克隆抗体制备及酶联免疫检测
被引量：1
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作者
陈阳
王洪星
黄惜
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机构
海南大学热带作物学院海南省热带生物资源可持续利用重点实验室
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出处
《分子植物育种》
CAS
北大核心
2022年第2期518-523,共6页
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基金
海南省重大科技计划项目(ZDKJ201817)资助。
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文摘
槟榔是海南重要的经济作物,APV1 (areca palm velarivirus 1)病毒引起的槟榔黄化病严重危害槟榔产业的健康发展。研发快速精准的APV1病毒检测技术对于防控槟榔黄化病具有重要意义。本研究利用RT-PCR扩增APV1病毒的外壳蛋白(CP)基因序列,构建原核表达载体pET30a-APV1-CP并转化至大肠杆菌,经诱导表达和蛋白纯化获得APV1-CP蛋白。通过注射兔子获得多克隆抗体,经检测其效价为102 400。采用ELISA和RT-PCR分别对槟榔APV1病毒检测,发现两种检测方法大部分的检测结果基本一致。APV1病毒ELISA检测技术对槟榔种苗的检测及槟榔黄化病的防控具有重要的实用价值。
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关键词
槟榔黄化病
apv1病毒
多克隆抗体
酶联免疫检测
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Keywords
Betel nut yellowing disease
apv1 virus
Polyclonal antibody
ELISA
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分类号
S763.7
[农业科学—森林保护学]
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