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AP1反应元件的确定及在细胞角蛋白13基因表达调控中的作用 被引量：3
1
作者 林功标 肖健云 +3 位作者 赵素萍 田勇泉 王承龙 邱元正 《中华医学遗传学杂志》 EI CAS CSCD 2002年第6期479-483,共5页
目的　确定细胞角蛋白 13(cytokeratin 13,CK13)基因 5′旁侧 - nt.199～ - nt.192碱基CTGAATCA反应元件的类型及其在 CK13基因表达调控中的作用。方法　采用报告基因分析的方法 ,构建 CK13基因 5′旁侧 5 13bp全片段、- nt.2 0 7～ +nt... 目的　确定细胞角蛋白 13(cytokeratin 13,CK13)基因 5′旁侧 - nt.199～ - nt.192碱基CTGAATCA反应元件的类型及其在 CK13基因表达调控中的作用。方法　采用报告基因分析的方法 ,构建 CK13基因 5′旁侧 5 13bp全片段、- nt.2 0 7～ +nt.6 3与氯霉素乙酰转移酶报告基因增强子载体的重组体 ,并采用 PCR定点诱变技术 ,构建与 - nt.2 0 7～ +nt.6 3同样长短 ,但 - nt.198和 - nt.197的 T、G分别定点诱变为 A、T的氯霉素乙酰转移酶报告基因增强子载体的重组体 ,通过脂质体介导的转染技术导入He L a细胞 ,检测各重组体报告基因的瞬间表达 ,确定 CK13基因 5′旁侧 - nt.199～ - nt.192碱基CTGAATCA在 CK13基因表达调控中的作用 ;并采用凝胶滞留试验及竞争性凝胶滞留试验验证 CK13基因 5′旁侧中 CTGAATCA反应元件的类型。结果　凝胶滞留试验及竞争性凝胶滞留试验证实 CK13基因5′旁侧 - nt.199～ - nt.192碱基 CTGAATCA反应元件是 AP1反应元件 ,它促进 CK13基因的表达。结论CK13基因 5′旁侧起始密码子上游 - nt.199～ - nt.192的碱基 CTGAATCA是 AP1反应元件 ,而不是c AMP反应元件 ,它可增进 CK13基因 5′旁侧的转录活性。 展开更多
关键词 细胞角蛋白13基因 ap1反应元件 基因表达调控
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