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柴胡疏肝散对NAFLD大鼠肝脏脂质代谢及AMPK/SIRT1通路的影响 被引量:14
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作者 张玉佩 邓远军 +10 位作者 胡巢凤 韩莉 杨钦河 梁荫基 孔怡琳 何毅芳 金玲 李媛媛 王观龙 程少冰 涂桂芳 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2016年第2期307-313,共7页
目的:观察柴胡疏肝散对高脂饮食建立的非酒精性脂肪性肝病(NAFLD)大鼠肝组织脂质代谢和腺苷酸活化蛋白激酶(AMPK)/sirtuin 1(SIRT1)通路相关蛋白的影响。方法:选用SPF级SD大鼠24只,随机分为正常(NC)组、高脂(HFD)组和柴胡疏肝散(CSP)组... 目的:观察柴胡疏肝散对高脂饮食建立的非酒精性脂肪性肝病(NAFLD)大鼠肝组织脂质代谢和腺苷酸活化蛋白激酶(AMPK)/sirtuin 1(SIRT1)通路相关蛋白的影响。方法:选用SPF级SD大鼠24只,随机分为正常(NC)组、高脂(HFD)组和柴胡疏肝散(CSP)组,每组8只。采用高脂饲料喂养大鼠16周建立NAFLD大鼠模型,用药组大鼠同时灌服柴胡疏肝散浸膏剂(9.6 g·kg^(-1)·d^(-1))进行干预,16周后取血和肝组织样本,全自动生化仪检测血清和肝匀浆总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)以及血清丙氨酸转氨酶(ALT)和天门冬氨酸转氨酶(AST)含量;HE染色观察肝组织病理损伤变化;油红O染色观察肝组织脂质蓄积程度,透射电镜观察肝细胞内超微结构变化;Western blot法检测肝组织AMPK、磷酸化AMPK(pAMPK)、SIRT1和解偶联蛋白2(UCP2)的蛋白水平。结果:大鼠肝组织HE染色、油红O染色和电镜结果证实肝细胞脂质蓄积严重,提示NAFLD大鼠模型建立成功。与NC组比较,HFD组血清和肝组织匀浆TC、TG含量显著升高(P<0.01),血清AST含量显著升高(P<0.01),肝组织p AMPK和SIRT1蛋白水平显著降低(P<0.01),UCP2蛋白水平显著升高(P<0.01);与HFD组比较,CSP组大鼠肝组织脂质蓄积程度明显改善,血清和肝匀浆TC和TG含量呈下降趋势,其中肝匀浆TC和TG含量下降显著(P<0.05),血清AST含量显著降低(P<0.05),肝组织p AMPK和SIRT1蛋白水平显著升高(P<0.05),UCP2蛋白水平显著下调(P<0.01),但各组大鼠总AMPK蛋白水平差异无统计学显著性。结论:柴胡疏肝散能够改善16周高脂饮食诱导的NAFLD大鼠肝脏脂肪代谢紊乱、减轻肝脏脂质蓄积,其作用机制可能与其激活AMPK/SIRT1通路有关。 展开更多
关键词 柴胡疏肝散 非酒精性脂肪性肝病 ampk/sirt1通路 脂质代谢
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N-乙酰半胱氨酸通过AMPK/SIRT1途径抑制缺氧诱导的大鼠脑血管内皮细胞损伤 被引量:14
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作者 张蕴 韩新生 +1 位作者 张洪阳 徐建可 《中国动脉硬化杂志》 CAS 2020年第2期107-112,共6页
目的研究N-乙酰半胱氨酸(NAC)对缺氧诱导脑血管内皮细胞损伤的调节作用及分子机制。方法选择SD大鼠分离培养脑血管内皮细胞,分为常氧组、缺氧组、0.5 NAC组(缺氧+0.5 mol/L NAC)、1.0 NAC组(缺氧+1.0 mol/L NAC)、NAC+8-bAMP组(缺氧+1.0... 目的研究N-乙酰半胱氨酸(NAC)对缺氧诱导脑血管内皮细胞损伤的调节作用及分子机制。方法选择SD大鼠分离培养脑血管内皮细胞,分为常氧组、缺氧组、0.5 NAC组(缺氧+0.5 mol/L NAC)、1.0 NAC组(缺氧+1.0 mol/L NAC)、NAC+8-bAMP组(缺氧+1.0 mol/L NAC+1.0 mol/L 8-bAMP)。采用MTS法检测细胞增殖活力,采用TUNEL染色检测凋亡率,采用试剂盒检测氧化应激指标,采用Western blot检测凋亡基因、AMPK/SIRT1通路分子的表达量。结果缺氧组细胞OD490值、T-AOC含量及B淋巴细胞瘤2(Bcl-2)、p-AMP活化蛋白激酶(pAMPK)、去乙酰化酶Sirtuin1(SIRT1)表达量均明显低于常氧组;缺氧组细胞凋亡率、细胞中活性氧(ROS)、丙二醛(MDA)、8-羟基脱氧鸟苷(8-OHDG)含量及bcl-2相关X蛋白(bax)、细胞色素C(Cyt-C)、含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶3(Caspase-3)的表达量均明显高于常氧组。0.5 NAC组、1.0 NAC组细胞OD490值、T-AOC量及Bcl-2、pAMPK、SIRT1表达量均明显高于缺氧组;0.5 NAC组、1.0 NAC组细胞凋亡率、ROS、MDA、8-OHDG含量及Caspase-3、Cyt-C、Bax的表达量均明显低于缺氧组。NAC+8-bAMP组细胞OD490值、T-AOC及Bcl-2、p-AMPK、SIRT1表达量均明显低于1.0 NAC组;NAC+8-bAMP组凋亡率、ROS、MDA、8-OHDG含量及Caspase-3、Cyt-C、Bax的表达量均明显高于1.0 NAC组。结论NAC能够通过激活AMPK/SIRT1通路来减轻氧化应激及线粒体凋亡介导的脑血管内皮细胞损伤。 展开更多
关键词 N-乙酰半胱氨酸 脑血管内皮细胞 氧化应激 凋亡 ampk/sirt1通路
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水飞蓟素通过调控AMPK/SIRT1途径促进自噬并抑制凋亡减轻大鼠急性肾损伤 被引量:8
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作者 李燕菊 冯杰 +6 位作者 赵婷 李红健 马俊鹏 孙力 玛尔江·巴哈提别克 王燕 于鲁海 《中国中西医结合肾病杂志》 2022年第1期11-15,I0002,I0003,共7页
目的:探究水飞蓟素对大鼠急性肾损伤(acute kidney injury, AKI)的作用及其可能的作用机制。方法:40只SD大鼠随机分为对照组、模型组、阳性对照组、水飞蓟素组和水飞蓟素+Compound-C组,每组各8只,除对照组外,其余组采用夹闭双侧肾动脉... 目的:探究水飞蓟素对大鼠急性肾损伤(acute kidney injury, AKI)的作用及其可能的作用机制。方法:40只SD大鼠随机分为对照组、模型组、阳性对照组、水飞蓟素组和水飞蓟素+Compound-C组,每组各8只,除对照组外,其余组采用夹闭双侧肾动脉后再灌注法建立AKI模型。HE染色和透射电镜检查肾组织结构变化;Western blot检测肾组织中KIM-1、NGAL、Bax、Bcl-2、LC3、Beclin1、p62、p-AMPKα、AMPKα和SIRT1蛋白表达;全自动生化分析仪检测血清中Scr和BUN水平;TUNEL凋亡检测试剂盒检测细胞凋亡。结果:与对照组相比,模型组大鼠肾组织线粒体结构缺陷,肾损伤评分、细胞凋亡率、KIM-1、NGAL和Bax蛋白表达显著升高(P<0.05),Scr和BUN水平显著升高(P<0.05),Bcl-2、LC3Ⅱ/LC3Ⅰ、Beclin1、p-AMPKα/AMPKα和SIRT1蛋白表达显著降低(P<0.05);与模型组相比,阳性对照组和水飞蓟素组大鼠肾组织病理学变化得到明显改善,肾损伤评分、细胞凋亡率、KIM-1、NGAL、Bax蛋白表达显著降低(P<0.05),Scr和BUN水平显著降低(P<0.05),Bcl-2、LC3Ⅱ/LC3Ⅰ、Beclin1、p-AMPKα/AMPKα和SIRT1蛋白表达显著升高(P<0.05);Compound-C可部分逆转水飞蓟素对AKI大鼠的作用。结论:水飞蓟素可能通过调控AMPK/SIRT1途径促进自噬并抑制凋亡减轻大鼠AKI。 展开更多
关键词 急性肾损伤 水飞蓟素 自噬 凋亡 ampk/sirt1途径
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基于AMPK/SIRT1通路探讨消溶稳斑方对不稳定斑块的作用 被引量:8
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作者 邵静 蒋静 《中国中医基础医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2020年第12期1779-1783,共5页
目的:基于腺苷酸活化蛋白激酶(AMPK)与沉默信息调节因子1(SIRT1)信号通路,探讨消溶稳斑方对防治动脉粥样硬化不稳定斑块的作用机制。方法:选用C57BL/6J小鼠和ApoE基因敲除小鼠分别给予标准饲料和高脂饲料喂养8周后分组:C57+标准+水组、C... 目的:基于腺苷酸活化蛋白激酶(AMPK)与沉默信息调节因子1(SIRT1)信号通路,探讨消溶稳斑方对防治动脉粥样硬化不稳定斑块的作用机制。方法:选用C57BL/6J小鼠和ApoE基因敲除小鼠分别给予标准饲料和高脂饲料喂养8周后分组:C57+标准+水组、C57+高脂+水组、ApoE+标准+水组、ApoE+高脂+水组、ApoE+高脂+他汀组、ApoE+高脂+消溶稳斑方低、中、高剂量组、持续喂养4周,检测各组小鼠主动脉弓组织蛋白中磷酸化的腺苷酸活化蛋白激酶(p-AMPK)、SIRT1蛋白水平,光镜下观察各组小鼠主动脉弓粥样硬化斑块特点以及检测各组间白介素6(IL-6)、肿瘤坏死因子α(TNF-ɑ)、C反应蛋白(CRP)水平。结果:与C57+标准+水组比较,ApoE+高脂+水组p-AMPK、SIRT1蛋白水平均降低,IL-6、TNF-ɑ、CRP水平均升高;与ApoE+高脂+水组比较,各组p-AMPK、SIRT1水平均升高,IL-6、TNF-ɑ、CRP水平均降低;与ApoE+高脂+他汀组比较,ApoE+高脂+中药低、中、高剂量组p-AMPK、SIRT1水平不同程度降低,ApoE+高脂+中药低、中剂量组IL-6、TNF-ɑ、CRP水平不同程度升高;光镜下见各组主动脉弓血管壁呈动脉粥样硬化内皮损伤改变,消溶稳斑方低、中、高剂量组及他汀组病理改变较ApoE+高脂+水组减轻,而他汀组与消溶稳斑方组病理改变程度相当。结论:消溶稳斑方可稳定易损斑块,延缓动脉粥样硬化进展,其机制可能与其调控AMPK/SIRT1通路、提高p-AMPK、SIRT1蛋白水平、上调炎症因子释放阈值、抑制炎症反应有关。 展开更多
关键词 消溶稳斑方 ampk/sirt1通路 不稳定斑块 动脉粥样硬化
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AMPK/Sirt1信号通路在运动调控骨骼肌质量中的作用 被引量:8
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作者 邱守涛 崔迪 +1 位作者 卢健 陈彩珍 《天津体育学院学报》 CAS CSSCI 北大核心 2014年第3期255-258,271,共5页
Sarcopenia指随着年龄的增加,机体骨骼肌质量、力量及功能逐渐下降的现象,它的发生增加了老年人的健康维护成本,给家庭及社会带来沉重经济负担。Sarcopenia的病理生理过程非常复杂,涉及细胞凋亡、氧化应激、蛋白质合成减少、骨骼肌废用... Sarcopenia指随着年龄的增加,机体骨骼肌质量、力量及功能逐渐下降的现象,它的发生增加了老年人的健康维护成本,给家庭及社会带来沉重经济负担。Sarcopenia的病理生理过程非常复杂,涉及细胞凋亡、氧化应激、蛋白质合成减少、骨骼肌废用、炎症反应、线粒体功能障碍等,并与骨骼肌质量控制(蛋白质质量控制和肌纤维数目控制)失衡密切相关。AMPK(AMP-activated protein kinase)、Sirt1(silencing information reg-ulator1)是机体内重要的能量代谢感受器,可感知体内的能量代谢状态,通过改变下游分子的基因表达或活性调节机体能量代谢过程。AMPK/Sirt1信号通路通过对细胞自噬、细胞凋亡、细胞增殖与分化、骨骼肌蛋白合成与降解、炎症反应等过程对的调控影响骨骼肌质量与功能,这可能与机体衰老过程中Sarcopenia的发生、发展及转归密切相关。研究表明,运动可促进骨骼肌蛋白质合成、增加机体的瘦体重,达到预防和治疗Sarcopenia的目的,但运动所引起的AMPK/Sirt1信号通路及其调控下游细胞事件的适应性改变与Sarcopenia的内在联系尚不明确。本文通过对AMPK/Sirt1信号通路与骨骼肌蛋白合成、降解和细胞凋亡等信号通路的关系及其运动调控进行综述,以期深入了解运动、AMPK/Sirt1信号通路与Sarcopenia的内在关系,旨为Sarcopenia的运动防治提供新思路。 展开更多
关键词 运动 ampk/sirt1信号通路 骨骼肌衰减 细胞凋亡 细胞自噬 骨骼肌质量控制
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木瓜发酵液对非酒精性脂肪性肝病小鼠肝脏脂质代谢及AMPK/SIRT1通路的影响 被引量:3
6
作者 涂浩 吴利春 +5 位作者 段丽 尹梦 侯梦莹 张长城 袁丁 刘朝奇 《食品工业科技》 CAS CSCD 北大核心 2016年第22期340-343,353,共5页
目的:观察木瓜发酵液对高糖高脂饲料诱导的非酒精性脂肪性肝病(NAFLD)小鼠脂质代谢及AMP激活蛋白酶(AMPK)/沉默信息调节因子1(SIRT1)通路的调控机制。方法:取雄性昆明小鼠32只,随机分为4组,即正常组、模型组、木瓜发酵液高(10 m L/kg)... 目的:观察木瓜发酵液对高糖高脂饲料诱导的非酒精性脂肪性肝病(NAFLD)小鼠脂质代谢及AMP激活蛋白酶(AMPK)/沉默信息调节因子1(SIRT1)通路的调控机制。方法:取雄性昆明小鼠32只,随机分为4组,即正常组、模型组、木瓜发酵液高(10 m L/kg)和低剂量组(5 m L/kg),每组8只。三周后,收集小鼠血液及组织样本。用试剂盒检测血清ALT、肝组织甘油三酯(TG)含量,分别用RT-PCR和Western Bloting检测p-AMPK和SIRT1基因的mRNA和蛋白表达水平。结果:与正常组比较,模型组小鼠病理证实肝组织脂质蓄积严重,血清ALT和肝脏TG水平明显升高(p<0.05),肝组织SIRT1、Fox O1和p-AMPK mRNA及蛋白表达均显著降低(p<0.05)。与模型组比较,木瓜发酵液明显改善肝组织脂质蓄积,肝组织TG含量明显下降(p<0.05),肝组织SIRT1、Fox O1 mRNA和SIRT1、p-AMPK蛋白表达均显著上调(p<0.05),其中木瓜发酵液高剂量组较低剂量组效果好,但二者比较差异无统计学意义。结论:木瓜发酵液能够改善高糖高脂饮食诱导的NAFLD小鼠脂肪代谢紊乱,减轻肝脏脂质蓄积,其作用机制可能与肝细胞内AMPK/SIRT1通路的激活有关。 展开更多
关键词 木瓜发酵液 非酒精性脂肪性肝病 ampk/sirt1通路 脂质代谢
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虾青素调控AMPK-SIRT1通路对七氟醚诱导HT22神经细胞损伤的影响 被引量:2
7
作者 李瑜 胡莹 +1 位作者 于映映 贾英萍 《现代药物与临床》 CAS 2021年第4期645-651,共7页
目的研究虾青素对七氟醚诱导的海马神经元HT22细胞活力和细胞凋亡的作用与机制。方法体外培养HT22细胞分为对照组、七氟醚组、七氟醚+虾青素(1.25、2.50、5.00μmol/L)组;七氟醚组给予4%七氟醚刺激细胞6 h;七氟醚+虾青素组七氟醚刺激细... 目的研究虾青素对七氟醚诱导的海马神经元HT22细胞活力和细胞凋亡的作用与机制。方法体外培养HT22细胞分为对照组、七氟醚组、七氟醚+虾青素(1.25、2.50、5.00μmol/L)组;七氟醚组给予4%七氟醚刺激细胞6 h;七氟醚+虾青素组七氟醚刺激细胞前给予不同浓度的虾青素处理2 h。采用MTT实验检测各组HT22细胞存活率,DCFH-DA荧光探针和硫代巴比妥酸法分别检测各组细胞内的活性氧(ROS)水平和丙二醛(MDA)含量,流式细胞术和TUNEL检测各组细胞凋亡,Western blotting检测各组细胞中CyclinD1、Cleaved Caspase-3、Bax和Bcl-2、AMPK、p-AMPK、SIRT1蛋白的表达。结果与对照组比较,七氟醚组HT22细胞存活率显著下降和细胞凋亡率显著增加(P<0.05),CyclinD1、Bcl-2、p-AMPK和SIRT1蛋白表达减少(P<0.05),Cleaved Caspase-3、Bax蛋白表达增加(P<0.05),ROS活性和MDA含量降低(P<0.05)。与模型组比较,七氟醚+虾青素HT22细胞Cleaved Caspase-3、Bax蛋白表达下调(P<0.05),CyclinD1、Bcl-2、p-AMPK和SIRT1蛋白表达上调(P<0.05),ROS活性和MDA含量降低(P<0.05),且呈剂量相关性。结论虾青素对七氟醚诱导的HT22细胞凋亡和氧化应激损伤具有保护作用,其机制可能与调控AMPK-SIRT1通路有关。 展开更多
关键词 虾青素 七氟醚 海马神经元 细胞凋亡 氧化应激 ampk-sirt1通路
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消溶稳斑方对ox-LDL诱导的人脐静脉内皮细胞炎症损伤的作用研究 被引量:1
8
作者 蒋静 邵静 《西部中医药》 2021年第10期20-24,共5页
目的:通过探讨消溶稳斑方对氧化低密度脂蛋白(oxidation low lipoprotein,ox-LDL)诱导的人脐静脉内皮细胞炎症反应的作用,进一步阐述消溶稳斑方对炎症反应诱发的动脉粥样硬化的治疗作用与机制。方法:选择培养的第三代人脐静脉内皮细胞,... 目的:通过探讨消溶稳斑方对氧化低密度脂蛋白(oxidation low lipoprotein,ox-LDL)诱导的人脐静脉内皮细胞炎症反应的作用,进一步阐述消溶稳斑方对炎症反应诱发的动脉粥样硬化的治疗作用与机制。方法:选择培养的第三代人脐静脉内皮细胞,将其分为空白组,模型组,他汀组,中药低、中、高浓度组,中药中浓度+抵抗素组,给予对应药物干预。采用蛋白质印迹法(Western blot)测定各组单磷酸腺苷酶活化蛋白激酶(amp-activated protein kinas,p-AMPK)、沉默信息调节因子1(silent information regulator 1,SIRT1)水平,采用逆转录-聚合酶链反应(reverse transcriptase-polymerase chain reaction,RT-PCR)技术检测抑制蛋白激酶β((inhibitor kappa B kinaseβ,IKKβ)mRNA、基质金属蛋白酶9(matrix metalloproteinase-9,MMP-9)mRNA表达,比较各组之间的差异。结果:与空白组比较,模型组,他汀组,中药低、中浓度组,中药中浓度+抵抗素组p-AMPK、SIRT1水平均不同程度降低(P<0.05),IKKβmRNA、MMP-9 mRNA表达呈上升趋势(P<0.05)。与模型组比较,他汀组,中药低、中、高浓度组p-AMPK、SIRT1水平均升高(P<0.05),IKKβmRNA、MMP-9 mRNA表达呈下降趋势(P<0.05)。与他汀组比较,中药低浓度组p-AMPK、SIRT1水平降低(P<0.05),中药中、高浓度组p-AMPK、SIRT1水平升高,但差异无统计学意义(P>0.05),IKKβmRNA、MMP-9 mRNA表达呈下降趋势(P<0.05)。结论:消溶稳斑方可通过作用于AMPK/SIRT1信号通路,上调p-AMPK、SIRT1水平,抑制IKKβmRNA、MMP-9 mRNA表达,阻断炎症因子释放,抑制炎症反应造成的血管内皮细胞损伤,发挥保护血管内皮细胞、防治动脉粥样硬化的作用。 展开更多
关键词 消溶稳斑方 人脐静脉内皮细胞 动脉粥样硬化 炎症反应 ampk/sirt1通路
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miR-23a对软骨细胞增殖、分化和氧化应激的影响机制
9
作者 孙卫国 郝强 +2 位作者 孙开旺 王顺超 杨德文 《生物技术》 CAS 2022年第5期582-586,共5页
[目的]探究miR-23a调控AMPK/SIRT1通路对人退变关节软骨细胞增殖、分化和氧化应激的影响。[方法]人退变关节软骨分为对照组、miR-23a mimic组、miR-23a inhibitor组。通过对以上三组细胞转染miR-23a NC、miR-23a mimic和miR-23a inhibi... [目的]探究miR-23a调控AMPK/SIRT1通路对人退变关节软骨细胞增殖、分化和氧化应激的影响。[方法]人退变关节软骨分为对照组、miR-23a mimic组、miR-23a inhibitor组。通过对以上三组细胞转染miR-23a NC、miR-23a mimic和miR-23a inhibitor转染来干扰细胞中miR-23a的表达水平。转染完成后,分别通过CCK-8、ELISA和Western Blot实验检测各组细胞增殖、氧化应激水平、分化能力以及AMPK/SIRT1信号通路的表达水平。[结果]三组细胞的各项比较差异显著(P<0.05)。与对照组相比,miR-23a mimic组的miR-23a、骨形成蛋白(BMP)2、BMP4、MDA水平显著升高(P<0.05),而OD值、SOD、AMPK/SIRT1通路水平显著降低(P<0.05)。与对照组相比,miR-23a inhibitor组的miR-23a、BMP2、BMP4、MDA水平显著降低(P<0.05),而OD值、SOD、AMPK/SIRT1通路水平显著升高(P<0.05)。[结论]OA患者的软骨组织中的miR-23a表达水平显著升高,miR-23a在退化的软骨中可抑制软骨细胞增殖,参与软骨分化,并抑制AMPK/SIRT1通路。 展开更多
关键词 骨关节炎 软骨退化 微小RNA-23a ampk/sirt1通路
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白细胞介素-6通过AMPK/SIRT1通路下调eNOS Thr495/497
10
作者 李畅 杨茜洋 +1 位作者 罗明昊 罗素新 《中国细胞生物学学报》 CAS CSCD 2021年第2期345-352,共8页
该文探讨了白细胞介素-6(interleukin-6,IL-6)对牛主动脉内皮细胞(bovine aortic endothelial cells,BAECs)的内皮型一氧化氮合成酶(endothelial nitric oxide synthase,eNOS)的影响及其可能的发生机制。在原代BAECs细胞培养基础上,选取... 该文探讨了白细胞介素-6(interleukin-6,IL-6)对牛主动脉内皮细胞(bovine aortic endothelial cells,BAECs)的内皮型一氧化氮合成酶(endothelial nitric oxide synthase,eNOS)的影响及其可能的发生机制。在原代BAECs细胞培养基础上,选取IL-6不同浓度(10、20、40 ng/mL)、不同时间(0.5、1、2 h)处理BAECs;AMPKα1 siRNA预处理BAECs后加入IL-6共处理2 h。用Western blot方法检测BAECs细胞中eNOS、Thr497、腺苷酸活化蛋白激酶(AMPK)、p-AMPK、沉默信息调节因子2相关酶1(SIRT1)的表达情况,用一氧化氮(NO)检测试剂盒检测BAECs细胞中NO含量。结果显示,与正常对照组相比,IL-6显著降低Thr497的表达(P<0.05),同时伴有p-AMPK、SIRT1上调(P<0.05),NO含量升高。而IL-6对Thr497的下调作用被AMPKα1 siRNA和EX-527阻断(P<0.05)。总之,IL-6可下调BAECs中Thr497表达进而影响eNOS活性,其作用机制可能涉及到AMPK/SIRT1通路的参与。 展开更多
关键词 白细胞介素-6 内皮型一氧化氮合成酶 一氧化氮 磷酸化 ampk/sirt1通路
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淫羊藿总黄酮通过AMPK/SIRT1/NFκB信号通路减轻自然衰老大鼠睾丸组织炎症反应 被引量:15
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作者 韩贵芳 张长城 +3 位作者 陈茜 马娜 袁丁 赵海霞 《天然产物研究与开发》 CAS CSCD 北大核心 2018年第9期1489-1493,共5页
探讨淫羊藿总黄酮(Total flavonoids of Epimedium,TFE)对自然衰老大鼠睾丸组织中AMPK/SIRT1/NFκB信号通路的影响及其抗炎作用。将40只18月龄雄性SD大鼠随机分为TFE低、中、高剂量组和自然衰老组,每组10只。另取10只2月龄雄性SD大鼠作... 探讨淫羊藿总黄酮(Total flavonoids of Epimedium,TFE)对自然衰老大鼠睾丸组织中AMPK/SIRT1/NFκB信号通路的影响及其抗炎作用。将40只18月龄雄性SD大鼠随机分为TFE低、中、高剂量组和自然衰老组,每组10只。另取10只2月龄雄性SD大鼠作为青年对照组。TFE低、中、高剂量组分别以10、20、40 mg/kg剂量灌胃给药,青年对照组和自然衰老组大鼠均灌胃给予质量分数为1%羧甲基纤维素钠溶液,持续给药4个月。HE染色观察大鼠睾丸组织形态,Western blot法检测各组大鼠睾丸组织中AMPK、p-AMPK、SIRT1、acetylNFκBp65、IL-1β、TNFα蛋白表达水平。结果显示,与自然衰老组相比,TFE低、中、高剂量组大鼠睾丸组织形态结构均有明显改善,TFE可促进大鼠睾丸组织内p-AMPK和SIRT1蛋白表达,显著降低acetyl-NFκBp65及其下游炎症因子IL-1β、TNFα蛋白表达水平。实验结果表明,TFE可减轻自然衰老大鼠睾丸组织炎症反应,其机制可能与调控AMPK/SIRT1/NFκB信号通路有关。 展开更多
关键词 淫羊藿总黄酮 衰老 睾丸 炎症反应 ampk/sirt1/NFκB通路
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竹节参总皂苷通过调节AMPK/Sirt1/NF-κB通路抑制衰老大鼠心肌细胞凋亡的作用研究 被引量:14
12
作者 宋亚男 袁丁 +4 位作者 张长城 王烙佩 何毓敏 王婷 周志勇 《中国中药杂志》 CAS CSCD 北大核心 2017年第23期4656-4660,共5页
研究竹节参总皂苷(saponins extracted from Panax japonicus,SPJ)对自然衰老大鼠心肌细胞凋亡的调节作用及其作用机制。将SD雄性大鼠随机分为青年对照组、自然衰老组、SPJ低剂量组、SPJ高剂量组,每组10只。自然衰老组、SPJ低、高剂量组... 研究竹节参总皂苷(saponins extracted from Panax japonicus,SPJ)对自然衰老大鼠心肌细胞凋亡的调节作用及其作用机制。将SD雄性大鼠随机分为青年对照组、自然衰老组、SPJ低剂量组、SPJ高剂量组,每组10只。自然衰老组、SPJ低、高剂量组从18月龄开始分别灌胃给予生理盐水、SPJ 10,60 mg·kg^(-1)·d-1,每周灌胃6 d,持续6个月至24月龄处理动物。HE染色观察各组大鼠心肌形态;Tunel法检测心肌细胞凋亡;Western blot检测各组大鼠心肌组织中Bcl-2,Bax,IL^(-1)β,TNF-α,AMPK,p-AMPK,Sirt1,Ac-NF-κB p65蛋白表达。SPJ能有效改善自然衰老大鼠心肌纤维的排列紊乱,减少炎性细胞浸润,抑制心肌细胞凋亡。同时,SPJ能明显抑制自然衰老过程中心脏组织Bax,IL^(-1)β,TNF-α,Ac-NF-κB p65的表达,促进Bcl-2,Bcl-2/Bax,p-AMPK/AMPK,Sirt1蛋白表达。SPJ可有效抑制自然衰老大鼠心肌细胞凋亡,其作用机制可能与调节AMPK/Sirt1/NF-κB通路介导的炎症反应有关。 展开更多
关键词 竹节参总皂苷 自然衰老大鼠 心肌细胞凋亡 炎症反应 ampk/sirt1/NF-κB信号通路
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白术内酯Ⅲ调节AMPK/SIRT1/NF-κB信号通路对脓毒症大鼠肝损伤的影响 被引量:8
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作者 潘毅 陈军喜 +1 位作者 闫智杰 夏芝辉 《实用医学杂志》 CAS 北大核心 2023年第7期827-832,共6页
目的探究白术内酯Ⅲ(AtractylideneⅢ,Atr-Ⅲ)对脓毒症大鼠肝损伤的影响以及对腺苷酸激活蛋白激酶(AMPK)/去乙酰化酶1(SIRT1)/核因子-κB(NF-κB)信号通路的调节作用。方法将60只SPF级SD雄性大鼠分为假手术组、模型组、阳性组、Atr-Ⅲ... 目的探究白术内酯Ⅲ(AtractylideneⅢ,Atr-Ⅲ)对脓毒症大鼠肝损伤的影响以及对腺苷酸激活蛋白激酶(AMPK)/去乙酰化酶1(SIRT1)/核因子-κB(NF-κB)信号通路的调节作用。方法将60只SPF级SD雄性大鼠分为假手术组、模型组、阳性组、Atr-Ⅲ低、高剂量组、Atr-Ⅲ高剂量+AMPK抑制剂组。检测大鼠血清中谷草转氨酶(AST)、谷丙转氨酶(ALT)水平;苏木素-伊红(HE)染色观察肝组织的病理变化;TUNEL染色检测肝细胞凋亡情况;ELISA检测血清白细胞介素1β(IL-1β)、白细胞介素6(IL-6)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)水平;检测肝组织超氧化物歧化酶(SOD)和过氧化氢酶(CAT)的活性;Western blot检测通路相关蛋白表达情况。结果与假手术组相比,模型组大鼠肝细胞损伤严重,AST、ALT、IL-1β、IL-6、TNF-α水平、细胞凋亡率、p65 NF-κB磷酸化表达均升高,SOD、CAT活性、AMPK磷酸化、SIRT1蛋白表达均降低(P<0.05);与模型组相比,阳性组和Atr-Ⅲ组大鼠肝细胞形态恢复,AST、ALT、IL-1β、IL-6、TNF-α水平、细胞凋亡率、p65 NF-κB磷酸化表达均降低,SOD、CAT水平、AMPK磷酸化、SIRT1蛋白表达均升高(P<0.05)。AMPK抑制剂BML-275消除了高剂量ATL-Ⅲ对脓毒症大鼠肝损伤的缓解作用。结论Atr-Ⅲ可以激活AMPK/SIRT1信号通路,抑制p65 NF-κB活化,减轻脓毒症大鼠的肝损伤。 展开更多
关键词 白术内酯Ⅲ ampk/sirt1/NF-κB通路 脓毒症 肝损伤 炎症
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茶黄素调节AMPK/SIRT1/NF-κB信号通路对膝骨关节炎大鼠的治疗作用 被引量:6
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作者 郭文帆 杨学钰 +3 位作者 郑雪君 卢吉高 杨勇 李会东 《河北医学》 CAS 2023年第1期42-49,共8页
目的:探讨茶黄素调节腺苷酸活化蛋白激酶(AMPK)/沉默信息调节因子1(SIRT1)/核因子-κB(NF-κB)信号通路对膝骨关节炎(KOA)大鼠的治疗作用。方法:向63只SD大鼠右膝关节注射50μL的碘乙酸钠(MIA)0.01mg/μL制备KOA大鼠模型,另取13只大鼠... 目的:探讨茶黄素调节腺苷酸活化蛋白激酶(AMPK)/沉默信息调节因子1(SIRT1)/核因子-κB(NF-κB)信号通路对膝骨关节炎(KOA)大鼠的治疗作用。方法:向63只SD大鼠右膝关节注射50μL的碘乙酸钠(MIA)0.01mg/μL制备KOA大鼠模型,另取13只大鼠仅膝关节注射生理盐水作为空白组,两周后随机从造模和空白组挑选3只大鼠,进行HE染色、Mankin和lequesne MG评分,以鉴定KOA模型是否制备成功。剩余造模成功大鼠随机分为模型组、茶黄素低剂量组(20mg/kg茶黄素)、茶黄素中剂量组(40mg/kg茶黄素)、茶黄素高剂量组(80mg/kg茶黄素)、塞来昔布组(18mg/kg阳性药塞来昔布)、抑制剂组(80mg/kg茶黄素+0.2mg/kg AMPK抑制剂Compound C)。茶黄素低、中、高剂量组以及塞来昔布组灌胃相应剂量药物,空白组和模型组灌胃等体积的蒸馏水,抑制剂组除灌胃相应剂量茶黄素外还需尾静脉注射相应剂量Compound C,每天1次,连续给药4周。在第15天(造模后1天),第29天(给药第14天)和第43天(给药第28天)检测大鼠机械疼痛阈值和大鼠关节宽度;观察大鼠行为学变化,进行lequesne MG评分;HE染色观察软骨组织病理变化并进行Mankin评分;试剂盒测定血清炎症因子(IL-1β、TNF-α和COMP)以及氧化应激标志物(SOD和MDA)水平;Western Blot检测AMPK/SIRT1/NF-κB信号通路相关蛋白表达。结果:与空白组相比,造模大鼠膝关节细胞排列紊乱,表面粗糙,排列不均匀,软骨细胞数量减少,潮痕不明显,并且Mankin和lequesne MG评分显著升高表明KOA大鼠造模成功。与空白组相比,第15天时,模型组、茶黄素低、中、高剂量组、塞来昔布组和抑制剂组大鼠疼痛阈值显著降低,关节宽度显著增加(P<0.05);与空白组相比,模型组大鼠软骨层较薄,大鼠足底肿胀,HE染色不均匀,细胞排列紊乱,表面粗糙,裂隙均匀,排列不均匀,软骨细胞数量减少,潮痕不明显,Mankin和lequesne MG评分、血清IL-1β、TNF-α、COMP 展开更多
关键词 膝骨关节炎 茶黄素 ampk/sirt1/NF-κB信号通路
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栀子苷通过AMPK/SIRT1/NF-κB通路调节乳腺癌细胞增殖、焦亡和侵袭 被引量:7
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作者 时延龙 周鹏 +2 位作者 王雪凯 郭煜 王强 《广西医科大学学报》 CAS 2022年第11期1700-1705,共6页
目的:探究栀子苷(GEN)通过AMPK/SIRT1/NF-κB通路对乳腺癌细胞的增殖、焦亡和侵袭的影响。方法:体外培养人乳腺癌MCF-7细胞,将其分为对照组、GEN低、中、高剂量(L-GEN、M-GEN、H-GEN)组和H-GEN+AMPK抑制剂组。采用细胞计数试剂盒(CCK-8... 目的:探究栀子苷(GEN)通过AMPK/SIRT1/NF-κB通路对乳腺癌细胞的增殖、焦亡和侵袭的影响。方法:体外培养人乳腺癌MCF-7细胞,将其分为对照组、GEN低、中、高剂量(L-GEN、M-GEN、H-GEN)组和H-GEN+AMPK抑制剂组。采用细胞计数试剂盒(CCK-8)实验、克隆形成实验检测MCF-7细胞增殖,检测MCF-7细胞焦亡[观察细胞形态变化、检测乳酸脱氢酶(LDH)释放量],Transwell实验检测MCF-7细胞侵袭,检测MCF-7细胞线粒体功能(JC-1法检测线粒体膜电位下降比例、Cell Titer-Glo®试剂盒检测ATP生成量),蛋白质免疫印迹(Western blotting)法检测AMPK/SIRT1/NF-κB通路相关蛋白表达。结果:与对照组比较,L-GEN组、M-GEN组、H-GEN组MCF-7细胞增殖率、克隆数、侵袭数减少,LDH释放量增加(均P<0.05),细胞密度降低、变圆、膨胀,在质膜上产生较大的气泡,表现出明显焦亡现象,以H-GEN组变化更为明显;与H-GEN组比较,HGEN+AMPK抑制剂组MCF-7细胞增殖率、克隆数、侵袭数增加,LDH释放量减少(均P<0.05),细胞焦亡现象减轻。与对照组比较,H-GEN组MCF-7细胞线粒体膜电位下降比例及p-AMPK、SIRT1、核NF-κB蛋白相对表达量升高,ATP生成量减少(P<0.05);与H-GEN组比较,H-GEN+AMPK抑制剂组MCF-7细胞线粒体膜电位下降比例及p-AMPK、SIRT1、核NF-κB蛋白相对表达量降低,ATP生成量增加(均P<0.05)。结论:GEN能够诱导人乳腺癌MCF-7细胞线粒体功能障碍,抑制MCF-7细胞增殖和侵袭,促进其焦亡,其机制可能与激活AMPK/SIRT1/NF-κB通路有关。 展开更多
关键词 栀子苷 ampk/sirt1/NF-κB通路 乳腺癌 增殖 焦亡 侵袭
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苍术素调节腺苷酸活化蛋白激酶/沉默信息调节因子1信号通路对白细胞介素-1β诱导软骨细胞自噬和凋亡的影响
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作者 沈晓娟 程磊 刘琳 《安徽医药》 CAS 2024年第5期899-903,I0004,共6页
目的探讨苍术素(ATR)通过调节腺苷酸活化蛋白激酶/沉默信息调节因子1(AMPK/SIRT1)信号通路对白细胞介素1β(IL-1β)诱导的乳鼠软骨细胞自噬与凋亡的影响。方法2022年1―8月从乳鼠中分离软骨细胞并鉴定;使用不同浓度苍术素(0、5.0、10.0... 目的探讨苍术素(ATR)通过调节腺苷酸活化蛋白激酶/沉默信息调节因子1(AMPK/SIRT1)信号通路对白细胞介素1β(IL-1β)诱导的乳鼠软骨细胞自噬与凋亡的影响。方法2022年1―8月从乳鼠中分离软骨细胞并鉴定;使用不同浓度苍术素(0、5.0、10.0、20.0、40.0、80.0μmol/L)预处理软骨细胞,再使用IL-1β诱导软骨细胞培养24 h,噻唑蓝(MTT)法检测增殖活性,筛选最佳药物浓度;将软骨细胞分为对照组、IL-1β组(10μg/L IL-1β)、苍术素组(10μg/L IL-1β+20μmol/L苍术素)、苍术素+AMPK抑制剂组(苍术素+compound C组,10μg/L IL-1β+20μmol/L苍术素+50μmol/L compound C);流式细胞术与TUNEL法检测软骨细胞凋亡,单丹磺酰尸胺(MDC)染色观察自噬小体;蛋白质印迹法检测自噬及AMPK/SIRT1通路相关蛋白表达。结果与对照组比较,IL-1β组软骨细胞增殖活性、自噬水平、微管相关蛋白轻链3Ⅱ/Ⅰ(LC3Ⅱ/LC3Ⅰ)[(0.47±0.08)比(1.23±0.14)]、Beclin-1[(0.67±0.09)比(1.45±0.19)]、自噬相关基因-5(Atg5)[(0.35±0.06)比(1.14±0.13)]、磷酸化AMPK(p-AMPK)[(0.37±0.05)比(0.91±0.05)]、SIRT1[(0.51±0.06)比(1.31±0.14)]、磷酸化Unc-51样自噬激活蛋白酶(p-ULK1)蛋白表达[(0.25±0.04)比(0.85±0.11)]降低,细胞凋亡率[(28.46±3.55)%比(2.54±0.82)%]升高(P<0.05);与IL-1β组比较,苍术素组细胞增殖活性、自噬水平、LC3Ⅱ/LC3Ⅰ、Beclin-1、Atg5、p-AMPK、SIRT1、p-ULK1蛋白表达升高,细胞凋亡率降低(P<0.05);compound C可逆转苍术素对IL-1β诱导的软骨细胞自噬激活作用。结论苍术素通过激活AMPK/SIRT1信号通路促进IL-1β诱导的大鼠软骨细胞自噬,抑制细胞凋亡。 展开更多
关键词 苍术属 白细胞介素1β 软骨细胞 ampk/sirt1信号通路 自噬
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基于网络药理学研究大补元煎防治AD的作用机制及AMPK/SIRT1信号通路验证
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作者 田梦杰 龙清华 +3 位作者 曾楚华 刘道忠 王平 袁林 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2024年第8期1692-1700,共9页
目的:通过网络药理学和分子对接技术探究大补元煎防治阿尔茨海默病(AD)的作用机制,并利用动物实验验证所发现的分子机制。方法:网络药理学分析大补元煎抗AD的有效成分及作用靶点。利用AutoDock和PyMOL软件对药物的核心成分与核心蛋白进... 目的:通过网络药理学和分子对接技术探究大补元煎防治阿尔茨海默病(AD)的作用机制,并利用动物实验验证所发现的分子机制。方法:网络药理学分析大补元煎抗AD的有效成分及作用靶点。利用AutoDock和PyMOL软件对药物的核心成分与核心蛋白进行分子对接验证。AD模型小鼠给予大补元煎治疗,并验证所发现的核心通路。结果:共筛选出80个有效活性成分和107个疾病作用靶点。大补元煎治疗AD的作用靶点有95个,其中核心靶点有35个。GO富集发现主要涉及程序性细胞死亡过程、细胞凋亡和信号转导调节等。KEGG信号通路富集发现主要涉及磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)/蛋白激酶B(Akt)信号通路、Wnt信号通路、腺苷酸活化蛋白激酶(AMPK)信号通路等。Morris水迷宫实验显示,大补元煎可减少AD小鼠的平台潜伏期,并增加小鼠的穿越平台次数和目标象限时间。免疫组化实验(IHC)结果显示,大补元煎可增加AD小鼠海马CA3区神经元核抗原(NeuN)标记的阳性细胞数。免疫荧光(IF)结果显示,大补元煎可抑制AD小鼠海马CA3区胶质纤维酸性蛋白(GFAP)、离子钙结合蛋白1(IBA1)的表达水平。Western blot实验显示,大补元煎可增加AD小鼠海马中磷酸化的腺苷酸活化蛋白激酶α(AMPKα)和沉默信息调节因子1(SIRT1)的表达水平。结论:本研究探讨了大补元煎抗AD的作用机制,并发现大补元煎可通过激活AMPK/SIRT1信号通路改善AD认知损伤、神经元丢失和神经炎症。 展开更多
关键词 大补元煎 阿尔茨海默病 网络药理学 ampk/sirt1信号通路
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新加苁蓉菟丝子汤通过调控AMPK/SIRT1信号通路对卵巢储备功能减退大鼠线粒体功能的影响 被引量:2
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作者 史薇 银雪梅 +2 位作者 王智超 吴也可 吴克明 《中成药》 CAS CSCD 北大核心 2023年第10期3221-3227,共7页
目的研究新加苁蓉菟丝子汤通过调控AMPK/SIRT1信号通路对卵巢储备功能减退(DOR)大鼠线粒体功能的影响。方法大鼠给予雷公藤甲素(500μg/kg)灌胃30 d建立DOR模型,随机分为模型组、调经促孕丸组(1.05 g/kg)、新加苁蓉菟丝子汤组(5.11 g/k... 目的研究新加苁蓉菟丝子汤通过调控AMPK/SIRT1信号通路对卵巢储备功能减退(DOR)大鼠线粒体功能的影响。方法大鼠给予雷公藤甲素(500μg/kg)灌胃30 d建立DOR模型,随机分为模型组、调经促孕丸组(1.05 g/kg)、新加苁蓉菟丝子汤组(5.11 g/kg),每组6只,另取6只正常大鼠作为空白组,灌胃给予相应药物。给药2周后,观察大鼠动情周期,HE染色计数卵巢各级卵泡、黄体数,ELISA法检测血清FSH、AMH、INHB水平,透射电镜下观察卵巢组织线粒体结构,流式细胞术检测卵巢组织ROS、MMP水平,试剂盒检测卵巢组织ATP水平,Western blot法检测卵巢组织AMPK、SIRT1、PGC-1α蛋白表达。结果与模型组比较,新加苁蓉菟丝子汤组部分大鼠恢复动情周期,初级、次级卵泡数、黄体数增加(P<0.05,P<0.01),闭锁卵泡数减少(P<0.01);血清FSH水平降低(P<0.05),AMH水平升高(P<0.05);卵巢组织线粒体形态学及功能损伤得到缓解,ROS水平降低(P<0.01),MMP、ATP水平升高(P<0.01);卵巢组织AMPK、SIRT1、PGC-1α蛋白表达升高(P<0.01)。结论新加苁蓉菟丝子汤可有效改善卵巢储备功能减退大鼠线粒体功能障碍,促进卵泡发育,保护卵巢功能,其作用机制可能与激活AMPK/SIRT1信号通路有关。 展开更多
关键词 新加苁蓉菟丝子汤 卵巢储备功能减退 线粒体功能 ampk/sirt1信号通路
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LncRNA MINCR调控AMPK/SIRT1信号通路对LPS诱导的人肺泡上皮细胞自噬和炎症反应的作用机制
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作者 叶明 方庆 +1 位作者 冯雁明 代朋 《解剖学研究》 CAS 2024年第5期444-450,共7页
目的探讨lncRNA MINCR调控AMPK/SIRT1信号通路对LPS诱导的人肺泡上皮细胞自噬和炎症反应的作用机制。方法将A549细胞随机分为Control组(A549细胞正常培养)、LPS组(10μg/mL LPS处理A549)、si-NC组(转染si-NC质粒后,10μg/mL LPS处理A549... 目的探讨lncRNA MINCR调控AMPK/SIRT1信号通路对LPS诱导的人肺泡上皮细胞自噬和炎症反应的作用机制。方法将A549细胞随机分为Control组(A549细胞正常培养)、LPS组(10μg/mL LPS处理A549)、si-NC组(转染si-NC质粒后,10μg/mL LPS处理A549)、si-MINCR组(转染si-MINCR质粒后,10μg/mL LPS处理A549)和si-MINCR+Compound C组(转染si-MINCR质粒后,10μg/mL LPS和50μmol/L的Compound C处理A549)。qRT-PCR检测细胞中MINCR相对表达量,CCK-8和流式细胞仪检测细胞存活率和凋亡率,ELISA检测细胞中炎症因子IL-6、IL-8、TNF-α水平,蛋白质印迹法检测细胞中LC3、p62、Beclin-1、AMPK、p-AMPK、SIRT1蛋白表达。结果与Control组比较,LPS组细胞中MINCR相对表达量(3.84±0.52)、细胞凋亡率(26.84%±3.12%)、细胞中IL-6(416.95±45.06)、IL-8(549.32±61.45)、TNF-α(694.81±71.42)水平及细胞中p62蛋白(0.87±0.10)表达明显升高,细胞中LC3Ⅱ/LC3Ι比值(0.32±0.05)、p-AMPK/AMPK比值(0.31±0.05)、Beclin-1(0.52±0.07)和SIRT1蛋白(0.46±0.06)表达明显降低(P<0.01);与LPS组比较,si-MINCR组细胞中MINCR相对表达量(1.45±0.26)、细胞凋亡率(9.62%±1.15%)、细胞中IL-6(198.62±21.34)、IL-8(287.15±30.76)、TNF-α(364.72±40.59)水平及细胞中p62蛋白(0.87±0.10)表达明显降低,LC3Ⅱ/LC3Ι比值(0.78±0.09)、p-AMPK/AMPK比值(0.64±0.07)、Beclin-1(0.73±0.08)和SIRT1蛋白(0.81±0.09)表达明显增加(P<0.01);与si-MINCR组比较,si-MINCR+Compound C组细胞中MINCR相对表达量(3.21±0.45)、细胞凋亡率(20.24%±2.26%)、细胞中IL-6(395.78±10.47)、IL-8(543.26±56.71)、TNF-α水平(610.54±65.33)及细胞中p62蛋白(0.79±0.08)表达明显升高,细胞中LC3Ⅱ/LC3Ι比值(0.40±0.06)、p-AMPK/AMPK比值(0.38±0.04)、Beclin-1(0.56±0.06)和SIRT1(0.52±0.07)蛋白表达明显降低(P<0.01)。结论敲减lncRNA MINCR可促进LPS诱导的肺泡上皮细胞自噬,减轻炎性损伤,其作用机制可能与激活AMPK/SIRT1信号通路有关。 展开更多
关键词 肺泡上皮细胞 长链非编码RNA 脂多糖 自噬 炎症反应 ampk/sirt1信号通路
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虫草菌丝调节AMPK/SirT1信号通路对四氯化碳诱导肝纤维化小鼠的作用
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作者 杨钊 闫阮玉 +5 位作者 吴洪雨 黄恺 沈丽 陶艳艳 刘成海 彭渊 《中国实验动物学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第5期630-637,共8页
目的研究虫草菌丝(cultured mycelium Cordyceps sinensis,CMCS)对四氯化碳(CCl4)诱导肝纤维化模型小鼠肝腺苷酸活化蛋白激酶/沉默信息调节因子1(AMPK/SirT1)信号通路的作用机制。方法将C57BL/6小鼠(n=40)按体重分层随机分为5组:正常对... 目的研究虫草菌丝(cultured mycelium Cordyceps sinensis,CMCS)对四氯化碳(CCl4)诱导肝纤维化模型小鼠肝腺苷酸活化蛋白激酶/沉默信息调节因子1(AMPK/SirT1)信号通路的作用机制。方法将C57BL/6小鼠(n=40)按体重分层随机分为5组:正常对照组、CMCS对照组(3.0 g/kg)、模型对照组、CMCS 1.5 g/kg组(1.5 g/kg)和CMCS 3.0 g/kg组(3.0 g/kg),采用腹腔注射10%CCl4(2 mL/kg)诱导小鼠肝损伤模型。造模与给药2周后,检测血清ALT、AST、TBil水平;苏木素-伊红(HE)染色观察肝炎症;天狼星红染色观察肝胶原沉积;Jamall’s法检测肝羟脯氨酸(Hyp)含量;流式蛋白定量技术(cytometric bead array,CBA)检测肝组织IL-6、MCP-1、IFN-γ、TNF、IL-10、IL-12p70水平;免疫组化观察肝组织CollagenⅠ和SirT1表达情况;RT-qPCR检测肝组织Prkaa1、Prkaa2、Lkb1和p53水平。结果CCl4染毒2周后,模型对照组血清ALT、AST、TBil水平均明显升高(P<0.05);HE染色和天狼星红染色分别提示肝内大量炎症细胞浸润和胶原沉积;肝Hyp含量及IL-6、MCP-1、TNF表达明显增多(P<0.05),IL-10和IL-12p70表达明显减少(P<0.01);免疫组化染色提示肝组织Collagen I表达增多;SirT1在肝窦间隙表达减少,在胶原沉积处表达增多;RT-qPCR检测提示肝组织Prkaa1、Prkaa2、Lkb1表达下降,p53表达增多(P<0.05)。CMCS可显著降低纤维化小鼠血清ALT、AST水平;降低肝组织IL-6、MCP-1、TNF表达(P<0.05),上调IL-10、IL-12p70水平(P<0.05);减少肝炎细胞浸润、胶原形成和Hyp含量,促进肝窦内SirT1表达,上调肝Prkaa1、Prkaa2、Lkb1表达(P<0.05);减轻肝内CollagenⅠ、p53表达(P<0.05)。与CMCS 1.5 g/kg组相比,CMCS 3.0 g/kg组抑制肝炎症、胶原沉积及上调AMPK/SirT1表达更为明显(P<0.05)。结论CMCS可通过上调AMPK/SirT1信号通路而发挥抗CCl4诱导小鼠肝纤维化的作用。 展开更多
关键词 虫草菌丝 四氯化碳(CCl4) 肝纤维化 ampk/sirt1信号通路
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