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基于AMPK/PGC-1α信号通路探讨乌萸汤对初老小鼠卵母细胞的作用机制 被引量:3
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作者 付寒雪 赵嘉静 黄文玲 《现代中西医结合杂志》 CAS 2022年第12期1624-1629,共6页
目的基于磷酸腺苷活化蛋白激酶(AMPK)/过氧化物酶体增殖活化受体γ共激活因子1α(PGC-1α)信号通路探讨乌萸汤对初老小鼠卵母细胞的作用机制。方法采用雄性6周龄SD大鼠制备乌萸汤含药血清;采用未成熟卵体外培养技术,原代细胞培养6周龄... 目的基于磷酸腺苷活化蛋白激酶(AMPK)/过氧化物酶体增殖活化受体γ共激活因子1α(PGC-1α)信号通路探讨乌萸汤对初老小鼠卵母细胞的作用机制。方法采用雄性6周龄SD大鼠制备乌萸汤含药血清;采用未成熟卵体外培养技术,原代细胞培养6周龄、24周龄小鼠卵母细胞后提取卵丘卵母细胞复合体(COC)。实验分为8组:对照组(6周龄小鼠COC培养于基础培养基)、初老组(24周龄小鼠COC培养于基础培养基)、初老+AICAR组(AMPK激动剂AICAR预处理24周龄小鼠COC 2 h)、初老+Compound C组(AMPK抑制剂Compound C预处理24周龄小鼠COC 2 h)、初老+乌萸汤含药血清组(24周龄小鼠COC培养于乌萸汤含药血清培养基)、初老+乌萸汤含药血清组+AICAR组(AMPK激动剂AICAR预处理24周龄小鼠COC 2 h后培养于乌萸汤含药血清培养基)、初老+乌萸汤含药血清组+Compound C组(AMPK抑制剂Compound C预处理24周龄小鼠COC 2 h后培养于乌萸汤含药血清培养基)、初老+山茱萸环烯醚萜苷类提取物组(24周龄小鼠COC培养于山茱萸环烯醚萜苷类提取物培养基)。采用PCR法及Western blot法检测各组卵母细胞中AMPK/PCG-1α通路相关因子基因及蛋白表达情况。结果初老+AICAR组、初老+乌萸汤含药血清组卵母细胞中AMPKα、PGC-1α、Nrf1基因相对表达量及AMPKα、p-AMPKα(Thr172)、PGC-1α、Nrf1蛋白相对表达量和初老+乌萸汤含药血清+AICAR组卵母细胞中AMPKα、PGC-1α、Nrf1基因相对表达量及AMPKα、p-AMPKα(Thr172)、PGC-1α蛋白相对表达量均明显高于初老组(P均<0.05);初老+AICAR组、初老+乌萸汤含药血清组、初老+乌萸汤含药血清+AICAR组卵母细胞中Nrf2基因相对表达量及初老+Compound C组卵母细胞中AMPKα、PGC-1α、Nrf1、Nrf2基因相对表达量均明显低于初老组(P均<0.05);初老+乌萸汤含药血清+Compound C组卵母细胞中AMPKα、PGC-1α、Nrf1、Nrf2基因相对表达量及p-AMPKα(Thr172)、PGC-1α、Nrf1蛋白相� 展开更多
关键词 ampk/pgc-1α通路 乌萸汤 卵母细胞 线粒体
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人牙髓干细胞条件培养基通过AMPK/PGC-1α途径改善氯化钴诱导的颏舌肌成肌细胞低氧损伤 被引量:1
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作者 张维华 於丽明 +4 位作者 韩欣欣 潘杰 邓佳佳 朱露莹 刘月华 《上海口腔医学》 CAS CSCD 北大核心 2020年第6期573-579,共7页
目的:研究氯化钴(CoCl2)模拟的低氧对颏舌肌成肌细胞活性和氧化应激的影响,探讨人牙髓干细胞(human dental pulp stem cells,hDPSCs)条件培养基(conditioned medium,CM)保护作用的机制与AMPK/PGC-1α通路的关系。方法:分离、培养及鉴定h... 目的:研究氯化钴(CoCl2)模拟的低氧对颏舌肌成肌细胞活性和氧化应激的影响,探讨人牙髓干细胞(human dental pulp stem cells,hDPSCs)条件培养基(conditioned medium,CM)保护作用的机制与AMPK/PGC-1α通路的关系。方法:分离、培养及鉴定hDPSCs,通过超滤浓缩法提取条件培养基;分离、培养小鼠颏舌肌成肌细胞,分为对照组、CM组、CoCl2组、CoCl2+CM组。采用CCK-8法检测颏舌肌成肌细胞的活性,分别使用DCFH-DA和MitoSOX Red评估细胞内和线粒体活性氧((reac)tive oxygen species,ROS)水平,实时定量PCR分析NRF-1、NRF-2线粒体相关基因的表达,Western印迹法检测PGC-1α、p-AMPK、总AMPK蛋白表达。采用SPSS 22.0软件包对数据进行统计学分析。结果:颇舌肌成肌细胞经过200μmol/L CoCl2处理24 h后增殖显著下降(P<0.05),细胞内和线粒体内ROS含量显著上升(P<0.05);与CoCl2相比,加入hDPSCs-CM后,细胞活性显著增加(P<0.05),胞内和线粒体内ROS含量显著降低(P<0.05);hDPSCs-CM显著上调颏舌肌成肌细胞中pAMPK和PGC-1α蛋白的表达水平以及PGC-1α下游的线粒体效应物NRF-1、NRF-2的mRNA表达水平(P<0.05)。结论:人牙髓干细胞条件培养基能减轻CoCl2诱导的颏舌肌成肌细胞低氧损伤,其机制可能与AMPK/PGC-1α通路的调节有关。 展开更多
关键词 人牙髓干细胞 条件培养基 颏舌肌 低氧 活性氧 ampk/pgc-1α通路
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心房颤动患者心房组织AMPK/PGC-1α通路表达改变的研究 被引量:1
3
作者 王宇超 刘岳恒 谷天祥 《中国心血管病研究》 CAS 2020年第8期719-723,共5页
目的探讨心房颤动(房颤)患者心房肌组织中AMPK/PGC-1α信号通路表达是否改变,探究该通路在房颤过程中的作用.方法选择2018年12月至2019年11月在我科行心脏手术的患者76例,根据术前24 h动态心电图及病史分为房颤组(41例)和窦性组(35例),... 目的探讨心房颤动(房颤)患者心房肌组织中AMPK/PGC-1α信号通路表达是否改变,探究该通路在房颤过程中的作用.方法选择2018年12月至2019年11月在我科行心脏手术的患者76例,根据术前24 h动态心电图及病史分为房颤组(41例)和窦性组(35例),术中切除左心耳组织留存.使用蛋白质印迹法(western blot,WB)检测心耳组织中AMPK、PGC-1α、NRF1、TFAM的表达量水平.免疫组织化学染色定量左心耳组织TFAM水平.Logistic回归分析AMPK、PGC-1α、NRF1、TFAM的表达水平与术后早期房颤之间的关系.结果WB结果显示,与窦性组相比,房颤组左心耳组织内的AMPK、PGC-1α、NRF1、TFAM的表达明显降低(AMPK:0.75±0.27比0.47±0.43;PGC-1α:0.55±0.10比0.35±0.10;NRF1:0.67±0.11比0.46±0.15;TFAM:0.88±0.19比0.58±0.30;P均<0.05).免疫组化结果显示,房颤组的左心耳TFAM水平较窦性组明显降低(8.86±2.13比5.98±2.53,P<0.05).Logistic回归分析显示,TFAM为术后早期房颤的影响因素(b=-0.55,P<0.05),低水平TFAM会增加术后新发房颤的风险.结论AMPK/PGC-1α信号通路参与了房颤过程,其表达在房颤心患者房内降低.TFAM为术后早期房颤的相关因素,低水平TFAM会增加术后发生房颤的风险. 展开更多
关键词 心房颤动 ampk/pgc-1α通路 线粒体生物合成 生物标记物 线粒体转录因子A
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电针“足三里”对慢性疲劳综合征大鼠骨骼肌腺苷酸活化蛋白激酶/过氧化物酶体增殖物活化受体γ共激活因子α信号通路基因表达的影响 被引量:21
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作者 董佳梓 魏云涛 +4 位作者 许环宇 张妤 勇入琳 薛亚楠 张立德 《针刺研究》 CAS CSCD 北大核心 2018年第6期335-340,共6页
目的:基于腺苷酸活化蛋白激酶(AMPK)/过氧化物酶体增殖物活化受体γ共激活因子α(PGC-1α)信号通路,观察针刺"足三里"对慢性疲劳综合征(CFS)大鼠骨骼肌细胞线粒体氧化应激的影响,阐释针刺"足三里"防治CFS的部分作... 目的:基于腺苷酸活化蛋白激酶(AMPK)/过氧化物酶体增殖物活化受体γ共激活因子α(PGC-1α)信号通路,观察针刺"足三里"对慢性疲劳综合征(CFS)大鼠骨骼肌细胞线粒体氧化应激的影响,阐释针刺"足三里"防治CFS的部分作用机制。方法:SD大鼠随机分为正常对照组、模型组、足三里组、非经非穴组,每组10只。采用多因素造模法复制CFS模型。足三里组电针双侧"足三里",非经非穴组电针双侧非经非穴,每日1次,每次20min,持续10d。检测造模前后、治疗后大鼠抓力变化;Western blot法检测大鼠骨骼肌三磷酸腺苷(ATP)合酶、AMPK、磷酸化AMPK(p-AMPK)、沉默信息调节因子2相关酶Ⅰ(SIRT 1)以及PGC-1α蛋白的表达;荧光定量PCR技术检测大鼠骨骼肌ATP合酶、SIRT 1以及PGC-1αmRNA的表达。结果:造模后,模型组、足三里组、非经非穴组大鼠抓力较正常对照组明显下降(P<0.05),治疗后足三里组大鼠抓力较模型组明显升高(P<0.05)。与正常对照组比较,模型组大鼠骨骼肌ATP合酶蛋白表达、ATP合酶mRNA表达明显下调(P<0.05,P<0.01),p-AMPK/AMPK差异无统计学意义(P>0.05),SIRT 1蛋白表达明显升高(P<0.01),PGC-1α蛋白及mRNA的表达明显降低(P<0.01)。与模型组相比,足三里组大鼠骨骼肌ATP合酶mRNA表达明显上调(P<0.01),p-AMPK/AMPK上调(P<0.05),SIRT 1蛋白及mRNA、PGC-1α蛋白及mRNA的表达明显上调(P<0.01)。结论:针刺"足三里"可使CFS大鼠骨骼肌AMPK表达明显增加,提高SIRT 1的表达,进一步直接或间接激活PGC-1α,提高线粒体的ATP合成,改善机体线粒体氧化应激反应,维持机体能量代谢,从而起到对CFS的治疗作用。 展开更多
关键词 慢性疲劳综合征 电针 骨骼肌 抓力 线粒体氧化应激 ampk/pgc-1α信号通路
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隔药饼灸对慢性疲劳综合征大鼠血乳酸及AMPK/PGC-1α信号通路的影响 被引量:6
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作者 徐小珊 马伟 +3 位作者 熊罗节 翟春涛 李玮 田岳凤 《针刺研究》 CAS CSCD 北大核心 2022年第10期878-884,共7页
目的:观察隔药饼灸对慢性疲劳综合征(CFS)大鼠血乳酸(BLA)及腺苷酸活化蛋白激酶/过氧化物酶体增殖物激活受体-γ共激活因子-1α(AMPK/PGC-1α)信号通路的影响,探讨隔药饼灸治疗CFS的部分作用机制。方法:SD大鼠随机分为空白组、模型组、... 目的:观察隔药饼灸对慢性疲劳综合征(CFS)大鼠血乳酸(BLA)及腺苷酸活化蛋白激酶/过氧化物酶体增殖物激活受体-γ共激活因子-1α(AMPK/PGC-1α)信号通路的影响,探讨隔药饼灸治疗CFS的部分作用机制。方法:SD大鼠随机分为空白组、模型组、隔药饼灸组、假药饼灸组和中药灌胃组,每组10只。采用慢性束缚与力竭游泳交替进行21 d的复合应激造模方法复制CFS大鼠模型。隔药饼灸组以逍遥散组方的药物制成药饼,于大鼠“神阙”“关元”“足三里”“期门”进行隔药饼灸,每穴灸5壮;假药饼灸组用赋形剂制备的假药饼,每穴灸5壮;中药灌胃组选择逍遥散悬浊液(60 mg·kg^(-1))灌服。以上干预均每日1次,共10 d。旷场实验与悬尾实验评价各组大鼠行为学变化;ELISA法检测大鼠血清中BLA、趋化因子CXC配体9(CXCL9)及β-内啡肽(β-EP)含量;HE染色法观察大鼠股四头肌病理形态;免疫组织化学法检测大鼠股四头肌磷酸化(p)-AMPK与PGC-1α蛋白表达水平。结果:与空白组比较,模型组大鼠旷场实验站立次数与水平跨格数均显著减少(P<0.05);与模型组、假药饼灸组比较,隔药饼灸组与中药灌胃组大鼠站立次数与水平跨格数显著增加(P<0.05)。与空白组比较,模型组大鼠悬尾实验挣扎次数显著减少(P<0.05),不动时间明显延长(P<0.05);与模型组比较,隔药饼灸组、假药饼灸组与中药灌胃组大鼠挣扎次数明显增加(P<0.05),不动时间显著缩短(P<0.05)。与空白组比较,模型组大鼠血清中BLA、CXCL9及β-EP含量显著升高(P<0.05),股四头肌部分纤维结构破坏,胞核固缩、凝聚,股四头肌p-AMPK与PGC-1α蛋白表达显著降低(P<0.05);与模型组比较,隔药饼灸组和中药灌胃组血清BLA、CXCL9及β-EP含量显著降低(P<0.05),肌纤维排列恢复,细胞间隙有所增大,股四头肌p-AMPK与PGC-1α蛋白表达显著升高(P<0.05),假药饼灸组肌纤维排列仍稀松杂乱;与假药饼灸� 展开更多
关键词 隔药饼灸 慢性疲劳综合征 能量代谢 乳酸 ampk/pgc-1α信号通路
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基于能量代谢探讨红景清肺方对PM_(2.5)诱导小鼠肺损伤的保护作用 被引量:1
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作者 苏鑫 胡万利 张胜君 《中华中医药学刊》 CAS 北大核心 2024年第1期5-8,I0002,I0003,共6页
目的探究红景清肺方对大气细颗粒物(particulate matter 2.5,PM_(2.5))诱导小鼠肺损伤的保护作用及机制。方法40只ICR雄性小鼠,随机分为空白对照组、PM_(2.5)模型组、中药等效组、中药二倍组。中药各组预给药7 d后,除空白对照组外,各组... 目的探究红景清肺方对大气细颗粒物(particulate matter 2.5,PM_(2.5))诱导小鼠肺损伤的保护作用及机制。方法40只ICR雄性小鼠,随机分为空白对照组、PM_(2.5)模型组、中药等效组、中药二倍组。中药各组预给药7 d后,除空白对照组外,各组持续2 d给予0.02 mg·μL^(-1)浓度PM_(2.5)混悬液滴鼻制备小鼠肺损伤模型。末次染毒24 h后取肺组织样本,苏木素-伊红(hematoxylin-eosin,HE)染色观察肺组织形态学变化;酶联免疫吸附法(enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)检测三磷酸腺苷(adenosine triphosphate,ATP)和Na^(+)-K^(+)-ATP酶(Na^(+)-K^(+)-ATPase)、Ca^(2+)-Mg^(2+)-ATP酶(Ca^(2+)-Mg^(2+)-ATPase)含量;蛋白免疫印迹法(western blot)检测腺苷酸活化蛋白激酶(AMP-activatedproteinkinase,AMPK)、过氧化物酶体增殖物激活受体1α(peroxisome proliferator-activated receptor-γcoactivator 1α,PGC-1α)及线粒体转录因子A(mitochondrial transcription factor A,TFAM)蛋白表达水平;免疫组织化学法(immunohistochemistry,IHC)检测PGC-1α、TFAM、核呼吸因子1(nuclear respiratory factor-1,Nrf1)蛋白表达。结果与空白对照组比较,PM_(2.5)模型组小鼠肺组织结构病理损伤明显,肺组织中ATP、Na^(+)-K^(+)-ATP酶、Ca^(2+)-Mg^(2+)-ATP酶含量显著降低(P<0.01),AMPK、PGC-1α、TFAM蛋白表达水平及PGC-1α、Nrf1、TFAM蛋白阳性表达率明显降低(P<0.01);与PM_(2.5)模型组比较,中药各组肺组织损伤明显改善,中药二倍组中ATP含量升高(P<0.05),Na^(+)-K^(+)-ATP酶、Ca^(2+)-Mg^(2+)-ATP酶含量显著升高(P<0.01),中药等效组三者含量有上升趋势,但差异无统计学意义(P>0.05),中药各组AMPK、PGC-1α、TFAM蛋白表达水平及PGC-1α、Nrf1、TFAM蛋白阳性表达率显著升高(P<0.01)。结论红景清肺方可提高肺组织内Na^(+)-K^(+)-ATP酶、Ca^(2+)-Mg^(2+)-ATP酶活性,上调AMPK/PGC-1α信号通路蛋白水平,减轻线粒体损伤和功能障碍,促进线粒体生物合成,有效改善肺组织能量代谢,� 展开更多
关键词 PM_(2.5) 红景清肺方 肺损伤 能量代谢 线粒体 ampk/pgc-1α信号通路
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AMPK/PGC-1α信号通路对高压氧诱导的氧化应激反应的调节作用 被引量:6
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作者 卫衍鹏 彭彬 +2 位作者 袁圆 王国华 姜正林 《中华航海医学与高气压医学杂志》 CAS CSCD 2019年第2期100-103,115,共5页
目的通过观察高压氧(hyperbaric oxygen, HBO)对小鼠肝细胞线粒体DNA(Mt-DNA)拷贝数和抗氧化蛋白表达的影响,探讨HBO诱导的氧化应激反应及其机制。方法将28只雄性C57BL/6小鼠按照数字表法随机分成5组:正常对照组(常压空气暴露)、HBO组(0... 目的通过观察高压氧(hyperbaric oxygen, HBO)对小鼠肝细胞线粒体DNA(Mt-DNA)拷贝数和抗氧化蛋白表达的影响,探讨HBO诱导的氧化应激反应及其机制。方法将28只雄性C57BL/6小鼠按照数字表法随机分成5组:正常对照组(常压空气暴露)、HBO组(0.20 MPa)暴露1、5、14、28 d组(HBO 1、5、14、28 d);暴露结束后立即处死并取其肝组织,提取肝组织总DNA及总蛋白后,采用qPCR实验检测Mt-DNA的拷贝数,Western blotting实验检测超氧化物歧化酶2(SOD2)、线粒体转录因子A(TFAM)、解偶联蛋白2(UCP2)和AMPK/PGC-1α信号通路蛋白的表达水平。结果与对照组(1.00±0.19)相比,HBO 1 d组(0.61±0.18)、HBO 5 d组(0.58±0.01)、HBO 14 d组(0.74±0.07)及HBO 28 d组(0.71±0.07)的Mt-DNA拷贝数均明显减少(P<0.05或P<0.01);抗氧化蛋白SOD2、TFAM、UCP2和AMPK/PGC-1α信号通路蛋白的表达均显著增加,差异均有统计学意义(P<0.05或P<0.01)。结论 AMPK/PGC-1α信号通路通过增加细胞抗氧化能力和减少Mt-DNA的拷贝数调节HBO诱导的氧化应激反应,是机体应对HBO诱导氧化应激的适应机制。 展开更多
关键词 ampk/pgc-1α信号通路 高压氧 氧化应激 小鼠 肝细胞 线粒体
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基于AMPK/PGC-1α信号通路探讨菟丝子多糖改善大鼠运动能力的作用及机制
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作者 庞伊婷 麻飞 《云南农业大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2024年第2期53-59,共7页
【目的】基于腺苷酸活化蛋白激酶(AMPK)/过氧化物酶体增殖活化受体γ共激活因子1α(PGC-1α)信号通路探讨菟丝子多糖改善大鼠运动能力的作用及潜在机制。【方法】将大鼠50只分为正常对照组、运动模型组及菟丝子多糖低、中、高剂量组(10... 【目的】基于腺苷酸活化蛋白激酶(AMPK)/过氧化物酶体增殖活化受体γ共激活因子1α(PGC-1α)信号通路探讨菟丝子多糖改善大鼠运动能力的作用及潜在机制。【方法】将大鼠50只分为正常对照组、运动模型组及菟丝子多糖低、中、高剂量组(10、200和400 mg/kg),除正常对照组外,其余各组大鼠进行游泳训练。游泳至力竭后,测定各组大鼠血清抗疲劳指标以及肝组织能量代谢和氧化应激指标,AMPKα和PGC-1αmRNA的表达水平,磷酸化AMPKα(p-AMPKα)、AMPKα和PGC-1α的蛋白表达水平。【结果】与运动模型组相比,菟丝子多糖低、中、高剂量组大鼠游泳力竭时间显著或极显著延长,血清尿素氮、乳酸、皮质酮以及肝组织丙二醛含量极显著减少,血清睾酮以及肝组织糖原、钠钾ATP酶、钙镁ATP酶、超氧化物歧化酶、谷胱甘肽过氧化物酶水平显著增加,肝组织AMPKαmRNA及其蛋白表达无明显变化,PGC-1αmRNA及p-AMPKα、PGC-1α蛋白表达极显著增加。【结论】菟丝子多糖可提升高强度大运动量训练大鼠的运动能力,且该作用与抗疲劳、增加能量物质储备、抑制氧化应激及活化AMPK/PGC-1α信号通路等有关。 展开更多
关键词 菟丝子多糖 运动能力 抗疲劳 氧化应激 ampk/pgc-1α信号通路
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葡萄籽原花青素提取物对运动性骨关节损伤大鼠的影响及其作用机制的研究
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作者 陈杰 冯洪涛 《中国食品卫生杂志》 CSCD 北大核心 2023年第5期674-680,共7页
目的揭示葡萄籽原花青素提取物(GSPE)对大鼠运动性骨关节损伤(SJI)的治疗作用及机制。方法建立SJI大鼠模型后,各组大鼠经口给予不同剂量的GSPE(0、50、100和200 mg/kg),持续4周,并设立正常对照组。受试物给药结束后,通过机械痛阈(PWT)... 目的揭示葡萄籽原花青素提取物(GSPE)对大鼠运动性骨关节损伤(SJI)的治疗作用及机制。方法建立SJI大鼠模型后,各组大鼠经口给予不同剂量的GSPE(0、50、100和200 mg/kg),持续4周,并设立正常对照组。受试物给药结束后,通过机械痛阈(PWT)测定法测定各组模型大鼠疼痛情况;取尾静脉血,检测血清超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)、丙二醛(MDA)含量。处死后,取膝关节经番红O-固绿染色后进行病理检查;取膝关节组织,通过Western blot方法检测过氧化物酶体增殖物激活受体γ共激活因子α(PGC-1α)、磷酸化-AMP依赖的蛋白激酶α(p-AMPKα)、AMPKα、核呼吸因子1(NRF1)和线粒体转录因子A(TFAM)的蛋白表达水平。结果随着GSPE剂量增加,SJI大鼠的PWT显著上升(P<0.05),膝关节病变形态改善,SJI大鼠的血清SOD和GSH-Px含量升高,MDA含量显著降低(P<0.05)。SJI大鼠膝关节组织中PGC-1α、p-AMPKα/AMPKα、NRF-1和TFAM的蛋白表达水平随着GSPE剂量增加而提高(P<0.05)。结论GSPE摄入有效减轻了SJI大鼠疼痛和膝关节损伤,作用机制与AMPK/PGC-1α线粒体通路的激活抑制了体内氧化应激水平有关。 展开更多
关键词 葡萄籽原花青素提取物 运动性骨关节损伤 疼痛 氧化应激 ampk/pgc-1α线粒体通路
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补骨脂酚对阿霉素心肌细胞损伤的保护作用及机制研究 被引量:4
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作者 陆晨曦 韩跃虎 +8 位作者 辛振龙 闫娟娟 李天 韩梦珍 姬婷 王立伟 吕德文 金振晓 杨阳 《西北大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2018年第6期769-775,共7页
探究补骨脂提取物补骨脂酚(Bakuchiol,BAK)是否可以减轻ADR引起的心肌细胞损伤及其作用机制。首先建立损伤合适的H9c2心肌细胞ADR损伤模型,采用不同浓度BAK处理,观察其对心肌细胞ADR损伤是否有保护作用并筛选最佳保护浓度。检测的指标包... 探究补骨脂提取物补骨脂酚(Bakuchiol,BAK)是否可以减轻ADR引起的心肌细胞损伤及其作用机制。首先建立损伤合适的H9c2心肌细胞ADR损伤模型,采用不同浓度BAK处理,观察其对心肌细胞ADR损伤是否有保护作用并筛选最佳保护浓度。检测的指标包括:细胞活力、凋亡率、活性氧(ROS)含量以及培养液中乳酸脱氢酶(LDH)水平,并用Western blot检测AMPK/PGC1α通路相关分子表达情况,初步明确该通路在BAK抗ADR心肌损伤中的作用。ADR可显著降低H9c2细胞的活力,并呈浓度依赖性,当浓度为2μM时损伤明显,用于进一步研究。BAK对H9c2细胞有明确的保护作用,当其浓度为1. 25μM时效果最佳,具体表现为:细胞活力增加、凋亡率下降、ROS含量下降以及培养液中LDH水平下降。Western结果显示,BAK可以逆转ADR下调的p-AMPK和PGC1-α蛋白表达。BAK可显著减轻ARD引起的H9c2心肌细胞损伤,其作用跟激活AMPK/PGC1α信号通路有关。 展开更多
关键词 补骨脂酚 阿霉素 心肌细胞损伤 ampk/pgc1α信号通路
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糖脂平对胰岛素抵抗大鼠AMPK/PGC-1α信号通路的影响 被引量:3
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作者 刘静 朱智耀 +6 位作者 高彦彬 耿建国 赵轩 周盛楠 李娇阳 仝宇 王晓磊 《世界中西医结合杂志》 2016年第8期1087-1090,共5页
目的了解中药复方糖脂平对高脂饮食诱导的胰岛素抵抗(IR)大鼠骨骼肌细胞腺苷酸活化蛋白激酶(AMPK)/过氧化物酶体增殖物激活受体γ辅助因子1α(PGC-1α)信号通路的影响。方法选择体重在180~200g的雄性SD大鼠40只,随机分为空白对照组10只... 目的了解中药复方糖脂平对高脂饮食诱导的胰岛素抵抗(IR)大鼠骨骼肌细胞腺苷酸活化蛋白激酶(AMPK)/过氧化物酶体增殖物激活受体γ辅助因子1α(PGC-1α)信号通路的影响。方法选择体重在180~200g的雄性SD大鼠40只,随机分为空白对照组10只和造模组30只。空白对照组全程予普通饲料喂养,造模组全程予高脂饲料喂养。8周造模成功后,将造模组再次随机分为模型组、糖脂平组、罗格列酮组,每组10只。糖脂平组予糖脂平按生药20 g/(kg·d)灌胃;罗格列酮组予罗格列酮0.8 mg/(kg·d)灌胃;模型组和空白对照组灌服等量的生理盐水,持续8周,末次给药后禁食12 h,用正常血糖高胰岛素钳夹实验评价胰岛素敏感性,检测各组大鼠体重、血糖、血胰岛素水平,并留取骨骼肌,采用Western Blot法检测AMPK-α、p-AMPK-α和PGC-1α的表达。结果中药复方糖脂平可以改善骨骼肌组织胰岛素的敏感性;降低IR大鼠体重、血糖和血胰岛素水平;糖脂平可提高IR大鼠p-AMPK-α和PGC-1α的蛋白表达。结论糖脂平具有降糖、减重、提高骨骼肌组织对胰岛素的敏感性的作用,作用机制可能与激活大鼠骨骼肌组织AMPK/PGC-1α信号通路有关。 展开更多
关键词 胰岛素抵抗 糖脂平 ampk/pgc-1α信号通路
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中等强度爬坡运动对肥胖大鼠AMPK-PGC-1α信号和脂代谢的影响 被引量:1
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作者 陶宝峰 王棣 《基因组学与应用生物学》 CAS CSCD 北大核心 2020年第8期3823-3830,共8页
为了探讨中等强度爬坡运动对肥胖大鼠AMPK-PGC-1α信号和脂代谢的影响,将80只雄性SD大鼠随机分为对照组、肥胖组、跑步组和爬坡组,对照组使用普通饲料喂养,肥胖组、跑步组和爬坡组使用高脂饲料喂养,共喂养6周。建模完成后,跑步组和爬坡... 为了探讨中等强度爬坡运动对肥胖大鼠AMPK-PGC-1α信号和脂代谢的影响,将80只雄性SD大鼠随机分为对照组、肥胖组、跑步组和爬坡组,对照组使用普通饲料喂养,肥胖组、跑步组和爬坡组使用高脂饲料喂养,共喂养6周。建模完成后,跑步组和爬坡组分别进行4周的跑步运动和爬坡运动。运动完成后检查各组大鼠的血糖、TC、TG、LDL-c、HDL-c、瘦素和脂联素水平。使用免疫组织化学染色、Western blotting或qRT-PCR检测大鼠骨骼肌组织中pAMPK、PGC-1α、MCAD、CPT-1、PPARα和PPARγ的蛋白或mRNA表达。结果显示,与跑步组比较,爬坡组的TC、TG和LDL-c水平均显著降低,而HDL-c显著升高;爬坡组的血清瘦素和脂联素含量均显著升高;爬坡组的pAMPK和PGC-1α蛋白表达水平均显著升高;爬坡组的MCAD、CPT-1、PPARα和PPARγmRNA表达水平均显著升高。研究表明,中等强度爬坡运动可通过促进瘦素和脂联素的合成分泌、激活AMPK-PGC-1α信号通路来改善糖脂代谢,从而发挥降血糖和降血脂的作用。 展开更多
关键词 肥胖 中等强度爬坡运动 ampk-pgc-1α信号通路 脂代谢
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葛根异黄酮通过调控LKB1/AMPK/PGC⁃1α信号通路对去卵巢大鼠心肌损伤的保护作用
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作者 张莹 欧阳灿玥 +5 位作者 陈兰英 袁蓓欣 崔宏伟 谢欣序 刘鹏 刘荣华 《中成药》 CAS CSCD 北大核心 2024年第8期2542-2551,共10页
目的研究葛根异黄酮对去卵巢大鼠心肌损伤的保护作用及其机制。方法将36只大鼠随机分为假手术组、模型组、戊酸雌二醇组(0.1 mg/kg)和葛根异黄酮低、中、高剂量组(55、110、220 mg/kg)。模型组和各给药组大鼠切除双侧卵巢,假手术组大鼠... 目的研究葛根异黄酮对去卵巢大鼠心肌损伤的保护作用及其机制。方法将36只大鼠随机分为假手术组、模型组、戊酸雌二醇组(0.1 mg/kg)和葛根异黄酮低、中、高剂量组(55、110、220 mg/kg)。模型组和各给药组大鼠切除双侧卵巢,假手术组大鼠仅切除卵巢周边小块脂肪组织。手术后2周开始给药,每天1次,每周6 d,连续灌胃给药16周。第16周末,通过PowerLab检测血流动力学[收缩压(SBP)、舒张压(DBP)、平均压(MBP)、左室收缩压(LVSP)、左室舒张压(LVMP)、等容收缩期左心室内压力最大上升和下降速率(±dp/dt_(max))];HE染色观察心脏组织病理变化;生化分析仪检测血浆中肌酸激酶(CK)、乳酸脱氢酶(LDH)、总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)及葡萄糖(Glu)水平;比色法检测心肌组织中三磷酸腺苷(ATP)水平;RT-qPCR法检测心肌组织中葡萄糖转运蛋白4(GLUT 4)、乳酸脱氢酶A(LDHA)、肉毒碱棕榈酰基转移酶-1(CPT-1α)、酰基辅酶A-羧化酶(ACC)、肝激酶B1(LKB 1)、腺苷酸活化蛋白激酶(AMPK)、过氧化物酶体增殖物激活受体γ辅激活酶因子1α(PGC-1α)mRNA表达;Western blot法检测心肌组织中能量代谢相关蛋白LKB1、p-AMPK/AMPK、PGC-1α表达。结果与模型组比较,葛根异黄酮组SBP、DBP、MBP、LVSP、LVMP降低(P<0.05,P<0.01),-dp/dt_(max)升高(P<0.05,P<0.01);去卵巢所致大鼠心肌纤维溶解、间隙增宽及炎性浸润情况得到改善;LDH、CK活性降低(P<0.05);心肌组织ATP水平升高(P<0.05,P<0.01);TC、TG、LDL-C及Glu水平降低(P<0.05,P<0.01),HDL-C水平升高(P<0.05,P<0.01);心肌组织GLUT4、LDHA、CPT-1α、ACC、LKB1、AMPK、PGC-1αmRNA表达升高(P<0.05,P<0.01);心肌组织LKB1、p-AMPK/AMPK、PGC-1α蛋白表达升高(P<0.05,P<0.01)。结论葛根异黄酮对去卵巢所致的大鼠心肌损伤具有保护作用,其机制与改善心肌组织能量代谢相关蛋白,调控LKB1/AMPK/PGC-1α 展开更多
关键词 葛根异黄酮 去卵巢 心肌损伤 LKB1/ampk/pgc-1α信号通路
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丹酚酸B调节SIRT1信号途径抑制H_(2)O_(2)诱导的NLRP3炎症小体激活 被引量:2
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作者 李庆菊 潘韵铮 +2 位作者 张琦 蒋宝平 许立 《中药新药与临床药理》 CAS CSCD 北大核心 2021年第5期604-611,共8页
目的基于沉默信息调节因子1(SIRT1)/NOD样受体蛋白3(NLRP3)炎症小体途径探讨丹酚酸B(Sal B)抗氧化应激致细胞损伤的作用机制,以期阐明丹酚酸B抗心肌缺血的作用机制。方法采用体外构建H_(2)O_(2)诱导的氧化应激细胞模型,将H9c2细胞分为6... 目的基于沉默信息调节因子1(SIRT1)/NOD样受体蛋白3(NLRP3)炎症小体途径探讨丹酚酸B(Sal B)抗氧化应激致细胞损伤的作用机制,以期阐明丹酚酸B抗心肌缺血的作用机制。方法采用体外构建H_(2)O_(2)诱导的氧化应激细胞模型,将H9c2细胞分为6组,分别为正常组、模型组(600μmol·L^(-1)H_(2)O_(2)刺激)、H_(2)O_(2)+丹酚酸B(5、10、20μmol·L^(-1))组和H_(2)O_(2)+丹酚酸B(20μmol·L^(-1))+EX527(10μmol·L^(-1))组。采用MTT法测定细胞活性;Hoechst染色法测定细胞凋亡;比色法及ELISA法分别测定乳酸脱氢酶(LDH)、白细胞介素(IL)-1β水平;采用DCFH-DA荧光探针检测细胞内活性氧(ROS)水平;采用JC-1荧光探针测定线粒体膜电位;Western Blot法测定H9c2细胞中NLRP3、半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶1(Caspase-1)、凋亡相关斑点样蛋白(ASC),以及SIRT1信号通路相关的SIRT1、磷酸化AMP蛋白活化激酶α(p-AMPKα)、AMP蛋白活化激酶α(AMPKα)、过氧化物酶体增殖物激活受体γ共激活因子1α(PGC-1α)蛋白表达。结果与正常组比较,模型组细胞活力及线粒体膜电位明显降低(P<0.01),细胞凋亡程度及细胞内ROS、LDH和炎症因子IL-1β水平明显升高(P<0.01);与NLRP3炎症小体相关的NLRP3、Caspase-1和ASC蛋白表达显著上调(P<0.01),SIRT1、p-AMPKα/AMPKα和PGC-1α蛋白表达明显下调(P<0.01)。与模型组比较,丹酚酸B组的细胞活力以及线粒体膜电位显著升高(P<0.05,P<0.01),细胞凋亡程度及细胞内ROS、LDH及炎症因子IL-1β释放水平明显降低(P<0.01)。丹酚酸B能够明显上调SIRT1信号通路中SIRT1、p-AMPKα/AMPKα、PGC-1α蛋白表达(P<0.05,P<0.01),下调NLRP3炎症小体相关的NLRP3、Caspase-1和ASC蛋白表达(P<0.05,P<0.01),且呈一定量效关系。在应用SIRT1特异性抑制剂EX527干预后,丹酚酸B抑制H_(2)O_(2)诱导的NLRP3炎症小体激活作用被明显逆转。结论丹酚酸B可能通过激活SIRT1/AMPK/PGC-1α信号通路,抑制氧化应激诱导的NLRP3炎� 展开更多
关键词 丹酚酸B 氧化应激 心肌缺血 NLRP3炎症小体 SIRT1/ampk/pgc-1α信号通路 H9C2细胞
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不同时间慢性间歇低氧下CB1R/AMPK/PGC-1α信号通路对H9C2大鼠心肌细胞的调控作用
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作者 胡梓璇 赵莉 +5 位作者 穆素芳 窦占军 王佩佩 段玉婷 熊阳 王蓓 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2022年第7期1185-1193,共9页
目的:探讨慢性间歇低氧(chronic intermittent hypoxia,CIH)对H9C2大鼠心肌细胞的影响,以及大麻素1型受体(cannabinoid type 1 receptor,CB1R)/AMP活化蛋白激酶(AMP-activated protein kinase,AMPK)/过氧化物酶体增殖物激活受体γ辅激... 目的:探讨慢性间歇低氧(chronic intermittent hypoxia,CIH)对H9C2大鼠心肌细胞的影响,以及大麻素1型受体(cannabinoid type 1 receptor,CB1R)/AMP活化蛋白激酶(AMP-activated protein kinase,AMPK)/过氧化物酶体增殖物激活受体γ辅激活因子1α(peroxisome proliferator-activated receptor-γcoactivator-1α,PGC-1α)信号通路在其中发挥的作用。方法:将H9C2大鼠心肌细胞分为正常对照(normal control,NC)组、6 h CIH组、18 h CIH组和18 h CIH+AM251(CB1R拮抗剂)组,间歇低氧仓中制备CIH细胞模型。流式细胞术检测细胞凋亡及活性氧水平,JC-1检测线粒体膜电位,MitoTracker染色后激光共聚焦显微镜观察线粒体的形态。Western blot和细胞免疫荧光分析CB1R、AMPK、磷酸化AMPK(phosphorylated AMPK,p-AMPK)和PGC-1α的表达情况。结果:与NC组相比,6 h CIH组活性氧轻度增高,线粒体膜电位显著升高,线粒体明显增多,CB1R、AMPK、p-AMPK和PGC-1α蛋白水平显著升高(P<0.05或P<0.01);18h CIH组细胞凋亡增加,活性氧显著增高,线粒体膜电位显著降低,线粒体碎片化显著增多,CB1R表达显著增多,AMPK、p-AMPK和PGC-1α蛋白水平显著降低(P<0.05或P<0.01);与18 h CIH组相比,18 h CIH+AM251组细胞凋亡和活性氧减少,线粒体膜电位显著升高,线粒体碎片化显著减少,CB1R表达显著降低,AMPK、p-AMPK和PGC-1α蛋白水平显著升高(P<0.05或P<0.01)。结论:AMPK/PGC-1α信号通路参与了CIH对H9C2大鼠心肌细胞的影响,CB1R可作为CIH介导的H9C2大鼠心肌细胞损伤的治疗靶点。 展开更多
关键词 慢性间歇低氧 心肌细胞 线粒体 CB1R/ampk/pgc-1α信号通路
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小建中汤对运动性疲劳小鼠骨骼肌AMPK/PGC1-α信号通路的影响 被引量:15
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作者 林致辉 周庆莹 +4 位作者 王梦妮 凌冰 刘派 郭军鹏 刘宏岩 《中国实验方剂学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2020年第13期73-78,共6页
目的:观察小建中汤对运动性疲劳小鼠骨骼肌中腺苷酸活化蛋白激酶/过氧化物酶增殖活化受体辅激活因子l-α(AMPK/PGC1-α)信号通路的影响。方法:40只昆明种小鼠随机分为正常组、模型组、补中益气汤组、小建中汤组,每组10只。模型组、补中... 目的:观察小建中汤对运动性疲劳小鼠骨骼肌中腺苷酸活化蛋白激酶/过氧化物酶增殖活化受体辅激活因子l-α(AMPK/PGC1-α)信号通路的影响。方法:40只昆明种小鼠随机分为正常组、模型组、补中益气汤组、小建中汤组,每组10只。模型组、补中益气汤组和小建中汤组跑台训练建立疲劳模型,正常组不施加任何干预。跑台训练同时,模型组灌服等量的生理盐水,小建中汤给予5 g·kg-1剂量灌胃,补中益气汤组给予2.8 g·kg-1剂量灌胃,连续6 d。实验结束后,检测各组小鼠体质量和跑台力竭时间;采用比色法检测各组小鼠血清尿素(UREA),乳酸脱氢酶(LDH),肌糖原(MG),骨骼肌Na^+-K^+-ATP酶,Ca^2+-Mg^2+-ATP酶的活性;采用苏木素-伊红(HE)染色观察各组小鼠骨骼肌病理形态变化;采用蛋白免疫印迹法(Western blot)检测各组小鼠AMPK和PGC1-α的蛋白表达。结果:与正常组比较,模型组小鼠体质量显著下降(P<0.01),Na^+-K^+-ATP,Ca^2+-Mg^2+-ATP,LDH,MG的活性明显下降(P<0.05,P<0.01),UREA的含量显著升高(P<0.01),AMPK,PGC1-α蛋白表达量显著升高(P<0.01);与模型组比较,小建中汤组小鼠体质量明显增加(P<0.05),跑台力竭时间显著延长(P<0.01),Na^+-K^+-ATP,Ca^2+-Mg^2+-ATP,LDH,MG的活性明显升高(P<0.05,P<0.01),UREA的含量显著下降(P<0.01),AMPK,PGC1-α蛋白表达量显著升高(P<0.01)。结论:小建中汤具有抗运动性疲劳的作用,其机制可能是通过提高骨骼肌AMPK/PGC1-α通路,增强线粒体氧化磷酸化减少代谢产物的堆积,减缓糖原的消耗分解,增强骨骼肌能量合成有关。 展开更多
关键词 运动性疲劳 小建中汤 能量代谢 腺嘌呤核苷三磷酸(ATP)酶 腺苷酸活化蛋白激酶/过氧化物酶增殖活化受体辅激活因子l-α(ampk/pgc1-α)信号通路
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