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天麻素通过抑制AKT/NLRP3通路改善BV-2小胶质细胞焦亡
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作者 刘泳 王宁宁 +1 位作者 曾楚华 王雨 《世界科学技术-中医药现代化》 CSCD 北大核心 2023年第10期3238-3245,共8页
目的探讨天麻素(Gastrodin)、对BV-2小胶质细胞焦亡模型AKT/NLRP3通路的影响。方法BV-2小胶质细胞分为正常对照组、模型组(1μg·mL^(-1)LPS+10μmol·L^(-1)Nigericin)、天麻素组(10、100μg·mL^(-1)天麻素)、抑制剂对照... 目的探讨天麻素(Gastrodin)、对BV-2小胶质细胞焦亡模型AKT/NLRP3通路的影响。方法BV-2小胶质细胞分为正常对照组、模型组(1μg·mL^(-1)LPS+10μmol·L^(-1)Nigericin)、天麻素组(10、100μg·mL^(-1)天麻素)、抑制剂对照组(10μmol·L^(-1)LY294002)、抑制剂组(100μg·mL^(-1)天麻素+10μmol·L^(-1)LY294002),采用1μg·mL^(-1)LPS联合10μmol·L^(-1)Nigericin共同干预,诱导BV-2小胶质细胞焦亡。CCK-8观察天麻素对细胞活性的影响,Western blot检测p-AKT、NLRP3、ASC、caspase-1、IL^(-1)β表达,免疫荧光检测NLRP3、p-AKT蛋白表达,Real-time PCR观察IL^(-1)βmRNA含量,分子对接确定天麻素与p-AKT1/2/3、NLRP3蛋白结合位点。结果与对照组(0μg·mL^(-1)天麻素)相比,0.1-1000μg·mL^(-1)天麻素对BV-2细胞活性无明显影响(P>0.05)。Western blot实验中,与正常组相比,模型组p-AKT、NLRP3、ASC、caspase-1、IL^(-1)β表达均明显上升(P<0.01);与模型组相比,天麻素组p-AKT、NLRP3、ASC、caspase-1、IL^(-1)β表达均下降(P<0.05或P<0.01)。免疫荧光实验中,与正常组相比,模型组NLRP3表达均明显上升(P<0.01);与模型组相比,天麻素组p-AKT、NLRP3表达明显下降(P<0.01);与天麻素组相比,抑制剂组p-AKT、NLRP3表达均下降(P<0.01)。Realtime PCR实验中,与正常组相比,模型组细胞IL^(-1)βmRNA含量均明显上升(P<0.01);与模型组相比,天麻素组细胞IL^(-1)βmRNA含量下降(P<0.01)。LDH活性检测实验中,与正常组相比,模型组细胞LDH活性明显上升(P<0.01);与模型组相比,100μg·mL^(-1)天麻素干预可降低焦亡模型细胞LDH活性(P<0.01)。分子对接中,天麻素与AKT1/2/3、NLRP3具有结合能力,结合能范围(-6.6)-(-6.8),结合方式包括氢键、范德华力等。结论天麻素通过抑制AKT/NLRP3通路改善BV-2小胶质细胞焦亡。 展开更多
关键词 天麻素 小胶质细胞 akt/nlrp3通路 细胞焦亡
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