当归多糖通过AKT/FOXO3通路调节免疫性卵巢早衰小鼠内分泌功能 被引量：29

1

作者 李莉 卢鹏 高霞 《基因组学与应用生物学》 CAS CSCD 北大核心 2019年第7期3268-3272,共5页

为探讨当归多糖(angelica polysaccharide,AP)对免疫性卵巢早衰小鼠内分泌功能的影响及分子机制,本研究将60只雌性BALB/c小鼠分为正常组、模型组、AP低剂量(100 mg/kg)、中剂量(200 mg/kg)、高剂量(400 mg/kg)组和补佳乐阳性组,以小鼠... 为探讨当归多糖(angelica polysaccharide,AP)对免疫性卵巢早衰小鼠内分泌功能的影响及分子机制,本研究将60只雌性BALB/c小鼠分为正常组、模型组、AP低剂量(100 mg/kg)、中剂量(200 mg/kg)、高剂量(400 mg/kg)组和补佳乐阳性组,以小鼠透明带多肽为抗原,皮下多点注射建立免疫性卵巢早衰(premature ovarian failure,POF)小鼠模型,灌胃相应药物,连续治疗4周后检测各组小鼠卵巢指数,检测各组小鼠血液SOD和MDA水平;通过ELISA检测各组小鼠卵巢组织IL-1β和IL-6水平,Western blotting检测各组小鼠p-AKT和FOXO3蛋白表达水平。与空白组相比,模型组小鼠卵巢指数显著降低,与模型组比较,AP低、中、高剂量组和阳性组小鼠卵巢指数显著升高,差异具有统计学意义(p<0.01)。与空白组比较,模型组小鼠血液SOD活性显著降低,MDA含量显著升高,与模型组比较,AP低、中、高剂量组和阳性组小鼠血液SOD活性显著升高,MDA含量显著降低。ELISA结果显示,与空白组比较,模型组小鼠卵巢组织IL-1β和IL-6含量显著升高,与模型组比较,AP低、中、高剂量组小鼠卵巢组织IL-1β和IL-6含量显著降低,差异具有统计学意义(p<0.01)。Western blotting结果显示,与空白组比较,模型组小鼠卵巢p-AKT和FOXO3蛋白表达显著降低,与模型组比较,AP低、中、高剂量组和阳性组小鼠卵巢p-AKT和FOXO3蛋白表达显著升高,差异具有统计学意义(p<0.01)。本研究结果说明,当归多糖AP激活AKT/FOXO3通路,抑制小鼠氧化应激,改善免疫性卵巢早衰小鼠内分泌功能,可在一定程度上抑制免疫卵巢早衰。 展开更多

关键词 当归多糖 卵巢早衰 氧化应激 akt/foxo3通路

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丹参酮IIA通过激活AKT/FOXO3a通路减轻七氟醚诱导的大鼠神经元细胞毒性

2

作者 李严棠 覃军 +1 位作者 傅翔 李波 《解剖科学进展》 CAS 2024年第1期39-42,共4页

目的 探究丹参酮IIA(Tan IIA)减轻七氟醚(Sev)诱导的大鼠神经元细胞毒性的机制及其对AKT/FOXO3a通路产生的影响。方法 将大鼠神经元细胞HT22分为对照组、Sev组、TanIIA干预组与Sev+Tan IIA+LY294002组。CCK-8实验筛选最佳TanIIA浓度;CC... 目的 探究丹参酮IIA(Tan IIA)减轻七氟醚(Sev)诱导的大鼠神经元细胞毒性的机制及其对AKT/FOXO3a通路产生的影响。方法 将大鼠神经元细胞HT22分为对照组、Sev组、TanIIA干预组与Sev+Tan IIA+LY294002组。CCK-8实验筛选最佳TanIIA浓度;CCK-8检测各组细胞活性;流式细胞术检测各组细胞凋亡率;试剂盒检测各组细胞MDA、SOD及GSH水平;Western blot检测各组细胞HO-1、 NQO1、AKT、p-AKT、FOXO3a及p-FOXO3a的蛋白表达。结果 Tan IIA的最佳处理浓度为3μg/mL。Sev能够导致细胞毒性,诱导细胞凋亡,导致氧化应激;Tan IIA对Sev诱导的细胞毒性、凋亡以及氧化应激具有保护作用,而抑制AKT则抵消了Tan IIA对Sev诱导的细胞毒性保护作用,抵消了Tan IIA对Sev诱导的细胞凋亡和氧化应激的抑制作用。此外,Tan IIA激活了AKT/FOXO3a通路。结论 丹参酮IIA通过激活AKT/FOXO3a通路减轻七氟醚诱导的大鼠神经元细胞毒性。 展开更多

关键词 丹参酮IIA 七氟醚 akt/foxo3a通路 神经毒性

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AKT/FoxO3a通路在白藜芦醇抑制大鼠肾脏间质纤维化中的作用

3

作者 孙荣嵘 冯小华 +3 位作者 王婷婷 刘楠 张瑞城 钟良宝 《药物评价研究》 CAS 2019年第11期2165-2168,共4页

目的探讨蛋白激酶B (Akt)/FoxO3a通路在白藜芦醇抑制肾脏纤维化中的作用。方法将55只SD大鼠随机分为假手术组(10只)和造模组(45只),采用单侧输尿管梗阻法构建大鼠肾间质纤维化模型,45只造模SD大鼠术后随机分为模型组和白藜芦醇(20、40 m... 目的探讨蛋白激酶B (Akt)/FoxO3a通路在白藜芦醇抑制肾脏纤维化中的作用。方法将55只SD大鼠随机分为假手术组(10只)和造模组(45只),采用单侧输尿管梗阻法构建大鼠肾间质纤维化模型,45只造模SD大鼠术后随机分为模型组和白藜芦醇(20、40 mg/kg)干预组,每组15只。干预组大鼠于术后ig白藜芦醇20、40 mg/kg,1次/d,持续2周。模型组大鼠ig等量生理盐水。HE、Masson染色观察肾组织病理变化,免疫组化检测α-SMA阳性细胞,Western blot检测Akt、p-Akt、FoxO3a、p-FoxO3a蛋白。结果假手术组、模型组、白藜芦醇20 mg/kg干预组和白藜芦醇40 mg/kg干预组肾小管损伤病理评分分别为(0.36±0.05)、(4.07±0.53)、(3.92±0.48)和(3.21±0.35),其中白藜芦醇20 mg/kg干预组与模型组间无显著性差异,假手术组评分显著低于白藜芦醇干预组(P<0.05),白藜芦醇40 mg/kg干预组又显著低于造模对照组(P<0.05)。假手术组、模型组和白藜芦醇40 mg/kg干预组α-SMA阳性细胞比例分别为(3.84±0.62)%、(52.36±14.27)%和(26.15±4.63)%,3组间具有显著性差异(P<0.01)。FoxO3a和Akt蛋白表达三组间无显著性差异,p-Akt和pFoxO3a蛋白表达在模型组SD大鼠显著减低,但白藜芦醇40 mg/kg干预组p-Akt和p-FoxO3a蛋白表达高于模型组,低于假手术组。结论白藜芦醇可以减低p-Akt和p-FoxO3a蛋白表达,发挥抗肾间质纤维化作用。 展开更多

关键词 白藜芦醇 akt/foxo3a通路 大鼠 肾间质纤维化 P-akt p-foxo3a

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HMB在小鼠急性呼吸窘迫综合征相关ICU获得性衰弱中的作用及其机制 被引量：1

4

作者 潘晓佳 徐朝霞 +4 位作者 林宁 林正霄 赵磊 冯健 李福祥 《解放军医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2022年第9期886-892,共7页

目的探讨β-羟基-β-甲基丁酸(HMB)在小鼠急性呼吸窘迫综合征(ARDS)相关ICU获得性衰弱(ICU-AW)中的作用及其机制。方法将40只SPF级雄性C57BL/6小鼠随机分为对照组、假手术组、模型组及HMB组,每组10只。模型组及HMB组小鼠在气管内注入3μ... 目的探讨β-羟基-β-甲基丁酸(HMB)在小鼠急性呼吸窘迫综合征(ARDS)相关ICU获得性衰弱(ICU-AW)中的作用及其机制。方法将40只SPF级雄性C57BL/6小鼠随机分为对照组、假手术组、模型组及HMB组,每组10只。模型组及HMB组小鼠在气管内注入3μg/g脂多糖(LPS),制备ARDS相关ICU-AW模型,假手术组注入等量无菌水,对照组不予操作。造模第2天,HMB组给予340 mg/(kg·d)HMB灌胃,其余3组给予等体积生理盐水,连续灌胃2周。另取与HMB组相同处理的小鼠20只,随机分为ARQ-092组与Akt抑制剂对照组,每组10只。从造模第2天开始,每天在HMB灌胃10 h后口服Akt抑制剂(ARQ-092组)或等体积载体(Akt抑制剂对照组),持续给药12 d。测量各组小鼠前肢肌肉抓力、肌肉减少指数(SI);HE染色观察肺组织及肌肉组织病理变化;qRT-PCR检测小鼠腓肠肌中Akt、FoxO3a、Atrogin1及MuRF1的mRNA表达水平;Western blotting检测小鼠腓肠肌中Akt/FoxO3a通路相关蛋白表达水平。结果HMB组小鼠的前肢肌肉抓力及SI均明显高于模型组(P<0.05)。HE染色结果显示,对照组及假手术组肺组织结构正常;模型组肺泡间隔可见明显增厚、断裂,结构紊乱,炎性细胞浸润;HMB组肺组织损伤程度较模型组轻。对照组及假手术组小鼠的腓肠肌肌束结构正常;模型组出现肌纤维萎缩、数量减少,肌束结构破坏,横截面积减少;HMB组小鼠腓肠肌损伤程度较轻。与模型组比较,HMB组小鼠腓肠肌中Akt及FoxO3a mRNA表达水平均明显升高(P<0.05),Akt及FoxO3a蛋白磷酸化水平也明显升高(P<0.05),而Atrogin1及MuRF1的mRNA及蛋白表达水平均明显降低(P<0.05)。结论HMB可通过调控Akt-FoxO3a-MuRF1/Atrogin1信号通路在ICU-AW中发挥保护作用,可能对ICU-AW的防治具有重要价值,而Akt抑制剂ARQ-092能够逆转HMB的此种保护作用。 展开更多

关键词 重症监护室获得性衰弱 急性呼吸窘迫综合征 肌肉萎缩 β-羟基-β-甲基丁酸 akt/foxo3a通路

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卵巢颗粒细胞自噬与PI3K/AKT/FOXO3a信号通路的相关性 被引量：16

5

作者 黄姗姗 刘慧萍 +4 位作者 张韫玉 陈镇 张楚洁 付慧兰 肖小芹 《湖南中医药大学学报》 CAS 2019年第6期775-780,共6页

细胞自噬是哺乳动物细胞物质代谢的一个重要机制,与细胞凋亡共同参与卵巢卵泡的发育和闭锁,并发挥重要的作用。近年研究发现,磷脂酰肌醇3-激酶/蛋白激酶B(phosphatidylinositol 3-kinase/protein kinase B,PI3K/AKT)信号通路参与卵巢疾... 细胞自噬是哺乳动物细胞物质代谢的一个重要机制,与细胞凋亡共同参与卵巢卵泡的发育和闭锁,并发挥重要的作用。近年研究发现,磷脂酰肌醇3-激酶/蛋白激酶B(phosphatidylinositol 3-kinase/protein kinase B,PI3K/AKT)信号通路参与卵巢疾病的发生。PI3K和AKT的过度激活可使原始卵泡过早发育以及卵泡过快凋亡,卵巢颗粒细胞作为卵泡发育重要的支持细胞,其功能的减退或凋亡很可能引发一系列女性内分泌方面的疾病。FOXO3a转录因子是PI3K/AKT信号通路下游的重要靶蛋白之一,参与抗增殖和凋亡。本文就关于卵巢颗粒细胞自噬与PI3K/AKT/FOXO3a信号通路的相关进展加以综述。 展开更多

关键词 卵巢 卵泡 颗粒细胞 自噬 PI3K/akt/foxo3a信号通路

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黄芩苷通过抑制ROS介导的PI3K/Akt/FoxO3a信号通路诱导HepG2细胞铁死亡 被引量：6

6

作者 周季青 黎华建 +4 位作者 曾煜豪 陈画画 梁炜瑜 张进 丁富平 《中国中药杂志》 CAS CSCD 北大核心 2024年第5期1327-1334,共8页

运用网络药理学和体外实验探究黄芩苷是否诱导HepG2细胞发生铁死亡并探讨潜在机制。体外培养HepG2细胞,CCK-8法检测细胞活力。TCGA数据库获取肝癌转录组测序数据,FerrDb V2数据库获取铁死亡基因数据。使用DEG2程辑包筛选差异表达基因,... 运用网络药理学和体外实验探究黄芩苷是否诱导HepG2细胞发生铁死亡并探讨潜在机制。体外培养HepG2细胞,CCK-8法检测细胞活力。TCGA数据库获取肝癌转录组测序数据,FerrDb V2数据库获取铁死亡基因数据。使用DEG2程辑包筛选差异表达基因,并与铁死亡基因取交集,得到介导铁死亡调节肝癌进程的靶向基因。通过基因本体数据库(Gene Ontology,GO)与京都基因与基因组百科全书数据库(Kyoto Encyclopedia of Genes and Genomes,KEGG)以P<0.05、|log2(fold change)|>0.5为标准,分析模块相关的分子功能及结构。DCFH-DA探针检测细胞活性氧(reactive oxygen species,ROS)水平变化。试剂盒检测细胞还原型谷胱甘肽(glutathione,GSH)、Fe^(2+)水平。实时荧光定量聚合酶链式反应(realtime quantitative PCR,RT-PCR)检测谷胱甘肽过氧化物酶4(glutathione peroxidase 4,GPX4)、溶质载体家族7成员11(solute carrier family 7 member 11,SLC7A11)mRNA表达。蛋白质印迹法检测GPX4、SLC7A11、PI3K、p-PI3K、Akt、p-Akt、FoxO3a、p-FoxO3a蛋白表达。CCK-8检测结果显示,200μmol·L-1黄芩苷干预48 h,能显著抑制HepG2细胞活力。网络药理学结果显示,可通过PI3K/Akt信号通路调节肝癌中铁死亡的发生。细胞实验结果显示,黄芩苷可下调SLC7A11,降低GSH水平和GPX4表达,诱导HepG2细胞ROS累积,增加Fe^(2+)产生。铁死亡抑制剂(ferrostatin-1,Fer-1)可减少黄芩苷诱导的ROS累积,上调SLC7A11、GSH和GPX4表达,减弱PI3K、Akt、FoxO3a磷酸化。综上,黄芩苷可通过抑制ROS介导的PI3K/Akt/FoxO3a通路诱导HepG2细胞铁死亡。 展开更多

关键词 肝细胞癌 黄芩苷 铁死亡 PI3K/akt/foxo3a信号通路

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黄连-大黄-肉桂复方及其组分对人肝癌SMMC-7721及HepG2细胞增殖的影响 被引量：9

7

作者 钱杨杨 吴中华 +2 位作者 张静 潘志强 刘小美 《中国中医药信息杂志》 CAS CSCD 2020年第4期52-58,共7页

目的观察黄连-大黄-肉桂复方及其组分配伍对人肝癌SMMC-7721及HepG2细胞增殖的影响,并从PI3K/AKT-FOXO3a通路探讨其作用的分子机制。方法体外培养人肝癌SMMC-7721及HepG2细胞,采用MTT法分别检测复方和复方中黄连、大黄、肉桂各自主要有... 目的观察黄连-大黄-肉桂复方及其组分配伍对人肝癌SMMC-7721及HepG2细胞增殖的影响,并从PI3K/AKT-FOXO3a通路探讨其作用的分子机制。方法体外培养人肝癌SMMC-7721及HepG2细胞,采用MTT法分别检测复方和复方中黄连、大黄、肉桂各自主要有效成分小檗碱、大黄素和桂皮醛不同配伍的肝癌细胞增殖;进一步以复方及有效组分最佳配伍(简称"组分")作用肝癌细胞24h,RT-qPCR检测PI3K、AKT和FOXO3a mRNA表达,Western blot检测PI3K p110、AKT、p-AKT、FOXO3a和p-FOXO3a蛋白表达。结果复方、小檗碱、大黄素和桂皮醛对肝癌细胞增殖具有抑制作用,并有较明显的量效和时效关系,小檗碱、大黄素和桂皮醛最佳配伍比例分别为44、23、46μmol/L;与对照组比较,复方和组分均能显著上调人肝癌SMMC-7721及HepG2细胞FOXO3a mRNA表达,PI3K mRNA表达也呈上调趋势,SMMC-7721细胞AKT mRNA表达显著下调,但组分使HepG2细胞AKT mRNA表达显著上调;复方和组分均可抑制PI3K p110、AKT及p-AKT蛋白表达,显著促进FOXO3a蛋白表达,对p-FOXO3a蛋白表达有抑制趋势。结论复方和组分均能抑制SMMC-7721、HepG2细胞增殖,其抗肝癌作用可能与PI3K/AKT的抑制和FOXO3a的激活有关。 展开更多

关键词 黄连-大黄-肉桂复方 组分配伍 肝癌细胞 PI3K/akt-foxo3a通路

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槲皮素通过AKT/FOXO3信号通路保护糖尿病大鼠心肌细胞 被引量：8

8

作者 张煜敏 张桢烨 +3 位作者 钱玲玲 王宁 缪凌峰 王如兴 《江苏大学学报（医学版）》 CAS 2021年第3期185-189,共5页

目的:探讨槲皮素对糖尿病大鼠心肌细胞的保护作用及其机制。方法:将雄性SD大鼠随机分为对照组、糖尿病组、槲皮素低剂量(50 mg/kg)干预组和槲皮素高剂量(100 mg/kg)干预组。除对照组外其余各组均注射链脲佐菌素(STZ)构建1型糖尿病大鼠... 目的:探讨槲皮素对糖尿病大鼠心肌细胞的保护作用及其机制。方法:将雄性SD大鼠随机分为对照组、糖尿病组、槲皮素低剂量(50 mg/kg)干预组和槲皮素高剂量(100 mg/kg)干预组。除对照组外其余各组均注射链脲佐菌素(STZ)构建1型糖尿病大鼠动物模型,槲皮素干预组分别给予低剂量(50 mg/kg)和高剂量(100 mg/kg)槲皮素灌胃。槲皮素灌胃1个月后,采用超声心动图检测大鼠心功能;采用TUNEL染色法检测大鼠心肌组织细胞凋亡水平;采用蛋白质印迹法检测大鼠心肌组织B淋巴细胞瘤因子相关X蛋白(BAX)、B淋巴细胞瘤-2(BCL-2)、磷酸化蛋白激酶B(pAKT)、蛋白激酶B(AKT)、磷酸化叉头核蛋白O3(pFOXO3)、叉头核蛋白O3(FOXO3)表达;采用实时荧光定量PCR检测大鼠心肌组织Bax和Bcl-2的mRNA水平。结果:糖尿病组心功能指标较对照组显著降低(P<0.05),但给予槲皮素干预后,心脏射血分数和短轴缩短率有明显改善(P<0.05)。糖尿病组心肌细胞凋亡率高于对照组(P<0.05),槲皮素干预后均明显改善(P<0.05),槲皮素低剂量干预组与高剂量干预组间无明显差异(P>0.05)。糖尿病组心肌组织Bax mRNA及蛋白水平均高于对照组(P<0.05),槲皮素干预后明显下降(P<0.05);糖尿病组Bcl-2 mRNA及蛋白水平均低于对照组(P<0.05),槲皮素干预后明显升高(P<0.05)。糖尿病组pAKT及pFOXO3蛋白表达较对照组明显下降(P<0.05),槲皮素干预后均明显升高(P<0.05),AKT及FOXO3在各组间表达无明显差异(P>0.05)。结论:槲皮素通过激活AKT/FOXO3信号通路减少糖尿病大鼠心肌细胞凋亡,从而改善心功能。 展开更多

关键词 糖尿病 槲皮素 心肌细胞 凋亡 akt/foxo3信号通路

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温肾养血方对高龄雌鼠卵泡发育的作用及其对PI3K-AKT-FOXO3a通路影响的研究 被引量：8

9

作者 辛明蔚 张莹 +4 位作者 何军琴 杨维 武颖 尹晓丹 贾朝霞 《首都医科大学学报》 CAS 北大核心 2019年第3期344-351,共8页

目的探讨温肾养血方促进高龄雌鼠卵泡发育的作用及机制。方法采用数字表法将8月龄ICR小鼠随机分为A:空白组、B:控制性超排卵组(controlled ovarian hyperstimulation,COH)组、C:温肾养血方低剂量组、D:温肾养血方中剂量组、E:温肾养血... 目的探讨温肾养血方促进高龄雌鼠卵泡发育的作用及机制。方法采用数字表法将8月龄ICR小鼠随机分为A:空白组、B:控制性超排卵组(controlled ovarian hyperstimulation,COH)组、C:温肾养血方低剂量组、D:温肾养血方中剂量组、E:温肾养血方高剂量组,连续每日定时(下午6时)灌胃给药10 d,第11天对B、C、D、E组雌鼠同时腹腔注射孕马血清促性腺激素(pregnant mare serum gonadotropin,PMSG)10 IU/只,A、B组雌鼠同时注射等量0.9%(质量分数)氯化钠注射液,48 h后,腹腔注射人绒毛膜促性腺激素(human chorionic gonadotropin,HCG)10 IU/只,14 h后,剖腹取出小鼠卵巢及输卵管,观察用药后各组小鼠取卵数及优质卵泡数,qRT-PCR、Western blotting法和免疫组织化学法检测PI3K、P-PI3K、AKT、P-AKT、FOXO3a、P-FOXO3a的表达情况。每组记录4只雌鼠与雄鼠交配后的生育数量。结果温肾养血方能够增加小鼠排卵数、优质卵泡数和生育数;与空白组比较,温肾养血方中剂量组小鼠卵巢PI3K mRNA表达下降,温肾养血方高、低剂量组表达升高,差异有统计学意义(P<0.05);低剂量组AKT mRNA的表达升高,差异有统计学意义(P<0.05);低剂量、中剂量和高剂量组的FOXO3a mRNA表达均升高,差异有统计学意义(P<0.05),随着中药浓度升高,FOXO3a mRNA表达的含量逐渐下降。结论温肾养血方可促进高龄ICR小鼠卵泡发育,增加排卵数、优质卵泡数及生育数量,其机制可能与调节PI3K,AKT和FOXO3a的表达有关。温肾养血方低剂量和中剂量效果最好,高剂量次之。 展开更多

关键词 温肾养血方 PI3K-akt-foxo3a通路 控制性超排卵

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灯盏细辛总咖啡酰奎宁酸调控PI3K/Akt/FoxO3a通路延缓衰老的作用机制研究

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作者 普元柱 陈海丰 苏灿 《天然产物研究与开发》 CAS CSCD 北大核心 2024年第5期737-747,共11页

研究灯盏细辛总咖啡酰奎宁酸(caffeoylquinic acid from Erigeron breviscapus,EBCQA)的抗衰老作用,并探讨其潜在作用机制。以线虫为模型,观察EBCQA对其寿命、氧化抗性、热抗性、运动能力、DAF-16入核、以及超氧化物歧化酶(superoxide d... 研究灯盏细辛总咖啡酰奎宁酸(caffeoylquinic acid from Erigeron breviscapus,EBCQA)的抗衰老作用,并探讨其潜在作用机制。以线虫为模型,观察EBCQA对其寿命、氧化抗性、热抗性、运动能力、DAF-16入核、以及超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(glutathione peroxidase,GSH-Px)、过氧化氢酶(catalase,CAT)活性和丙二醛(malondialdehyde,MDA)含量的影响。腹腔注射D-半乳糖构建衰老大鼠模型,检测EBCQA对大鼠学习记忆能力、胸腺和脾脏系数、肝脏中磷脂酰肌醇3-激酶(phosphoinositide 3-kinase,PI3K)、蛋白激酶B(Akt/protein kinase B,Akt)、磷酸化Akt(phosphp-Akt,p-Akt)、叉头框蛋白O3a(forkhead box class O3a,FOXO3a)、磷酸化FOXO3a(phosphp-FOXO3a,p-FOXO3a)表达,以及肝脏和血清中SOD、GSH-Px、CAT活性和MDA含量的影响。结果显示,EBCQA能够延长野生型线虫寿命,并提升其氧化抗性、热抗性和运动能力,但对线虫PI3K、Akt、FoxO3a同源体突变株寿命没有显著影响;EBCQA能促进DAF-16入核,通过DAF-16提升线虫的SOD、GSH-Px、CAT活性,降低MDA水平。在D-半乳糖诱导衰老大鼠中,EBCQA给药显著改善大鼠的学习记忆功能,提升胸腺和脾脏系数,降低PI3K、Akt、p-Akt、p-FoxO3a表达和MDA含量,增强SOD、GSH-Px、CAT活性。以上结果表明,EBCQA具有延缓衰老的作用,其机制可能与抑制PI3K和Akt激活、降低FOXO3a磷酸化、促进FOXO3a入核和转录活性、提升抗氧化酶活性和抑制氧化应激相关。 展开更多

关键词 灯盏细辛总咖啡酰奎宁酸 线虫 D-半乳糖诱导衰老大鼠 PI3K/akt/foxo3a通路 抗衰老

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“秩边透水道”针刺对卵巢低反应小鼠PI3K/AKT/FOXO3a通路的影响

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作者 郝健亨 王海军 +1 位作者 曹玉霞 冀来喜 《中国针灸》 CAS CSCD 北大核心 2024年第7期821-830,共10页

目的:基于磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)/蛋白激酶B(AKT)/叉头蛋白O3a(FOXO3a)通路观察“秩边透水道”针刺对卵巢低反应(POR)小鼠卵巢功能的保护作用,探析针刺抑制POR卵巢颗粒细胞凋亡的可能机制。方法:将动情周期规律的45只小鼠随机分成空白... 目的:基于磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)/蛋白激酶B(AKT)/叉头蛋白O3a(FOXO3a)通路观察“秩边透水道”针刺对卵巢低反应(POR)小鼠卵巢功能的保护作用,探析针刺抑制POR卵巢颗粒细胞凋亡的可能机制。方法:将动情周期规律的45只小鼠随机分成空白组、模型组和针刺组,每组15只。模型组和针刺组小鼠予雷公藤多苷混悬液(50 mg·kg^(-1)·d^(-1))灌胃2周制备POR模型。造模成功后针刺组小鼠予“秩边透水道”针刺干预连续2周,每日1次,每次20 min。干预结束次日开始促排卵,各组促排卵后完成取材。采用阴道脱落细胞涂片观察小鼠动情周期变化,记录小鼠取卵数、卵巢湿重、末次体质量与卵巢指数;ELISA法检测小鼠血清抗缪勒管激素(AMH)、卵泡刺激素(FSH)、雌二醇(E2)、黄体生成素(LH)含量;HE染色法观察小鼠卵巢组织形态;TUNEL染色法观察小鼠卵巢颗粒细胞凋亡情况;实时荧光定量PCR法检测小鼠卵巢组织PI3K、AKT、FOXO3a mRNA表达;Western blot法检测卵巢组织B淋巴细胞瘤-2(Bcl-2)关联X的蛋白(BAX),半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3(Caspase-3)、磷酸化磷脂酰肌醇3-激酶(p-PI3K)和磷酸化蛋白激酶B(p-AKT)蛋白表达。结果:与空白组比较,模型组小鼠动情周期紊乱率升高(P<0.01);与模型组比较,针刺组小鼠动情周期紊乱率降低(P<0.01)。与空白组比较,模型组小鼠取卵数、卵巢湿重、卵巢指数和末次体质量降低(P<0.01);与模型组比较,针刺组小鼠取卵数、卵巢指数和卵巢湿重升高(P<0.01,P<0.05),末次体质量比较差异无统计学意义(P>0.05)。与空白组比较,模型组小鼠血清FSH、LH含量升高(P<0.01),血清AMH、E2含量降低(P<0.01);与模型组比较,针刺组小鼠血清FSH、LH含量降低(P<0.01,P<0.05),血清AMH、E2含量升高(P<0.01,P<0.05)。与空白组比较,模型组小鼠卵巢组织各级正常发育卵泡数量减少且形态较差,各级闭锁卵泡增多;与模型组比较,针刺组小 展开更多

关键词 卵巢低反应 针刺 秩边透水道 卵巢功能 PI3K/akt/foxo3a信号通路 细胞凋亡

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PI3K/Akt/FOXO3a信号通路介导的保护性自噬参与肺腺癌获得性顺铂耐药表型重塑 被引量：4

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作者 周欢 徐铭 +2 位作者 李波 刘春英 王淳 《中国临床药理学与治疗学》 CAS CSCD 2022年第9期961-970,共10页

目的:比较顺铂压力下人肺腺癌亲本A549细胞与获得性顺铂耐药表型的A549/DDP细胞自噬水平,探寻肿瘤细胞获得性耐药表型重塑的分子机制。方法:不同浓度顺铂(cisplatin,DDP)干预亲本A549细胞及获得性顺铂耐药表型的A549/DDP细胞,应用CCK-8... 目的:比较顺铂压力下人肺腺癌亲本A549细胞与获得性顺铂耐药表型的A549/DDP细胞自噬水平,探寻肿瘤细胞获得性耐药表型重塑的分子机制。方法:不同浓度顺铂(cisplatin,DDP)干预亲本A549细胞及获得性顺铂耐药表型的A549/DDP细胞,应用CCK-8法比较两株细胞耐药指数、免疫印迹法比较自噬相关蛋白(Beclin 1、LC3Ⅱ及p62)表达水平;应用10μmol/L顺铂(相当于亲本A549细胞半数抑制浓度,即A549 IC 50值)干预A549及A549/DDP细胞,构建细胞应激状态,CCK-8法比较两株细胞生存活力,免疫印迹法比较自噬相关蛋白(Beclin 1、LC3Ⅱ及p62)、凋亡相关蛋白(Bcl-2、Bax、Cleaved Caspase-3)、转录因子FOXO3a及其磷酸化蛋白(p-FOXO3a)表达水平,免疫荧光法观察FOXO3a亚细胞定位,并利用自噬晚期抑制剂巴弗洛霉素A1(Baf A1)干预A549及A549/DDP细胞,进一步验证顺铂压力下细胞自噬激活情况;利用蛋白激酶抑制剂干预PI3K/Akt信号通路,免疫印迹法检测顺铂压力下A549及A549/DDP细胞Akt、p-Akt及自噬相关蛋白表达水平,以探寻肿瘤细胞获得性耐药表型重塑的分子机制。结果:与亲本A549细胞相比,获得性顺铂耐药表型的A549/DDP细胞具有更强的顺铂耐药性及较高的基础自噬水平。在10μmol/L顺铂压力下,A549/DDP细胞存活率明显高于A549细胞;A549细胞中,顺铂通过抑制PI3K/Akt/FOXO3a信号通路,上调转录因子FOXO3a表达水平,下调Bcl-2表达、促进Bax及Cleaved Caspase-3活性片段表达增加,诱导细胞凋亡;A549/DDP细胞中,相同浓度的顺铂通过抑制PI3K/Akt/FOXO3a信号通路,抑制FOXO3a磷酸化,上调Beclin 1及LC3Ⅱ表达、下调p62表达,促进细胞保护性自噬,使耐药细胞获得生存活性。结论:顺铂诱导亲本A549细胞凋亡可能与抑制PI3K/Akt/FOXO3a信号通路,上调转录因子FOXO3a表达有关;A549/DDP细胞顺铂耐药表型的获得可能与顺铂抑制PI3K/Akt/FOXO3a信号通路,抑制FOXO3a磷酸化,上调细胞保护性自 展开更多

关键词 肺腺癌 获得性顺铂耐药 保护性自噬 PI3K/akt/foxo3a信号通路 凋亡

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新生大鼠原始卵泡凋亡与PI3K/Akt/Foxo3a信号通路的相关性 被引量：4

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作者 赵粉琴 丁晓南 +2 位作者 安明霞 张小花 贾学玲 《中国计划生育学杂志》 2022年第6期1227-1232,共6页

目的:观察PI3K激动剂对新生大鼠卵巢PI3K/Akt/Foxo3a蛋白、细胞周期以及凋亡蛋白表达的影响。方法:取7日龄雌性大鼠卵巢体外培养,随机分为对照组、PI3K激活剂组、PI3K通路抑制剂组,每组10只。培养7dHE染色观察培养5d卵巢组织卵泡形态学... 目的:观察PI3K激动剂对新生大鼠卵巢PI3K/Akt/Foxo3a蛋白、细胞周期以及凋亡蛋白表达的影响。方法:取7日龄雌性大鼠卵巢体外培养,随机分为对照组、PI3K激活剂组、PI3K通路抑制剂组,每组10只。培养7dHE染色观察培养5d卵巢组织卵泡形态学;荧光显微镜法检测卵巢细胞凋亡;Western blot法比较p-AKT、p-FOXO3A、CDK2、P27、BCL-2及TAP63蛋白表达;PCR法检测培养3,5,7d PI3K、Akt、Foxo3a、Bcl-2、p27、Cdk2和Tap63 mRNA表达量。结果:PI3K激活剂组卵巢组织PI3K、p-AKT、p-FOXO3A、BCL-2、CDK2和TAP63蛋白表达增加(P<0.01),P27蛋白表达减少,尤以第5天最显著(P<0.05),之后逐渐下降,第7天达到最低(P<0.05);而PI3K抑制剂组卵巢组织PI3K、p-AKT、p-FOXO3A、CDK2、BCL-2和TAP63蛋白表达减少,P27蛋白表达增加。结论:激活PI3K/AKT/Foxo3a信号通路可以促进原始卵泡发育,其机制可能与上调卵巢组织PI3K、AKT、FOXO3A、BCL-2、CDK2和TAP63蛋白表达,下调P27蛋白表达有关。 展开更多

关键词 新生大鼠 原始卵泡凋亡 PI3K/akt/foxo3a信号通路 P27蛋白 BCL-2蛋白

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健脾方对废用性肌肉萎缩小鼠Akt/FOXO3a通路表达的机制研究 被引量：3

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作者 李小凯 丁劼 +4 位作者 孙雯 高洒洒 杨光月 郭海玲 赵咏芳 《上海中医药大学学报》 CAS 2022年第5期86-92,共7页

目的:探究健脾方基于Akt/FOXO3a信号通路预防小鼠废用性肌肉萎缩的作用机制。方法:将45只10周龄雄性C57/BL6小鼠随机分为对照组、模型组及健脾方组。通过后肢卸载构建废用性肌肉萎缩小鼠模型。对照组和模型组小鼠每天每只灌胃给予0.2 ml... 目的:探究健脾方基于Akt/FOXO3a信号通路预防小鼠废用性肌肉萎缩的作用机制。方法:将45只10周龄雄性C57/BL6小鼠随机分为对照组、模型组及健脾方组。通过后肢卸载构建废用性肌肉萎缩小鼠模型。对照组和模型组小鼠每天每只灌胃给予0.2 ml 0.9%NaCl溶液,健脾方组小鼠每天每只灌胃给予0.2 ml健脾方混悬液。给药28 d后,称取小鼠体质量、肌肉湿重(累积肌肉、腓肠肌、比目鱼肌、胫骨前肌、趾长伸肌及股四头肌),qRT-PCR检测腓肠肌中IGF-1、PI3K、Akt、Atrogin及MuRF1 mRNA的表达水平,Western blot检测腓肠肌中p-Akt、p-FOXO3a、Akt、FOXO3a蛋白的表达水平。结果:(1)与对照组比较,模型组小鼠四肢抓力/体质量比值、肌肉湿重/体质量比值、肌纤维横截面积和直径明显降低(P<0.05)。与模型组比较,健脾方组小鼠四肢抓力/体质量比值明显增加(P<0.05);累积肌肉、比目鱼肌、胫骨前肌、股四头肌的湿重/体质量比值明显增加(P<0.05);肌纤维横截面积明显增加(P<0.05)。(2)健脾方干预后,小鼠腓肠肌IGF-1、Akt mRNA表达明显增加(P<0.05),Atrogin、MuRF1 mRNA表达明显减少(P<0.05);p-Akt蛋白表达升高,p-FOXO3a蛋白表达降低。结论:健脾方可能通过上调Akt磷酸化水平抑制Akt/FOXO3a信号通路来预防废用性肌肉萎缩。 展开更多

关键词 健脾方 废用性肌萎缩 后肢卸载 抓力 腓肠肌 akt/foxo3a信号通路

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丁苯酞对帕金森病伴抑郁小鼠抑郁行为的影响及对黑质纹状体相关信号通路的调节作用 被引量：3

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作者 刘斌 范少凯 +7 位作者 李炳翰 杨浩辉 张艳淑 毛文静 邓春颖 吴小坤 王雅楠 李世英 《中国医药》 2022年第1期102-106,共5页

目的观察丁苯酞对帕金森病伴抑郁小鼠抑郁行为的影响及对黑质纹状体区磷脂酰肌醇⁃3⁃激酶(PI3K)/蛋白激酶B(Akt)/叉头状转录因子O亚族3a(FoxO3a)信号通路关键因子的调节作用,探讨丁苯酞治疗帕金森病抑郁的效果及机制。方法选择C57成年雄... 目的观察丁苯酞对帕金森病伴抑郁小鼠抑郁行为的影响及对黑质纹状体区磷脂酰肌醇⁃3⁃激酶(PI3K)/蛋白激酶B(Akt)/叉头状转录因子O亚族3a(FoxO3a)信号通路关键因子的调节作用,探讨丁苯酞治疗帕金森病抑郁的效果及机制。方法选择C57成年雄性小鼠40只,完全随机分为正常对照组、帕金森病伴抑郁模型组、多巴丝肼治疗组和联合治疗组。正常对照组正常饲养,不给予任何干预。采用腹腔注射1⁃甲基⁃4⁃苯基⁃1,2,3,6⁃四氢吡啶建立帕金森病小鼠模型,采用慢性不可预知温和应激诱导产生帕金森病伴抑郁小鼠模型。多巴丝肼治疗组给予多巴丝肼6.25 mg/kg,1次/d,灌胃7 d;联合治疗组给予多巴丝肼6.25 mg/kg和丁苯酞120 mg/kg,1次/d,灌胃7 d。通过强迫游泳测试、悬尾测试和糖水偏好实验对小鼠的抑郁行为进行评价。蛋白质印迹法检测各组黑质纹状体区PI3K/Akt/FoxO3a信号通路相关磷酸化因子p⁃PI3K、p⁃Akt、p⁃FoxO3a水平。结果帕金森病伴抑郁模型组强迫游泳不动时间及悬尾静止时间长于正常对照组,糖水偏好指数低于正常对照组,差异均有统计学意义(均P<0.05)。多巴丝肼治疗组及联合治疗组强迫游泳不动时间及悬尾静止时间短于帕金森病伴抑郁模型组,糖水偏好指数高于帕金森病伴抑郁模型组,以联合治疗组更明显,差异均有统计学意义(均P<0.05)。帕金森病伴抑郁模型组p⁃PI3K、p⁃Akt、p⁃FoxO3a表达水平明显低于正常对照组,差异均有统计学意义(均P<0.05)。多巴丝肼治疗组及联合治疗组p⁃PI3K、p⁃Akt、p⁃FoxO3a表达水平高于帕金森病伴抑郁模型组[(0.54±0.02)、(0.60±0.03)比(0.44±0.01),(0.57±0.01)、(0.66±0.02)比(0.44±0.04),(0.61±0.03)、(0.70±0.03)比(0.45±0.02)],以联合治疗组更明显,差异均有统计学意义(均P<0.05)。结论丁苯酞可通过激活黑质纹状体区PI3K/Akt/FoxO3a信号通路改善帕金森病伴抑郁 展开更多

关键词 帕金森病 抑郁 丁苯酞 磷脂酰肌醇⁃3⁃激酶/蛋白激酶B/叉头状转录因子O亚族3a信号通路(PI3K/akt/foxo3a信号通路)

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基于网络药理学研究艾片抗脑缺血再灌注损伤的作用机制及验证 被引量：3

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作者 付尹 杨显娟 +4 位作者 王建 王立映 王佳俊 龚道银 邓钦清 《中草药》 CAS CSCD 北大核心 2021年第8期2374-2383,共10页

目的探明艾片抗脑缺血再灌注损伤的作用及其机制。方法借助Pharm Mapper等数据库获得艾片(左旋龙脑)抗脑缺血再灌注损伤(cerebral ischemia-reperfusion injury,CIRI)的潜在靶点并进行基因本体(gene ontology,GO)功能富集分析和京都基... 目的探明艾片抗脑缺血再灌注损伤的作用及其机制。方法借助Pharm Mapper等数据库获得艾片(左旋龙脑)抗脑缺血再灌注损伤(cerebral ischemia-reperfusion injury,CIRI)的潜在靶点并进行基因本体(gene ontology,GO)功能富集分析和京都基因与基因组百科全书(Kyoto encyclopedia of genes and genomes,KEGG)通路富集分析。分别设置假手术组、模型组、溶剂模型(1%聚山梨酯-80)组、阳性药(尼莫地平)组及艾片高、中、低剂量(0.20、0.10、0.05 g/kg)组,采用预防和治疗给药的方式对线栓法制备的CIRI模型大鼠进行干预,ZeaLonga评分法对不同时间点(再灌注4、22.5、46.5、70.5 h)模型大鼠神经功能进行评价;2,3,5-氯化三苯基四氮唑(2,3,5-triphenyltetrazoliumchloride,TTC)染色法观察大鼠脑梗死率;蛋白质印迹(Western blotting)和免疫组织化学法对预测的通路进行初步验证。结果网络药理学预测显示,艾片抗CIRI的潜在靶点有63个,可能与调控生物过程及叉头转录因子O亚族(forkhead transcription factor of the O class,FOXO)信号通路、磷脂酰肌醇-3激酶(phosphatidylinositol-3-kinases,PI3K)/蛋白激酶B(protein kinase B,Akt)信号通路、雌激素信号通路等有关。实验结果显示,艾片0.20、0.10 g/kg组能极显著降低模型大鼠脑梗死率,显著升高模型大鼠缺血侧皮层中磷酸化叉头转录因子O亚族3a (phosphorylated-forkheadboxO3a, p-FOXO3a)蛋白表达量和p-Akt/Akt和p-FOXO3a/FOXO3a值,极显著降低细胞死亡调解因子(Bcl-2 interacting mediator of cell death,Bim)和半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3(cysteinyl aspartate specific proteinase 3,Caspase-3)蛋白表达量,艾片0.20 g/kg组还能不同程度改善模型大鼠各时间点神经功能损伤。结论艾片可能是通过调节Akt/FOXO3a/Bim信号通路改善CIRI,发挥抗细胞凋亡作用。 展开更多

关键词 艾片 脑缺血再灌注 网络药理学 akt/foxo3a/Bim信号通路 凋亡

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基于“治未病”理论探讨穴位注射对卵巢储备功能减退大鼠PI3K、AKT、FOXO3a表达的影响 被引量：3

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作者 李娅 罗小光 陈睿 《中华中医药杂志》 CAS CSCD 北大核心 2022年第4期2254-2258,共5页

目的:基于中医“治未病”理论探讨穴位注射胎盘多肽早期预防对卵巢储备功能减退(DOR)模型大鼠的保护作用和可能机制。方法:将有正常动情周期的SPF级12周龄雌性大鼠随机分为空白组、模型组、生肌组、生穴组、肽肌组、肽穴组,每组8只。除... 目的:基于中医“治未病”理论探讨穴位注射胎盘多肽早期预防对卵巢储备功能减退(DOR)模型大鼠的保护作用和可能机制。方法:将有正常动情周期的SPF级12周龄雌性大鼠随机分为空白组、模型组、生肌组、生穴组、肽肌组、肽穴组,每组8只。除空白组外,其余5组以雷公藤多苷混悬液造模,造模同时,行相应干预,共2周。干预结束后,检测各组大鼠体质量、卵巢指数、卵巢组织的病理变化,ELISA检测血清中血清卵泡刺激素(FSH)、雌二醇(E2)、抑制素B(INHB)水平,免疫组化检测磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)、蛋白激酶B(AKT)、叉头状转录因子O亚族3(FOXO3a)蛋白的表达。结果:与空白组比较,模型组大鼠血清中E2、INHB水平降低、FSH水平显著升高(P<0.01);卵巢中各级卵泡数量减少,闭锁卵泡不同程度增多,PI3K、AKT、FOXO3a蛋白含量显著升高(P<0.01)。与模型组比较,肽穴组血清中E2、INHB水平显著升高,FSH水平显著降低(P<0.01,P<0.05),卵巢中成熟卵泡增加,黄体数量增多,PI3K、AKT、FOXO3a蛋白含量显著降低(P<0.01);生穴组、肽肌组血清中E2水平显著升高(P<0.05),AKT蛋白含量显著降低(P<0.05)。结论:穴位注射胎盘多肽注射液可以早期预防大鼠卵巢储备功能减退,其作用机制可能与调节PI3K、AKT、FOXO3a蛋白的表达,改善血清FSH、E2、INHB水平有关。 展开更多

关键词 穴位注射 治未病 卵巢储备功能减退 PI3K/akt/foxo3a信号通路

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^(60)Coγ射线对大鼠性激素水平以及PI3K/Akt信号通路蛋白表达的影响 被引量：2

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作者 赵粉琴 苟雅姣 +4 位作者 胡芝霞 刘小莉 李春瑶 谢知慧 李淑萍 《甘肃农业大学学报》 CAS CSCD 2021年第2期31-39,共9页

【目的】探讨^(60)Coγ射线对大鼠血清性激素水平及PI3K/Akt/Foxo3a信号通路蛋白表达的影响,明确辐射对卵巢组织损伤的分子机制.【方法】通过一次6.0 Gy^(60)Coγ射线对大鼠进行照射后,分别在第3、7、14、21天,通过TUNEL法观察卵巢组织... 【目的】探讨^(60)Coγ射线对大鼠血清性激素水平及PI3K/Akt/Foxo3a信号通路蛋白表达的影响,明确辐射对卵巢组织损伤的分子机制.【方法】通过一次6.0 Gy^(60)Coγ射线对大鼠进行照射后,分别在第3、7、14、21天,通过TUNEL法观察卵巢组织细胞凋亡情况、血清LH、FSH和雌激素(E2)水平及免疫组化法观察卵巢组织Akt、磷酸化Akt、Foxo3a、磷酸化Foxo3a蛋白水平的表达.【结果】辐射损伤造成卵巢颗粒细胞明显凋亡(P<0.01);而且随着辐射时间的延长细胞凋亡数量逐渐增加,在辐射第21天达到高峰(P<0.01);大鼠血清FSH、LH和E2水平随着辐射对卵巢功能的损伤而逐渐降低(P<0.01);卵巢组织蛋白测定总Akt,p-Akt、Foxo3a蛋白的表达呈现逐渐增加趋势(P<0.01),尤以总Akt和Foxo3a蛋白的表达在辐射第21天最显著(P<0.01);而p-Foxo3a蛋白表达逐渐下降(P<0.01),尤以辐射第21天最显著(P<0.01).【结论】辐射导致大鼠POF的原因,一方面激活PI3K/Akt/Foxo3a信号通路,导致颗粒细胞以及卵母细胞凋亡,另一方面垂体腺细胞凋亡影响促性腺激素分泌. 展开更多

关键词 辐射损伤 卵巢早衰 PI3K/akt/foxo3a信号通路 卵泡发育

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FOXO3a介导PTEN对DNA修复基因RAD51表达的调节作用

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作者 陈忠民 胡迎春 +2 位作者 徐勤枝 周平坤 吴德昌 《军事医学》 CAS CSCD 北大核心 2011年第7期485-488,共4页

目的探讨转录因子FOXO3a在PTEN调节RAD51表达中的作用。方法利用Western印迹技术分析PTEN缺陷与否时,总FOXO3a以及细胞核内FOXO3a磷酸化的情况;转染外源AKT到PTEN野生型细胞或外源PTEN和失去激酶活性的AKT(AKT-DN)到PTEN缺陷型细胞,West... 目的探讨转录因子FOXO3a在PTEN调节RAD51表达中的作用。方法利用Western印迹技术分析PTEN缺陷与否时,总FOXO3a以及细胞核内FOXO3a磷酸化的情况;转染外源AKT到PTEN野生型细胞或外源PTEN和失去激酶活性的AKT(AKT-DN)到PTEN缺陷型细胞,Western印迹检测核内FOXO3a的磷酸化情况。结果 PTEN缺失导致细胞核内FOXO3a磷酸化水平增高;外源PTEN可以降低PTEN缺陷型细胞核内FOXO3a的磷酸化水平,外源AKT可以增加PTEN野生型细胞核内FOXO3a的磷酸化水平;沉默FOXO3a在一定程度上导致RAD51表达水平下降。结论 FOXO3a可以结合到RAD51基因的启动子区,PI3K/AKT/FOXO3a信号通路是PTEN调节RAD51表达的重要方式之一。 展开更多

关键词 转录因子 foxo3A PTEN DNA修复 DNA断裂 双链 RAD51 磷酸化 PI3K/akt/foxo3a信号通路

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氢醌对Jurkat细胞自噬及Akt/Foxo3a信号通路的影响 被引量：1

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作者 刘欢 姜海虹 +4 位作者 蔡炜 毕勇毅 刘旖旎 刘歌 王红 《公共卫生与预防医学》 2022年第6期15-19,共5页

目的探究氢醌(HQ)对人T淋巴细胞白血病系Jurkat细胞自噬相关的信号通路及其作用机制。方法(1)取对数生长期的Jurkat细胞分别用终浓度为0μmol·L^(-1)(对照)、12.5μmol·L^(-1)和25μmol·L^(-1) HQ溶液的培养基培养24h后... 目的探究氢醌(HQ)对人T淋巴细胞白血病系Jurkat细胞自噬相关的信号通路及其作用机制。方法(1)取对数生长期的Jurkat细胞分别用终浓度为0μmol·L^(-1)(对照)、12.5μmol·L^(-1)和25μmol·L^(-1) HQ溶液的培养基培养24h后,采用蛋白质印迹试验(Western-Blotting)检测自噬关键蛋白P62、LC3B,免疫荧光法检测LC3荧光斑点聚集情况;(2)利用基因表达数据库,选取CD34+细胞样本中经HQ作用后差异表达的微小mRNA(miRNA),参考TargetScan、miRDB和miRwalk基因预测工具的结果,分析其可能调控的靶基因并进行信号通路富集分析;(3)根据分析结果,采用实时荧光定量聚合酶链式反应(RT-PCR)检测HQ染毒Jurkat细胞后蛋白激酶B/叉头框蛋白O3A(Akt/Foxo3a)信号通路中Akt、Foxo3a基因表达水平,Western-Blotting检测Akt和Foxo3a及磷酸化Akt(p-Akt)和Foxo3a(p-Foxo3a)蛋白表达水平。结果(1)与对照组相比,25μmol·L^(-1)浓度组自噬关键蛋白P62表达下降,12.5μmol·L^(-1)和25μmol·L^(-1)浓度组LC3Ⅱ/LC3Ⅰ比值升高,差异均有统计学意义(P<0.05),同时免疫荧光法结果显示LC3荧光斑点聚集随HQ浓度的升高而增多;(2)经生物信息学分析后得到AMPK、MAPK、Hedgehog和PI3K/Akt等与细胞自噬相关的信号通路;(3)RT-PCR和Western-Blotting结果显示,HQ染毒组Akt/Foxo3a通路关键基因和蛋白Akt和Foxo3a的表达水平均降低,且蛋白的磷酸化水平降低,25μmol·L^(-1)浓度组均低于12.5μmol·L^(-1)浓度组,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论氢醌可诱导Jurkat细胞自噬水平增加,其机制可能与Akt/Foxo3a信号通路被抑制有关。 展开更多

关键词 氢醌 jurkat细胞 细胞自噬 生物信息学分析 akt/foxo3a信号通路

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