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空心莲子草醇提物抗AIV-H9N2作用的研究 被引量:2
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作者 郑新 戴琪 +3 位作者 李永华 方佳慧 刘焱文 张秀桥 《黑龙江畜牧兽医》 CAS 北大核心 2023年第5期117-122,138,共7页
为了研究空心莲子草醇提物[Alternanthera philoxeroides(Mart.)Griseb.alcohol extract,AAE]的体外抗H9N2型禽流感病毒(avian Influenza virus,AIV)的效果,探索空心莲子草体外抗病毒的作用方式,试验测定了AIV-H9N2对DF-1细胞的TCID50;... 为了研究空心莲子草醇提物[Alternanthera philoxeroides(Mart.)Griseb.alcohol extract,AAE]的体外抗H9N2型禽流感病毒(avian Influenza virus,AIV)的效果,探索空心莲子草体外抗病毒的作用方式,试验测定了AIV-H9N2对DF-1细胞的TCID50;采用观察细胞病变联合CCK-8检测的方法,测定AAE对DF-1细胞的毒性作用;通过计算各试验组(空白对照组、病毒对照组、给药组)细胞的存活率,观察3种作用方式(预防感染作用、抑制复制作用及直接杀灭病毒作用)下,不同浓度AAE体外抗AIV-H9N2的效果,并计算治疗指数(TI)。经尿囊腔接种病毒,测定鸡胚的半数胚致死量(ELD50),测定AAE对鸡胚的最大安全浓度,然后对鸡胚进行攻毒用药试验,统计各组存活情况及血凝效价,观察胚体的发育情况。结果表明:收获的AIV-H9N2病毒液TCID50为1×10^(-4.23)/0.1 mL;AAE对DF-1细胞作用24,48小时时的CC50浓度分别为(191.52±8.73)μg/mL、(156.96±8.79)μg/mL;3种作用方式下,药物对细胞的保护率范围分别在40%~58%、4%~34%及12%~18%之间,AAE治疗指数预防病毒感染作用(3.42±0.71)大于影响病毒复制作用(1.74±0.11),AAE不具有直接杀灭病毒作用。鸡胚的ELD50为1×10^(-2.84)/0.2 mL,AAE对鸡胚的最大安全浓度为32.5 mg/mL,AAE能显著改善AIV-H9N2感染胚胎的存活情况(P<0.05),降低病毒感染的血凝效价,减弱病毒对胚体发育的影响。说明AAE在DF-1细胞和鸡胚中对AIV-H9N2具有潜在的抑制作用,可以抑制AIV-H9N2的活性。 展开更多
关键词 空心莲子草醇提物 aiv-h9n2 抗病毒作用 细胞 鸡胚 TCID50 ELD50
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鸡新城疫—传染性支气管炎—禽流感(H9N2)三联灭活疫苗的安全性研究 被引量:2
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作者 李新生 陈红英 +3 位作者 黄宗梅 王亚丹 李双亮 崔保安 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2010年第7期164-165,共2页
为证实鸡新城疫—传染性支气管炎—禽流感(新支流)三联灭活油乳疫苗的安全性,通过颈部皮下注射接种14日龄来航鸡,每日测定鸡的体重,连续监测28 d,用t检验分析对照组和免疫组体重之间的差异显著性。试验结果表明,免疫接种组和空白对照组... 为证实鸡新城疫—传染性支气管炎—禽流感(新支流)三联灭活油乳疫苗的安全性,通过颈部皮下注射接种14日龄来航鸡,每日测定鸡的体重,连续监测28 d,用t检验分析对照组和免疫组体重之间的差异显著性。试验结果表明,免疫接种组和空白对照组体重差异不显著,所制备的新支流三联疫苗不影响鸡的生长性能,对鸡安全。 展开更多
关键词 新城疫 传染性支气管炎 禽流感(h9n2) 灭活油乳疫苗 安全性
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H9N2亚型禽流感病毒PA基因的克隆与序列分析 被引量:1
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作者 易华山 侯顺利 +5 位作者 胡永浩 独军政 刘萍 王光华 高闪电 常惠芸 《甘肃农业大学学报》 CAS CSCD 2007年第3期12-16,共5页
对甘肃H9N2亚型的A/Chicken/GanSu/2/99(A/CK/GS/2/99)株PA基因进行了克隆、测序及分子进化分析.结果表明:该病毒PA基因开放阅读框由2 151个碱基组成,编码716个氨基酸;其与A/Quail/HongKong/NT28/99(H9N2)株和A/Duck/HongKong/Y280/97(H... 对甘肃H9N2亚型的A/Chicken/GanSu/2/99(A/CK/GS/2/99)株PA基因进行了克隆、测序及分子进化分析.结果表明:该病毒PA基因开放阅读框由2 151个碱基组成,编码716个氨基酸;其与A/Quail/HongKong/NT28/99(H9N2)株和A/Duck/HongKong/Y280/97(H9N2)株的核苷酸同源性分别为98.4%和98.5%,氨基酸同源性分别为98.7%和98.7%;与A/HongKong/156/97(H5N1)和A/Goose/GuangDong/1/96(H5N1)的核苷酸同源性分别为89.0%和87.8%,氨基酸同源性分别为为93.9%和94.3%. 展开更多
关键词 禽流感病毒(h9n2株) PA基因 克隆 序列分析
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鸡新城疫-禽流感二联灭活疫苗免疫不同日龄商品肉鸡的效果比较
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作者 江兴华 赵华娥 +4 位作者 林晓荣 郑敬敏 包松英 林拱阳 王全溪 《福建畜牧兽医》 2016年第5期18-21,共4页
使用鸡新城疫-禽流感(H9N2 HP株)二联灭活疫苗分别免疫3、7、14日龄三组商品肉鸡各40羽,同时设一组空白对照组。各免疫组及对照组于3、7、14、21、28、35、42日龄采血检测新城疫、禽流感抗体,于21、28、35日龄进行禽流感病毒攻毒,对比... 使用鸡新城疫-禽流感(H9N2 HP株)二联灭活疫苗分别免疫3、7、14日龄三组商品肉鸡各40羽,同时设一组空白对照组。各免疫组及对照组于3、7、14、21、28、35、42日龄采血检测新城疫、禽流感抗体,于21、28、35日龄进行禽流感病毒攻毒,对比不同日龄免疫组的抗体消涨情况及不同日龄禽流感攻毒结果。发现对照组随鸡日龄增加,新城疫与禽流感抗体逐渐下降,在42日龄时下降至0,而不同免疫组新城疫与禽流感抗体均先下降,21日龄左右开始上升,至35日龄新城疫与禽流感抗体升至6log2以上。3日龄免疫组的禽流感免疫保护效果最好,21、28、35日龄时禽流感强毒攻毒保护率均达100%;7日龄免疫组在21、35日龄时禽流感强毒攻毒保护率均达100%,28日龄时禽流感强毒攻毒保护率达70%;14日龄免疫组在28、35日龄时禽流感强毒攻毒保护率均达100%,21日龄时禽流感强毒攻毒保护率只达30%。试验表明,商品肉鸡选择3日龄免疫鸡新城疫-禽流感(H9N2 HP株)二联灭活疫苗时禽流感免疫保护效果最好,采用3日龄免疫程序可以提高新城疫与禽流感的免疫保护效果,减少养殖业的经济损失。 展开更多
关键词 鸡新城疫 禽流感(h9n2 hP株) 二联灭活疫苗 肉鸡 免疫效果 nDV and aiv(h9n2 hP strain)
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空心莲子草乙酸乙酯部位体内外抗H9N2亚型禽流感病毒活性的研究
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作者 廖思雨 郑新 +4 位作者 戴琪 许诗怡 张天旭 张秀桥 桂春 《中国畜牧兽医》 CAS CSCD 北大核心 2024年第2期759-769,共11页
[目的]探究空心莲子草乙酸乙酯部位(ethyl acetate extract from Alternanthera philoxeroides,AETAC)体内外抗H9N2亚型禽流感病毒(H9N2 subtype Avian influenza virus, AIV-H9N2)活性及其作用机制。[方法]利用CCK-8法检测不同浓度AETA... [目的]探究空心莲子草乙酸乙酯部位(ethyl acetate extract from Alternanthera philoxeroides,AETAC)体内外抗H9N2亚型禽流感病毒(H9N2 subtype Avian influenza virus, AIV-H9N2)活性及其作用机制。[方法]利用CCK-8法检测不同浓度AETAC作用不同时间对鸡胚成纤维细胞(DF-1)的抑制作用,通过预防感染、影响复制、阻止吸附及直接杀灭4种方式作用后检测AETAC对DF-1细胞的毒性,选择体外最佳抗AIV-H9N2作用方式。尿囊腔接种不同浓度AETAC确定其对鸡胚的最大安全浓度;将AETAC以3种不同给药方式作用于AIV-H9N2感染后鸡胚,选择体内最佳给药方式。经尿囊腔同时接种AETAC和AIV-H9N2,统计各组鸡胚存活数,测定血凝效价,并观察胚胎的发育情况和鸡胚法氏囊病理组织变化。[结果]在一定范围内,随着AETAC浓度升高或作用时间延长,AETAC对DF-1细胞的抑制率升高。与空白对照组相比,4种抗AIV-H9N2作用方式下,病毒对照组和药物组细胞存活率均显著降低(P<0.05);与病毒对照组相比,AETAC浓度为5~30μg/mL时,4种抗AIV-H9N2作用方式下,药物组细胞存活率均显著升高(P<0.05)。4种作用方式下,DF-1细胞存活率分别为8.15%~64.96%(预防感染)、8.56%~83.83%(影响复制)、1.82%~5.90%(阻止吸附)和6.90%~40.12%(直接杀灭)。AETAC对鸡胚的最大安全浓度为16.41 mg/mL,对感染鸡胚的最佳给药方式为AETAC和病毒混合后接种。以最佳体内作用方式给药后,AETAC中、低浓度组鸡胚存活率为40%~60%,高浓度组鸡胚全部存活,胚胎喙部发育明显,鸡胚法氏囊淋巴滤泡发育完整,滤泡大小和数量正常,充血量少,组织病理状态改善。[结论]AETAC在体内外对AIV-H9N2均具有显著的抑制作用,且主要与影响病毒复制作用方式相关。 展开更多
关键词 空心莲子草乙酸乙酯部位(AETAC) h9n2亚型禽流感病毒(aiv-h9n2) DF-1细胞 鸡胚
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H9N2亚型AIV不同攻毒方式排毒规律的研究 被引量:3
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作者 余文兰 梁柏 +5 位作者 刘郁夫 刘传高 马晓莉 张俊俊 刘永伦 陈嘉 《黑龙江畜牧兽医(下半月)》 北大核心 2017年第11期126-128,共3页
为了研究H9N2亚型禽流感目前的流行情况,从广东省某鸡场的发病鸡中分离到一株H9N2亚型禽流感病毒(A/Chicken/Guangdong/1104/2014),遗传进化分析显示该毒株属于BJ/94-like谱系h9.4.2.5分支,与经典疫苗株的HA基因相似性为89.3~90.7%,通... 为了研究H9N2亚型禽流感目前的流行情况,从广东省某鸡场的发病鸡中分离到一株H9N2亚型禽流感病毒(A/Chicken/Guangdong/1104/2014),遗传进化分析显示该毒株属于BJ/94-like谱系h9.4.2.5分支,与经典疫苗株的HA基因相似性为89.3~90.7%,通过点眼滴鼻、静脉注射、肌肉注射的方式攻毒SPF鸡研究其攻毒后的排毒规律。结果表明:病毒通过点眼滴鼻和静脉注射方式攻毒能够很好地感染SPF鸡,并在攻毒后第3天排毒率达到100%,但是随后几天排毒率逐渐下降,点眼滴鼻组在攻毒后第7天排毒率下降为0;肌肉注射组则没能有效感染SPF鸡,攻毒后第3~9天的排毒率为16.7%~33.3%。说明静脉注射是较好的攻毒方式,能有效感染SPF鸡,SPF鸡攻毒后第3~5天的排毒率达到100%。 展开更多
关键词 禽流感病毒(aiv)h9n2型 攻毒方式 排毒规律 表面蛋白血凝素 神经氨酸酶
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复方戊二醛消毒剂对鸡禽流感病毒(H9N2株)杀灭效果的研究 被引量:6
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作者 武卫平 禚宝山 +5 位作者 李富金 陈溥言 孙中成 李英 鞠洪涛 崔道石 《中国兽药杂志》 2005年第12期25-27,共3页
研究了一种复方戊二醛消毒剂对鸡禽流感病毒(AIV H9N2株)的杀灭效果及稳定性。将该消毒剂1∶500稀释度的溶液在20℃条件下与等量2×105EID50AIV(H9N2株)病毒液作用,10 m in内可完全杀灭AIV(H9N2株)病毒;该消毒剂1∶500稀释度的溶液... 研究了一种复方戊二醛消毒剂对鸡禽流感病毒(AIV H9N2株)的杀灭效果及稳定性。将该消毒剂1∶500稀释度的溶液在20℃条件下与等量2×105EID50AIV(H9N2株)病毒液作用,10 m in内可完全杀灭AIV(H9N2株)病毒;该消毒剂1∶500稀释度的溶液在室温下放置2 d,仍能保持原有的消毒效果。 展开更多
关键词 复方戊二醛消毒剂 禽流感病毒 消毒效力 稳定性
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鸡减蛋性病毒病四联油乳剂灭活疫苗的研制与应用 被引量:1
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作者 丁伯良 鄢明华 +5 位作者 王英珍 李秀丽 张健 侯庆云 王东 张莉 《中国兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第6期631-633,共3页
选用鸡新城疫病毒Lasota株、鸡传染性支气管炎M41株、鸡减蛋综合征病毒EDSV76-AV127株及禽流感H9N2亚型Ss株等4株病毒作为制苗用毒种,采用中空纤维超滤浓缩技术对病毒抗原进行浓缩,制成四联油乳剂灭活疫苗。并对其进行了物理性状、无菌... 选用鸡新城疫病毒Lasota株、鸡传染性支气管炎M41株、鸡减蛋综合征病毒EDSV76-AV127株及禽流感H9N2亚型Ss株等4株病毒作为制苗用毒种,采用中空纤维超滤浓缩技术对病毒抗原进行浓缩,制成四联油乳剂灭活疫苗。并对其进行了物理性状、无菌检验、安全性、免疫和效力检验及疫苗保存期试验等方面的检验,证明所制备疫苗完全符合质量标准。本疫苗在天津蓟县、宝坻、西青等地进行田间应用试验,共免疫蛋鸡2.8万羽份,结果表明,疫苗免疫保护率达95%。 展开更多
关键词 新城疫 传染性支气管炎 减蛋综合征 h9n2亚型禽流感 四联灭活疫苗
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Immunomodulatory Effect of Purified Exotoxins of <i>Staphylococcus aureus</i>in Association with Bird Flu Virus Vaccine in Broilers
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作者 Muhammad Usman Ghani Muhammad Danish Mehmood +4 位作者 Amna Javed Farheen Ansari Huma Anwar Sana Noreen Sajjad Hussain Shah 《American Journal of Molecular Biology》 2019年第1期1-15,共15页
Immunization is the most effective method still used against infectious agents. Although not always, vaccines ineffectiveness is reported enormously against many of the pathogens throughout the world in poultry, parti... Immunization is the most effective method still used against infectious agents. Although not always, vaccines ineffectiveness is reported enormously against many of the pathogens throughout the world in poultry, particularly in case of killed or sub unit vaccine. The current project is, therefore, carried out as a preliminary study on broiler chickens to investigate the modulation of immune system against avian influenza virus in association with purified Staphylococcus aureus toxoid. After isolation of Gram positive cocci bacteria on mannitol salt agar from raw milk, yogurt and chicken meat were subsequently biochemically characterized by using rapid diagnostic kit. Pure culture of S. aureus was inoculated into digitally controlled bio-fermentor containing mannitol salt broth for production of toxins. Enormous production of bacteria was passed through sequence of filtration system based on 0.45 μm followed by 0.22 μm size. The centrifugation of the filtrate was made at 10,000 rpm for 60 minutes at 5℃ followed by 56,100 rpm for 20 minutes and clear supernatant containing Staphylococcus enterotoxin (SEs) was obtained. Bradford estimation of proteins further provided 305 μg/ml of SEs toxoid. Four types of oil adjuvant avian influenza type H9N2 virus vaccines (without toxoid, 91.5 μg/0.3ml, 22.8 μg/0.3ml and 11.43 μg/0.3ml) were injected into healthy AI H9N2 susceptible broilers and anti-H9N2 HI antibody titers were measured in terms of hemagglutination inhibition test. It was observed that on the 8th day, post vaccination cumulative mean anti AIH9 HI antibody titer of G-1, G-2, G-3, G-4 and G-5 was 3.13 ± 0.406, 5.13 ± 0.246, 3.96 ± 0.159, 3.25 ± 0.237 and 0.78 ± 0.467 respectively. It was found that all the vaccines induced protective titers 18 days’ post vaccination, but vaccine containing 91.5 μg/dose of SEs toxoid showed significantly higher (P < 0.05) immune response as compared to vaccine containing 22.8 μg/dose and 11.43 μg/dose, whereas, vaccines containing SEs toxoid showed better (P < 0. 展开更多
关键词 aiv h9n2 STAPhYLOCOCCUS AUREUS TOXOID Super Antigen IMMUnOMODULATIOn hI Assay
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H_9N_2亚型AIV HA基因的原核表达及间接ELISA方法的建立 被引量:18
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作者 郑其升 刘华雷 +5 位作者 张晓勇 周斌 曹瑞兵 任雪枫 李鹏 陈溥言 《中国病毒学》 CSCD 2005年第3期293-297,共5页
根据GenBank公开发表的禽流感病毒(AvianInfluenzaVirus,AIV)H9N2亚型血凝素基因(HA)序列设计引物,用PCR方法从重组质粒pUCHA中扩增H9N2亚型禽流感病毒去除信号肽的血凝素基因,将该片段定向插入到原核表达载体pET32a(+)中,构建原核表达... 根据GenBank公开发表的禽流感病毒(AvianInfluenzaVirus,AIV)H9N2亚型血凝素基因(HA)序列设计引物,用PCR方法从重组质粒pUCHA中扩增H9N2亚型禽流感病毒去除信号肽的血凝素基因,将该片段定向插入到原核表达载体pET32a(+)中,构建原核表达载体pETHA。阳性质粒转化宿主菌BL21(DE3),经IPTG诱导,HA基因获得表达,经定位分析,目的蛋白以包涵体的形式存在于大肠杆菌中。通过改变IPTG的浓度和诱导时间,确定了表达HA基因的最佳诱导条件:IPTG终浓度为0.7mmol/L,诱导时间为3h。Westernblot分析表明,重组蛋白能与H9N2亚型AIV阳性血清发生特异性反应。以纯化后表达产物作为诊断抗原包被酶标板建立了检测H9亚型AIV抗体的间接ELISA方法。结果表明,抗原的最佳包被浓度为25μg/mL,血清的最佳稀释度为1∶80,阳性标准初步定为:OD待检血清>0.5且OD标准阳性血清>1.0;OD标准阴性血清<0.1。 展开更多
关键词 禽流感病毒h9n2亚型、血凝素基因、原核表达、间接ELISA
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