耐异烟肼结核分枝杆菌临床分离株耐药相关基因突变研究 被引量：44

1

作者 陈曦 马玙 +3 位作者 金奇 姜广路 李传友 王庆 《中华结核和呼吸杂志》 CAS CSCD 北大核心 2005年第4期250-253,共4页

目的阐明结核分枝杆菌耐异烟肼临床分离株katG、inhA、ahpC、kasA及oxyR基因突变特点。方法对144株结核分枝杆菌临床分离株(耐异烟肼菌株101株;异烟肼敏感株43株)的katG、inhA、kasA、ahpC及oxyR基因进行DNA片断扩增及DNA序列分析,与Gen... 目的阐明结核分枝杆菌耐异烟肼临床分离株katG、inhA、ahpC、kasA及oxyR基因突变特点。方法对144株结核分枝杆菌临床分离株(耐异烟肼菌株101株;异烟肼敏感株43株)的katG、inhA、kasA、ahpC及oxyR基因进行DNA片断扩增及DNA序列分析,与GeneBank中结核分枝杆菌标准序列进行比较。结果(1)耐异烟肼菌株中未发现katG完全缺失,81株耐药株(80.2%)katG存在点突变、缺失或插入,其中16个突变位点未见报道;39株(38.6%)耐药株第315位点突变,低耐药菌株(1μg/ml)第315位点突变率显著高于高耐药菌株(10μg/ml;χ2=9.31,P<0.05);58株(57.4%)耐药株第463位点突变。23株(53.3%)敏感株第463位点突变。(2)5株(4.9%)耐药株inhA发生突变。敏感株inhA无突变。(3)3株(2.9%)耐药株ahpC发生突变。敏感株ahpC无突变。(4)17株(16.8%)耐药株kasA发生突变。敏感株中3株菌株Gly312Ser突变。(5)在全部菌株中未发现oxyR基因突变。(6)综合本项研究中各基因的突变情况,共有91株耐异烟肼菌株发生与异烟肼耐药相关的突变。结论本项研究进一步证实了结核分枝杆菌耐异烟肼与katG、inhA、ahpC及kasA基因突变之间的关系,并且提示还有其他机制参与异烟肼耐药。 展开更多

关键词 临床分离株 耐异烟肼结核分枝杆菌 耐药相关基因 突变研究 DNA序列分析 INHA ahpc katG 基因突变 oxyR基因 位点突变 耐药菌株 耐药株 敏感株 DNA片断 突变位点 未发现 突变率 缺失

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静电增强脱除PM2.5研究进展 被引量：28

2

作者 黄斌 姚强 李水清 《电站系统工程》 北大核心 2003年第6期44-46,共3页

电站是PM2.5主要的发生源。随着人们对PM2.5对健康危害的认识,工业脱除PM2.5已成为迫切需要发展的技术。通过静电与其它传统除尘器结合的“混合除尘器”已成为现在工业除尘发展的一个重要方向。此种技术能够大幅度提高脱除PM2.5的效率,... 电站是PM2.5主要的发生源。随着人们对PM2.5对健康危害的认识,工业脱除PM2.5已成为迫切需要发展的技术。通过静电与其它传统除尘器结合的“混合除尘器”已成为现在工业除尘发展的一个重要方向。此种技术能够大幅度提高脱除PM2.5的效率,而且易于实现对现有电站除尘器的改造和新建。综述了国内外的发展状况,在此基础上提出适应我国脱除PM2.5技术发展的建议。 展开更多

关键词 电站 静电除尘器 除尘设备 除尘效率 旋风分离器

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腾冲嗜热厌氧杆菌ahpC编码基因的克隆表达及生物信息学分析 被引量：2

3

作者 郑航辉 高昇 +4 位作者 杨宇泽 吴润 万学瑞 王川 刘磊 《生物学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第5期36-40,共5页

为了研究腾冲嗜热厌氧杆菌( Thermoanaerobacter tengcongensis )AhpC在嗜热中的作用,应用PCR技术扩增腾冲嗜热厌氧菌 tte0270 基因(即 ahpC 编码基因),构建了原核表达载体pET-28a:: ahpC 并在大肠杆菌BL21(DE3)表达 AhpC ,并通过荧光定... 为了研究腾冲嗜热厌氧杆菌( Thermoanaerobacter tengcongensis )AhpC在嗜热中的作用,应用PCR技术扩增腾冲嗜热厌氧菌 tte0270 基因(即 ahpC 编码基因),构建了原核表达载体pET-28a:: ahpC 并在大肠杆菌BL21(DE3)表达 AhpC ,并通过荧光定量PCR分析 ahpC 在50 ℃、60 ℃、75 ℃和80 ℃的mRNA表达量;同时利用生物信息学软件分析AhpC在腾冲嗜热厌氧杆菌、单核细胞增生李斯特菌和大肠杆菌中编码氨基酸的基本理化性质和蛋白质三级结构。在BL21(DE3)中腾冲嗜热厌氧杆菌AhpC蛋白能高效的表达,以可溶性形式存在,分子质量为26 ku;荧光定量PCR结果表明腾冲嗜热厌氧杆菌 ahpC mRNA表达量随温度升高而提高;生物信息学分析得出AhpC含有220个氨基酸,为酸性亲水性蛋白,等电点为6.126,蛋白质有29.1%的氨基酸参与α-螺旋结构的形成。嗜热菌AhpC中Glu(E)和Lys(K)的含量高于常温细菌。腾冲嗜热厌氧杆菌AhpC的三级结构明显比大肠杆菌和单核细胞增生李斯特菌的更紧凑。结果对腾冲嗜热菌嗜热机制研究具有一定的启发。 展开更多

关键词 腾冲嗜热厌氧菌 ahpc 热适应

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空肠弯曲菌AhpC蛋白的克隆表达及抗原性分析 被引量：1

4

作者 曹芳芳 孟凡亮 +2 位作者 乔博 张茂俊 张建中 《中国人兽共患病学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第10期909-913,共5页

目的构建空肠弯曲菌烷基过氧化氢还原酶(ahpC)基因的原核表达系统,克隆表达AhpC蛋白,用Western blot以及ELISA方法检测表达蛋白的抗原性,为筛选空肠弯曲菌感染后特异性抗体检测试剂的制备奠定基础。方法用PCR方法从中国分离菌株ICDCCJ07... 目的构建空肠弯曲菌烷基过氧化氢还原酶(ahpC)基因的原核表达系统,克隆表达AhpC蛋白,用Western blot以及ELISA方法检测表达蛋白的抗原性,为筛选空肠弯曲菌感染后特异性抗体检测试剂的制备奠定基础。方法用PCR方法从中国分离菌株ICDCCJ07001的染色体DNA中扩增出ahpC基因,将目的基因插入表达载体pGEX-4T-1后转化入大肠杆菌E.coliBL21(DE3),IPTG诱导重组质粒pGEX-ahpC的表达。SDS-PAGE分析表达产物,采用GST标签亲和层析柱纯化表达蛋白。应用兔免疫血清、临床感染者血清以及健康无感染者血清,利用Western blot以及ELISA的方法分析AhpC蛋白的抗原性并初步评价其在ELISA检测方法中的应用。结果 PCR扩增及双酶切鉴定证实重组质粒构建成功。重组表达蛋白经飞行质谱鉴定为空肠弯曲菌AhpC蛋白,Western blot及ELISA检测结果显示AhpC具有特异抗原性。结论成功构建了ahpC重组表达载体pGEX-4T-1/ahpC,并在大肠杆菌中高效表达。空肠弯曲菌AhpC蛋白具有抗原性,可以作为空肠弯曲菌感染后血清抗体检测的特异抗原。 展开更多

关键词 空肠弯曲菌 克隆表达 ahpc 抗原性

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变形链球菌gcp基因敲除菌株表达谱基因芯片 被引量：1

5

作者 谢苗苗 胡晓聪 +1 位作者 吴补领 闫文娟 《中国组织工程研究》 CAS CSCD 2013年第33期5988-5994,共7页

背景:前期研究中经证实变形链球菌内部存在单磷酸鸟苷环二聚体信号通路,构建了变形链球菌 gcp 基因敲除菌株。目的:比较变形链球菌野生菌种和 gcp 基因突变菌株基因表达的差异情况,筛选与生物膜相关的基因,进入后续研究。方法:提取两种... 背景:前期研究中经证实变形链球菌内部存在单磷酸鸟苷环二聚体信号通路,构建了变形链球菌 gcp 基因敲除菌株。目的:比较变形链球菌野生菌种和 gcp 基因突变菌株基因表达的差异情况,筛选与生物膜相关的基因,进入后续研究。方法:提取两种细菌的总 RNA,反转录后分别用 cy3 和 cy5 染色。与基因芯片杂交后,扫描结果,进行数据分析,获取差异基因信息,对筛选的基因进行 Real-Time PCR 验证。结果与结论:差异基因主要与糖代谢、生物膜形成有关,选择了 2 个基因进行验证,PCR 结果与芯片结果相符合。变形链球菌 gcp 基因敲除后,突变菌株 ahpC 基因表达上调,磷酸转移酶系统基因表达下调,说明这 2个基因与 c-di-GMP 信号通路的下游途径相关。 展开更多

关键词 组织构建 组织构建细胞学实验 变形链球菌 基因芯片 C-DI-GMP 信号通路 ahpc 磷酸转移酶系统 国家自然科学基金

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植物病原黄单胞菌毒性相关基因对内源过氧化氢的上游调控作用研究 被引量：1

6

作者 庞新跃 李欣 +3 位作者 王娜 刘严 郭菡 李红玉 《植物病理学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第4期379-384,共6页

以植物病原细菌黄单胞菌的avrXa7基因和ahpC基因的2个突变体及其野生型菌株为研究对象,探讨植物病原细菌内源过氧化氢水平与菌株毒性的联系。AR/HRP法分析病原菌的过氧化氢清除力,组织化学法对细胞内过氧化氢进行定量和定位分析。结果表... 以植物病原细菌黄单胞菌的avrXa7基因和ahpC基因的2个突变体及其野生型菌株为研究对象,探讨植物病原细菌内源过氧化氢水平与菌株毒性的联系。AR/HRP法分析病原菌的过氧化氢清除力,组织化学法对细胞内过氧化氢进行定量和定位分析。结果表明,avrXa7基因的突变诱导病原菌毒性的显著降低,并引起病原菌内源过氧化氢积累水平显著下降;ahpC基因的突变诱导病原菌内源过氧化氢水平显著降低,但未能引起病原菌毒性产生显著的变化。研究结果说明,在植物病原细菌黄单胞病菌的致病机制中,病原菌内源过氧化氢的积累水平并不能直接决定菌株的毒性,而是处在avrXa7基因的下游,受到avrXa7或者更多毒性相关基因的调控,参与病原菌的致病过程。 展开更多

关键词 毒性 avrXa7 ahpc 过氧化氢 植物病原细菌

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高原红细胞增多症患者的血氧饱和度的观察 被引量：1

7

作者 裴蕾 《西南国防医药》 CAS 2000年第2期71-75,共5页

目的:观察RBC剧增而引起的高粘血症对血氧饱和度的影响。方法:对6例汉族高原红细胞增多症、5例藏族高原红细胞增多症和5例高原正常人的股动脉和肘正中静脉的血样隔绝空气进行血气分析,然后又把同一血样在体外37℃的恒温条件下,进行体外... 目的:观察RBC剧增而引起的高粘血症对血氧饱和度的影响。方法:对6例汉族高原红细胞增多症、5例藏族高原红细胞增多症和5例高原正常人的股动脉和肘正中静脉的血样隔绝空气进行血气分析,然后又把同一血样在体外37℃的恒温条件下,进行体外通氧15min后再进行血气分析。将两次结果进行对比研究。结果:受试者正常对照组动脉血氧饱和度为86.50％,经体外通氧后,上升到99.87％。静脉则由33.02％上升到96.55%,具有统计学意义。而病人组通氧后,虽然血氧饱和也明显升高,但未达到正常对照组的水平。其动脉血氧饱和度的上升速率是病人组高于对照组,而静脉则是病人组低于对照组。三组静脉血氧饱和度上升速度又明显高于动脉。动、静脉血氧分压差是病人组低于对照组,都具有统计学意义。结论:正常对照组和高原红细胞增多症患者动、静脉血体外通氧后血氧饱和度都超过体内动静脉血氧饱和度,是由于高原低氧环境所致。病人组的静脉血氧饱和度上升速率低于正常组,这除了与2,3磷酸甘油酯(2,3DPG)含量有关外,另一重要因素是血液粘度剧增影响了血红蛋白与氧结合或释放,并参与红细胞增多症的发病机理。 展开更多

关键词 红细胞增多症 ahpc 血液粘度 血氧饱和度

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ahpC基因突变与结核分支杆菌耐异烟肼的研究 被引量：11

8

作者 吴雪琼 张俊仙 +4 位作者 胡忠义 庄玉辉 靳安佳 张晓刚 李国利 《中华结核和呼吸杂志》 CAS CSCD 北大核心 1998年第12期727-729,共3页

目的了解我国结核分支杆菌耐异烟肼（ＩＮＨ）分离株ａｈｐＣ编码基因及其启动子突变情况，研究其与ＩＮＨ耐药关系。方法通过聚合酶链反应（ＰＣＲ）单链构象多态性（ＳＳＣＰ）方法分析６２株结核分支杆菌临床分离株ａｈｐＣ及其启... 目的了解我国结核分支杆菌耐异烟肼（ＩＮＨ）分离株ａｈｐＣ编码基因及其启动子突变情况，研究其与ＩＮＨ耐药关系。方法通过聚合酶链反应（ＰＣＲ）单链构象多态性（ＳＳＣＰ）方法分析６２株结核分支杆菌临床分离株ａｈｐＣ及其启动子基因。以Ｈ３７ＲＶ标准株为对照。结果３２株结核分支杆菌药物敏感株ａｈｐＣ及其启动子基因ＳＳＣＰ均泳动正常；３０株耐ＩＮＨ分离株ａｈｐＣ编码基因ＳＳＣＰ也未见异常；１２株高度耐ＩＮＨ分离株中，５株ａｈｐＣ启动子ＳＳＣＰ泳动异常；１８株低度耐ＩＮＨ分离株的ａｈｐＣ启动子泳动正常。结论结核分支杆菌ａｈｐＣ编码基因与耐ＩＮＨ无关；ａｈｐＣ启动子突变是结核分支杆菌ｋａｔＧ改变、过氧化氢酶缺乏的代偿性变化，也许能作为结核分支杆菌高度耐ＩＮＨ的间接指标。 展开更多

关键词 结核分支杆菌 抗药性 ahpc基因 异烟肼 基因突变

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基因芯片技术检测结核分枝杆菌对利福平和异烟肼耐药水平和katG、inhA、oxyR-ahpC以及rpoB基因突变位置的关联性分析 被引量：10

9

作者 黄海滨 张海晴 +7 位作者 刘成永 刘加彬 魏素梅 成松 贾彤 张礼茂 郭岩 张雪迪 《北京医学》 CAS 2016年第11期1247-1249,共3页

结核分枝杆菌（mycobacterium tuberculosis,MTB）是一种能够引起结核病的病原菌,除了能够引起常见的肺结核外,还能够侵犯全身多个器官引起相应结核病。肺结核病是由结核分枝杆菌引起的呼吸系统传染病,人感染结核分枝杆菌后是否发病与... 结核分枝杆菌（mycobacterium tuberculosis,MTB）是一种能够引起结核病的病原菌,除了能够引起常见的肺结核外,还能够侵犯全身多个器官引起相应结核病。肺结核病是由结核分枝杆菌引起的呼吸系统传染病,人感染结核分枝杆菌后是否发病与免疫功能密切相关。目前结核病的诊断和治疗面临着巨大挑战,尤其是难治性结核病及耐药结核病的诊断及有效治疗问题。 展开更多

关键词 INHA KATG oxyR-ahpc rpoB基因 耐药水平 基因突变 关联性分析 tuberculosis 基因芯片技术 基因芯片法

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PCR-SSCP技术直接快速检测痰标本中结核分支杆菌rpoB,katG,ahpC基因突变的研究 被引量：2

10

作者 董德琼 杨渝浩 +1 位作者 彭理年 肖瑜 《贵州医药》 CAS 2001年第11期975-977,共3页

目的应用PCR -SSCP技术直接快速检测痰标本中结核分支杆菌rpoB ,katG及ahpC基因突变 ,评价此方法用于结核分支杆菌利福平 (RFP)及异烟肼 (INH)耐药性试验的意义。方法以结核分支杆菌H3 7Rv为对照 ,30例耐RFP(单耐或多耐 )、2 1例耐INH(... 目的应用PCR -SSCP技术直接快速检测痰标本中结核分支杆菌rpoB ,katG及ahpC基因突变 ,评价此方法用于结核分支杆菌利福平 (RFP)及异烟肼 (INH)耐药性试验的意义。方法以结核分支杆菌H3 7Rv为对照 ,30例耐RFP(单耐或多耐 )、2 1例耐INH(单耐和多耐 )的结核分支杆菌临床分离株及 10例敏感菌株 ;39例菌阳肺结核患者及 30例非结核性肺部疾病患者痰标本 ,采用PCR SS CP技术检测痰标本和菌株中的结核杆菌rpoB ,katG ,ahpC基因突变 ,并与药敏试验对照。结果PCR -SSCP检测痰标本中结核分支杆菌rpoB ,katG及ahpC基因突变的阳性率分别为 79% (31/ 39)、46 % (18/39)及 5 % (2 / 39)。结论PCR -SSCP可望成为直接检测临床痰标本中结核分支杆菌耐利福平及耐异烟肼的快速方法。 展开更多

关键词 结核分支杆菌 RPOB基因 takG基因 ahpc基因 聚合酶链反应 PCR-SSCP技术 结核病 检测

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问号钩端螺旋体过氧化物还原酶AhpC在氧化应激中的功能研究 被引量：2

11

作者 罗依惠 吴亦斐 Jean-Pierre Munyampundu 《中华微生物学和免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2018年第3期193-198,共6页

目的确定问号钩端螺旋体（简称钩体）赖株AhpC蛋白的过氧化物还原酶活性及其在问号钩体感染宿主细胞过程中是否具有抵抗氧化应激的功能。 方法构建问号钩体黄疸出血群赖型赖株ahpC基因原核表达系统。Ni-NTA亲和层析法提纯目的重组蛋白r... 目的确定问号钩端螺旋体（简称钩体）赖株AhpC蛋白的过氧化物还原酶活性及其在问号钩体感染宿主细胞过程中是否具有抵抗氧化应激的功能。 方法构建问号钩体黄疸出血群赖型赖株ahpC基因原核表达系统。Ni-NTA亲和层析法提纯目的重组蛋白rAhpC，检测其酶学活性和保护DNA不被氧化的功能。用定点突变方法验证AhpC的过氧化半胱氨酸和还原性半胱氨酸。经不同浓度的Conoidin A抑制问号钩体过氧化物还原酶活性后，比较抑制前后构体内的活性氧自由基（reactive oxygen species，ROS）水平和钩体存活率的变化。结果所构建的原核表达系统能有效表达rAhpC。rAhpC具有过氧化物还原酶的活性，其催化反应依赖于硫氧还蛋白和硫氧还蛋白还原酶系统。AhpC分子中含有的两个半胱氨酸对维持酶的活性起着至关重要的作用，其中Cys47是AhpC的过氧化半胱氨酸，而Cys167是还原性半胱氨酸。AhpC能够保护质粒DNA免遭过氧化氢的氧化损伤。经不同浓度的Conoidin A抑制问号钩体的过氧化物还原酶的活性后，钩体在巨噬细胞内的存活率明显下降，并且呈现出剂量依赖的效应，表明钩体存活率的降低与钩体的过氧化物还原酶活性丧失从而无法有效降解构体内活性氧水平有着密切的关系。结论问号钩体的AhpC具有过氧化物还原酶的活性，能抵抗宿主细胞引起的氧化损伤，与钩体在巨噬细胞内的存活有关。 展开更多

关键词 问号钩端螺旋体 ahpc基因 氧化应激 存活

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重组幽门螺杆菌AhpC基因的克隆表达及其初步纯化 被引量：2

12

作者 张卫军 邹全明 +2 位作者 毛旭虎 罗萍 解庆华 《重庆医学》 CAS CSCD 2006年第11期1012-1014,1018,共4页

目的克隆表达幽门螺杆菌(helicobacter pylori)AhpC基因,为筛选预防或治疗幽门螺杆菌的疫苗保护性抗原奠定基础。方法用PCR方法从临床分离株9806的染色体DNA中扩增出AhpC基因片段,将目的基因插入表达载体pET-11c中,重组载体pET-AhpC经DN... 目的克隆表达幽门螺杆菌(helicobacter pylori)AhpC基因,为筛选预防或治疗幽门螺杆菌的疫苗保护性抗原奠定基础。方法用PCR方法从临床分离株9806的染色体DNA中扩增出AhpC基因片段,将目的基因插入表达载体pET-11c中,重组载体pET-AhpC经DNA测序鉴定后,将重组质粒转化大肠杆菌E.coli BL21(DE3),IPTG诱导表达。采用阴离子交换层析纯化蛋白,并用SDS-PAGE和Western blot鉴定。结果PCR扩增的AhpC基因长度为597bp,经酶切和测序分析,插入到载体的基因片段与GenBank公布的序列相似性达98%,SDS-PAGE显示,经IPTG诱导目的蛋白占总蛋白的28.7%,经纯化后,蛋白纯度达70%以上。Western blot检测该蛋白与兔抗Hp的多克隆抗血清发生结合反应。结论成功构建了AhpC表达载体pET-AhpC,并在大肠杆菌中高效表达。 展开更多

关键词 幽门螺杆菌 ahpc基因 克隆

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水稻白叶枯病菌ahpC基因转录单元分析和原核表达 被引量：2

13

作者 王艳丽 吴茂森 +2 位作者 田芳 陈华民 何晨阳 《生物技术通报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第12期114-119,共6页

从水稻白叶枯病菌（Xanthomonas oryzae pv．Oryzae，Xoo）菌株PX099“中克隆了H202降解基因ahpC，发现其编码的烷基过氧化氢酶AhpC在所测定的不同种病原细菌中的蛋白序列高度保守；采用RT—PCR方法分析了基因的转录结构特征，发现aheC... 从水稻白叶枯病菌（Xanthomonas oryzae pv．Oryzae，Xoo）菌株PX099“中克隆了H202降解基因ahpC，发现其编码的烷基过氧化氢酶AhpC在所测定的不同种病原细菌中的蛋白序列高度保守；采用RT—PCR方法分析了基因的转录结构特征，发现aheC基因与酶电子供体基因ahpF组成了同一个转录单元；通过对ahpCp—lacZ活性检测，发现该启动子活性显著地受转录调控因子OxyR的正调控。此外，利用表达载体pET-28a（＋）对ahpC基因进行了原核表达，经诱导后获得了可溶性的靶蛋白，可用于后续的生物学功能的分析。 展开更多

关键词 水稻白叶枯病菌 ahpc基因 转录调控 原核表达

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水稻与油菜黄单胞菌菜豆致病变种非寄主互作体系中病原细菌过氧化氢的作用 被引量：2

14

作者 李欣 庞新跃 +5 位作者 朱文学 李鑫玲 刘严 郭菡 李红玉 赵春燕 《中国农业科学》 CAS CSCD 北大核心 2011年第5期939-945,共7页

【目的】探讨互作体系中病原菌来源过氧化氢的作用。【方法】采用组织化学法通过透射电子显微镜技术观察水稻与油菜黄单胞菌菜豆致病变种互作体系中的过氧化氢积累的定位。【结果】突变体菌株细胞中烷基过氧化物还原酶亚基C的缺失导致... 【目的】探讨互作体系中病原菌来源过氧化氢的作用。【方法】采用组织化学法通过透射电子显微镜技术观察水稻与油菜黄单胞菌菜豆致病变种互作体系中的过氧化氢积累的定位。【结果】突变体菌株细胞中烷基过氧化物还原酶亚基C的缺失导致胞内其余过氧化氢清除酶活性的补偿性显著上升,使胞内内源过氧化氢积累水平显著下降,并引起病原菌与水稻互作体系中的过氧化氢积累水平发生显著变化。【结论】病原细菌很可能是互作体系中过氧化氢的一个重要来源。病原细菌产生的过氧化氢很可能在非寄主互作中造成细菌周围植物细胞的损伤,对植物细胞具有潜在的毒性。 展开更多

关键词 烷基过氧化物还原酶亚基C(ahpc) 过氧化氢 非寄主互作 油菜黄单胞菌菜豆致病变种

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吉林省结核分枝杆菌oxyR-ahpC基因耐药相关性研究 被引量：1

15

作者 张立夫 张炜煜 +3 位作者 杨修军 王慧 李可维 袁明月 《中国卫生检验杂志》 CAS 2019年第7期769-771,共3页

目的阐明吉林省结核分枝杆菌耐异烟肼的临床分离株中oxyR-ahpC基因间隔区突变特点。方法对580株结核分枝杆菌临床分离株(耐异烟肼菌株500株;异烟肼敏感株80株)的DNA片断扩增及DNA序列分析,并将测序所得结果与标准菌株的DNA序列进行对比... 目的阐明吉林省结核分枝杆菌耐异烟肼的临床分离株中oxyR-ahpC基因间隔区突变特点。方法对580株结核分枝杆菌临床分离株(耐异烟肼菌株500株;异烟肼敏感株80株)的DNA片断扩增及DNA序列分析,并将测序所得结果与标准菌株的DNA序列进行对比分析。结果 580株结核分枝杆菌临床菌株中,80株敏感株oxyR-ahpC间隔区未发生突变;在500株异烟肼耐药的临床分离株中有200株菌株中存在oxyR-ahpC间隔区突变,其中有29株在(-17)位点发生突变,12株在(-27)位点发生突变,134株在11位点发生突变。结论吉林省耐多药结核分枝杆菌异烟肼耐药基因中oxyR-ahpC间隔区突变具有明显的区域特异性,建议在本省的结核病耐多药快速检测项目中增加对oxyR-ahpC间隔区突变的检测,以便提高耐多药患者的检出率。 展开更多

关键词 结核分枝杆菌 耐多药 异烟肼 oxyR-ahpc

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幽门螺杆菌ahpC基因的克隆与原核表达 被引量：1

16

作者 李艳青 段广才 +4 位作者 宋春花 张建光 王淑玲 张卫东 郗园林 《西安交通大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2010年第1期47-50,共4页

目的构建幽门螺杆菌(Helicobacter pylori,Hp)ahpC基因的原核表达系统,表达并纯化Ahp蛋白。方法用PCR方法从中国分离株MEL-Hp27的染色体DNA中扩增出ahpC基因片段,将目的基因插入表达载体pET-30a中,构建重组质粒pET30a-ahpC。重组质粒经... 目的构建幽门螺杆菌(Helicobacter pylori,Hp)ahpC基因的原核表达系统,表达并纯化Ahp蛋白。方法用PCR方法从中国分离株MEL-Hp27的染色体DNA中扩增出ahpC基因片段,将目的基因插入表达载体pET-30a中,构建重组质粒pET30a-ahpC。重组质粒经DNA测序鉴定后转化大肠杆菌E.coli BL21(DE3),IPTG诱导表达。采用镍离子亲和层析纯化蛋白,并用SDS-PAGE鉴定。结果PCR扩增的ahpC基因长度为594 bp,经酶切和测序分析,插入到载体的基因与GenBank公布的序列相似性达99%;SDS-PAGE显示,经IPTG诱导出分子质量为23 ku的目的蛋白,且产量较高。结论成功构建了ahpC表达载体pET30a-ahpC,并在大肠杆菌中高效表达。 展开更多

关键词 幽门螺杆菌 ahpc基因 克隆 基因表达

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肺痨康与耐异烟肼结核ahpC基因突变关系的研究 被引量：1

17

作者 陈欢 叶品良 +3 位作者 张传涛 卢润生 卢振方 王燕平 《中国医学创新》 CAS 2016年第8期1-4,共4页

目的:探讨肺痨康对耐异烟肼结核ahpC基因突变的影响。方法:采用全基因重测序的方法,对药物干预后的耐异烟肼结核模型小鼠肺组织结核杆菌基因组DNA进行重测序。以标准菌株(H37RV)为参考序列,筛选出与ahpC基因相关的突变位点,进行对比分... 目的:探讨肺痨康对耐异烟肼结核ahpC基因突变的影响。方法:采用全基因重测序的方法,对药物干预后的耐异烟肼结核模型小鼠肺组织结核杆菌基因组DNA进行重测序。以标准菌株(H37RV)为参考序列,筛选出与ahpC基因相关的突变位点,进行对比分析。结果:7个碱基突变位点的ahpC基因对应的密码子和氨基酸均未发生改变。肺痨康组和肺痨康联合异烟肼组的突变位点2729621,对应的密码子Gcc→Tcc,氨基酸由丙氨酸变为丝氨酸。结论:肺痨康对ahpC基因突变无修复作用,突变位点2729621,可能是肺痨康干预过的小鼠与未使用肺痨康干预过的小鼠之间的个体差异相关的单核苷酸多态性(SNP)位点。肺痨康抗结核的作用机制,需要参考与异烟肼耐药相关的其它基因的文献资料做进一步研究讨论。 展开更多

关键词 肺痨康 耐异烟肼结核 ahpc基因突变

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