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Isolation of S-adenosylmethionine Synthetase Gene from Suaeda salsa and Its Differential Expression Under NaCl Stress 被引量:12
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作者 马秀灵 王增兰 +2 位作者 戚元成 赵彦修 张慧 《Acta Botanica Sinica》 CSCD 2003年第11期1359-1365,共7页
AdoMet plays numerous roles of being the major methyl-group donor in trans-methylation reactions. To gain insight into the possible functions of the AdoMet protein of Suaeda salsa L. in response to salt stress, S aden... AdoMet plays numerous roles of being the major methyl-group donor in trans-methylation reactions. To gain insight into the possible functions of the AdoMet protein of Suaeda salsa L. in response to salt stress, S adenosylmethionine synthetase gene (SAMS2) was analyzed. We isolated SAMS2 cDNA clone (AF321001) from a lambda -Zap cDNA library constructed from the halophyte S. salsa Pall aerial tissue treated with 400 mmol/L NaCl. SsSAMS2 was found to encode a S-adenolyl-L-methionine synthetase enzyme (AdoMet synthetase). The fragment was 1 531 bp with an open reading frame of 395 amino acids, the calculated molecular weight was about 43 kD. SsSAMS2 showed the highest homology to SAMS2 gene of Catharanthus roseus G. Don., with 93% identity in deduced amino acid sequence. Southern blotting analysis showed that SsSAMS2 might be a two-copy gene in S. salsa genome. Northern blot indicated that the cDNA was up-regulated by salt and other stresses. Enzyme activity assay indicated that the activity of SAMS2 increased under NaCl stress. 展开更多
关键词 adomet Suaeda salsa salt stress SAMS gene SEQUENCE expression
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酵母生物合成S-腺苷-L-蛋氨酸的动力学研究 被引量:1
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作者 刘惠 林建平 +1 位作者 吴坚平 岑沛霖 《高校化学工程学报》 EI CAS CSCD 北大核心 2004年第2期168-173,共6页
研究了酿酒酵母在葡萄糖和L-蛋氨酸存在时生物合成S-腺苷-L-蛋氨酸(SAM)的规律。在高溶氧(DO>40%)条件下,SAM产率及L-蛋氨酸转化率分别达到了82.2 mgg-1和37.4%。将代谢溢流模型推广应用到包括酵母生长和加前体生物转化过程的动力学... 研究了酿酒酵母在葡萄糖和L-蛋氨酸存在时生物合成S-腺苷-L-蛋氨酸(SAM)的规律。在高溶氧(DO>40%)条件下,SAM产率及L-蛋氨酸转化率分别达到了82.2 mgg-1和37.4%。将代谢溢流模型推广应用到包括酵母生长和加前体生物转化过程的动力学研究,结果表明,该模型能较好地描述实验数据。 展开更多
关键词 S-腺苷-L-蛋氨酸(SAM adomet SAM-e) 酿酒酵母 代谢溢流 动力学
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S-adenosyl-L-methionine, trehalose and oleanolic acid in few plants
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作者 Dipankar Malakar Paramita Chaudhuri +1 位作者 Trina Dutta Anil K Ghosh 《Health》 2010年第8期968-972,共5页
S-Adenosyl-L-Methionine (AdoMet), S-Adenosyl- L-Homocysteine (AdoHcy), adenosine, trehalose and oleanolic acid were measured in six medicinal herbs and three spices. The findings showed that AdoMet content was forty s... S-Adenosyl-L-Methionine (AdoMet), S-Adenosyl- L-Homocysteine (AdoHcy), adenosine, trehalose and oleanolic acid were measured in six medicinal herbs and three spices. The findings showed that AdoMet content was forty six fold higher in the leaves of Catharanthus roseus as compared with average AdoMet content of rest of the plants. In comparison to other plants, Withania somnifera had very high AdoHcy: Ado-Met and adenosine: AdoMet ratios indicating it may have contained high AdoMet. Trehalose was found to be twenty fold and nine fold higher in bulb of Allium cepa and root of Withania somnifera respectively with respect to average trehalose content of rest of the plants. Ocimum sanctum appeared to be a rich source of oleanolic acid. It appeared from our study that Catharanthus roseus, Allium cepa and Ocimum sanctum could be utilized as natural sources of AdoMet, trehalose and oleanolic acid respectively. 展开更多
关键词 adomet AdoHcy ADENOSINE TREHALOSE Oleanolic Acid
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EFFECT OF UP-REGULATION OF S-ADOMET SYNTHETASE ON TAXOL-INDUCED APOPTOSIS IN HUMAN BREAST CANCER CELLS
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作者 陈丽荣 郑树 +1 位作者 范伟民 张苏展 《Chinese Journal of Cancer Research》 SCIE CAS CSCD 1998年第4期3-6,共4页
Objective: To investigate the gene regulation of taxolinduced apoptosis Methods: Northern blot hybridization, enzyme activity assay of S AdoMet synthetase and flow cytometry were performed in the investigation of ex... Objective: To investigate the gene regulation of taxolinduced apoptosis Methods: Northern blot hybridization, enzyme activity assay of S AdoMet synthetase and flow cytometry were performed in the investigation of expression in the mRNA level and biological action of S AdoMet synthetase in taxol induced apoptosis in human breast cancer cell line (BCap 37) Results: Up regulation of S AdoMet synthetase expression was resulted by taxol treatment and the expression peaked at 48 hours Moreover,the up regulation of S AdoMet synthetase was associated with cytotoxicity of anti microtubule agents including taxol and colchicine Inhibition rate of S AdoMet synthetase activity by 1% DMSO was 34% in taxol treated cells and 14% in taxol untreated cells compared to control groups, respectively Posttreatment with 1% DMSO following pretreatment with individual antitumor agent for 3 hrs promoted apoptotic cell death of taxol ,colchicine ,and adriamycin treated Bcap37 cells Conclusion : The induction of apoptosis enhanced by post treatment with DMSO in taxol treated cells is probably linked to its inhibition on enzyme activity of S AdoMet synthetase ,suggesting that the increased expression of S AdoMet synthetase possibly plays an important role in protecting cells from DNA fragmentation in taxol induced apoptosis Accepted July 26, 1998 This work was supported by the National High Biotechnology Foundation of China and a grant from the Natural Science Foundation of Zhejiang Province, China 展开更多
关键词 Breast neoplasm TAXOL S adomet synthetase APOPTOSIS
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SET区域Rubisco赖氨酸甲基化转移酶催化赖氨酸多重甲基化的量子力学研究
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作者 蒋彦可 邹建卫 +2 位作者 卢运祥 蒋勇军 俞庆森 《化学学报》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2009年第5期372-380,共9页
用从头计算和DFT方法计算S-腺苷甲锍氨酸多重甲基化赖氨酸的反应机理.气相中非催化反应的能垒比较低,反应势能剖面类似于SN2反应,而在电介质中,反应能垒很高.在B3LYP/6-31G*和ONIOM(MP2:B 3LYP)水平,研究了Rubisco大亚基甲基转移酶活性... 用从头计算和DFT方法计算S-腺苷甲锍氨酸多重甲基化赖氨酸的反应机理.气相中非催化反应的能垒比较低,反应势能剖面类似于SN2反应,而在电介质中,反应能垒很高.在B3LYP/6-31G*和ONIOM(MP2:B 3LYP)水平,研究了Rubisco大亚基甲基转移酶活性位点的三个残基催化转移甲基到赖氨酸反应的过程.在ONIOM(MP2:B3LYP)水平,预测的反应能垒为82.8kJ/mol,与从实验得到的87.4kJ/mol接近.计算结果表明,酶对过渡态并没有特殊的稳定作用,主要通过为反应物提供一个没有溶剂的环境,用临近的残基把亲电和亲核的底物连接在一起,进而促使甲基化反应的进行. 展开更多
关键词 赖氨酸甲基化 甲基化转移酶 S-腺苷甲锍氨酸 洋葱算法 从头计算
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酿酒酵母生物转化蛋氨酸生产S-腺苷-L-蛋氨酸 被引量:20
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作者 刘惠 林建平 +1 位作者 吴坚平 岑沛霖 《化学反应工程与工艺》 CAS CSCD 北大核心 2002年第4期310-315,共6页
摇瓶考察筛选酿酒酵母 (zjus1)培养 1d后补加蛋氨酸和葡萄糖生产 S-腺苷 - L -蛋氨酸 (SAM) ,并考察了酵母提取物、补加蛋氨酸浓度、葡萄糖浓度及转化 p H对酵母细胞的生长和 SAM产量的影响 ,15 LB.Braun罐间歇培养及转化过程实验表明 ... 摇瓶考察筛选酿酒酵母 (zjus1)培养 1d后补加蛋氨酸和葡萄糖生产 S-腺苷 - L -蛋氨酸 (SAM) ,并考察了酵母提取物、补加蛋氨酸浓度、葡萄糖浓度及转化 p H对酵母细胞的生长和 SAM产量的影响 ,15 LB.Braun罐间歇培养及转化过程实验表明 ,溶氧提高利于碳源利用、细胞生长和 SAM产量提高 ,SAM水平可达 80 0 mg/ L ,酵母密度 DCW=15 g/ L ,蛋氨酸转化率约 30 %。 展开更多
关键词 生产 S-腺苷-L-蛋氨酸 酿酒酵母 蛋氨酸 生物转化
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S-腺苷-L-蛋氨酸在弱酸树脂上的离子交换平衡 被引量:1
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作者 刘惠 林建平 岑沛霖 《浙江大学学报(工学版)》 EI CAS CSCD 北大核心 2004年第1期125-128,共4页
结合Donnan膜平衡理论与树脂的弱电解质性质,在假设S-腺苷-L-蛋氨酸(SAM)分子带一价正电荷的基础上,建立了SAM在D113弱酸树脂上的离子交换平衡模型.实验测定了初始pH值为2.30、5.01、7.13及8.13时的等温离子交换平衡数据,通过实验数据... 结合Donnan膜平衡理论与树脂的弱电解质性质,在假设S-腺苷-L-蛋氨酸(SAM)分子带一价正电荷的基础上,建立了SAM在D113弱酸树脂上的离子交换平衡模型.实验测定了初始pH值为2.30、5.01、7.13及8.13时的等温离子交换平衡数据,通过实验数据拟合得到了两个模型参数.实验数据拟合结果表明,在初始pH值为5~8时,两参数的模型较好地描述了离子交换平衡. 展开更多
关键词 S-腺苷-L-蛋氨酸 弱酸树脂 离子交换平衡 Donnan膜平衡理论 离子交换剂 电解质
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一种S-腺苷甲硫氨酸依赖的甲基转移酶活性的检测方法 被引量:2
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作者 谷劲松 谭晓军 《高等学校化学学报》 SCIE EI CAS CSCD 北大核心 2012年第3期521-525,共5页
通过PCR扩增获得了S-腺苷-L-高半胱氨酸核苷酶(SAHN)和S-核糖基高半胱氨酸酶(SRHH)的基因序列,克隆入表达载体,转化宿主细胞,表达纯化得到带有组氨酸标签的重组蛋白,基于SAHN和SRHH重组酶建立了一种酶偶联分析S-腺苷甲硫氨酸(AdoMet)依... 通过PCR扩增获得了S-腺苷-L-高半胱氨酸核苷酶(SAHN)和S-核糖基高半胱氨酸酶(SRHH)的基因序列,克隆入表达载体,转化宿主细胞,表达纯化得到带有组氨酸标签的重组蛋白,基于SAHN和SRHH重组酶建立了一种酶偶联分析S-腺苷甲硫氨酸(AdoMet)依赖的甲基转移酶活性的检测方法.甲基转移酶的共同产物S-腺苷-L-高半胱氨酸(AdoHcy)首先被SAHN酶水解生成腺嘌呤和S-核苷高半胱氨酸,后者进一步被SRHH酶裂解生成高半胱氨酸,最后高半胱氨酸与Ellman’s试剂反应生成5-硫代-2-硝基苯甲酸(TNB).实验结果表明,重组表达获取的2种酶蛋白均具有良好的催化活性,酶偶联反应生成的TNB与初始AdoHcy浓度呈现显著的线性正相关.该检测方法克服了S-腺苷甲硫氨酸依赖的甲基转移酶的共同产物AdoHcy的反馈抑制,使甲基化反应进行完全,从而保证了对甲基转移酶活性准确有效的定量分析. 展开更多
关键词 S-腺苷-L-高半胱氨酸 S-腺苷-L-高半胱氨酸核苷酶 S-核糖基高半胱氨酸酶 S-腺苷甲硫氨酸依赖甲基转移酶 酶偶联分析
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腺苷基蛋氨酸合成酶表达在紫杉醇诱发的乳腺癌细胞凋亡中的作用探讨 被引量:1
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作者 陈丽荣 郑树 +1 位作者 范伟民 张苏展 《中华肿瘤杂志》 CAS CSCD 北大核心 1998年第1期28-30,共3页
目的研究紫杉醇诱发细胞凋亡的基因调控机制。方法应用Northern杂交技术和酶活性检测以及流式细胞术对紫杉醇诱发的人乳腺癌细胞凋亡过程中腺苷基蛋氨酸合成酶基因mRNA水平表达及其生物学功能进行分析。结果紫杉醇处理细胞... 目的研究紫杉醇诱发细胞凋亡的基因调控机制。方法应用Northern杂交技术和酶活性检测以及流式细胞术对紫杉醇诱发的人乳腺癌细胞凋亡过程中腺苷基蛋氨酸合成酶基因mRNA水平表达及其生物学功能进行分析。结果紫杉醇处理细胞可使腺苷基蛋氨酸合成酶基因表达逐渐增高,在48小时时达到高峰。腺苷基蛋氨酸合成酶基因表达上调与抗微管药物紫杉醇和秋水仙碱的细胞毒作用有关。进一步研究发现,1%二甲基亚砜(DMSO)对乳腺癌细胞腺苷基蛋氨酸合成酶活性有降低作用,抑制率为14%,DMSO后处理不仅对紫杉醇诱导的该酶活性的增高产生抑制,抑制率为34%,而且促进紫杉醇和秋水仙碱等诱发的细胞凋亡反应。结论DMSO后处理对紫杉醇诱导细胞凋亡反应的增强效应可能与其对腺苷基蛋氨酸合成酶活性抑制有关,该酶表达增高可能在紫杉醇诱发的细胞凋亡过程中起着保护细胞核DNA免受裂解的作用。 展开更多
关键词 乳腺癌 细胞凋亡 紫杉醇 ATP
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