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牛ADIG基因启动子转录调控分析 被引量：2
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作者 唐林 魏大为 +5 位作者 汪书哲 雷召雄 高晓茜 王兴平 马燕芬 马云 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2022年第3期722-730,共9页
旨在构建脂肪生成素基因(adipohenin,ADIG)在牛不同组织中的表达谱,鉴定其核心启动子区域及关键转录因子,以期阐明其转录调控的分子机制。本研究采集3头((24±2)月龄)健康南阳公牛的心、肝、脾、肺、肾、肌肉和皮下脂肪组织,通过逆... 旨在构建脂肪生成素基因(adipohenin,ADIG)在牛不同组织中的表达谱,鉴定其核心启动子区域及关键转录因子,以期阐明其转录调控的分子机制。本研究采集3头((24±2)月龄)健康南阳公牛的心、肝、脾、肺、肾、肌肉和皮下脂肪组织,通过逆转录-聚合酶链反应(reverse transcription-polymerase chain reaction,RT-PCR)检测各组织中ADIG基因的相对表达量;克隆获得牛ADIG基因上游启动子区2245 bp序列,构建6个pGL3-WT,与pRL-TK共转染293T细胞、原代脂肪细胞和3T3-L1细胞,进一步利用生物信息学预测其核心启动子区的关键转录因子。结果发现,ADIG基因在南阳牛肺(P<0.05)、肾(P<0.05)和皮下脂肪(P<0.05)组织中高表达;克隆得到2245 bp及其6段缺失片段序列的ADIG基因的启动子序列,成功构建了pADIG-1621/+59、pADIG-1288/+59、pADIG-850/+59、pADIG-589/+59、pADIG-321/+59和pADIG-79/+59双荧光素酶报告载体,并检测到牛ADIG基因启动子核心区域在-321/-79;生物信息学初步预测牛ADIG基因核心区域含有C/EBPα、PPARδ、CREB、STAT5和AP-2α等转录因子结合位点。综上,牛ADIG基因在皮下脂肪组织中表达量最高,其启动子核心区位于-321/-79,C/EBPα、PPARδ、CREB、STAT5和AP-2α等转录因子对ADIG基因转录活性具有调控作用。本研究结果为探究ADIG基因在肉牛分子水平上的改良培育提供理论依据。 展开更多
关键词 南阳牛 adig基因 启动子 转录调控 双荧光素酶报告基因
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