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人肺腺癌紫杉醇耐药细胞株的建立及其特性研究 被引量：9
1
作者 杨晓华 沙慧芳 +3 位作者 冯久贤 孙强玲 储天晴 高志强 《现代医学》 2009年第1期34-37,共4页
目的建立耐紫杉醇的人肺腺癌A549(A549/Taxol)细胞株,并初步研究其生物学特性。方法应用抗肿瘤药紫杉醇以体外浓度递增和短时作用法筛选A549细胞株。用四甲基偶氮唑盐(MTT)法检测细胞的耐药指数及对多种抗癌药物的敏感性;免疫细胞化学... 目的建立耐紫杉醇的人肺腺癌A549(A549/Taxol)细胞株,并初步研究其生物学特性。方法应用抗肿瘤药紫杉醇以体外浓度递增和短时作用法筛选A549细胞株。用四甲基偶氮唑盐(MTT)法检测细胞的耐药指数及对多种抗癌药物的敏感性;免疫细胞化学法检测P-糖蛋白(P170)、β-tubulin等耐药相关蛋白的表达情况。结果A549/Taxol细胞的紫杉醇半数抑制浓度(IC50)是亲代A549细胞的512.8倍,群体倍增时间是亲代细胞的1.28倍,对紫杉醇、丝裂霉素、长春新碱、诺维本的耐药指数依次为512.8、66.48、4.88和2.06;而对顺铂、健择无交叉耐药。A549/Taxol细胞高表达P170,β-tubulin表达水平高于其亲代细胞系。结论成功建立了一株耐紫杉醇的A549/Taxol,并呈多药耐药特性。 展开更多
关键词 肺腺癌细胞A549 多药耐药 紫杉醇 细胞株
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姜黄素对转化生长因子-β诱导的A549细胞上皮间质转化的影响 被引量：2
2
作者 汪玉琪 来岳标 姚庆华 《浙江中西医结合杂志》 2016年第1期22-26,99,100,共7页
目的研究姜黄素对转化生长因子-β(TGF-β)诱导的肺腺癌A549细胞上皮间质转化(EMT)作用及可能机制。方法选取体外培养肺腺癌A549细胞采用MTT法检测姜黄素细胞抑制率。实验分对照组、TGF-β组(TGF-β5ng/m L)、TGF-β+姜黄素组(TGF-β5ng... 目的研究姜黄素对转化生长因子-β(TGF-β)诱导的肺腺癌A549细胞上皮间质转化(EMT)作用及可能机制。方法选取体外培养肺腺癌A549细胞采用MTT法检测姜黄素细胞抑制率。实验分对照组、TGF-β组(TGF-β5ng/m L)、TGF-β+姜黄素组(TGF-β5ng/m L+姜黄素10μmol/L)、姜黄素组(姜黄素10μmol/L)。采用Transwell细胞迁移及浸润实验检测各组的运动迁移和侵袭浸润的能力,免疫荧光和Western印迹法实验检测各组EMT相关标记物E-钙黏蛋白、N-钙黏蛋白和波形蛋白的表达水平与Wnt/β-catenin信号通路相关P-GSK3β、GSK3β、β-catenin、c-Myc蛋白以及Snail蛋白表达水平,同时检测Wnt/β-catenin抑制剂XAV939(1、2、4μmol/L)作用后EMT表达情况。结果 MTT实验表明,10μmol/L姜黄素作用A549细胞24h和48h时,细胞增殖抑制率分别为(12.21±2.60)%和(21.33±3.25)%(P<0.05);TGF-β能显著促进细胞的运动迁移和侵袭浸润,下调E-钙黏蛋白的表达,上调波形蛋白及N-钙黏蛋白的表达,伴有P-GSK3β、β-catenin和c-Myc的表达增加以及Snail蛋白表达增加,GSK3β表达无明显变化,而姜黄素可以抑制TGF-β的作用(P<0.05)。同时,XAV939对TGF-β诱导的EMT也有抑制作用。结论姜黄素可能通过抑制Wnt/β-catenin信号通路来抑制TGF-β诱导的A549细胞上皮间质转化。 展开更多
关键词 肺腺癌A549细胞 上皮间质转化 姜黄素 WNT/Β-CATENIN信号通路
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热休克人羊膜间充质干细胞提取物与杀伤细胞共培养及抑瘤效应评价
3
作者 李培义 李宁 +3 位作者 王雪 张川骎 李菲 罗清 《重庆医学》 CAS 北大核心 2016年第29期4033-4035,4040,共4页
[摘要]目的将热休克人羊膜间充质干细胞（hAMSCs）提取物与细胞因子诱导的杀伤细胞（CIK）共培养，以期提高早期CIK的增殖、分泌细胞因子及体外杀伤等能力，为得到高质量CIK提供研究基础。方法（1）从外周血单个核细胞中常规诱导培养CI... [摘要]目的将热休克人羊膜间充质干细胞（hAMSCs）提取物与细胞因子诱导的杀伤细胞（CIK）共培养，以期提高早期CIK的增殖、分泌细胞因子及体外杀伤等能力，为得到高质量CIK提供研究基础。方法（1）从外周血单个核细胞中常规诱导培养CIK；（2）热休克处理hAMSCs（42℃，1h），48h后收集上清液及胞内物质，将提取物与第10天CIK（370μg：2×106个）共培养；（3）计数第12、14、17天CIK细胞数，绘制生长曲线；（4）酶联免疫吸附测定（ELISA）检测细胞因子白细胞介素（IL）-2、肿瘤坏死因子α（TNF-α）、干扰素γ（IFN-γ）的分泌量；（5）MTT法检测CIK对A549的体外杀伤活性。结果（1）加入hAMSCs提取物的实验组增殖速度明显高于对照组，第12、14、17天CIK细胞数分别为[（5．26±0．01）×105／mL％（5．60±0．00）×105／mL）]、r（6．26士0．23）×105／mL。5．（9．37±0．15）×105／mL]、[（8．10±0．75）×105／mL vs．（11．00土1．67）×105／mL]，差异有统计学意义（P〈0．05）；（2）ELISA结果表明，hAMSCs提取物对早期CIK细胞分泌细胞因子有一定促进能力，两组第14天IL-2、TNF-α、IFN-γ量（pg／mL）分别为（13．49±0．78 vs．15．49±3．47）、（53．52±5．52 vs．33．83±15．61）、（60．68±19．390s．50．24±18．89），差异无统计学意义（P〉0．05）；（3）MTT结果：对照组与实验组IC50分别为（38．60±18．63 vs．25．62±8．39），差异无统计学意义（P〉0．05）。结论成功将热休克hAMSCs提取物与CIK共培养；共培养后显著促进了早期CIK的增殖活性。 展开更多
关键词 杀伤细胞 人羊膜间充质干细胞 A549肺腺癌细胞 热休克
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人A549肺腺癌细胞中甲状旁腺激素相关蛋白的表达及其与性激素状态相关性的研究 被引量：2
4
作者 龚丽明 黄云超 +2 位作者 李鸿钧 欧霞 王东坤 《上海医学》 CAS CSCD 北大核心 2011年第7期543-546,共4页
目的探讨人A549肺腺癌细胞中甲状旁腺激素相关蛋白(PTHrP)的表达,以及性激素对其表达的影响。方法将人A549肺腺癌细胞培养48 h后,采用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测其雌激素受体(ER)-α、β,雄激素受体(AR),PTHrP mRNA的表达。再分别... 目的探讨人A549肺腺癌细胞中甲状旁腺激素相关蛋白(PTHrP)的表达,以及性激素对其表达的影响。方法将人A549肺腺癌细胞培养48 h后,采用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测其雌激素受体(ER)-α、β,雄激素受体(AR),PTHrP mRNA的表达。再分别以不同浓度(0、0.5、1、5、10 nmol/L)的雌二醇和睾酮处理人A549肺腺癌细胞48 h,采用实时定量聚合酶链反应(PCR)检测其PTHrP mRNA的表达。结果在人A549肺腺癌细胞中有ERβ-、AR及PTHrP mRNA表达,而ER-α不表达。再以不同浓度的17β-雌二醇及睾酮处理人A549肺腺癌细胞48 h,17β-雌二醇处理后未检测到PTHrP mRNA的表达;浓度为0、0.5、1、5、10 nmol/L睾酮处理后PTHrP的表达量分别为100%、90%、75%、60%、25%。结论人A549肺腺癌细胞中有ERβ-、AR及PTHrP mRNA表达,性激素可调节PTHrP mRNA的分泌,其中AR对PTHrP mRNA起负调节作用。 展开更多
关键词 非小细胞肺癌 人A549肺腺癌细胞 甲状旁腺激素相关蛋白 性激素 逆转录多聚酶链反应 适时定量多聚酶链反应
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环氧化酶-2抑制剂塞来昔布联合顺铂对A549人肺腺癌细胞株增殖影响的体外实验研究 被引量：3
5
作者 熊建萍 陶庆松 +1 位作者 张凌 项小军 《实用癌症杂志》 2006年第1期4-6,14,共4页
目的观察环氧化酶-2(COX-2)抑制剂塞来昔布(Celecoxib)与化疗药物顺铂(DDP)联合应用对A549人肺腺癌细胞增殖的影响。方法应用MTS法检测Celecoxib与DDP联用对人肺腺癌A549细胞增殖的影响。结果在一定浓度范围内,Celecoxib和DDP均可抑制A... 目的观察环氧化酶-2(COX-2)抑制剂塞来昔布(Celecoxib)与化疗药物顺铂(DDP)联合应用对A549人肺腺癌细胞增殖的影响。方法应用MTS法检测Celecoxib与DDP联用对人肺腺癌A549细胞增殖的影响。结果在一定浓度范围内,Celecoxib和DDP均可抑制A549人肺腺癌细胞的生长,其抑制作用呈量-效关系。Celecoxib(0.35 mg/L)与DDP联用可增强对A549细胞生长的抑制作用,DDP浓度≥1 mg/L时两者具有协同或相加作用;且在一定浓度范围内,Celecoxib与DDP联用对细胞的生长抑制作用呈时-效关系。结论Celecoxib与DDP联合可增强对A549人肺腺癌细胞的生长抑制效应。 展开更多
关键词 COX-2抑制剂 塞来昔布 顺铂 A549人腺癌细胞 MTS试验
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miR-145-5p通过靶向ABCE1表达影响人肺腺癌A549细胞的增殖和迁移 被引量：3
6
作者 于潜 韩旭 +1 位作者 李晓倩 杨雪英 《实用药物与临床》 CAS 2019年第6期569-573,共5页
目的探讨microRNA (miR)-145-5p在肺腺癌组织中的表达情况及其对人肺腺癌A549细胞增殖和迁移的影响及机制。方法检测人肺腺癌组织和A549细胞中miR-145-5p的基因表达。生物信息数据库预测、双荧光素酶报告基因实验验证miR-145-5p和ABCE1... 目的探讨microRNA (miR)-145-5p在肺腺癌组织中的表达情况及其对人肺腺癌A549细胞增殖和迁移的影响及机制。方法检测人肺腺癌组织和A549细胞中miR-145-5p的基因表达。生物信息数据库预测、双荧光素酶报告基因实验验证miR-145-5p和ABCE1的靶控关系;转染miR-145-5p的模拟物、抑制物和对照物入A549细胞,PCR法测定转染后miR-145-5p和ABCE1 mRNA的表达。MTT和划痕愈合实验检测转染前后A549细胞的增殖和迁移能力。结果在肺腺癌组织和A549细胞系中miR-145-5p表达明显下降(P<0.05)。生物信息数据库和双荧光素酶报告基因实验证实,ABCE1是miR-145-5p的靶基因。与未转染和转染miR-145-5p对照物的A549细胞相比,转染模拟物48 h后可显著增加miR-145-5p的表达,抑制ABCE1 mRNA表达,同时,细胞增殖和迁移能力受到抑制(P<0.05);而转染抑制后可显著降低miR-145-5p的表达,增加ABCE1 mRNA表达,同时,细胞增殖和迁移能力明显增强(P<0.05)。结论在癌组织中表达明显降低的miR-145-5p,能够通过负性调节ABCE1的表达,抑制人肺腺癌A549细胞增殖和迁移,为肺癌治疗提供新的靶点。 展开更多
关键词 ATP结合盒E1 ABCE1 A549人肺腺癌细胞 miR-145-5p
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白藜芦醇抑制A549人肺腺癌细胞增殖与IGF-ⅠR的关系 被引量：2
7
作者 朱剑武 夏蕾 +6 位作者 杨剑 罗维 李娟 周芊 曾林立 王东 杨镇洲 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第24期2567-2570,共4页
目的探讨白藜芦醇对人肺腺癌A549细胞增殖的抑制效应及其与IGF-ⅠR的关系。方法以人肺腺癌A549细胞株为研究对象,采用MTT方法测定细胞增殖,用RT-PCR与免疫印迹方法测定IGF-Ⅰ受体mRNA与蛋白表达水平。结果 2.5～15 nmol/L IGF-Ⅰ可显著... 目的探讨白藜芦醇对人肺腺癌A549细胞增殖的抑制效应及其与IGF-ⅠR的关系。方法以人肺腺癌A549细胞株为研究对象,采用MTT方法测定细胞增殖,用RT-PCR与免疫印迹方法测定IGF-Ⅰ受体mRNA与蛋白表达水平。结果 2.5～15 nmol/L IGF-Ⅰ可显著促进A549细胞增殖(P<0.05),给予12.5、25.0、50μmol/L白藜芦醇对A549细胞增殖具有明显抑制作用(P<0.05)。白藜芦醇(6.25～50μmol/L)与10 nmol/L IGF-Ⅰ共作用于A549细胞,均可抑制IGF-Ⅰ的促A549细胞增殖作用,其中尤以25、50μmol/L白藜芦醇的抑制增殖作用显著(P<0.05),白藜芦醇可有效降低IGF-ⅠR mRNA与蛋白表达。结论白藜芦醇可通过降低IGF-ⅠR mRNA与蛋白表达有效抑制IGF-Ⅰ介导的A549肺癌细胞增殖。 展开更多
关键词 白藜芦醇 胰岛素样生长因子-1 胰岛素样生长因子-1受体 人肺腺癌细胞A549
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枸杞多糖对多柔比星所致心肌H9c2损伤的保护作用 被引量：2
8
作者 周国亮 辛艳飞 +2 位作者 谢方 韩滨 宣尧仙 《中华中医药学刊》 CAS 2011年第7期1500-1502,共3页
目的:考察枸杞多糖(LBP)对多柔比星(DOX)作用下H9c2心肌细胞损伤的保护作用。方法:应用H9c2心肌细胞筛查体系,通过检测细胞存活率、过氧化物岐化酶(SOD)活性和氧化代谢产物(MDA)含量,考察LBP从33μg/mL至0.46 ng/mL浓度范围内细胞保护... 目的:考察枸杞多糖(LBP)对多柔比星(DOX)作用下H9c2心肌细胞损伤的保护作用。方法:应用H9c2心肌细胞筛查体系,通过检测细胞存活率、过氧化物岐化酶(SOD)活性和氧化代谢产物(MDA)含量,考察LBP从33μg/mL至0.46 ng/mL浓度范围内细胞保护作用的最佳浓度。研究在最优浓度下,LBP对暴露于10、2和0.4μg/mL浓度DOX下H9c2心肌细胞的存活率的影响。应用A549肺癌细胞,考察LBP对DOX抗肿瘤活性的影响。结果:LPB的浓度达到1.85μg/mL时,实验体系下H9c2细胞存活率达到最大,同时可以改善DOX所引起的心肌细胞SOD活性降低和MDA浓度增高。在该浓度下,LBP可以有效地增加2和0.4μg/mL浓度DOX作用下心肌细胞的存活率;但不降低DOX对A549肿瘤细胞的杀伤效果。结论:LBP通过减轻氧化应激损伤降低DOX对心肌细胞的毒性作用。 展开更多
关键词 枸杞多糖 多柔比星 H9C2心肌细胞 A549肺癌细胞
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