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一链双靶siRNA对皮肤鳞状细胞癌NET-1和Survivin基因表达及增殖和凋亡的影响研究
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作者 季周婧 张丽丽 张捷 《交通医学》 2023年第1期14-19,23,共7页
目的:探讨一链双靶siRNA对人皮肤鳞癌细胞株(A431)NET-1和Survivin基因的抑制作用以及对细胞增殖、凋亡的影响。方法:构建siRNA NET-1、siRNA Survivin以及同时靶向NET-1和Survivin基因的一链双靶siRNA。采用免疫共沉淀法检测NET-1和Sur... 目的:探讨一链双靶siRNA对人皮肤鳞癌细胞株(A431)NET-1和Survivin基因的抑制作用以及对细胞增殖、凋亡的影响。方法:构建siRNA NET-1、siRNA Survivin以及同时靶向NET-1和Survivin基因的一链双靶siRNA。采用免疫共沉淀法检测NET-1和Survivin蛋白在A431人皮肤鳞癌细胞中的相互作用。将A431细胞分为siRNA-NET-1组、siRNA-Survivin组、siRNA-NET-1&Survivin组、siRNA-NC组和control组,分别进行细胞转染。qRT-PCR和Western Blot法分别检测细胞内NET-1、Survivin mRNA和蛋白表达,细胞免疫荧光法观察NET-1、Survivin蛋白在细胞内的表达及定位。CCK-8法和流式细胞仪分别检测细胞增殖与凋亡情况。结果:免疫共沉淀法证实NET-1和Survivin蛋白有相互作用。qRT-PCR和Western Blot结果显示,siRNA-NET-1&Survivin组、siRNA-NET-1组和siRNA-Survivin组细胞中NET-1和Survivin mRNA和蛋白表达水平均低于siRNA-NC组及control组,siRNA-NET-1&Survivin组低于siRNA-NET-1组和siRNA-Survivin组,差异均有统计学意义(P<0.05)。CCK-8法检测显示,siRNA-NET-1&Survivin组、siRNA-NET-1组和siRNA-Survivin组细胞增殖水平低于siRNA-NC组和control组,siRNA-NET-1&Survivin组低于siRNA-NET-1组和siRNA-Survivin组,差异均有统计学意义(P<0.05)。流式细胞仪检测显示,siRNA-NET-1&Survivin组、siRNA-NET-1组和siRNA-Survivin组细胞凋亡率高于siRNA-NC组和control组,siRNA-NET-1&Survivin组高于siRNA-NET-1组和siRNA-Survivin组,差异均有统计学意义(P<0.05)。细胞免疫荧光显示,siRNA-NET-1&Survivin组、siRNA-NET-1组和siRNA-Survivin组NET-1和Survivin蛋白表达阳性细胞百分率低于control组,siRNA-NET-1&Survivin组低于siRNA-NET-1和siRNA-Survivin组,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论:NET-1和Survivin蛋白存在相互作用,靶向NET-1和Survivin的一链双靶siRNA能同时下调A431细胞NET-1和Survivin基因表达,并能抑制A431细胞增殖,促进细胞凋亡,一链双靶siRNA作用效果优于单靶siRNA。 展开更多
关键词 NET-1 SURVIVIN 一链双靶siRNA A431 RNA干扰 皮肤鳞状细胞癌
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全反式维A酸对A431细胞中BMI-1表达的影响 被引量:3
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作者 杨丽娟 耿松梅 《中国皮肤性病学杂志》 CAS 北大核心 2009年第10期615-617,644,共4页
目的研究全反式维A酸(ATRA)对表皮鳞癌细胞株A431细胞生长周期的影响及干细胞更新因子BMI-1在鳞癌A431细胞系不同分化时期的表达变化,以明确BMI-1在皮肤鳞状细胞癌细胞增殖分化中的功能。方法体外培养A431细胞,分别于ATRA作用24h和48h... 目的研究全反式维A酸(ATRA)对表皮鳞癌细胞株A431细胞生长周期的影响及干细胞更新因子BMI-1在鳞癌A431细胞系不同分化时期的表达变化,以明确BMI-1在皮肤鳞状细胞癌细胞增殖分化中的功能。方法体外培养A431细胞,分别于ATRA作用24h和48h时收集细胞,流式细胞仪检测不同状态下细胞周期的变化,免疫组化SP法检测不同时期BMI-1蛋白表达变化;对照组细胞不加药物直接检测。结果ATRA作用48h后,A431细胞G0/Gl分布比例增高,S期及G2期分布降低,且作用24h和48h时BMI-1表达逐渐减少,与对照组比较,差异有统计学意义(P<0.05)。结论ATRA可抑制鳞癌细胞A431增殖,并影响BMI-1在肿瘤细胞不同增殖状态的表达,说明作为干细胞更新因子BMI-1在维持皮肤鳞状细胞癌增殖中可能起关键作用。 展开更多
关键词 全反式维甲酸 BMI-1 A431
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氟尿嘧啶联合白藜芦醇诱导肿瘤细胞凋亡的体内外研究 被引量:3
3
作者 敦洁宁 孙奥琪 +2 位作者 贾广辉 张永健 杜青 《中国药学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2016年第24期2094-2101,共8页
目的研究氟尿嘧啶(5-Fu)联合白藜芦醇对肿瘤细胞A431、TE-1的抑制和致凋亡作用及机制,以及两药联合对小鼠皮肤癌的治疗作用。方法四甲基偶氮唑蓝(MTT)法、生长曲线实验、Chou-Talalay法和乳酸脱氢酶(LDH)溢出实验对联合用药抗肿瘤作用... 目的研究氟尿嘧啶(5-Fu)联合白藜芦醇对肿瘤细胞A431、TE-1的抑制和致凋亡作用及机制,以及两药联合对小鼠皮肤癌的治疗作用。方法四甲基偶氮唑蓝(MTT)法、生长曲线实验、Chou-Talalay法和乳酸脱氢酶(LDH)溢出实验对联合用药抗肿瘤作用进行体外评价。光镜观察、DNA Ladder和共聚焦测定胞内Ca^(2+)变化研究药物诱导凋亡的作用和机制。两阶段促癌法诱发小鼠皮肤癌,免疫组化法检测鼠皮中活化caspase-3的表达。结果联合用药可以大大降低氟尿嘧啶(5-Fu)或白藜芦醇对A431的中效浓度。两药联用对肿瘤细胞的凋亡有协同作用,可以观察到更多典型凋亡形态学变化及显著的DNA片段化现象,其机制可能与大量增加细胞中Ca^(2+)强度有关。联合给药后小鼠表皮肿瘤数量明显减少,表皮细胞中caspase-3的活化程度与单药相比明显增加。结论联合给药在体内外均有协同抗肿瘤作用。 展开更多
关键词 氟尿嘧啶 白藜芦醇 TE-1 A431 协同效应 凋亡
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人鳞状细胞癌细胞株A431中Bmi-1基因的RNAi对其增殖的影响 被引量:3
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作者 王应权 王晨霞 +2 位作者 李强 马铭 郭歌 《医学分子生物学杂志》 CAS 2017年第6期342-346,共5页
目的 探讨人鳞状细胞癌细胞株A431中干细胞更新因子(B-cell specific moloney murine leukemia virus insertion site1, Bmi-1)基因的 RNA干扰(RNA interference, RNAi)对其增殖的影响.方法 转染Bmi-1基因的RNAi至人鳞状细胞癌细胞... 目的 探讨人鳞状细胞癌细胞株A431中干细胞更新因子(B-cell specific moloney murine leukemia virus insertion site1, Bmi-1)基因的 RNA干扰(RNA interference, RNAi)对其增殖的影响.方法 转染Bmi-1基因的RNAi至人鳞状细胞癌细胞株A431,采用逆转录聚合酶联反应法(reverse transcription polymer-ase chain reaction, RT-PCR)筛选A431细胞株Bmi-1-RNAi沉默载体,采用Western印迹法测定Bmi-1蛋白表达,采用四甲基偶氮唑蓝(Methyl thiazolyl tetrazolium, MTT)法测定细胞增殖抑制情况,并应用流式细胞仪测定细胞周期.结果 ① 转染Bmi-1shRNA 2 d后,A431细胞缩小,间隙变大,生长速度减缓.② 转染Bmi-1shRNA组Bmi-mRNA表达量明显低于空白对照组(P〈0.05).③ 转染Bmi-1shRNA组Bmi-1蛋白表达较空白对照组明显降低.④转染Bmi-1shRNA组其S期细胞所占比例高于空白对照组,G2/M期细胞比例少于空白对照组(P〈0.05).结论 RNAi可抑制Bmi-1mRNA及蛋白表达,限制A431细胞分化及增殖,阻滞其生长周期. 展开更多
关键词 鳞状细胞癌 A431 BMI-1基因 细胞增殖
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爪哇伪枝藻胞外多糖诱导皮肤癌细胞(A431)凋亡的研究 被引量:3
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作者 张宏 马红 +5 位作者 张德禄 吕莹 王高鸿 陈坤 刘永定 胡春香 《水生生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第6期874-880,共7页
为探讨爪哇伪枝藻胞外多糖(Extracellular polymeric substances ofScytonema javanicum,EPS)诱导人表皮癌A431细胞凋亡及其对凋亡相关基因caspase-3、bcl-2和bax表达的影响,本实验利用MTT法检测细胞生长抑制情况;HE染色法及透射电镜进... 为探讨爪哇伪枝藻胞外多糖(Extracellular polymeric substances ofScytonema javanicum,EPS)诱导人表皮癌A431细胞凋亡及其对凋亡相关基因caspase-3、bcl-2和bax表达的影响,本实验利用MTT法检测细胞生长抑制情况;HE染色法及透射电镜进行形态学观察;单细胞凝胶电泳法(SCGE/彗星电泳)分析DNA受损情况;免疫组织化学法检测细胞内caspase-3、bcl-2和bax表达水平。结果显示EPS能显著抑制A431细胞增殖,并呈时间和剂量依赖性,作用96h的半数抑制浓度IC50为4.25mg/mL,并出现细胞凋亡的形态学改变;彗星电泳结果与对照相比6mg/mL EPS作用48h能引起A431细胞DNA严重损伤;免疫组织化学检测发现6mg/mLEPS作用72h能显著上调A431细胞内凋亡相关基因caspase-3和bax的表达,而下调bcl-2的表达。 展开更多
关键词 爪哇伪枝藻 胞外多糖 A431 细胞凋亡
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转录因子GRHL3促进皮肤鳞癌细胞迁移和侵袭 被引量:3
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作者 邓庆梅 周利利 +4 位作者 郭思佳 陈津津 郭立钰 曾凡军 周海胜 《安徽医科大学学报》 CAS 北大核心 2019年第2期236-241,共6页
目的研究转录因子果蝇头状因子3(GRHL3)对皮肤鳞癌(SCC)细胞系A431细胞迁移和侵袭的影响。方法利用免疫组织化学检测皮肤癌组织GRHL3表达,分析皮肤鳞状细胞癌中GRHL3表达水平与临床病理分期的关系;利用脂质体介导GRHL3过表达载体转染A43... 目的研究转录因子果蝇头状因子3(GRHL3)对皮肤鳞癌(SCC)细胞系A431细胞迁移和侵袭的影响。方法利用免疫组织化学检测皮肤癌组织GRHL3表达,分析皮肤鳞状细胞癌中GRHL3表达水平与临床病理分期的关系;利用脂质体介导GRHL3过表达载体转染A431细胞,建立过量表达GRHL3的A431细胞系;通过Transwell检测GRHL3对A431细胞迁移和侵袭能力的影响;利用表达谱芯片技术分析过量表达GRHL3对A431细胞迁移、侵袭等相关基因表达变化;采用染色质免疫共沉淀-测序(ChI P-seq)的方法分析GRHL3调控的靶基因及GRHL3的结合位点;比较基因表达谱芯片和染色质免疫共沉淀-测序的结果,以确定GRHL3参与调控细胞迁移和侵袭相关的靶基因。结果免疫组化结果显示SCC组织及癌旁组织GRHL3表达水平较正常皮肤组织明显增加,且与临床病理分期有关;Western blot结果证实GRHL3在A431细胞过量表达,由此成功建立稳定过量表达GRHL3的A431细胞株;Transwell侵袭和迁移试验显示GRHL3过量表达增强了A431细胞迁移和侵袭能力;表达谱芯片结果显示有128个基因与细胞运动和黏附相关;ChI Pseq结果显示GRHL3结合基因组DNA的主要位置是在基因间区(55. 65%),而只有2. 49%分布于结构基因的启动子区域;表达谱芯片显示差异表达的128个基因和ChI P-seq显示的GRHL3调控149个候选基因,均与细胞迁移和侵袭有关,其中有26个基因具有一致性。提示GRHL3通过调控26个候选基因促进皮肤鳞癌细胞的迁移和侵袭。结论 GRHL3通过调控皮肤鳞癌细胞的与迁移和侵袭相关基因表达,促进细胞迁移和侵袭,有助于后续研究GRHL3调控肿瘤细胞迁移和侵袭的分子机制。 展开更多
关键词 皮肤鳞癌 GRHL3 A431 迁移 侵袭
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蛋白激酶Cζ抑制剂对皮肤鳞癌细胞A-431增殖和侵袭的影响 被引量:2
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作者 邢艳玲 吴静 《天津医药》 CAS 2017年第6期566-570,共5页
目的探讨蛋白激酶C(PKC)ζ抑制剂T5450996对皮肤鳞癌细胞A-431增殖和侵袭能力的影响。方法应用Z′-LYTE^(?)试剂盒筛选PKCζ抑制剂T5450996;利用细胞增殖实验和细胞周期分析观察T5450996对皮肤鳞癌细胞A-431增殖的影响;运用划痕实验和... 目的探讨蛋白激酶C(PKC)ζ抑制剂T5450996对皮肤鳞癌细胞A-431增殖和侵袭能力的影响。方法应用Z′-LYTE^(?)试剂盒筛选PKCζ抑制剂T5450996;利用细胞增殖实验和细胞周期分析观察T5450996对皮肤鳞癌细胞A-431增殖的影响;运用划痕实验和侵袭实验分析T5450996对A-431迁移和侵袭能力的影响。结果T5450996可以抑制PKCζ激酶的活性,半数抑制浓度(IC_(50))约为35μmol/L;与对照组相比,35μmol/L和70μmol/L的T5450996可以显著抑制A-431细胞的增殖,阻滞A-431细胞周期;划痕实验和侵袭实验结果显示35μmol/L和70μmol/L的T5450996处理A-431细胞后,A-431细胞的迁移及侵袭能力明显下降(均P<0.05),20μmol/L的T5450996没有明显作用(均P>0.05)。结论 PKCζ抑制剂T5450996可显著抑制皮肤鳞癌细胞A-431的增殖和侵袭能力,是一个有潜在应用前景的小分子抑制剂。 展开更多
关键词 蛋白激酶C 蛋白激酶抑制剂 皮肤肿瘤 细胞增殖 肿瘤侵润 肿瘤转移 A-431
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Differential Responses to UVB Irradiation in Human Keratinocytes and Epidermoid Carcinoma Cells 被引量:2
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作者 ZHOU Mei Juan ZHENG Li +5 位作者 GUO Ling LIU Wei Ling LV Chao JIANG Li Hong OU Cheng Shan DING Zhen Hua 《Biomedical and Environmental Sciences》 SCIE CAS CSCD 2012年第5期583-589,共7页
Abstract Objective To examine UVB-induced responses in normal human keratinocytes (HaCaT) and epidermoid carcinoma cells (A431) at the cellular and molecular level, and investigated the protective effect of salidr... Abstract Objective To examine UVB-induced responses in normal human keratinocytes (HaCaT) and epidermoid carcinoma cells (A431) at the cellular and molecular level, and investigated the protective effect of salidroside. Methods Cells irradiated by UVB at various dosage and their viability was assessed by MTT assays, cell cycle was analysed by flow cytometry. The expression of NF-KB, BCL-2, and CDK6 after 50 J/㎡ UVB irradiation were detected by RT-PCR and western blotting. Results Our results confirmed greater tolerance of A341 cells to UVB-induced damage such as cell viability and cell cycle arrest, which was accompanied by differential expression changes in NF-KB, BCL-2, and CDK6. UVB exposure resulted in HaCaT cells undergoing G1-S phase arrest. When treated with salidroside, HaCaT survival was significantly enhanced following exposure to UVB, suggesting great therapeutic potential for this compound. Conclusion Taken together, our study suggests that A431 respond differently to UVB than norma HaCaT cells, and supports a role for NF-KB, CDK6, and BCL-2 in UVB-induced cell G1-S phase arrest Furthermore, salidroside can effectively protect HaCaT from UVB irradiation. 展开更多
关键词 UVB G1-S phase arrest HACAT A431 NF-KB BCL-2 CDK6 SALIDROSIDE
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EFFECTS OF MONOCLONAL ANTIBODY ANTIEGF RECEPTOR ON HUMAN NASOPHARYNGEAL CARCINOMA CELL AND OTHER TUMOR CELLS 被引量:1
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作者 管恩南 周廷冲 +5 位作者 王晋海 陈勇 孙英勋 黄培根 唐蔚萍 赵明伦 《Science China Chemistry》 SCIE EI CAS 1990年第11期1334-1340,共7页
Three anti-EGF receptor MoAbs were used in these studies. Administration of MoAbs 3 and 176 inhibited tumor formation in nude mice by CNE-2, a poorly differentiated nasopharyngeal carcinoma cell line and A431, an epid... Three anti-EGF receptor MoAbs were used in these studies. Administration of MoAbs 3 and 176 inhibited tumor formation in nude mice by CNE-2, a poorly differentiated nasopharyngeal carcinoma cell line and A431, an epidermoid carcinoma cell line. When the same MoAbs were used in treatment against HeLa, a cervical carcinoma, tumor growth was not affected. The number of EGF receptors and apparent dissociation constants for ^(125)I-EGF on CNE-2 and A431 was 1.3×10^(?)/cell (Kd 7.7×10^(-8)mol/L) and 1.4×10~6/cell(Kd 2.4×10^(-9)mol/L), respectively. Both MoAbs 3 and 176, capable of competing with EGF for receptor binding, showed significant tumor growth inhibition. MoAb 101 was incapable of blocking the binding of EGF to its receptor, and not as effective as MoAbs 3 and 176 in tumor growth inhibition. Our observation is that the MoAb anti-EGF receptor is cytostatic rather than cytocidal, in vitro against CNE-2 and A431. 展开更多
关键词 NASOPHARYNGEAL carcinoma EGF receptor monoelonal ANTIBODY CNE-2 A431
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黄腐酚对人皮肤鳞癌A431细胞恶性生物学行为的抑制作用
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作者 王攀琦 张蒙 +5 位作者 刘洋 刘星吟 董兰 魏瑶璐 宁志丰 刘复兴 《湖北科技学院学报(医学版)》 2022年第3期202-206,211,共6页
目的探究黄腐酚对人皮肤鳞癌A431细胞增殖、迁移侵袭和凋亡的影响及作用机制。方法给予不同浓度梯度的黄腐酚(0、10、20、40、60、80、100μmol/L)处理A431细胞,应用四甲基偶氮唑盐(MTT)比色法检测细胞增殖活性;利用细胞划痕实验、Trans... 目的探究黄腐酚对人皮肤鳞癌A431细胞增殖、迁移侵袭和凋亡的影响及作用机制。方法给予不同浓度梯度的黄腐酚(0、10、20、40、60、80、100μmol/L)处理A431细胞,应用四甲基偶氮唑盐(MTT)比色法检测细胞增殖活性;利用细胞划痕实验、Transwell小室迁移实验、Transwell小室侵袭实验检测黄腐酚处理后A431的迁移能力、侵袭能力;利用Western blot检测A431中STAT3、JAK2和Bcl-2蛋白的表达。结果黄腐酚可呈剂量依赖性抑制A431细胞的增殖、迁移和侵袭;A431细胞中STAT3、JAK2和Bcl-2有下调趋势,且均呈剂量依赖性。结论黄腐酚可呈剂量依赖性的抑制A431细胞的增殖和侵袭迁移,有望作为潜在的抗皮肤鳞癌药物应用到临床。 展开更多
关键词 黄腐酚 皮肤鳞癌 A431 凋亡
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miR-21在UVB照射的人角质形成细胞和人表皮鳞癌细胞中的差异表达 被引量:1
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作者 郭玲 吕超 +1 位作者 何英杰 丁振华 《中华放射医学与防护杂志》 CAS CSCD 北大核心 2010年第6期674-676,共3页
目的 方法研究miR-21在紫外线B(UVB)照射的人角质形成细胞HaCaT和人表皮鳞癌细胞A431中的差异表达.方法 50 J/m2UVB照射HaCaT细胞和A431细胞后,通过实时荧光定量RT-PCR检验miR-21的表达水平;利用在线数据库PicTar等预测靶基因并用Gos... 目的 方法研究miR-21在紫外线B(UVB)照射的人角质形成细胞HaCaT和人表皮鳞癌细胞A431中的差异表达.方法 50 J/m2UVB照射HaCaT细胞和A431细胞后,通过实时荧光定量RT-PCR检验miR-21的表达水平;利用在线数据库PicTar等预测靶基因并用Gostat软件对靶基因基因进行功能分类.结果 miR-21在表皮鳞状细胞癌中的表达是正常角质形成细胞的4倍多;miR-21在经UVB照射后HaCaT细胞中,在2~4 h内,其表达水平是升高的,在随后的8 h,其表达水平与对照相比降低了2倍,到12 h后表达水平就不再变化;在照射后的A431细胞中,miR-21的表达水平没有明显改变.在对其靶基因预测后用Gostat进行功能分类发现,PIK3R1、BCL2、E2F3等基因参与细胞的分化及细胞的周期进程.结论 miR-21可能参与表皮鳞状细胞癌的致病机理,并可能在UVB诱导的损伤机制中发挥作用. 展开更多
关键词 MIR-21 HaCaT A431 紫外线B
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马尼地平调节AKT/ERK/STAT5信号通路增强阿霉素抗皮肤鳞状细胞癌的作用 被引量:2
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作者 冯森玲 袁中文 +4 位作者 林颖 晏烽根 曹礼慧 黄鸿亮 梁宝莹 《中国皮肤性病学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2021年第11期1231-1237,共7页
目的探讨马尼地平增强阿霉素抗皮肤鳞状细胞癌的作用及可能的机制。方法体外培养A431细胞,实验分为对照组、阿霉素(0.01μmol/L)组、阿霉素和马尼地平(2.5、5、10μmol/L)联合给药组;MTT实验检测细胞增殖活力;细胞克隆形成实验检测细胞... 目的探讨马尼地平增强阿霉素抗皮肤鳞状细胞癌的作用及可能的机制。方法体外培养A431细胞,实验分为对照组、阿霉素(0.01μmol/L)组、阿霉素和马尼地平(2.5、5、10μmol/L)联合给药组;MTT实验检测细胞增殖活力;细胞克隆形成实验检测细胞的增殖能力;荧光显微镜观察阿霉素进入细胞核的荧光强度;流式细胞术检测细胞凋亡及细胞内阿霉素的含量;Western blot实验检测AKT、ERK、STAT5及磷酸化蛋白p-AKT、p-ERK、p-STAT5的表达情况。结果 MTT法结果显示,马尼地平(2.5、5、10μmol/L)与阿霉素联用均可增加A431细胞对阿霉素的敏感性;细胞克隆形成实验结果显示,马尼地平(2.5、5、10μmol/L)与阿霉素联用能抑制A431细胞克隆的形成,而单用马尼地平或阿霉素时A431细胞克隆的形成无明显变化;荧光显微镜观察结果显示,马尼地平(10μmol/L)能增加阿霉素在A431细胞内的分布;流式细胞术检测结果显示,马尼地平(2.5、5、10μmol/L)与阿霉素联用能促进A431细胞的凋亡;Western blot实验结果显示,马尼地平(2.5、5、10μmol/L)与阿霉素联用能降低A431细胞p-AKT、p-ERK、p-STAT5蛋白的表达水平;当AKT/ERK/STAT5信号通路的活性被0.1μmol/L博舒替尼抑制后,5μmol/L马尼地平不能发挥阿霉素对皮肤鳞状细胞癌的增敏作用。结论马尼地平可能通过调节A431细胞的AKT/ERK/STAT5信号通路从而增强阿霉素抗皮肤鳞状细胞癌的作用。 展开更多
关键词 马尼地平 阿霉素 皮肤鳞状细胞癌 AKT/ERK/STAT5信号通路
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Novel Nitrobenzazolo[3,2-a]quinolinium Salts Induce Cell Death through a Mechanism Involving DNA Damage, Cell Cycle Changes, and Mitochondrial Permeabilization
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作者 Christian Vélez Osvaldo Cox +8 位作者 Carlos A. Rosado-Berrios Dennise Molina Luz Arroyo Sujey Carro Anton Filikov Vineet Kumar Sanjay V. Malhotra Marisol Cordero Beatriz Zayas 《Open Journal of Apoptosis》 2013年第2期13-22,共10页
This study reports the capacity of three nitro substituted benzazolo[3,2-a]quinolinium salts NBQs: NBQ 95 (NSC-763304), NBQ 38 (NSC 763305), and NBQ 97 (NSC-763306) as potential antitumor agents. NBQ’s are unnatural ... This study reports the capacity of three nitro substituted benzazolo[3,2-a]quinolinium salts NBQs: NBQ 95 (NSC-763304), NBQ 38 (NSC 763305), and NBQ 97 (NSC-763306) as potential antitumor agents. NBQ’s are unnatural alkaloids possessing a positive charge that could facilitate interaction with cell organelles. The anticancer activities of these compounds were evaluated through the National Cancer Institute (NCI) 60 cell line screening which represents diverse histologies. The screening was performed at 10 μM on all cell lines. Results from the NCI screening indicated cytotoxicity activity on six cell lines. In order to explore a possible mechanism of action, a detailed biological activity study of NBQ 95 and NBQ 38 was performed on A431 human epidermoid carcinoma cells to determine an apoptotic pathway involving, cell cycle changes, DNA fragmentation, mutations, mitochondrial membrane permeabilization and caspases activation. DNA fragmentation, cell cycle effects, mutagenesis, mitochondrial permeabilization and activation of caspases were determined by fluorimetry and differential imaging. Our data showed that A431 growth was inhibited with an average IC50 of 30 mM. In terms of the mechanism, these compounds interacted with DNA causing fragmentation and cell cycle arrest at sub G0/G1 stage. Mutagenesis was higher for NBQ 38 and moderate for NBQ 95 Mitochondrial permeabilization was observed with NBQ 38 and slightly for NBQ 95. Both compounds caused activation of Caspases 3 and 7 suggesting an apoptotic cell death pathway through an intrinsic mechanism. This study reports evidence of the toxicity of these novel compounds with overlapping structural and mechanistic similarities to ellipticine, a known anti-tumor compound. 展开更多
关键词 Apoptosis A431 Quinolinium SALTS MUTAGENESIS Caspase Activation
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美国法规10 CFR 431中电机相关部分的研究和分析
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作者 李子琦 张继红 唐若 《微电机》 北大核心 2013年第11期81-83,共3页
介绍美国联邦法规10 CFR 431中电机相关部分。通过对其中三个子部分的研究和浅析,为指导我国电机出口企业应对贸易壁垒、制定相应措施提供参考依据。
关键词 政策法规 10 CFR 431 电机
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Differential Anticancer Effect of an Apple Extract (Applephenon<sup>&reg</sup>), Polyphenols and Isoflavones on Normal Human Keratinocytes and Epidermoid Cancer Cells
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作者 John J. Wille Mark A. Berhow Jong Y. Park 《Journal of Cancer Therapy》 2019年第6期476-493,共18页
Applephenon&reg, a purified extract prepared from green apples, was examined for its cytotoxicity and inhibitory effects on the proliferation of cultures of normal human keratinocytes and several epidermoid cancer... Applephenon&reg, a purified extract prepared from green apples, was examined for its cytotoxicity and inhibitory effects on the proliferation of cultures of normal human keratinocytes and several epidermoid cancer cell lines. Our HPLC studies demonstrated a high content of phenolic compounds (>65%), including catechin, epicatechin, caffeic acid and phloretin as well as polyphenols such as proanthocyanidins. Applephenon&reg demonstrated a greater cytotoxic effect against HeLa, A431 cancer cell lines and HaCaT, an immortalized keratinocyte cell line than serum-free cultures of proliferating normal human keratinocytes (NHK). Proliferation of NHK was inhibited at concentrations above 0.0013% while concentrations above 0.005% were cytotoxic. By contrast, Applephenon&reg solutions above 0.00025% killed each of the cancer cell lines. Treated cells displayed increased intercellular separation and evidence of keratinizing stratification. We also tested the effect of epicatechin, and two isoflavonoids, genistein and daidzein, on cancer cell lines. Hela cells were more sensitive to epicatechin and genistein inhibition of cell growth and cytotoxicity than were NHK. Daidzein at these concentrations had little effect on cancer cells. These results indicate that Applephenon&reg and some of its phenolic components have selective anticancer activity. 展开更多
关键词 ApplephenonTM (AP-SH Grade) Cytotoxicity EPICATECHIN Epidermal Keratinocytes EPIDERMOID Cancer Cell Lines (A431 HaCaT HeLa) Genistein POLYPHENOLS
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miR-4712-5p在外阴鳞癌A431细胞增殖、侵袭中的作用
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作者 杨劭劼 叶冬熳 +4 位作者 石洪爽 刘嗣同 李东阳 张文一 武昕 《现代肿瘤医学》 CAS 2019年第16期2807-2812,共6页
目的:筛选外阴鳞状细胞癌差异表达基因,观察其在外阴鳞癌中的作用,探讨其在外阴鳞癌组织、细胞中的作用靶点。方法:采用生物信息学方法筛选差异表达的基因miRNA-4712-5p。其表达在外阴鳞癌临床组织(VS组织)和外阴鳞癌细胞系A431(VS细胞... 目的:筛选外阴鳞状细胞癌差异表达基因,观察其在外阴鳞癌中的作用,探讨其在外阴鳞癌组织、细胞中的作用靶点。方法:采用生物信息学方法筛选差异表达的基因miRNA-4712-5p。其表达在外阴鳞癌临床组织(VS组织)和外阴鳞癌细胞系A431(VS细胞)中通过qRT-PCR方法得到验证。构建过表达模拟物并转染A431细胞后,通过CCK-8实验和Transwell实验判断miRNA-4712-5p在外阴鳞癌细胞中增殖、侵袭和转移的作用,并分析miRNA-4712-5p作用靶点PTEN,Westernblot实验和免疫组化实验检测PTEN表达水平。结果:miR-4712-5p在外阴鳞癌组织和细胞中的表达水平显著升高,并可促进外阴鳞癌细胞的增殖和侵袭。生物信息学分析PTEN可能是miR-4712-5p的靶基因。qRT-PCR显示外阴鳞癌组织中PTEN表达显著低于邻近非癌组织。用所构建的miR-4712-5p过表达模拟物转染A431细胞后,PTEN蛋白显著降低。结论:miR-4712-5p在外阴鳞癌组织和细胞中显著增高,可通过降低PTEN蛋白的表达,促进外阴鳞癌细胞的增殖和侵袭。 展开更多
关键词 外阴鳞状细胞癌 A431 microRNA-4712-5p 增殖 侵袭 PTEN
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A431鳞状细胞异种移植瘤模型中c-Kit信号通路诱导其对EGFRIs耐药机制的影响
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作者 张丽霞 杨晓鲲 +2 位作者 王倩 赵蓓 蔡震 《中国皮肤性病学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2016年第12期1214-1218,1251,共6页
目的建立EGFRIs(吉非替尼)耐药的EGFR野生型移植瘤模型,并研究其可能耐药机制。方法雌性BALB/c裸鼠皮下注射A431细胞,肿瘤生长到150×200mm^3,口服给予50mg/kg的吉非替尼,1次/d,连续25周后对EGFRIs产生耐药。比较敏感和耐药移植瘤... 目的建立EGFRIs(吉非替尼)耐药的EGFR野生型移植瘤模型,并研究其可能耐药机制。方法雌性BALB/c裸鼠皮下注射A431细胞,肿瘤生长到150×200mm^3,口服给予50mg/kg的吉非替尼,1次/d,连续25周后对EGFRIs产生耐药。比较敏感和耐药移植瘤的全基因组基因表达谱寻找目的基因。耐药模型分别接受空白对照组、吉非替尼、目的基因抑制剂(AMG706),或它们的混合物治疗21d,检测肿瘤组织生长、细胞凋亡、目的基因以及相关细胞因子表达情况。结果 C-kit在吉非替尼耐药的A431异种移植瘤中过表达,双重阻断EGFR和c-Kit信号有协同作用,引起细胞凋亡。结论 A431异种移植瘤模型中诱导的吉非替尼耐药可能与c-Kit过表达有关。EGFRIs和c-Kit抑制剂的联合治疗可能阻断这种耐药机制,抑制肿瘤细胞生长。 展开更多
关键词 表皮生长因子受体(EGFR) A431 C-KIT 鳞状细胞癌
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地西他滨抑制A431细胞生物学功能的机制
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作者 徐道知 欧阳玲 《中国医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2017年第12期1105-1110,共6页
目的检测地西他滨对A431细胞生物学功能的影响并初步探讨其机制。方法将0、5、10和20μmol/L的地西他滨分别作用于A431细胞,通过MTT法观察地西他滨对细胞增殖的影响,通过Western blotting和实时PCR检测地西他滨作用于A431细胞后细胞增... 目的检测地西他滨对A431细胞生物学功能的影响并初步探讨其机制。方法将0、5、10和20μmol/L的地西他滨分别作用于A431细胞,通过MTT法观察地西他滨对细胞增殖的影响,通过Western blotting和实时PCR检测地西他滨作用于A431细胞后细胞增殖相关蛋白Cyclin B1、PCNA和CDC2的改变。通过Hoechst 33258染色检测0、5和10μmol/L地西他滨对A431细胞凋亡状态的影响,采用Western blotting和实时PCR检测地西他滨对A431细胞凋亡相关蛋白Bax和Bcl-2的影响。采用transwell实验检测细胞侵袭转移情况,并通过Western blotting和实时PCR检测0、5和10μmol/L的地西他滨对侵袭转移相关蛋白MMP2的影响。结果 MTT检测发现,5、10和20μmol/L的地西他滨作用于A431细胞24 h后对细胞增殖的抑制率分别为(43.81±1.53)%、(48.64±4.65)%和(50.69±4.99)%,随着药物的浓度增加,对A431细胞的增殖抑制率显著增加(P<0.05)。Hoechst 33258染色发现,地西他滨可以显著促进细胞凋亡,transwell实验也证明地西他滨可以明显抑制A431细胞的转移能力。Western blotting和实时PCR结果显示,地西他滨影响A431细胞中Cyclin B1、CDC2、PCNA、Bax、Bcl-2和MMP2蛋白及m RNA水平,地西他滨处理组与对照组比较,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论地西他滨对外阴鳞状细胞癌的生物学功能有很强的抑制作用,可以作为治疗外阴鳞状细胞癌的化疗药物。 展开更多
关键词 地西他滨 A431 增殖 凋亡 转移
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Induced Differentiation of Epithelioid Carcinoma Cell Lines: Evidence for Tumor Cell Quantal Mitosis
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作者 John J. Wille Jong Y. Park 《Journal of Cancer Therapy》 2016年第11期794-811,共18页
The effects of growth factors and calcium concentrations present in different culture media on induction of terminal differentiation were investigated for four different epidermoid carcinoma cell lines, Hela, KB, A431... The effects of growth factors and calcium concentrations present in different culture media on induction of terminal differentiation were investigated for four different epidermoid carcinoma cell lines, Hela, KB, A431, and SCC-25, and their responses determined relative to those elicited by normal human keratinocytes subjected to these culture conditions. Differentiation status was determined cyto-chemically by a validated keratin protein staining method, and by autoradiographic analyses. Growth and differentiation promoting factors that influenced the direction of integrated control of growth and differentiation in normal human keratinocytes were found to be effective for some cell lines but not others. The factors examined were 1) high density arrest in serum-free and serum-containing media, 2) media shifts from high density culture in serum-containing media to low density growth factor-depleted or supplemented serum-free medium, and 3) the concentration of calcium in the media. The extent and degree of differentiation achieved varied among different cell lines depend on the presence or absence of serum, EGF and insulin protein growth factors. Certain growth media appear to sponsor keratin protein, cyto-chemically-detected differentiation, and evidence of quantal mitotic division in low density HeLa cell and SCC25 cell cultures. Epidermoid carcinoma cell lines retain limited capacity to commit to early stages of cell differentiation. 展开更多
关键词 Cell Differentiation Epidermoid Carcinoma Cell Lines A431 HELA Kb SCC-25 Keratinocytes Cytochemical Staining Methods Quantal Mitosis
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BMI-1在不同时期表皮鳞癌细胞中的表达
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作者 杨丽娟 张莉 《社区医学杂志》 2009年第11期4-5,共2页
目的研究全反式维甲酸(ATRA)对表皮鳞癌细胞株A431细胞凋亡的影响,并观察干细胞更新因子BMI-1在鳞癌A431细胞系不同分化时期的表达变化,以明确BMI-1在皮肤鳞癌细胞增殖分化中的功能。方法体外培养A431细胞,分别于ATRA作用即刻、24 h及4... 目的研究全反式维甲酸(ATRA)对表皮鳞癌细胞株A431细胞凋亡的影响,并观察干细胞更新因子BMI-1在鳞癌A431细胞系不同分化时期的表达变化,以明确BMI-1在皮肤鳞癌细胞增殖分化中的功能。方法体外培养A431细胞,分别于ATRA作用即刻、24 h及48 h收集细胞,流式细胞仪检测不同状态下细胞凋亡变化,west-ern blot法检测不同时期BMI-1蛋白表达差异。结果随ATRA作用时间的延长可以显著提高A431细胞的凋亡率。同时24 h及48 h BMI-1表达逐渐减少,与即刻组之间差异有统计学意义(P<0.05)。结论ATRA可抑制鳞癌细胞A431增殖,并影响BMI-1在肿瘤细胞不同增殖状态的表达,同时说明干细胞更新因子BMI-1在维持皮肤鳞状细胞癌增殖中可能起关键作用。 展开更多
关键词 BMI-1 A431 全反式维甲酸
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